全 文 ：第19卷 第10期
Vol.19 No.10
2013年 10月
October.2013Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
HPLC法测定桐叶中齐墩果酸和熊果酸的含量
佘永红
（湘西自治州食品药品检验所，湖南 吉首 416000）
[摘要] 目的：建立桐叶中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。方法：采用HPLC法，色谱柱为Promosil C18柱（4.6 mm×250 mm，
5 μm），流动相为乙睛-甲醇-水-磷酸（66∶12∶22∶0.02），流速为1.0 mL·min-1，检测波长为210 nm，柱温为25 ℃，进样量为20 μL。
结果：齐墩果酸在0.1292-1.5504 μg范围内呈良好的线形关系（r=0.9999），平均回收率为100.1%，RSD%为3.4%（n=6）。熊果酸
在0.2428-2.9136 μg范围内呈良好的线形关系（r=0.9999），平均回收率为99.3%，RSD%为2.2%（n=6）。结论：该方法操作简单、
准确，重现性好，可用于桐叶的质量控制。
[关键词] 桐叶；齐墩果酸；熊果酸；HPLC法
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2013）10-0094-02
Determination of Oleanolic Acid and Ursolic Acid in Paulownia Leaves by HPLC
SHE Yong-hong
(Xiangxi Food and Drug Inspection, Hunan Jishou 416000, China)
[Abstract] Objective：To establish a method for the determination of oleanolic acid and ursolic acid in Paulownia Leaves．
Methods：HPLC was applied, and column was Promosil C18（4.6 mm×250 mm, 5 μm）; mobile phase was acetonitrile- methanol -
water-phosphoric acid（66∶12∶22∶0.02）；flow rate was 1.0 mL·min-1; the detection wavelength was 210 nm; column temperature
was 25 ℃ ; the injection volume was 20 μL． Results：Oleanolic acid in the range of 0.1296-1.5504 μg showed good linear
relationship (r=0．9999)，and the average recovery was 100.1%; RSD% was 3.4% (n=6). Ursolic acid in the range of 0.2428-
2.9136 μg showed good linear relationship (r =0．9999), and the average recovery was 99.3% ; RSD% was 2.2% (n =6).
Conclusion: The method is simple, accurate, reproducible，and can be used for Paulownia Leaves quality control.
[Key words] Paulownia Leaves；HPLC；Oleanolic acid；Ursolic acid ；Content determination
桐叶为玄参科植物白花泡桐paulownia fortunei (See－
mann) hemsley的干燥叶。具有清热解毒，止血消肿的功能。用
于痈疽，疔疮，烧烫伤，创伤出血等[1]。近年来经研究发现白花
泡桐叶含有齐墩果酸、熊果酸等成分[2-3]。齐墩果酸具有护肝
降酶、抗炎等作用[4]，熊果酸具有中枢作用及抗菌、抗炎等作
用[4]。湘西宏成制药有限责任公司生产的复方桐叶烧伤油由
桐叶、麻油组成，用于面积小于29%的Ⅱ度烧烫伤，在临床上
取得了满意的效果。为了有效的控制桐叶的质量，笔者采用
HPLC法测定活性成分齐墩果酸、熊果酸的含量，结果表明该
方法基本稳定、可靠。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Agilent 1260液相色谱仪，Agilent 1260VWD检测
器，AUW 220D电子天平。Rev.B.03[16]化学色谱工作站。
1.2 试药 齐墩果酸（中国药品生物制品检定所，批号：
110709-200505），置五氧化二磷减压干燥12 h以上使用，熊果
酸（中国食品药品检定研究所，批号：110742-200518）。甲醇、乙
腈为色谱纯；水为哇哈哈纯净水；其他试药均为分析纯。
1.3 样品 由湘西宏成制药有限责任公司提供,均采自药材
基地，批号：20110715、20120720、20120716、20120718。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱：Promosil C18柱（250 mm×4.6 mm，
5 μm）；流动相：乙睛-甲醇-水-磷酸（66∶12∶22∶0.02）（用三乙
胺调节pH值至6.5）；流速1.0 mL·min-1；检测波长：210 nm；柱
温：25 ℃，进样量：20 μL。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取齐墩果酸12.92 mg与熊果
酸24.28 mg，分别置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
度，作为齐墩果酸、熊果酸的标准储备溶液，浓度分别为1.292、
2.428 mg·mL-1。分别精密吸取1 mL齐墩果酸、1.5 mL熊果酸置
于同一50 mL容量瓶中，加甲醇制成每1 mL分别含25.84 μg齐
墩果酸与72.84 μg熊果酸的混合溶液，摇匀，即得对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.8 g，精
密称定，置50 mL容量瓶中，加无水乙醇适量，超声处理30 min，
放冷，加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.4 系统适用性试验 按上述色谱条件测定，齐墩果酸峰与
熊果酸峰分离度大于1.5，理论板数均在12000以上。供试品色
谱中，在与对照品色谱峰相应的位置上检出色谱峰。（见图1）
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2013.10.046
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October.2013
2.5 线形关系考察 分别精密吸取齐墩果酸、熊果酸的标准
储备溶液各2 mL，置于同一20 mL容量瓶中，混匀，得标准混
合储备溶液，分别精密吸取0.5、1、2、3、4、6 mL，至10 mL量瓶
中，加甲醇稀释至刻度,制成含6.46、12.92、25.84、38.76、51.68、
77.52 μg·mL-1齐墩果酸和含12.14、24.28、48.56、72.84、97.12、
145.68 μg·mL-1熊果酸的混合溶液，进样量20 μL，按上述色谱
条件注入液相色谱仪中，以峰面积Y对进样量X做线形回归，
回归方程为：齐墩果酸Y=10.397X-0.9891，r=0.9999；熊果酸
Y=8.993X-3.6148，r=0.9999。结果表明：齐墩果酸在0.1292-
1.5504μg，熊果酸在0.2428-2.9136μg范围内呈良好的线形关系。
2.6 精密度实验 取同一浓度混合对照品溶液, 连续进样6
次，齐墩果酸峰面积的RSD%为0.35%，熊果酸峰面积的RSD%
为0.39%。
2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，于0、1、2、4、8、12 h，
共进样6次，齐墩果酸峰面积积分值RSD%=1.1%，熊果酸峰面
积积分值RSD%=0.66%，表明供试品溶液在12 h内基本稳定。
2.8 重现性实验 取同一批号样品6份（批号：20110715），分别
按样品测定法测定。齐墩果酸测定含量分别为1.4807、1.4619、
1.4875、1.4669、1.4886、1.5171 mg·g-1，平均含量为1.4838 mg·g-1，
RSD%为1.4%。熊果酸测定含量分别为4.5721、4.5290、4.5651、
4.6243、4.6114、4.5523 mg·g-1，平均含量为4.5757 mg·g-1，
RSD%为0.79%。
2.9 加样回收率实验 取齐墩果酸含量为1.4838 mg·g-1、熊
果酸的含量为4.5757 mg·g-1样品6份，置50 mL量瓶中，分别吸
取浓度为1.292 mg·mL-1的齐墩果酸标准储备溶液0.5 mL，浓
度为2.428 mg·mL-1的熊果酸标准储备溶液0.75 mL，按供试品
溶液的方法制备。照上述色谱条件测定，测得齐墩果酸平均
回收率为100.1%，RSD%为3.4%。熊果酸平均回收率为99.3%，
RSD%为2.2%。（见表1-2）
表1 齐墩果酸回收率试验 （n=6）
序号 取样量 样品含量 加入对照 测得量 回收率 平均回收 RSD
(g) (mg) 品量(mg) (mg) (%) 率(%) (%)
1 0.4057 0.6020 0.6460 1.2747 104.1
2 0.3946 0.5855 0.6460 1.1952 94.4
3 0.4032 0.5983 0.6460 1.2371 98.9
4 0.4005 0.5943 0.6460 1.2399 99.9
5 0.3967 0.5886 0.6460 1.2489 102.2
6 0.3991 0.5922 0.6460 1.2465 101.3
表2 熊果酸回收率试验 （n=6）
序号 取样量 样品含量 加入对照 测得量 回收率 平均回收 RSD
(g) (mg) 品量(mg) (mg) (%) 率(%) (%)
1 0.4057 1.8564 1.8210 3.6337 97.6
2 0.3946 1.8056 1.8210 3.6483 101.2
3 0.4032 1.8449 1.8210 3.6368 98.4
4 0.4005 1.8326 1.8210 3.6400 99.3
5 0.3967 1.8152 1.8210 3.6781 102.3
6 0.3991 1.8262 1.8210 3.5907 96.9
2.10 样品测定 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各
20 μL，注入液相色谱仪，测定，以外标法计算含量。（见表3-
4）
表3 齐墩果酸的含量测定结果 （n＝6）
批号 齐墩果酸含量（mg·g-1） RSD(%)
20110715 1.4838 1.4
20120720 1.4218 0.31
20120716 0.9282 0.69
20120718 0.6299 0.14
表4 熊果酸的含量测定结果 （n＝6）
批号 熊果酸含量（mg·g-1） RSD(%)
20110715 4.5757 0.79
20120720 4.2458 0.45
20120716 2.8288 0.15
20120718 1.9137 0.10
3 讨 论
3.1 提取方式的选择 比较不同提取方式（超声提取，加热
回流提取）、不同溶剂（甲醇，无水乙醇）、不同提取时间（30、
45min）对含量的影响。结果表明，提取方式、溶剂和提取时间对实
验结果影响不大，故选择相对安全、方便的无水乙醇超声提取。
3.2 流动相的选择 齐墩果酸和熊果酸同属于五环三萜类
化合物，为同分异构体，极性相似，难以有效分离。笔者参考
文献[5]，经实验考察，流动相曾选为乙睛-甲醇-水-磷酸-三
乙胺（66∶12∶22∶0.02∶0.04）,实验中发现，流动相的pH值对峰形
和分离度的影响很大，经反复实验，流动相调整为乙睛-甲
醇-水-磷酸（66 ∶12 ∶22 ∶0.02）（用三乙胺调节pH值至6.5），
分离效果好，达到基线分离。
从实验数据显示，齐墩果酸的含量，熊果酸的含量，均存
在一定差异,其原因有待进一步探讨。参考文献[6]，熊果酸的
100.1 3.4
99.3 2.2
A-对照品 B-供试品
图1 桐叶中齐墩果酸、熊果酸HPLC色谱图
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中医中药在我国医疗保健体系中有着举足轻重的地位。
本文通过对我院中药饮片处方基本情况的调查分析，整理出
用药情况，找出处方的用药规律，为指导中药房工作和中医
临床合理用药提供有益的参考。
1 资料与方法
1.1 资料来源 资料来源于我院2012年所有门诊中药饮片
处方，共1940张，进行调查分析。
1.2 方法 根据《中国药典》和《处方管理办法》等要求，按照
处方书写规范性、患者性别、年龄、味数、疾病诊断、药物使用
频率等，用Microsoft Excel程序进行统计分析[1]。
2 结 果
2.1 不规范处方统计 1940张处方中，不规范处方1275张，
占65.8%。其中主要是药物剂量超量，其次为脚注不明。（见表1）
2．2 性别、年龄分布、味数分布 1940张处方中，男性有574
人，占29.59%；女性有1366人，占70.41%。患者的年龄最小者1
岁，最大者95岁，平均年龄为59.98岁。1940张中药处方中患者
的年龄分布见表2。
1940张处方组成的药味数为1-23味，其中，由1-5味药组
成的处方最多，共817张，占42.11%，平均每方用药9.27味。单
张处方药的味数比例见表3。
表1 不规范处方统计
不规范原因 处方数 比例（%）
剂量超量 815 63.9
脚注不明 288 22.6
修改未签字 16 1.3
剂量表述不规范 141 11.1
服用方法不完整 15 1.2
合计 1275 100.0
表2 1940张处方中患者的年龄分布
年龄段(岁) 例数 比例（%）
0-14 14 0.7
15-35 109 5.6
36-55 513 26.4
56-75 1024 52.8
75-95 280 14.4
合 计 1940 100
含量7月达到最高，然后即开始下降，7月中下旬的白花泡桐
叶中熊果酸的含量为最高，适于采收入药。因此实验用的桐
叶均采自7月中下旬。
参考文献
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湖南科学技术出版社,2009:283-284
[2] 李晓强,武敬莲,曹斐华,等.白花泡桐叶化学成分的研究[J].
中药材，2008,31（6）：850-852
[3] 张德莉,李晓强,李冲.白花泡桐叶三萜类化学成分研究[J].
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[4] 国家医药管理局中草药情报中心站.植物药有效成分手册
[M].北京:人民卫生出版社,1986:786-787，1101-1102
[5] 戚志华,王四旺,王剑波,等.不同生长期女贞子中齐墩果酸
和熊果酸的含量变化[J].中国中药杂志,2007,32(15):1583-
1585
[6] 乌鲁木汗·那孜尔别克，石进校，李科，等.HPLC测定白花
泡桐叶不同月份熊果酸和木犀草素的含量[J].湖南农业科
学，2011，41（21）:102-105
（收稿日期：2013-04-02 编辑：李海洋）
我院2012年中药饮片处方的调查分析
王 寅，王瑞梅
（北京康复中心，北京 100144）
[摘要] 目的：总结我院目前中药饮片临床使用现状，分析用药规律，通过回顾性数据分析，统计得出用药趋势、分析处
方合理性。方法：对我院2012年所有门诊中药饮片处方用Excel程序进行统计分析。结果：我院中药饮片的使用以老年患者、慢
性病居多；虚证居所有证候之首，活血化瘀药品使用频繁，但诊断缺乏中医特色。结论：通过对中药饮片处方的统计分析，有
利于总结使用人群的病证结合的变化趋势，为中药房指导临床合理用药提供理论支持。
[关键词] 中药饮片；处方分析；合理用药
[中图分类号] R283 [文献标识码] B [文章编号] 1672-951X（2013）10-0096-02
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