全 文 ：· 实验研究 · 7 5
广枣叶提取物原儿茶酸对大鼠离体正常心脏心功能的影响
李双军
(内蒙古赤峰市林西县医院 , 内蒙古 赤峰 0 2 5 2 5 0)
【摘要】 目的 主要研究广枣叶提取物原儿茶酸对大 鼠离体正常心脏心功能有何影响 。 方法 取 SD 大鼠 , 开胸取出心脏后 , 置于 aL ng e nd o rf
灌流装置 上用 k 一H 液持续灌流 , 观察心肌收缩 力和心 电图 , 待稳 定后给药 , 继续观察心 电 图和心肌收缩 力的变化 , 从而判断是 否该药有
效 。 结果 发现原儿 茶酸在不同浓度的情况下对心脏 的心 电及心肌收缩力有不 同的影响 。 结论 原 儿茶酸对心脏有减慢心率和心肌收缩力的
作用 。
【关键词】广枣提取物原儿茶酸 ; 离体心脏灌流 ; L a n g e nd o if 法 ; 大 鼠 ; 动物
中图分类号 : R一 3 3 文献标识码 : B 文章编号 : 1 6 7 1一 5 1 9 4 ( 2 0 1 3 ) 1 3一 0 0 7 5一 0 2
2
.
1 一般情况
药物有使其心肌收缩力减小和心率减慢的作用 , 就认为它具有抗
心律失常说的作用 。
2
.
2 广枣叶提取物原儿茶酸对大鼠离体正常心脏心肌收缩力的影响
(表 l )
表 1 广枣叶提取物原 儿茶酸对大 鼠离体正常心脏心肌收缩力的
影响 ( 贡 士 s , =n 8 )
浓度 给药后的心肌收缩力
5
t
OS O 士 l夕7 2
2石5 0 士 1 t 7 7 2 * *
2
.
17 5 士 0夕7 4 *
2
t
8 7 5 士 l t 8 7 3 * *
1
.
9 3 8 士 l t O8 9 *
l
_
6 6 3 士 l _ 11 7 *
型铂
1 材料与方法
1
.
1 材料
1
.
1
.
1 药物
广枣叶提取物原儿茶酸 , 天然药化教研室提供 ; 戊 巴 比妥钠
(化学纯 ) , 佛 山市化工实验厂进 口分装 , 批号 : 8 609 0 1 ; K r eb s -
H e ns el e lt (K
一
H ) 灌流液 , 由实验学生 自行按比例配制。
1
.
l
t
2 动物
SD大鼠40 只 , 包头医学院动物室提供 , 体质量 3 50 一 4 5 0 9雌雄兼
有 。 随机分成 5组 , 每组 8只 , 雌雄各半 , 分别为空白组 、 阳性对照组
(原儿茶酸 : 浓度为 10 一 9一 10 一 5 ) 。
1
.
l
t
3 主要仪器
B L
一
4 2 0生物机能实验系统 (成都泰盟科技有限公司 ) ; 超级恒
温水浴 (上海市试验仪器厂 ) ; 离体灌流装置 ; 自动抽注机z C z 一 50
(浙江医科大学医学仪器实验厂 ) 。
l
t
2 方法
l
t
2
.
1 实验动物分组
取SD大鼠随机分为8组 , 每组雌雄各半 , 5只为一组 , 该组动物则
分别给不同浓度的广枣叶提取物原儿茶酸。 以心率及心肌收缩力为评
价指标 , 观察实验现象 。
12
t
Z al gn
e
dn
o
rf 离体心脏灌流模型的建立
取SD大鼠用 3%戊巴比妥钠30 m叭 g腹腔注射麻醉 , 仰卧固定于手
术台 。 获取 SD大鼠离体心脏后 , 将其连接于灌注装置并通过逆行灌注
的方法对离体心脏进行灌注 ; 进行灌注时 , 用用95 % 0 2与 5% C 0 2饱和
的K 一H液开始进行灌流 , 灌流压7 0 c n 〕 H 20 , 温度为 (3 7 t 0 士 0 . 5 ) ℃ ,
p H ( 7
t
4 士 0 . 5 )
。 灌流过程中要对灌注液成分进行调整并保持灌注压
力 、 温度和p H值的稳定 l] 。
l
t
2 3 实验指标测定
一直用饱和的K 一H液进行灌流 , 待稳定后用容积导电法 , 观察和
记录心率的变化 。 待心率稳定后 , 从侧管注人不同浓度的原儿茶酸 ,
观察心电图的变化 , 直至出现心室纤颤停止给药 , 记录心电图和心肌
收缩力的变化 。 其中每种浓度的原儿茶酸要用 8只鼠进行验证 , 重复
试验操作 , 观察实验现象 , 记录实验结果 。
l
t
2 4 统计方法
采用方差分析和 t检验 (E xc el 表格计算 ) 对实验数据处理 , 实验
结果均以均数 士标准差 ( 贡 士 s ) 表示 , 以单因素方差分析 , 各组与
空白组间比较脸验显示差异性 , 尸 < 0 t 05 表示差异有统计学意义 。
2 实验结果
10
一
9
10
一
8
10
一
7
10
一
6
10
一
5
与空 白组比较 : * 甲 < 住01 ; * P < 住05实验结果表明 , 广枣叶中提取物原儿茶酸各浓度均能够降低心肌
收缩力 沪 < 0刀 1或尸 < 0刀 5 ) 。 图 l 。
图 l 广枣叶提取物原儿茶酸对大鼠离体正常心脏心肌收缩力的影响
2 3 广枣叶提取物原儿茶酸对大鼠离体正常心脏心率的影响 (表 2 )
实验结果表明 , 广枣叶中提取物原儿茶酸各浓度均能够减 J唆心率
(P < 0刀 1或尸 < 0刀 5 ) 。
3 讨 论
原儿茶酸在体内的作用机制 l] : ( 1 , 2为原儿茶酸 ( p r ot oc at ce hu i
。 ac id
,
PA C )
, 在儿茶酚氧位甲基转移酶 ( (C O M T ) ) 的催化下原儿茶
酸甲基化生成香草酸 ( va 血il 。 a ic d , , VA )C 12] 与儿茶酚胺类物质的同
为C O M T底物 l3] , 在代谢过程中可产生竞争性相互作用 , 所产生的影
DOI : 10. 15912 /j . cnki . gocm. 2013. 13. 071
花 · 实验研究 ·
表2 广 枣叶提取物原 儿茶酸对 大鼠正常离体心脏心率的
影响 ( 贡 士 s , =n 8 )
浓度 给药后的心率
17 2
.
5 士 3 8 4 52
1 0 5
t
o 士 2 2 t6 7 8*
1 10石 士 4 8 t 7 2 9 * *
10 6
_
3 士 50 _4 0 9* *
型铂
7 l
t
3 士 2 2 3 2 1*
5 9
_
4 士 4 _ 17 3 *
与空 白组比较 :
10
一
9
10
一
8
10
一
7
10
一
6
10
一
5
* * P < 0
.
0 1
: * P < 0
.
0 5
响可能随机体状态改变而不同 。 ②在前期的药效研究中发现 , 据文献
报道 145 〕, 原儿茶酸在心脏中的甲基化代谢物香草酸可通过与辅酶A结
合 , 部分隔离线粒体的辅酶A , 一定程度上抑制脂肪酸氧化 , 从而优
化心肌能量代谢 , 保护心脏 , 该抑制作用与甲基化代谢密切相关l6] 。
实验结果显示 , 乙醇提取乙酸乙酪萃取的广枣提取物原儿茶酸有
降低心率和减慢心肌收缩力的作用 。 心率 (H ae rt R at 。 ) 是用来描述心
动周期的专业术语 , 是指心脏每分钟跳动的次数 , 以第一声音为准 ,
是速度指标 , 是评价心脏跳动快慢的基本指标 。 心肌收缩力是在一定
程度上反映了心室肌张力的强度及心肌纤维收缩速率 , 受负荷影响较
小 , 对收缩能力变化较敏感 。 综上所述 , 广枣叶提取物原儿茶酸主要
通过降低心率 , 抑制心肌收缩力从而降低心肌耗氧量 。
参考文献
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2 0 0 7
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8 5 6 ( l
一
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一
1 0 7
.
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动学的影响 IJ] .中国药科大学学报 ,2 0 10 , 5 (:2) 41 一 42 .
黄茂注射液对日2 荷瘤小鼠抑瘤作用的细胞免疫机制
范双莉以 王志举1* 任亚丽 2
( l 郑州大学基础医学院 , 河南郑州 4 5 0 0 0 1 ; 2 济源职业技术学院 , 河南 济源 4 59 0 0 0)
【摘要」 目的 探讨黄茂注射液体内抑瘤作用的细胞免疫机制 。 方法 将 昆明小 鼠移植 H 2 肝癌 细胞后 , 分为五组: 模型 组 , 5 一 氟尿嚓吮组 ,
黄茂注射液低 、 中 、 高剂量组 。 分别测定各组小 鼠肿瘤生 长抑制率 ( IR ) 和腹腔 巨噬细胞的吞噬指数 ; 采用 M T T 法测定各 组小 鼠脾琳 巴
细胞增殖指数 。 结果 5 一 氟尿嚓吮 组和高 、 中剂量黄 茂注射液实验组小 鼠 H 2 实体瘤 IR 分别为 59 . 45 % 、 50 . 62 % 和 40 . 47 % , 与模型 组比
较有显著性差异 (P < 0 . 0 5 ) ; 黄茂注射液实验组 小 鼠腹腔 巨噬细胞吞噬百 分数 、 吞噬指数和脾脏琳 巴细胞增值指数都明 显高于模型 组小
鼠 (p < 0 . 05 ) 。 结论 黄茂注射液在荷瘤小 鼠体内具有一定的抑瘤作用 , 其机制可能与其提高荷瘤小 鼠的细胞 免疫功能有关 。
【关键词】黄茂 ; H 2 荷瘤小 鼠 ; 细胞免疫 ; 抑瘤率
中图分类号 : R一 3 3 文献标识码 : B 文章编号 : 1 6 7 1一 8 1 9 4 ( 2 0 1 3 ) 1 3一 0 0 76 一 0 2
黄蔑是豆科多年生草本植物 , 其味甘 , 性微温 , 是重要的补益类
中药 。 据报道 , 黄蔑中含有大量微量元素 , 如eF +2 、 M n +2 、 Z n +2 、 se
等 。 黄蔑注射液是从黄蔑中提取的有效成分精制而成 , 含有五十多种
皂试和数种黄蔑多糖 , 具有提高机体免疫能力的作用 ! `〕。 本研究通过
观察黄蔑注射液对 H 2 2肝癌实体瘤的抑瘤效应 , 探讨黄蔑注射液抗肿
瘤作用的细胞免疫机制 。
1 材料与方法
1
.
1 实验动物及瘤株
昆明种健康小鼠 10 0只 , 体质量 18 一 2 2 9 , 雌雄不拘 (由本院动物
中心提供 ) ; 选用H 2 2肝癌实体瘤为动物模型 , 瘤株 (由本学院药理
学教研室提供 ) 。
l
t
2 药品 、 试剂及仪器
黄蔑注射液 , 每 5毗含生药 109 ; 5 一氟尿嚓咙 (5一FU ) , 25 n喇支 ;
噬哇蓝 (M T T ) ; 刀豆蛋白 (C o nA ) ; D J5 0 3 1酶联免疫检测仪 。
l
t
3 方法
l
t
3
.
1 模型制备与动物分组
通讯作者 : 压一二 a } ] : 2 7 3 3 9 5 8 6 2@ qq . e。二
每一只小鼠左腋皮下注射 0 Z n止的瘤悬液 , 形成实体瘤 , 移植后将
动物随机分为模型组 , 5一氟尿嚓咙组 , 黄蔑注射液低 、 中 、 高剂量组 ,
每组 10 只小鼠。 24 h J琶开始给药 。 低 、 中 、 高剂量实验组小鼠分别腹腔
注射黄蔑注射液0 . 1 、 0 2 、 0 t4毗d/ , 剂量 分别为g2 、 g4 、 8留` g , l 次月 ;
5
一氟尿嚓咙组小鼠腹腔给予 5一氟尿嚓咙30 n官`g , l 次月 ; 模型组小鼠腹腔
给予氯化钠注射液o tZ n止 , 1次d/ 。 连续给药记为 1个疗程 。
l
t
3
t
2 实验方法
①抑瘤率的测定 : 给药 7 d后颈椎脱臼处死小鼠 , 剥瘤称量 , 计算
各组肿瘤生长抑制率 (抑瘤率 , I R ) 。 IR = (模型组平均瘤重量 一实验
组平均瘤重量 ) 模型组平均瘤重量 火 10 % 。 ②腹腔巨噬细胞功能的测
定 : 给药 7妮 , 测定各组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数 l2] 。
③脾脏淋巴细胞增殖指数 : 给药7 d后颈椎脱臼处死小鼠 , 摘取脾脏 ,
M T T法测定各组小鼠脾淋巴细胞转化指数 l3] 。
l
t
4 统计学方法
数据采用S P SS 1 3 t o统计软件进行分析 , 计量数据用均数 士标准差
( 贡 士 S ) 表示 , 两组间比较采用配对资料的t检验 , 计数资料进行才
检验 , 尸 < 0 t 05 为差异有统计学意义 。
2 结 果