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棕树籽对雄性大鼠生育力影响的研究



全 文 :棕树籽对雄性大鼠生育力影响的研究
基金项目:湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划(湘教通[2009]320 号)
通讯作者:谢辉,湖南中医药大学,邮编:410007
李诗琴1,王长军1,刘宏昌1,贺江林1,曾昭澄1,谢 辉2
(1. 湖南中医药大学湘杏学院 2007 级中西医结合专业,湖南 长沙,410007;
2. 湖南中医药大学,湖南 长沙,410007)
[摘要] 目的:探讨棕树籽对雄性大鼠生育力的影响。方法:将 40 只雄性 SD大鼠随机分为空白组,棕树籽煎剂高、中、
低剂量组,每组 10 只,棕树籽煎剂高、中、低剂量组每次给药 20 mL·kg -1(生药量分别为 60g·kg -1、40g·kg -1、20g·kg -1) ,空白
组给予生理盐水,每天 1 次,连续灌胃 14 天,观察雄鼠的不育期、体外活性精子数及雌鼠受孕率。结果:与空白组比较,棕树籽
煎剂高、中剂量组受孕率降低、不育期延长,高剂量组活性精子数降低,差异有统计学意义(P < 0. 05,P < 0. 01)。结论:棕树籽
有一定的降低雄性大鼠生育力的作用。
[关键词] 棕树籽;大鼠;生育力;活性精子;实验研究
[中图分类号]R285. 5 [文献标识码]A [文章编号]1003 - 7705(2013)02 - 0130 - 01
棕树主要生长在我国南方大部分地区,为四季常青植
物,湖南较为常见,人们多用于房前屋后的绿化观赏,少有
用于药物使用者。但是,湖南湘潭地区民间中医曾用棕树
所结的种子熬水作为避孕用药,有一定的效果。本研究主
要探讨棕树籽对雄性大鼠生育力的影响,以明确其避孕作
用。笔者通过查阅《中华本草》、《湖南药物志》等大型药物
手册,均未见有棕树籽此作用的记载,说明本项目选材新
颖,现将实验介绍如下。
1 实验材料
1. 1 动物 雄性 wistar 大白鼠 40 只,8 月龄,体重(250 ±
20)g;由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供,实验动物
许可证 SCXK(湘)2009 - 0001。饲养条件:湖南中医药大学
SPF级动物实验室,室温(25 ± 2)℃,相对湿度(65 ± 5)%;
标准饲料,全营养喂养,自由饮水;笼具每周清洗消毒 1 次,
紫灯灭菌10min。实验动物在实验室饲养房内观察 5d,无异
常者用于本实验。
1. 2 药物 将棕树成熟的种子采用常规水提法进行煎煮、
浓缩、配制生药量浓度为 1g·mL -1、2g·mL -1、3g·mL -1以供
实验,保存备用。
2 实验方法
2. 1 对雄性大白鼠生育力的影响 将 40 只雄性 wistar 大
白鼠随机分成棕树籽煎剂高、中、低剂量组和空白组,每组
10 只。雄鼠药物组灌胃被试药物,给药时间 14 天,每天 1
次。对照组给生理盐水,其他与实验组同。停药后,将 1 只
有生育力的 wistar雌鼠(250 ± 20)g合笼 1 周,第 2 周取出雌
鼠,更换另一只雌鼠,合笼 1 周,第 3 ~ 8 周同前处理。从合
笼到雌鼠怀孕之前的时段作为雄鼠不育期。雄鼠的生育力
以雌鼠怀孕百分率和雄鼠不育期来表示。药物组雌鼠由不
孕到怀孕时,表明雄鼠的生育力已经恢复。
2. 2 对雄性大白鼠精子作用的影响 将雄鼠在乙醚麻醉下
摘除副睾,置入 25mL的容量瓶内,加生理盐水 2mL,用小刀
将副睾切成若干小块,轻轻震荡,可以得到含有精子的乳
液,用吸管吸出乳液,分别加到盛有 3 组药物浓度的试管中,
使之混合,10min后,取出 1 滴混合液,置载玻片上,观察精
子活动力,以精子不活动作为杀死,并计数活动精子数。
2. 3 统计学方法 所有数据均以均数和标准差(x ± s)表
示,组间比较方差齐时用方差分析,方差不齐时用秩和检
验,采用 SPSS 16. 0 软件包进行分析处理。
3 实验结果
3. 1 棕树籽对雄性大鼠生育力的影响(见表 1) 实验结果
表明,空白组雄鼠 8 周内持续具有生育力,雌鼠怀孕率高达
78. 75%;高剂量组在第 8 周出现雌鼠受孕情况,说明个别雄
鼠恢复了生育力,雌鼠怀孕率仅 5%,不育期(54. 0 ± 1. 45)
天,与空白组比较差异显著(P < 0. 01) ;中剂量组在第 5 周
出现雌鼠受孕情况,雌鼠怀孕率 20%,不育期(25. 0 ± 1. 25)
天,与空白组差异显著(P < 0. 01) ;低剂量在第 2 周出现雌
鼠受孕情况,雌鼠怀孕率 55%,不育期(5. 5 ± 1. 78)天,与空
白组比较却无差异(P > 0. 05)。
表 1 对雄性大鼠生育力的影响(x ± s)
组别 n 药物剂量(g·kg - 1) 雌鼠怀孕率(%) 不育期(天)
空白组 10 - 78. 75 5. 0 ± 1. 25
棕树籽煎剂高剂量组 10 60 5 54. 0 ± 1. 45a
棕树籽煎剂中剂量组 10 40 20 25. 0 ± 1. 25a
棕树籽煎剂低剂量组 10 20 55 5. 5 ± 1. 78b
注:与空白组比较,aP < 0. 01,bP > 0. 05
3. 2 棕树籽对雄性大鼠精子作用的影响(见表 2) 与空白
组比较,棕树籽煎剂高、中剂量组活性精子明显减少,差异
有统计学意义(P < 0. 01) ,而低剂量组却无统计学意义。
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第 29 卷第 2 期
2013 年 2 月 HUNAN JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 29 No. 2
Feb 2013
伤科七味片对大鼠肝肾功能的影响
翦林宏,肖梅英,李勇敏
(湖南省中医药研究院 ,湖南 长沙,410006)
[摘要] 目的:研究大鼠连续服伤科七味片而产生的毒性反应以及停药后的恢复情况,为临床伤科七味片的运用提供依
据。方法:将伤科七味片 0. 3、0. 8、2. 0g(片重)/kg(体重)3 个剂量连续灌胃大鼠 13 周。结果:生化检测结果显示伤科七味片
高剂量组大鼠的 AST、T - BIL、BUN、ALB 均有不同程度显著变化;病理组织学检查结果显示高剂量组动物肝、肾病理变化加
剧,二者表明伤科七味片同剂量给药期间对鼠的肝、肾有一定的毒性作用,但停药后均恢复正常。结论:伤科七味片高剂量对
大鼠的肝、肾功能有一定的毒性反应,但为可逆性毒性反应。
[关键词] 伤科七味片;肝肾功能;毒性反应;大鼠;实验研究
[中图分类号]R285. 5 [文献标识码]A [文章编号]1003 - 7705(2013)02 - 0131 - 01
伤科七味片为纯中成药,临床上具有消肿散瘀、舒筋活
络、止痛之功效。主要用于治疗跌打损伤、扭伤等肌肉、骨骼
疾病。本实验就伤科七味片对大鼠肝肾功能的影响进行了研
究,为其临床应用提供了一定的实验依据,现介绍如下。
1 实验材料
1. 1 药物 伤科七味片:湖南德康制药股份有限公司产品(批号:
061102)。规格为0.4g/片,用法用量:口服,每次 2片,每天 3次。
极量,每次4片,每天3次。临床用量为每天 6片,70kg人临床用
量为0. 034g(片重)/kg。(以下剂量均按 g(片重)/kg计算)。
1. 2 主要仪器 SaBa18 全自动生化分析议(System Rema -
Italy) ;Easy Lyte PLUS(上海富升)。
1. 3 实验动物 SD系 SPF级大鼠 80 只,体重80 ~ 100g,雌
雄各半,由上海西普尔 -必凯实验动物有限公司提供。实
验动物生产许可证号:SCXK(沪)2006 - 0002 号。
2 实验方法
2. 1 分组及给药 将 80 只 SD 大鼠随机分成 4 组,即空白
对照组,伤科七味片低、中、高剂量组,每组 20 只,雌雄各半。
实验动物饲养在室温 18℃ ~25℃、相对湿度 50% ~ 60%、通
风良好的环境里。
参照文献方法[1],实验时将药物配成最大浓度为 0. 2g /mL
的水混悬液,大鼠灌胃体积为10mL/kg,此时大鼠的用药剂量为
2. 0g(片重)/kg,相当于 70kg人临床剂量的 58倍,以此作为大
鼠长期毒性实验的高剂量,中剂量取临床剂量的 24倍,低剂量
取临床剂量的 10 倍。低、中、高剂量相应的药物浓度为 0. 03、
0. 08、0. 20g /mL,相应的剂量为 0. 3、0. 8、2. 0g(片重)/kg。
每鼠每天灌胃给药 1 次,灌胃体积为 10mL /kg,空白对
照组大鼠灌等体积蒸馏水,连续给药 13 周后停药。每组各
取 10 只大鼠,雌雄各半,作为给药期大鼠,取大鼠眼眶静脉
血 4 ~ 5mL;取内脏做病理检测。取血清测天门冬氨酸氨基
转换酶(AST)、丙氨酸氨基转换酶(ALT)、碱性磷酸酶
(ALP)、肌酸激酶(CK)、γ -谷氨酰基转换酶(GGT)、总胆红
素(T - BIL)、尿素氮(BUN)、肌酐(Grea) ;停药后恢复 4 周,
每组取剩余大鼠 10 只,作为停药期大鼠,并进行上述检测。
对两个不同时期大鼠检测结果进行比较。
2. 2 统计学方法 对所有数据进行统计学处理,实验数据
采用(x ± s)表示,组间差异采用 t检验。
3 实验结果
3. 1 伤科七味片对大鼠肝肾功能生化指标的影响(见表 1)
表 1 伤科七味片对大鼠肝、肾功能生化指标的影响(x ± s,n = 10)
组别 时期 AST(U /L) ALT(U /L) ALP(U /L) CK(U /L) GGT(U /L) T - BIL(μm /L) BUN(μm /L) GREA(μm /L)
空白对照组
给药期 47. 2 ± 8. 0 255. 6 ± 43. 3 214. 7 ± 94. 0 2388. 7 ± 725. 5 4. 80 ± 1. 93 7. 41 ± 1. 22 7. 01 ± 1. 79 50. 87 ± 6. 91
停药期 63. 8 ± 12. 1 224. 0 ± 36. 8 185. 4 ± 86. 3 1745. 2 ± 554. 3 5. 45 ± 2. 01 8. 45 ± 3. 11 6. 22 ± 1. 78 44. 40 ± 7. 25
低剂量组
给药期 48. 0 ± 5. 6 255. 0 ± 27. 0 245. 6 ± 88. 6 1194. 1 ± 253. 6a 5. 80 ± 2. 30 9. 07 ± 3. 50 7. 68 ± 1. 55 49. 62 ± 3. 60
停药期 58. 9 ± 9. 6 217. 6 ± 35. 0 202. 0 ± 77. 7 1543. 8 ± 360. 8 5. 28 ± 1. 44 9. 01 ± 2. 24 5. 48 ± 2. 05 41. 77 ± 4. 89
中剂量组
给药期 52. 4 ± 8. 1 246. 8 ± 55. 4 263. 6 ± 135. 1 1498. 4 ± 681. 0b 5. 30 ± 1. 89 8. 82 ± 2. 01 7. 72 ± 1. 26 52. 10 ± 5. 50
停药期 71. 4 ± 12. 2 233. 4 ± 48. 8 194. 6 ± 65. 51 1654. 4 ± 703. 0 5. 82 ± 2. 18 8. 20 ± 2. 36 5. 60 ± 1. 44 50. 23 ± 8. 15
高剂量组
给药期 57. 2 ± 12. 5 324. 7 ± 98. 9 293. 9 ± 94. 0 872. 5 ± 546. 7a 6. 50 ± 1. 96 10. 18 ± 2. 34a 8. 74 ± 1. 91b 56. 10 ± 6. 58
停药期 66. 6 ± 8. 8 241. 1 ± 55. 7 189. 0 ± 76. 3 1712. 5 ± 669. 7 6. 12 ± 3. 30 8. 87 ± 3. 42 6. 08 ± 2. 20 46. 69 ± 7. 30
注:与空白对照组比较,aP < 0. 01,bP < 0. 05,
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
其余各组数值均在正常范围内
表 2 对雄性大鼠精子作用的影响(x ± s)
组别 n 药物剂量(g·kg - 1) 活性精子(个)
空白组 10 - 35. 5 ± 6. 25
棕树籽煎剂高剂量组 10 60 30. 0 ± 5. 39a
棕树籽煎剂中剂量组 10 40 32. 0 ± 6. 08
棕树籽煎剂低剂量组 10 20 38. 0 ± 5. 59
注:与空白组比较,aP < 0. 05
4 讨 论
本实验研究结果表明,棕树籽用于雄性大鼠较高浓度
服用时能使雌鼠受孕率、雄鼠活性精子数明显降低,不育期
延长,这说明棕树籽有一定的抗雄性大鼠生育力的作用,但
其机制尚需我们今后进一步研究。
(收稿日期:2012 - 11 - 29)
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2013 年 2 月 HUNAN JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 29 No. 2
Feb 2013