全 文 ：金丝带化学成分研究
元 超1，吴长生2，李 刚2，李 铭1，赵遵田1*
(1．山东师范大学生命科学学院，山东济南 250014;2．山东大学药学院，山东济南 250014)
摘要 ［目的］对金丝带(Lethariella zahlbruckneria)含有的主要化学成分进行初步探讨，为进一步活性成分的分离及结构鉴定奠定基础。
［方法］采用试管法结合薄层色谱法，对金丝带的化学成分进行预试。［结果］金丝带中主要含有酚类、挥发油类、有机酸、多糖及其苷类
成分，可能含有强心苷、甾体及萜类。［结论］该研究可为该科属地衣的分类学研究提供依据。
关键词 金丝带(Lethariella zahlbruckneria);共生;预试;地衣
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)14 －08329 －02
Preliminary Research on Chemical Components of Lethariella zahlbruckneria
YUAN Chao et al (College of Life Sciences，Shandong Normal University，Jinan，Shandong 250014)
Abstract ［Objective］To carry out preliminary research on main chemical components of Lethariella zahlbruckneria，so as to lay a foundation
for further isolation and structure identification of active components． ［Method］A pre-test for chemical components of Lethariella zahlbruckneria
was performed by combining tube method with thin-layer chromatography． ［Results］Phenols，volatile oil，organic acid，polysaccharide and glyco-
side were main chemical components of Lethariella zahlbruckneria． Besides，it may contain cardiac glycoside，sterides and hemiterpene． ［Con-
clusion］This research can providea basis for taxonomic studies of lichen that belong to Lethariella genus，Parmeliaceae family．
Key words Lethariella zahlbruckneria;Commensalism;Pre-test;Lichen
基金项目 国家自然科学基金(31070010)。
作者简介 元超(1979 － ) ，男，山东威海人，博士，讲师，从事天然产物
方面研究，E-mail:yuanchao79@ 126． com。* 通讯作者，教
授，硕士，博导，从事植物资源分类学研究，E-mail:ztzhao@
sohu． com。
收稿日期 2011-02-09
地衣是一种真菌与藻类的共生体［1］，种类多，分布广，生
长期长，自古以来人们用其制作香料、染料、抗生素等。近几
年随着对地衣研究的深入，发现其具有抗菌、消肿、驱虫、抗
肿瘤等活性［2］。药材金丝带为梅衣科(Parmeliaceae)金丝属
(Lethariella)植物金丝带(Lethariella zahlbruckneria)的地衣
体，味苦性平，具有镇静、消炎、止痛功效，可用于治疗癫痫、
精神分裂、神经衰弱及头目眩晕等疾病［3］。笔者采用试管预
示和薄层预示方法，对金丝带含有的主要化学成分进行初步
探讨，为进一步活性成分的分离及结构鉴定奠定基础。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 研究对象。金丝带(Lethariella zahlbruckneria)于 2007
年 7月采自青海省祁连县牛心山，经中国科学院微生物研究
所王海英博士鉴定。
1． 1． 2 主要试剂。薄层层析 GF254 硅胶，由青岛海洋化工
厂生产;石油醚、乙醇、聚乙烯醇、FeCl3 和 KOH 等试剂均为
市售，分析纯。
1． 1． 3 主要仪器。EB-280 型电子天平，由日本 shimadzu公
司生产;ZF-C型三用紫外分析仪，由苏州江东精密仪器有限
公司生产;DF-101型恒温数显磁力搅拌器，由巩义市予华仪
器有限责任公司生产。
1． 2 方法
1． 2． 1 薄层板的制备。准确称取 1． 7 g 聚乙烯醇置于 500
ml烧杯中，加蒸馏水 250 ml，不断搅拌下加热至完全溶解，冷
却至室温。再称取适量薄层硅胶 GF254于研钵中，加入适量
聚乙烯醇溶液，研磨至无气泡，用载玻片铺板，室温放干，置
于 105 ℃烘箱活化 30 min，储存于干燥器中备用。
1． 2． 2 供试样液的制备。
1． 2． 2． 1 冷水提取液。称取 5． 0 g金丝带粉末，加去离子水
约 60 ml，室温浸泡 24 h，过滤所得滤液为冷水提取液。
1． 2． 2． 2 热水提取液。冷水浸提液及残渣在50 ～60 ℃水浴
中浸提 0． 5 h，抽滤，即得热水提取液。
1． 2． 2． 3 石油醚提取液。称取金丝带粉末 15． 0 g，用石油醚
作为提取溶剂，60 ℃加热回流 1 h，抽滤，即得石油醚提取液。
1． 2． 2． 4 乙醇提取液。称取金丝带粉末 15． 0 g，用乙醇作为
提取溶剂，60 ℃加热回流 1 h，抽滤，即得乙醇提取液。
1． 2． 2． 5 甲醇提取液。称取金丝带粉末 15． 0 g，用甲醇作为
提取溶剂，60 ℃加热回流 1 h，，抽滤，即得甲醇提取液。
1． 2． 2． 6 酸性乙醇液。取部分乙醇提液，浓缩至干，以 20%
盐酸 20 ml溶解，过滤，得酸性乙醇液。
1． 2． 3 试管法预试［4］。准确移取供试样液 1 ～ 2 ml 置于试
管中，加入检测试剂，观察现象。
1． 2． 4 薄层法预试。用毛细管点样将样品点在薄层板上，
选用正己烷∶乙醚∶乙酸 =130∶ 100∶ 20展开系统展开，室温干
燥后，喷上相应的显色剂，观察现象。
2 结果与分析
2． 1 试管预试结果 按照“1． 2． 3”进行试管预试，预试项目
及结果见表 1。
2． 2 薄层预试结果 按照“1． 2． 4”进行薄层预试，预试结果
见表 2。由表 1 ～2可知，金丝带中主要含有酚类、挥发油类、
有机酸和多糖及其苷类成分，可能含有强心苷、甾体及萜类。
3 讨论
试管预示法是过加入检测试剂后，观察试液颜色变化来
确定其中含有的成分。由于试液本身带有一定颜色或有时
颜色变化不明显，以及试验者对颜色变化判断的误差，造成
试验结果不准，而薄层色谱法检测灵敏度高，重现性好，是试
管法得很好补充。地衣是自然界中一种特殊群体，是菌类与
藻类的共生体，这种特殊的共生关系导致了其特殊的化学成
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(14):8329 － 8330，8333 责任编辑 侯美灵 责任校对 马君叶
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.14.091
表 1 金丝带试管预试结果
Table 1 Pre-test results of Lethariella zahlbruckneria by tube method
序号
No．
预试项目
Pre-test stem
预试样液
Pre-test solution
试验设计
Experiment design
现象
Phenomenon
结果
Results
1 酚性成分 酸性乙醇液 a． FeCl3 试验 绿色 + +
b． 重氮化试验 深红色 + +
2 鞣质成分 热水提液 a． FeCl3 试验 暗红色 +
b． NaCl白明胶试验 无现象 －
c． 生物碱反应 无沉淀 －
3 生物碱 酸性乙醇液 a． 碘化铋钾试验 无沉淀 －
b． 碘化汞钾试验 无沉淀 －
c． 硅钨酸试验 无沉淀 －
d． 碘化碘钾试验 无沉淀 －
4 糖、多糖及苷 热水提液 a． 碱性酒石酸铜试验 砖红色沉淀 +
b． 1-萘酚试验 明显紫色环 + +
5 皂苷 热水提液 a． 泡沫试验 无明显蜂窝状泡沫 －
b． 醋酐浓硫酸试验 无紫色环 －
c． 氯仿浓硫酸试验 无明显颜色变化 －
6 甾体萜类 乙醇提液 a． 冰醋酸浓硫酸试验 不明显墨绿色系列变化 + / －
b． 氯仿浓硫酸试验 硫酸层弱绿色荧光 + / －
7 黄酮及苷 乙醇提液 a． 盐酸锌粉反应 无颜色变化 －
b． 醋酸铅沉淀反应 无沉淀生成 －
8 蒽醌及其苷 甲醇提液 a． 碱性试验 无颜色变化 －
b． 醋酸镁试验 无颜色变化 －
9 强心苷 甲醇提液 a． 碱性苦味酸试验 显橙黄色 +
b． 三氯化铁冰醋酸试验 界面呈棕色 +
10 内酯香豆素 甲醇提液 a． 异羟钨酸铁试验 橙红色 －
b． 重氮化试验 红色 + +
11 氨基酸多肽 冷水提液 a． 酸致沉淀试验 白色混浊 +
b． 双缩脲反应 无颜色变化 －
c． 茚三酮反应 淡紫色 +
12 挥发油油脂 乙醚提液 a． 挥发油试验 有油状物 + +
注:“+”表示正反应，“－”表示负反应，“+ / －”表示不确定。
Note:“+”represented positive reaction，“－”represented negative reaction，“+ / －”represented indeterminacy．
表 2 金丝带薄层预试结果
Table 2 Pre-test results of Lethariella zahlbruckneria by thin-layer chromatography
序号
No．
检测项目
Test item
试验设计
Experiment design
现象
Phenomenon
结果
Results
1 挥发油 喷新配制的 5%香荚兰醛的浓硫酸溶液 黄色斑点 +
2 生物碱 改良碘化铋钾 橘红色斑点 －
3 强心苷 先喷 2% 3，5-二硝基苯甲酸乙醇
溶液再喷 4% NaOH乙醇溶液
紫红色斑点 +
4 黄酮及其苷 喷 3% FeCl3 乙醇溶液;先在 254 nm波长紫外
灯下观察，再喷 1% AlCl3 溶液
棕色斑点;紫红色荧光增强 －
－
5 蒽醌及苷 喷 5% KOH溶液，90 ℃烘烤 红色斑点 －
6 甾体及萜类 喷 5%磷钼酸乙醇溶液，120 ℃烘烤 5 min 深蓝色斑点 +
7 内酯及香豆素 365 nm紫外灯照射 天蓝色荧光，氨熏，荧光增强 －
8 酚类成分 喷 1% FeCl3 与 1% 铁氰化钾等量混合溶液 紫红色斑点 + +
9 有机酸 精密 pH试纸 pH为 5 ～6 + +
10 氨基酸 喷 0． 2% 茚三酮乙酸溶液，80 ℃烘烤 蓝色或蓝紫色 －
注:“+”表示正反应，“－”表示负反应
Note:“+”represented positive reaction，“－”represented negative reaction．
分，对其进行化学成分的系统预试将有助于其化学成分及生
物活性的进一步研究。该研究对对金丝带化学成分的研究
将会为该科属地衣的分类学研究提供依据。
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(下转第 8333页)
0338 安徽农业科学 2011 年
于 100 μg /ml时，细胞存活率趋于稳定。菜芙蓉花总黄酮含
量为 5． 78%，而其中金丝桃苷含量高达 4． 002%却对 Hela细
胞无抑制作用，这可能是 Hela 细胞对总黄酮中的其它成分
具有高敏感性从而导致存活率降低。经计算，菜芙蓉黄酮提
取物对 Hela 细胞生长抑制的 IC50约为 228 μg /ml。
表 1 样品含量测定结果(n =3)
Table 1 Results of sample determination (n =3)
生长部位
Growth
area
金丝桃苷含量∥%
Hyperoside
content
平均值∥%
Mean value
RSD
%
根 Root 8． 80 ×10 －3
8． 89 ×10 －3
9． 01 ×10 －3
0． 009 1． 18
茎 Stem 1． 78 ×10 －2
1． 80 ×10 －2
1． 74 ×10 －2
0． 017 1． 72
叶 Leaf 3． 93 ×10 －2
3． 83 ×10 －2
3． 79 ×10 －2
0． 383 1． 87
籽 Seed 3． 93 ×10 －3
4． 01 ×10 －3
4． 00 ×10 －3
0． 004 1． 02
花 Flower 3． 991
3． 960
4． 005
4． 002 1． 21
图 2 菜芙蓉黄酮提取物和金丝桃苷对 Hela细胞生长抑制作用
的剂量效应关系
Fig． 2 Dose-response relationship of ethanolic extract and hy-
peroside on growth inhibitory of Hela cells
3 结论与讨论
该研究建立的高效色谱法具有简便、快捷、灵敏度高、稳
定性好和测定结果准确可靠等特点。试验采用甲醇 －水、乙
腈 －水等系统进行分离，结果表明甲醇 －水系统已完全达到
所需的分离效果，故从环保和经济角度考虑，流动相采用甲
醇 －水。另外，发现菜芙蓉金丝桃苷色谱峰易拖尾，但当在
水中加入磷酸时可改善其峰形，故选择以甲醇 － 0． 05%磷酸
溶液作为流动相，色谱峰达到基线分离，能够达到与其他组
分分离，n ＞5 000，拖尾为 1． 02，并满足含量测定的要求，获
得良好的分离效果。
菜芙蓉是珍稀植物，具有食用、药用、保健功能，因产地
不同，采集时间不同，菜芙蓉花中金丝桃苷含量也有较大差
异［8］。该试验材料花中金丝桃苷含量为 4． 002%，高于其他
相关文献报道的含量［3 －4］，具有很大的开发价值。菜芙蓉花
总黄酮提取物对 Hela 细胞具有明显的生长抑制作用，且呈
剂量效应，IC50约为 228 μg /ml，而金丝桃苷对 Hela细胞无明
显的生长抑制作用，可能是其他的黄酮成分具有抑制肿瘤细
胞生长的作用。下一步的研究工作将对提取物中的黄酮作
进一步的分离、纯化和鉴定，探讨各黄酮组分在对肿瘤细胞
生长抑制中所起的作用及机制，为进一步揭示菜芙蓉黄酮提
取物抗肿瘤机理提供理论依据。
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檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
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