全 文 ：中国现代医药杂志 2014 年 1 月第 16 卷第 1 期 MMJC， Jan 2014， Vol 16， No.1
·论 著·
乌榄（Canarium pimela Leenh）为橄榄科，常绿大
型乔木，生于低海拔山地林中，资源丰富，广泛分布
于我国南部福建、两广、云南等地。目前，乌榄的药效
研究工作主要集中在其叶水提取物对心血管系统的
药理作用，如快速降低血压、减慢心率、减弱心肌收
缩力、舒张血管平滑肌以及双向调节心功能等 [1]。 据
文献报道，乌榄叶挥发油成分中主要为单萜、倍半萜
及其抗氧化化合物[2]，但尚未见有关乌榄叶其他提取
部位对心脏的药效报道。 故本实验通过探究乌榄叶
水提取物、乙醇提取物、正丁醇提取物及石油醚提取
物对大鼠离体心脏的影响，以确认其对心脏的最佳
药理作用提取部位，为开发研究乌榄叶最佳活性提
取部位对心血管的药理作用奠定实验基础。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1 药品试剂 乌榄叶采自广东省中山、珠海地
区，其水提取物、乙醇提取物、正丁醇提取物及石油
醚提取物干粉，均由本实验室制备。水提取物用蒸馏
水稀释，其余提取物均用羧甲基纤维素钠溶液（CMC-
Na）乳化[3]，调试 pH值到 7.0，再用滤孔直径为 0.22μm
的微孔滤膜过滤。 丹参注射液（1.5g 生药/ml，批号：
1111022），正大青春宝药业有限公司；肝素钠注射液
（2ml：12500U，批号：1106121），江苏万邦生化医药股
份有限公司；Krebs-Henseleit 液（简称 K-H 液），配
乌榄叶不同提取物对大鼠离体心脏的影响
岑柏宏 江维宁 刘萍芬 林嘉成 梁燕玲 董艳芬 吕竹芬
【摘要】 目的 探讨乌榄叶对大鼠离体心脏作用的最佳活性提取部位。 方法 建立 Langendorff 离体心脏灌流模型，
采用加入羧甲基纤维素钠制备非水提取物乳剂的方法，通过动脉套管分别给予乌榄叶水提取物、乌榄叶乙醇提取物、乌榄
叶正丁醇提取物及乌榄叶石油醚提取物，记录给药后 10min 内的心率、冠脉流量及心肌收缩力，以确定乌榄叶对心脏影响
的最佳活性提取部位。 结果 乌榄叶水提取物能够降低离体心脏的心率、增加冠脉流量及减弱心肌收缩力，而其他提取物
均无此作用。 结论 乌榄叶水提取物是乌榄叶对心脏影响的最佳活性提取部位。
【关键词】 乌榄叶 离体心脏灌流 水提取物 非水提取物
The impact of the diverse extracts of Canarium pimela Leenh leaves on isolated heart of rat Cen Baihong，Jiang Weining，
Liu Pingfen，et al. Nature Pharmaceutical，School of Pharmacy，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006
【Abstract】 Objective To study the best pharmacological activity part of the leaves of Canarium pimela Leenh on isolat-
ed heart of rat. Methods Established Langendorff isolated heart perfusion model， added sodium carboxymethyl cellulose and
made non-aqueous extract emulsions. Gave the liquid extract， ethanol extract， n-butane extract and petroleum ether extract of
Canarium pimela Leenh by the arterial sheath. Recorded the heart rate， coronary flow and myocardial contractile force after
10min administration，to confirm the most effective pharmacological extract of the leaves of Canarium pimela Leenh for the heart.
Results The liquid extract of the leaves of Canarium pimela Leenh reduced the rate of the isolated heart， increased coronary
blood flow and weakened myocardial contractile force， but others hadn’t these functions. Conclusion The liquid extract of
the leaves of Canarium pimela Leenh is the most effective pharmacological extract for the isolated heart.
【Key words】 Leaves of Canarium pimela Leenh Isolated heart perfusion Aqueous extract Non-aqueous extract
▲基金项目：广东省教育厅大学生创新训练基金项目（编号：
1057312014）
作者单位：510006 广东药学院 药科学院天然药物制剂专
业（岑柏宏、江维宁、刘萍芬、林嘉成），基础学院生理教研室
（梁燕玲、董艳芬），药物研究所（吕竹芬）
通讯作者：董艳芬，E-mail：dong704704@163.com
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中国现代医药杂志 2014 年 1 月第 16 卷第 1 期 MMJC， Jan 2014， Vol 16， No.1
方如下 （NaCl：6.9g，KCl：0.35g，MgSO4·7H2O：0.29g，
KH2PO4：0.16g，NaHCO3：2.1g，CaCl2：0.28g，glucose：2.0
g）。
1.1.2 实验动物 SPF 级 SD 大鼠，雌雄各半，体重
（250±50）g，由广东省动物实验中心提供。
1.1.3 实验仪器 MedLab 生物信号采集处理系统，
南京美易公司；JZ101 型张力换能器；Langendorff 离
体心脏灌流仪；PHS-25 型数字 pH 计，上海魅宇仪
器设备有限公司；ZC-10 智能型超级恒温水槽，宁波
天恒仪器厂。
1.2方法
1.2.1 药材提取物的制备 取乌榄叶，加入蒸馏水加
热回流提取，滤过，收集续滤液。 醇沉析出杂质，滤
过，收集续滤液，除去水分，烘干，打粉制得水提取
物。
取乌榄叶，加入 95%乙醇加热回流提取，滤过，
收集续滤液，除去溶剂，干燥，取得乙醇提取物。
取乌榄叶，加入 95%乙醇加热回流提取，滤过，
收集续滤液，续滤液先用石油醚萃取，取石油醚层，
除去石油醚，干燥，收集石油醚提取物。 续滤液再用
正丁醇萃取，取正丁醇层，去除正丁醇，干燥，收集正
丁醇提取物。
1.2.2 实验分组 把实验动物随机分为 7 组：生理盐
水组，溶媒组（0.5%CMC-Na 溶液），丹参注射液组
（1.5g 生药/ml），乌榄叶水提取物组（0.1g 生药 /ml），
乌榄叶乙醇提取物组（0.1g 生药/ml），乌榄叶正丁醇
提取物组（0.1g 生药/ml），乌榄叶石油醚提取物组
（0.1g生药/ml），每组 8只。
1.2.3 大鼠离体心脏灌流模型的建立 腹腔注射肝
素 1 000U/kg，20min 后迅速断头开胸暴露心脏，摘
取心脏立即放入 K-H准备液（4℃，用前 95%O2与5%
CO2饱和 30min）中，排空心脏内残留的血液，将主动
脉固定于 Langendorff 灌流装置中的心脏套管上，用
95%O2与 5%CO2饱和的 K-H 液进行恒温（37℃）恒
压（75mmHg）灌流。 用蛙心夹夹住离体心脏的心尖
部，经张力换能器与 MedLab 生物信号采集处理系
统连接，由此建立大鼠离体心脏灌流模型[4]。
1.2.4 指标测定 上架稳定 10min 后，开始记录冠脉
流量，待流量稳定后（约 10min），从侧管恒速推注
0.2ml 药液，给药时间为 30s，同步记录给药后 10min
内心脏的冠脉流量、心率及心肌收缩力，综合评价不
同提取物对心脏的作用效果，以确认乌榄叶对大鼠
离体心脏作用的最佳活性提取部位。
1.3 统计学方法 实验数据以 x±s表示。 用 SPSS 19.0
软件进行统计学分析，组间对照用单因素方差分析。
2 结果
2.1 乌榄叶不同提取物对大鼠离体心脏心率的作用
由表 1 可见，溶媒组（CMC-Na）给药后，心率有所下
降，但该变化与生理盐水组相比无显著性差异。乌榄
叶水提取物组给药后，心率下降，在给药后第1min
作用最为显著， 与同期的生理盐水组及丹参注射液
组比较具有统计学意义（P<0.05），提示乌榄叶水提
取物对离体心脏具有明显心率减慢作用。 乌榄叶正
丁醇提取物及石油醚提取物对心率的影响与溶媒组
相比无显著性差异，乙醇提取物组心率表现为先降
后加快，心率减慢变化值与溶媒组比较无统计学意
义，但给药后第 4min 心率加快变化值与同期溶媒组
比较具有统计学意义（P<0.05），表明乌榄叶乙醇提
取物对离体心脏心率可能具有双向调节作用。
表 1 乌榄叶不同提取物对大鼠离体心脏心率的作用（次/min，x±s）
组别（n=8） 给药前
给药后（变化值）
第 1min 第 2min 第 3min 第 4min 第 5min 第 7min 第 10min
生理盐水组 226.88±26.54 -4.99±5.09 -4.60±4.55 -4.34±7.35 -4.30±7.69 -4.64±8.09 -4.93±8.59 -8.20±10.52
溶媒组（CMC-Na） 217.72±27.70 -3.01±3.51 -8.38±12.61 -9.11±14.67 -10.60±12.60 -5.24±11.79 -11.11±12.93 -1.13±10.82
丹参注射液组 213.39±22.34 -3.82±10.85 -1.54±12.23 -0.82±7.75 1.81±9.88 2.67±13.36 1.90±16.61 -6.42±12.90
水提取物组 233.84±29.81 -10.32±7.81*# -6.02±5.70 -7.32±4.63 -6.85±7.88 -5.31±10.42 -5.41±12.89 -8.06±12.85
乙醇提取物组 236.01±31.10 -1.07±3.64 -0.82±5.43 -0.28±6.19 1.63±7.46& 1.24±8.07 -2.03±7.37 -3.67±10.65
正丁醇提取物组 253.61±37.23 -3.76±3.62 -5.03±4.53 -4.28±5.15 -3.84±3.61 -2.32±2.82 -0.89±3.93 -0.77±4.91
石油醚提取物组 227.33±30.36 -3.14±2.22 -1.71±1.56 -1.08±3.08 -0.82±3.77 0.22±5.00 -0.83±5.75 -2.45±4.21
注：与生理盐水组比较，*P<0.05；与丹参注射液组比较，#P<0.05；与溶媒组（CMC-Na）比较，&P<0.05
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2.2 乌榄叶不同提取物对大鼠离体心脏冠脉流量的
作用 根据表 2 可知，溶媒组（CMC-Na）给药后，其
对冠脉流量的影响与生理盐水组相比无显著性差
异。乌榄叶水提取物组给药 1min后，冠脉流量上升，
该变化与生理盐水组比较具有统计学意义（P<0.05），
并与丹参注射液组效果类似，说明乌榄叶水提取物
能增加冠脉流量。而乌榄叶乙醇提取物、正丁醇提取
物及石油醚提取物对冠脉流量的影响与溶媒组相比
无显著性差异。
2.3 乌榄叶不同提取物对大鼠离体心脏心肌收缩力
的作用 溶媒组（CMC-Na）给药后，心肌收缩力的变
化与生理盐水组相比无显著性差异。 乌榄叶水提取
物组给药后的第 2min、第 3min 与同期生理盐水组
比较，心肌收缩力明显减弱（P<0.05），并于第 2min
作用最为明显，与阳性药物丹参注射液作用类似，提
示乌榄叶水提取物具有减弱心肌收缩力的作用。 乌
榄叶乙醇提取物、正丁醇提取物及石油醚提取物对
心肌收缩力的影响与溶媒组相比无显著性差异，见
表 3。
组别（n=8） 给药前
给药后（变化值）
第 1min 第 2min 第 3min 第 4min 第 5min 第 7min 第 10min
生理盐水组 2.07±0.46 0.00±0.09 -0.06±0.11 0.06±0.39 -0.05±0.16 -0.12±0.17 -0.13±0.19 -0.19±0.19
溶媒组（CMC-Na） 2.18±0.39 0.07±0.23 0.10±0.36 -0.07±0.17 0.14±0.47 0.08±0.49 -0.16±0.23 -0.24±0.25
丹参注射液组 2.36±1.03 0.00±0.32 -0.08±0.11 -0.10±0.47 -0.23±0.27* -0.25±0.26* -0.05±0.43 -0.10±0.15
水提取物组 2.45±0.52 -0.01±0.17 -0.18±0.16* -0.15±0.12* -0.14±0.17 -0.16±0.17 -0.06±0.22 -0.14±0.22
乙醇提取物组 2.28±0.54 0.15±0.31 0.02±0.12 -0.01±0.09 0.04±0.09 0.01±0.14 0.01±0.22 -0.02±0.21
正丁醇提取物组 1.86±0.41 0.04±0.14 0.04±0.18 0.06±0.19 0.01±0.14 0.06±0.19 0.01±0.13 -0.12±0.21
石油醚提取物组 2.57±0.54 0.00±0.08 0.04±0.08 0.00±0.09 -0.01±0.04 0.09±0.38 0.11±0.28 -0.11±0.12
注：与生理盐水组比较，*P<0.05
表 3 乌榄叶不同提取物对大鼠离体心脏心肌收缩力的作用（g，x±s）
表 2 乌榄叶不同提取物对大鼠离体心脏冠脉流量的作用（ml/min，x±s）
组别（n=8） 给药前
给药后（变化值）
第 1min 第 2min 第 3min 第 4min 第 5min 第 7min 第 10min
生理盐水组 10.00±1.36 -0.04±0.13 -0.15±0.21 0.00±0.16 -0.19±0.15 -0.11±0.27 -0.23±0.25 -0.33±0.26
溶媒组（CMC-Na） 11.13±1.39 -0.05±0.16 -0.10±0.13 -0.05±0.22 -0.10±0.23 -0.14±0.30 -0.35±0.44 -0.30±0.35
丹参注射液组 10.01±0.65 0.00±0.13 0.19±0.46* 0.14±0.33* 0.15±0.35* 0.10±0.38 0.11±0.50 -0.07±0.35
水提取物组 9.71±0.68 0.04±0.42* -0.05±0.28 -0.10±0.21 -0.06±0.21 -0.14±0.16 -0.19±0.34 -0.24±0.30
乙醇提取物组 10.74±0.94 -0.10±0.19 -0.07±0.12 0.00±0.22 0.05±0.21 0.00±0.26 -0.13±0.27 -0.43±0.34
正丁醇提取物组 10.34±0.84 -0.04±0.11 -0.06±0.13 -0.02±0.15 0.03±0.23 0.01±0.23 -0.01±0.20 0.05±0.33
石油醚提取物组 10.04±0.90 -0.09±0.09 -0.04±0.17 0.00±0.25 0.03±0.19 0.05±0.18 0.00±0.19 0.08±0.20
注：与生理盐水组比较，*P<0.05
3 讨论
Langendorff 离体心脏灌流法是研究药物对冠状
动脉及离体心功能作用的常用方法，是研究离体心
脏在人工控制条件下，观察各种因素对心脏活动影响
的一种可靠方法，其优势在于操作简单，设计巧妙，
应用广泛，实验条件易控，并且可以排除神经及体液
等因素从而直接观察药物对心脏的药理作用[5]。
实验中发现，给予同等容量 0.5%CMC-Na 溶液
组与生理盐水组比较，离体心脏的心率、心肌收缩力
及冠脉流量的变化并无统计学意义，表明该溶液可
用作本实验所需的乌榄叶非水提取物的溶媒。 当观
察乌榄叶不同提取物对离体心脏的作用时，本实验
发现：乌榄叶水提取物具有降低心率，减弱心肌收缩
力，增加冠脉流量的作用，其增加冠脉流量，减弱心
肌收缩力效果与阳性对照药丹参注射液类似。 而乌
榄叶乙醇提取物能使心率先降低后增加，但对心肌
收缩力及冠脉流量无显著影响。此外，乌榄叶正丁醇
提取物和石油醚提取物则对离体心脏的心率、心肌
收缩力及冠脉流量的影响均无统计学意义。 实验结
果提示，乌榄叶对大鼠离体心脏的最有效药理活性
部位主要位于其水提取物部分。 此结果与此前有文
献报道乌榄叶水提取物快速降低血压、减慢心率、减
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弱心肌收缩力、舒张血管平滑肌等现象相吻合[1，6]。
根据资料显示，水作为一种极性强的溶剂，对盐
类、糖类、鞣质、蛋白质以及各种苷类均有良好的溶
出性能，广泛用于各种中草药有效成分的提取。乙醇
作为一种常用的有机溶剂，其极性处于极性溶剂与
非极性溶剂之间，溶出范围广，亲水性成分除蛋白
质、鞣质、盐类及部分多糖外，大部分物质均能在乙
醇中溶解，而亲脂性成分如树脂、挥发油、内酯、芳烃
类化合物及苷元等均能溶于乙醇中。 正丁醇极性中
等，能溶解小分子糖类、多种酚类、黄酮类及内酯类
等物质。石油醚极性弱，常用于油脂类、叶绿素、挥发
油、游离甾体及三萜类化合物等物质的提取 [7]。 实验
通过对水提取物采取水提醇沉法进行初步纯化，除
去了盐类、蛋白质及大部分多糖等物质后，制备实验
所需的药材水提取物，此外，实验结果证实，水提取
物为乌榄叶对大鼠离体心脏的最佳药理活性部位。
由此推断，乌榄叶对大鼠离体心脏最佳药理活性物
质最可能是一些极性较大的苷类或鞣质，但具体有
效成分仍需作进一步探索。
参 考 文 献
1 张坤泉，郭铭坚，肖茂瑕，等．浅谈乌榄药用的研究进展[J]．中国
实用医药，2008，3（20）：183-184
2 杨永利，郭守军，马瑞君，等．乌榄叶挥发油化学成分分析[J]．广
西植物，2007，27（4）：662-664
3 牛生洋，郝峰鸽．羧甲基纤维素钠的应用进展[J]．安徽农业科学，
2006，34（15）：3574-3575
4 徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学．3 版．北京：人民卫生出
版社，2001：986-987
5 李海涛，王俊亚，张东梅．离体心脏灌流实验方法的类比研究[J]．
卫生职业教育，2007，15（25）：116-117
6 岑柏宏，江维宁，刘萍芬，等 ．乌榄叶水提取物对心脏血流动力
学的作用探究[J]．医学理论与实践，2012，25（7）：747-749
7 吴立军，娄红祥，周晶．天然药物化学． 6 版．北京：人民卫生出版
社，2011：21-24
（收稿：2013－11-27）
《中国现代医药杂志》征稿征订启事
《中国现代医药杂志》系国家级综合医学期刊，国内刊号为 CN 11—5248 ／ R，国际刊号 ISSN 1672—9463。 月刊，大十六开，
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