全 文 ：千斤藤素对喉癌细胞 Hep-2多药耐药性的研究 经验交流
Modulation of mutidrug resistance of Hep-2 cells by cepharanthin
汪　建 　林代诚 　 粱传余** 　　 (第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉科 )重庆 , 400038
　　提　要　目的: 研究千斤藤素 ( Cepha ranthine, CEP)逆转多药耐药性的能力。方法: 用 M T T法检测药物
敏感性 ,用流式细胞技术检测 p170蛋白的表达。结果: CEP能明显提高喉癌细胞株对平阳霉素 ( Pingyangcin,
PYM )的敏感性 ,并能明显降低 p170蛋白的表达。结论: CEP可能通过抑制 p170膜外转运功能逆转 Hep-2细
胞对 PYM的耐药 ,增强其敏感性。
　　头颈部恶性肿瘤对化疗不敏感 [1 ] ,但术前和术后
辅以化疗 ,对于减少肿瘤局部复发和转移是十分必要
的。多药耐药性是肿瘤化疗失败的重要原因之一 [2 ] ,当
前逆转多药耐药性是国内外学者研究的重点。近期应
用和研究最多的如环孢霉素 A、异博定等耐药调节剂
都有其自身的副作用而没能广泛应用于临床。因此 ,寻
求高效、低毒的耐药调节剂是十分必要的。千斤藤素
( Cepha ranthine, CEP)是从传统中草药中提取出来的
生物碱 ,具有低毒、升高白细胞、诱导肿瘤细胞分化 [3 ]
等作用 ,本实验研究了 CEP对喉癌细胞多药耐药性的
关系。
1　材料和方法
1. 1　细胞培养
　　低分化喉癌细胞 ( Hep-2购自北京动物所 ) ,培养液为 RP-
M I1640内含 15%灭活小牛血清 ,细胞置 CO2孵箱 , 37℃培养。
1. 2　药物及试剂
　　千斤藤素 ( Cephar anthine, CEP) ,平阳霉素 ( Pingyangcin,
PYM )浙江海门制药厂 , M TT ( Sigma)。
1. 3　细胞增殖抑制试验
　　参见文献 [ 3]。取对数生长期 Hep-2细胞 ,接种于 96孔细胞
培养板 ,细胞浓度为 2× 105 /ml。每孔加入细胞液 100μl,诱导剂
量的 CEP[3 ] 4μmo l /L 100μl为对照组 ,实验组加入 100μl不同
浓度的 PYM,每个条件均设 4个重复孔 , 37℃ , 5% CO2培养 72
h,中止培养前 4 h每孔加入 M T T 10μl,继续培养 4 h,在自动
酶标仪上比色 (波长 600 nm) ,测定光密度 (Dλ)值。药物对细胞
增殖抑制率由下列公式计算:
抑制率= 对照孔 Dλ-实验孔 Dλ对照孔 Dλ × 100%
1. 4　 p170的检测
　　用流式细胞仪技术 [4] ,表示单位为均道值。
1. 5　统计学处理
　　实验数据在电子计算机上用 SPO软件进行统计学处理 ,
结果以 x-± s表示 , t检验。
2　结果
2. 1　CEP、 PYM对 Hep-2细胞增殖抑制作用 ,见附表
附表　Hep-2细胞增殖抑制及 p170表达
Dλ值 抑制率 p170
对照组 0. 902± 0. 046 4. 10 64± 3. 12
CEP 0. 865± 0. 037 49. 22 51± 2. 80*△
PYM 0. 458± 0. 037* 77. 7 66± 3. 62
CEP+ PYM 0. 201± 0. 015*△ 50± 4. 10*△
* : P < 0. 01与对照组比较 ;△: P < 0. 01与 PYM组比较
　　诱导剂量 CEP对 Hep-2细胞抑制作用很小 ,单用 PYM对
Hep-2细胞的抑制作用约 50% ,而 CEP和 PYM合用细胞抑制
率达 77. 70%。可见 CEP能显著提高 PYM对 Hep-2细胞的抑
制作用。
2. 2　 CEP、 PYM对 Hep-2细胞 p170蛋白表达的影响 ,
见附表
　　 Hep-2细胞加 PYM后 p170的表达无变化 ,但加入 CEP和
CEP+ PYM后 p170的表达明显降低。
3　讨论
　　化疗药物已广泛用于各种恶性肿瘤的治疗 ,其效
果尚不令人满意。由于肿瘤细胞对抗癌药物的耐药性
常常限制了疗效的进一步提高。PYM在头颈部恶性
肿瘤中应用较广 ,在 CEP诱导肿瘤细胞分化的实验
中 ,我们发现 CEP加入 PYM后喉癌细胞对 PYM的
敏感性大大增强 ,推测可能与细胞的耐药性有关 ,因此
我们检测了 p170蛋白的表达。
261
第 20卷第 3期
1998年 6月 　
第　三　军　医　大　学　学　报
　 ACT A ACADEMIAE MEDICIN AE MIL ITARIS TERTIAE 　　
Vo l. 20, No. 3
Jun. 1998

华西医科大学附一院耳鼻咽喉科 ,成都 , 6100041
汪　建 ,男 , 37岁 ,主治医师 ,博士
DOI : 10. 16016 /j . 1000 -5404. 1998. 03. 034
　　目前认为 p170蛋白的作用就象一个泵 ,依赖耗能
过程将药物从细胞内泵出细胞外而产生耐药 [6 ]。研究
发现加入 PYM后 p170蛋白的表达增加 ,加入 CEP后
能明显降低 Hep-2细胞 p170的表达 ,并显著提高 Hep-
2细胞对 PYM的敏感性 ,说明 CEP具有逆转喉癌细
胞 Hep-2多药耐药性的作用 ,其机制可能是通过降低
Hep-2细胞 p170的表达 ,导致其泵出药物功能下降 ,提
高细胞对药物的积蓄能力而实现的。由于 CEP已经有
大剂量用药的临床经验而未发现毒副作用的报道 ,因
此我们认为 CEP有希望作为多药耐药性的逆转剂而
应用于临床。
　　关键词　千斤藤素 ;平阳霉素 ;多药耐药
　　中图法分类号　 R739. 65
参考文献
1 Vog l S E, Lerner H, Kaplan B H et al . Failure o f effectiv e
initial chemo therapy to modify the cour se of stag eⅣ ( MO )
squamous cancer o f the head and neck. Cancer , 1982; 50: 840
2 Sato W , Fuka zaw a N , Suzuki T et al . Circumvention of
multidrug resistance by a new ly synthesized quinoline
deriv ativ e. Cancer Res, 1991; 5: 2420
3 汪　建 ,赵连三 ,林代诚等 .千斤藤碱对头颈部恶性肿瘤细胞
诱导分化的研究 . 中华耳鼻咽喉科杂志 , 1997; 32( 2): 99
4 Marks D C, Bebov L, Davey M W et al . The M T T cell via
blity assay fo r cyto to xicity testing in multidrug-resistant hu-
man leukemia cells. Leukemia Res, 1992; 10: 1165
5 左连富 ,周道安 ,齐凤英等 .定量分析乳腺癌细胞 p53基因产
物的表达 .中华物理医学杂志 , 1994; 16: 78
6 G rogan T M , Spier C M , Slamas S E et al . P-g ly copro tein
expression in h uman plasma cells myeloma: co r relation with
prio r chemo therapy. Blo od, 1993; 81: 493
(收稿: 1998-01-06;修回: 1998-05-28)
(编辑　王　红 )
10例冠状动脉内支架近期疗效的观察
Short term effects of intracoronary stents in 10 patients with coronary
heart disease
何国祥 　舒茂琴　 宋治远　 倪庭枢　 司良毅　 刘风秀 　 徐绍萍　 李晓 ** 　　 (第三军医大学附属西南医
院心血管内科 ) 重庆 , 400038
　　提　要　目的: 总结冠状动脉内支架 (支架 )的临床应用结果以改进操作方法 ,提高疗效。方法: 在常规经
皮腔内冠状动脉成形术 ( PTC A)基础上经心导管技术植入支架。10例冠心病患者共植入 11个支架 ,其中 2例
用于 PTCA并发的急性冠状动脉闭塞 , 8例系预防 PTCA术后再狭窄。结果: 11个支架植入均获成功 ,无严重
并发症。所有病人的心电图相关导联缺血性 S T-T改变和症状在术后均显著地改善。结论: 植入支架是处理
PTCA术中急性冠状动脉闭塞非常有效和安全的方法 ,并可用于预防 PTCA后再狭窄。
　　自 Sigw art等 [1 ]于 1987年首先成功地植入冠状动
脉支架以来 ,其临床应用日益广泛 ,为经皮腔内冠状动
脉成形术 ( PTCA)所致的急性冠状动脉闭塞和术后再
狭窄的处理及预防提供了可靠的方法 ,受到广泛重
视 [2 ]。现报告 10例严重冠心病患者植入冠状动脉内支
架的近期疗效。
1　资料与方法
1. 1　临床资料
　　自 1995年 8月至 1996年 7月 , 10例严重冠心病患者接受冠状
动脉内支架治疗。10例中 ,男 9例 ,女 1例。平均 ( 57± 10)岁 ( 43岁
～ 68岁 )。双支冠状动脉病变 8例 ,单支病变 2例。按照 ACC /
AHA PTCA专家组对冠状动脉病变的分型标准 [3]分析 ,均为 B
或 C型病变 ,平均狭窄程度 (直径法 ) ( 89± 10)% , T IM I血流分
级: 0级 3例 , 1级 6例 , 2级 1例 (左前降支偏心性狭窄 )。其中 2例系
用于 PTCA术中发生急性冠状动脉闭塞的处理 ,另 8例为预防
PTCA术后再狭窄。
1. 2　方法
1. 2. 1　术前准备　　同 PTCA。
1. 2. 2　术中操作　　在常规 PTCA基础上进行 ,静脉注入肝
素抗凝。冠状动脉造影后选用相应直径的球囊预扩张冠状动脉
262
第 20卷第 3期
1998年 6月 　
第　三　军　医　大　学　学　报
　 ACT A ACADEMIAE MEDICIN AE MIL ITARIS TERTIAE 　　
Vo l. 20, No. 3
Jun. 1998

放射科
何国祥 ,男 , 45岁 ,主任医师 ,教授