全 文 ：＊基金项目:宁夏医科大学2009 年校级面上项目(编号:XM200904)
　作者简介:闫惠琴(1960～),女 ,副教授 ,研究方向:生药学实验教学。
·实验研究·
金叶接骨木中熊果酸和齐墩果酸含量的高效液相色谱测定＊
闫惠琴 , 李迎秋 , 赵淑红
(宁夏医科大学 , 宁夏 银川 750004)
　　摘　要:目的:建立高效液相色谱法同时测定金叶接骨木
茎叶中齐墩果酸和熊果酸含量的方法。 方法:采用 The rmo
ODS-2H YPERSIL(250 mm× 4.6 mm , 5 μm);流动相为甲
醇-0.4%磷酸水溶液(80%:20%);检测波长 210 nm , 流速
0.8 mL/ min , 柱温 25 ℃。 结果:齐墩果酸的线性范围为
12.17 ～ 243.36 μg / mL(r=0.999 9),回收率为 98.50%(RSD
为 3.03);熊果酸的线性范围为 3.25 ～ 64.92 μg(r=0.999
8),回收率为 99.49%(RSD为 1.37)。金叶接骨木茎中齐墩
果酸含量(mg/ g)为 1.485 , 熊果酸为 0.348;叶中齐墩果酸为
0.636 ,熊果酸为 0.437。结论:本法操作简单 ,测定结果准确 ,
可用于金叶接骨木中齐墩果酸与熊果酸的含量测定。
关键词:金叶接骨木;齐墩果酸;熊果酸;高效液相色谱法
中图分类号:R282.5 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2011)06-0076-02
金叶接骨木(Sambucus canadensis.` Aurea )为忍冬科接
骨木属植物加拿大接骨木(Sambucus Canadensis L.)的彩色
叶变种 ,本区作为观赏植物从外地引进并在银川地区栽培[ 1] 。
接骨木属植物有着广泛的临床药用价值 , 其中齐墩果酸 、熊果
酸是接骨木属植物抗病毒性肝炎活性成分 , 临床用于治疗急
性病毒性肝炎疗效显著[ 2] 。本人在前期的实验中检测出金叶
接骨木的茎叶中含有槲皮素 、芸香苷以及熊果酸 、齐墩果酸等
化学成分[ 3] 。金叶接骨木如接骨木属其他植物一样具有一定
药用价值 ,本文对银川地区引种的三年生金叶接骨木茎叶中
齐墩果酸和熊果酸两种成分进行含量测定 , 并建立高效液相
色谱法测定金叶接骨木中齐墩果酸和熊果酸含量的方法 , 为
进一步开发和利用其植物提供科学依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器　日立 L2000 高效液相色谱仪(L-2455DAD)检
测器 , L-2300 柱温箱 , L-2200 自动进样器 , L-2130 四元
泵 ,分析天平(AP210 , 十万分之一), 超声波提取器(KQ -
500B),中药材粉碎机(FW100型)。
1.2　试药　齐墩果酸对照品(批号 110742-200314 , 中国药
品生物制品检定所);熊果酸对照品(批号 8502 ,中国药品生物
制品检定所);甲醇(色谱纯 , 美国天地试剂公司);乙腈(色谱
纯 ,美国天地试剂公司);娃哈哈纯净水;其他试剂均为分
析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　色谱柱:美国 Thermo ODS -2HYPERSIL
(250 mm× 4.6 mm , 5 μm);流动相:甲醇-0.4%磷酸水溶液
(80%:20%);检测波长:210 nm , 流速 0.8 mL/ min , 柱温:
25 ℃。
2.2　对照品溶液的制备　分别精密称量熊果酸对照品
5.0 mg ,齐墩果酸对照品 1.3 mg ,共同置 5 mL 容量瓶中 , 色
谱甲醇溶解 ,定容 ,得熊果酸 、齐墩果酸混合对照品溶液 ,临用
前稀释[4 ～ 5] 。在 2.1 项所述色谱条件下 , 取对照品溶液进样
10 μL 检测。得色谱图 1。
a.为齐墩果酸　b.为熊果酸
图 1　齐墩果酸 、熊果酸对照品 HPLC色谱图
结果显示 ,齐墩果酸色谱峰保留时间为 28.00 min , 熊果
酸色谱峰保留时间在 29.59 min ,两者能够基线分离。
2.3　供试品溶液的制备　分别取金叶接骨木的叶和茎药材 ,
粉碎 ,过 80 目筛 , 60 ℃干燥至恒重。分别精密称取适量(相当
于生药 0.5 g), 置 200 mL 具塞三角锥形瓶中 , 加入甲醇 10
mL ,超声提取 40 min , 冷却 , 过滤 , 滤液水浴蒸干 , 残渣用甲醇
溶解并定容至 10 mL 容量瓶中得金叶接骨木叶和茎药材供试
品溶液。
2.4　线性范围考察　取稀释后的齐墩果酸 、熊果酸混合对照
品溶液(齐墩果酸 、熊果酸浓度分别为 243.36 μg/ mL、64.92
76 云 南 中 医 中 药 杂 志　　　　　　　　　　2011 年第 32 卷第 6 期
μg/ mL),分别稀释 1.5、2 、3、4 、10 、20 倍后按“ 2.1” 项下色谱
条件进样检测 ,以峰面积为横坐标 , 浓度为纵坐标进行线性回
归。齐墩果酸回归方程 C=0.000 1A+3.440 5 , r=0.999 9 ,
表明齐墩果酸在 12.17～ 243.36μg/ mL 浓度范围内线性关系
良好;熊果酸回归方程 C=4×10-5A+0.979 1 , r=0.999 8 ,
表明熊果酸在 3.25 ～ 64.92 μg/ mL 浓度范围内线性关系
良好。
2.5　稳定性试验　取同一金叶接骨木叶供试品溶液 , 分别于
0 、2 、4 、8、12 、24 h 进样测定 ,考察其稳定性。记录峰面积 , 计
算齐墩果酸和熊果酸峰面积的 RSD分别为 0.63%、0.81%。
表明供试品溶液在 24 h 内基本稳定。
2.6　精密度试验　取同一金叶接骨木叶供试品溶液 , 连续进
样 6 次 ,记录峰面积 , 计算齐墩果酸和熊果酸峰面积的 RSD ,
RSD分别为 1.05%、0.73%(n=6)。表明仪器精密度良好。
2.7　重复性试验　精密称定同一批金叶接骨木叶样品 , 按
“ 2.2”项下方法分别制备 6 份供试品溶液 , 按“ 2.1”项下色谱
条件进行测定 ,记录峰面积 , 分别按回归方程计算齐墩果酸和
熊果酸的含量。 其 RSD 值分别为 0.85%、1.42%(n=6), 表
明此方法重复性良好。
2.8　加样回收率　称取已知含量的金叶接骨木叶样品 6 份 ,
每份约 0.5 g ,准确计算样品中齐墩果酸和熊果酸的含量 , 分
别加入适量齐墩果酸和熊果酸对照品溶液 ,按“ 2.2”项下方法
制备供试品溶液 , 进样。结果显示 , 齐墩果酸和熊果酸的加样
回收率分别为 98.50%(RSD 为 3.03)和 99.49(RSD 为
1.37),回收率良好。
2.9　样品测定　分别取金叶接骨木叶和茎药材粉末约 0.5 g
精密称定 ,按照“ 2.3”项下方法制备供试液 ,按“ 2.1”项下色谱
条件分别取 10 μL 进样检测 , 记录金叶接骨木茎和叶的色谱
图和峰面积。如图 2、3 所示。
图 2　金叶接骨木茎供试液色谱图
图 3　金叶接骨木叶供试液色谱图
测得金叶接骨木茎齐墩果酸与熊果酸含量分别为
1.485 mg/g和 0.348 mg/g;叶中齐墩果酸和熊果酸的含量分
别为 0.636 mg/g 和 0.437 mg/ g。
3　讨论
齐墩果酸与熊果酸均属三萜类化合物 , 结构相似 , 其理化
性质相近 ,因而在色谱柱上的保留时间非常相近 , 如果柱效不
高并且流动相选择不当时 , 很难将其分开。 本实验采用
H PLC 法同时测定金叶接骨木茎叶中的这两种成分时 , 采用
调节流动相的 pH 值 ,并加大流动相中水的比例 ,可以有效的
将两者分开。本法定量准确 , 回收率高 , 并能同时测出齐墩果
酸与熊果酸的含量 ,简单易行 ,可做为同时含有齐墩果酸与熊
果酸植物的测定标准。
金叶接骨木在我国多省区均有栽培 , 其枝繁叶茂 , 资源丰
富 ,能否如接骨木属植物一样具有药用价值 ,本次实验为进一
步开发和利用其植物提供了一定的科学依据。
致谢:对本课题给予帮助的韩义欣 、张霞等老师表示
感谢!
参考文献:
[ 1] 曹兵 ,宋丽华 ,马国彬 ,等.银川地区 14种绿化树种的引种试验报
告[ J] .农业科学研究 , 2007 , 28(3):72.
[ 2] 陈武 ,李开泉,熊筱娟 ,等.陆英抗肝炎活性成分的研究[ J] .南昌
大学学报(理科版), 2001 , 25(2)165～ 167.
[ 3] 赵淑红 ,高亦珑 , 徐力生 ,等.银川引种金叶接骨木药用价值初
探[ J] .宁夏医学杂志 , 2010 , 32(1):58～ 59.
[ 4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[ M] .一部.北京:中国医
药科技出版社 , 2010:附录 28～ 30.
[ 5] 邹盛勤 ,陈武.地榆中乌索酸和齐墩果酸含量的高效液相色谱测
定[ J] .时珍国医国药 , 2006 , 17(8):1373～ 1374.
(收稿日期:2011-04-18)
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772011 年第 32 卷第 6 期　　　　　　　　　　云 南 中 医 中 药 杂志
Yunnan Journal of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica
Vol.32.N o.6 (General No.216) June , 2011
Main Content
Study on the TCM Syndrome Features of 180 HAART-induced Hyperlipidemia Patients
　　 N I Liang , DUANE Cheng-y u ,WAN Gang⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Clinical Observation on the Treatment of 34 Chronic Hepatitis B Patients by the Combination of Yugan Decoction and Adefovir Dipivoxil
　　 TAO Rong-ju⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Determination of Ursolic Acid andOleanolic Acid Content in Gold Leaf Elder by HPLC
　　 YAN Hui-qin , LI Ying-qiu , ZHAO Shu-hong⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Study on the Chemical Compositions of Valeriana Jatamansi
　　 LI Yuan-dan , LI Rong-tao , LI Hai-zhou⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
Study on the TCM Syndrome Features of 180 HAART-induced Hyperlipidemia Patients
NI Liang , DUANE Cheng-yu ,WAN Gang(Medical Center of Infectious Diseases , Beijing Ditan Hospital Affiliated to Capital M edical Univer sity , Beijing , 100000)
Abstract:Objective:To study the clinical features and syndrome factors of TCM of HAART-induced hyperlipidemia patients.Methods:
180 diagnosed HAART-induced hyperlipidemia patients were prospectively collected in the multiple centers and the rules and characteristics
of their TCM syndromes were studied by means of descriptive sta tistics and exploratory factor analysis.Results:The common symptoms are
as follows:fatigue(139 cases , 77.22%), a rthralgia of limbs(103 cases , 57.22%), ano rex ia(103 cases , 57.22%), white tongue coating(126
cases , 70.00%), pale tongue(78 cases , 43.33%), teeth-printed tongue(68 cases , 37.78%), slippery pulse(93 cases , 51.67%), thready
pulse(92 cases , 51.11%).9 common factors were extracted to find out that the elements of common disease location syndrome w ere spleen ,
kidney , hear t , and the elements o f disease nature syndrome were , deficiency of Qi , Yang , blood and phlegm.Conclusion:The study show s the
TCM syndromes of HAART-induced hyperlipidemia pa tients are deferent f rom the primary hyperlipidemia performance and the locations of
the disease are in the spleen , kidney and heart , and the natures of the disease are mostly phlegm or dampness.
Key words:HAART;hy perlipidemia;syndrome
Clinical Observation on the Treatment of 34 Chronic Hepatitis B Patients by the Combination of Yugan Decoction and Adefovir Dipivoxil
TAO Rong-ju(Division 1 of Internal M edicine, T raditional Chinese M edicine Hospital o f Xuanw ei City , Xuanwei , Yunnan , 655400)
Abstract:Objective:To observe the clinical effect and the safety of Yugan Deco ction combined with adefovir dipivoxil on the treatment of
chronic hepatitis B(CHB)patients.Methods:68 patients were randomly divided into 2 groups.34 patients in the treatment g roup were
treated with Yugan Decoction combined with adefovir dipivoxil while the 34 patients in the control group were o nly treated with adefovir
dipiv oxil.Results:The signs and symptoms of the patients in the treatment g roup improved in HBeA g ,HBV-DNA negative conver sion rate,
the recovery of liver function and the reduction of adverse reactions , significantly superior to the control group(P <0.05).Conclusion:
Yugan Decoction combined with adefo vir dipivox il can raise the efficacy , improve the clinical symptoms and reduce the adve rse drug reactions
in the treatment of the chronic hepatitis B patients.
Key words:Yugan Decoction;adefovir dipivoxil;chronic hepatitis B
Determination of Ursolic Acid andOleanolic Acid Content in Gold Leaf Elder by HPLC
YAN Hui-qin , LI Ying-qiu , ZHAO Shu-hong
(Ningxia M edical U niversity , Yinchuan , N ingx ia , 750004)
Abstract:Objective:To establish a HPLC method for the determination of o leanolic acid and ursolic acid content in the stems and leaves
of g old leaf elder.Methods:Thermo ODS-2HYPERSIL (250 mm ×4.6 mm , 5 μm)w as used.Mobile phase was -0.4% methanol
phosphoric acid(80%:20%), w ith 210 nm o f detection waveleng th , 0.8 mL/min of flow rate , 25℃ of column temperature.Results:The
linear range of the oleanolic acid was 12.17～ 243.36μg/mL(r=0.999 9), with 98.50%(RSD 3.03)of recovery rate.The linear rang e of
the ursolic acid was 3.25～ 64.92μg(r=0.9998), with 99.49%(RSD 1.37)of recovery rate.The oleanolic acid content in the gold leaf
elder stems(mg/ g)was 1.485 , and the ursolic acid was 0.348;but the oleanolic acid in the leaves was 0.636 , and the ursolic acid was 0.437.
Conclusio n:The method is simple and accura te and can be used fo r the determination of the oleanolic acid and ursolic acid content in the gold
leaf elder.
Key words:g old leaf elder;oleanolic acid;ursolic acid;HPLC
Study on the Chemical Compositions of Valeriana Jatamansi
LI Yuan-dan , LI Rong-tao , LI Hai-zhou
(Scho ol of Life Science and T echnology , Kunming University of Science and Technology , Kunming , Yunnan , 650224)
Abstract:Objective:T o study the chemical compositions in valeriana jatamansi root.Methods and Results:Silica gel column
chromatog raphy , glucose gel hydroxypropy l Sephadex LH-20 column chroma tog raphy and HPLC w ere used to sepa rate 17 compounds from
valeriana jatamansi root.Through the analysis of their physical and chemical proper ties and spectral data, the chemical compositions were
identified as(3S , 4R , 5S , 7S , 8S , 9S)-3 , 8-epoxy-7-hy droxy-4 , 8-dimethylper-hydrocy cl openta[ c] py ran(1),(3S , 4S , 5S , 7S , 8S , 9S)
-3 , 8-ethoxy-7-hydroxy-4 , 8-dimethylper- hy drocyclopenta[ c] py ran(2), 4-β-hydroxy-8-β -methoxy-10-methy lene-2 , 9
-dioxatricy clo [ 4.3.1.03.7] decan(3), 6-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-4-methy l-enehex ahydrocyclopenta[ c] py ran-1-(3H)-
one(4), jatamansi A(5), jatamansi G(6), 8-hy droxy pinoresinol(7), 2 , 5-di (4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1 , 4-dioxan(8),
pinoresinol(9),(+)-2-(3 , 4-dimethoxyphenyl)-6-(3 , 4-dihydrox yphenyl)-2 , 7-dioxabi-cyclo [ 3 , 3 , 0] octane(10), pino resinol
monomethy l ether(11), prinsepoil(12),(-)- massoniresinol (13), cinnamolide (14), valeriananoid A (15), valeriananoid C (16)and
volvatrate A(17).Conclusion:Compounds 3 , 4 and 17 was the first time to find in the plant in the compound 7 to 14.
Key words:valeriana jatamansi;chemical composition;valeriana