全 文 ：第 31卷　第 2期
2010年 4月
内 蒙 古 农 业 大 学 学 报
JournalofInnerMongoliaAgriculturalUniversity
Vol.31　No.2
Apr.2010
沙柳材霉腐菌及最适培养基的筛选＊
贺　荣 , 　冯利群＊ , 　王雅梅
(内蒙古农业大学 , 呼和浩特 　010018)
摘要:　腐朽真菌引起的木材霉变腐朽严重影响木材外观 , 降低木材的使用价值 , 因此预防木材霉变腐朽 , 是木材利
用过程中的 1个重要课题。本文利用常规的分离纯化方法从沙生灌木的 1个品种沙柳材上分离出 2种腐朽菌 ,经鉴
定为均隶属于半知菌类 ,进一步通过单因素试验和正交试验研究了腐朽菌的培养特性 , 将 2种腐朽菌接种培养在
PDA培养基上 , 分别从碳源 、氮源 、pH等因素确定了腐朽菌的最适生长条件。
关键词:　
中图分类号:　S781.42　　　文献标识码:　A　　　文章编号:1009-3575(2010)02-0232-04
THEBESTSELECTOFSALIXFUNGIANDMEDIUM
HE-Rong, 　FENGLi-qun＊ , 　 WANGYa-mei
(CollegeofMaterialScienceandArtDesign, InnerMongoliaAgriculturalUniversity, Hohhot　010018, China)
Abstract:　Woodfungicauseareductioninthetimberutilization, decreasingtheaestheticqualityofwood.Therebyitisanimportant
researehworktopreventwooddecayinperiodofwoodusing.Inthisdissertation, 2 typesofstainingstrainwereisolatedandidentified
fromsalixwoodTheculturalcharacteristicsandbiologicalcharacteristicswereinvestigated.Thesetwofungiwereidentifiedasthecate-
goryofDeuterornyeotina.Wealsousedsingle-factortestandorthogonaltesttostudytheirculturalcharacteristics, andculturedthem
ontheculturemediumofPDApetridishes, afterthatwecanhavetheresultthattheefectsofdifferentcarbon, nitrogenandpHvalue
onthegrowthconditionofdecayfungi.
Keywords:　Decayfungi;　 separation;　orthogonaltest
　　沙生灌木是广泛生长在内蒙古西部干旱半干旱
地区的多年生灌丛植物 ,主要品种有沙柳 、柠条 、红
柳 、乌柳 、花棒 、枸杞等 ,其中储蓄量较大的有沙柳 、
柠条等品种 ,根据沙生灌木的生物学特点 ,它们必须
3a-5a平茬复壮 1次 ,这些平茬枝条已木质化 ,且纤
维素含量高 ,是生产人造板的好材料 [ 1] 。但是 ,沙生
灌木在贮存过程中容易发生霉腐现象 ,沙柳作为沙
生灌木一大主要品种也不例外 ,它的收购季节一般
为秋 、冬季 ,收购时是湿沙柳 ,含水率较高 ,贮存期又
较长(约 9个月),贮存中易发生霉变和腐烂。为了
解决这一问题 ,有必要对能够使其发霉的菌种的生
长特性进行研究 ,以便下一步的防腐研究 [ 2] 。本试
验的目的在于将发霉沙柳上的腐朽菌筛选出来 ,并
对其进行了生长特性研究 ,分别通过单因素试验和
正交试验探索了不同碳源 、氮源 、pH等条件对菌种
生长的影响 [ 3, 4] 。
＊ 收稿日期:　2010-01-08基金项目:　国家自然科学基金(30860222);内蒙古农业大学博士启动基金(BJ07-60)作者简介:　贺荣(1983-),女 ,硕士研究生。主要从事木材防腐的研究.＊通讯作者:　E-mail:fenglq0816@yahoo.com.cn
1　沙柳材腐朽菌的筛选鉴定及生
长条件的优化
1.1　沙柳材腐朽菌的筛选鉴定
1.1.1　试验材料　沙柳:采自于内蒙古巴彦淖尔盟
乌兰布和沙漠 , 5年生 ,长 73.5cm直径 1.1cm,取其
发霉的中部进行实验 。
1.1.2　试验方法　
1.1.2.1　初筛　无菌挑取发霉后的试材样品上的
菌放置在预先经过无菌配置好的基础培养基上培养
5d左右。当发现菌落布满整个培养皿时就开始进行
下一步的复筛分离 ,使得菌落得到进一步的纯化。
1.1.2.2　复筛　在无菌工作台中挑取初筛培养基
中的菌置于选择培养基(PDA)划线分离 ,得到单菌
落 ,在 25℃下培养 5d-7d,观察选择培养基上的菌
落形态 。
菌种扩大平板培养:选择出来的单菌落继续无
菌操作挑取到查氏培养基上进行扩大平板纯化培
养 ,放置在冰箱内保存待进一步研究 [ 5, 6] 。
1.2　沙柳材腐朽菌生长条件的优化
1.2.1　试验材料　筛选出的菌种:Fl半知菌亚门 ,
丛梗孢目;F2半知菌亚门 ,球壳孢目 。
1.2.2　试验方法
1.2.2.1　单因素试验　不同碳源对霉菌生长的影
响:以 PDA培养基做基本培养基 ,改变其中的碳源 ,
观察不同碳源对霉菌生长的影响 ,培养 2d后测得菌
落直径 。
1.2.2.2　不同氮源对霉菌生长的影响　以筛选出
的最适碳源做培养基的碳源 ,改变氮源 ,观察不同氮
源对霉菌生长的影响 ,培养 2d后测得菌落直径 。
1.2.2.3　不同 pH值对霉菌生长的影响　分别用上
面筛选的碳源和氮源 ,改变培养基的 pH值 ,观察不
同 pH值对霉菌生长的影响 ,培养 2d后测得菌落直
径 。
1.2.2.4　正交试验(不同碳源 、氮源和 pH对霉菌生
长的优化)　采用正交试验 ,观察不同碳源 、氮源和
pH的组合对霉菌生长情况的影响 ,得出最佳配比。
2　结果与分析
2.1　沙柳材腐朽菌的筛选及鉴定结果
经过初筛和复筛培养基的培养筛选 ,发现 ,此菌
群为霉菌的 2个菌种 F1、F2。见图 1与图 2。根据
《真菌分类鉴定手册 》[ 7] 鉴定为:Fl为半知菌亚门 ,
丛梗孢目。 F1菌落形态特征:圆形 ,边缘整齐 ,气生
菌丝连成网格状 ,初为白色 ,第 3d从菌落中心开始
变为灰绿色 。在 PDA平板培养基上生长较慢 , 10d
覆盖平板 ,成熟菌落黑灰色 。菌丝形态特征:分生孢
子梗直立 ,单生 ,灰黑色 。F2为半知菌亚门 ,球壳孢
目 。菌落形态特征:圆形 ,边缘整齐;初为白色 ,第 3d
开始以接种点为中心开始向外逐渐变为暗灰色 ,成
熟菌落黑色 。气生菌丝发达 ,菌落绒毛状 ,逐渐加厚
成绒毡状。在 PDA平板培养基上生长较快 ,在 25℃
时 , 3d覆盖平板。菌丝形态特征:菌丝种类单一 ,黑
色 ,粗壮 ,长 ,多分枝[ 8] 。
图 1　Fl菌种的菌丝结构
Fig.1 ThespawnofF1 decayfungi
图 2　F2菌种的菌丝结
Fig2.ThespawnofF2 decayfungi
2.2　最适生长条件的优化结果
2.2.1　不同碳源对霉菌生长的影响　以 PDA培养
基做基本培养基 ,改变其中的碳源 ,观察不同碳源对
霉菌生长的影响 ,霉菌最适用的碳源为葡萄糖(见表
1和图 3)。
233第 2期　　　　　　　　　　　　　贺　荣等:　沙柳材霉腐菌及最适培养基的筛选
表 1　不同碳源对生长的影响
Tab1 Theefectofdiferentcarbon
sourceonthegrowthofdecayfungi
菌种 霉菌(菌落直径)单位:mm
可溶性淀粉 32
葡萄糖 36
蔗糖 22
图 3　不同碳源对霉菌生长的影响曲线
Fig3 Theefectcurveofdiferentcarbon
sourceonthegrowthofdecayfungi
图 4　不同氮源对霉菌生长的影响曲线
Fig4 Theefectcurveofdiferentnitrogen
sourceonthegrowthofdecayfungi
如表 1所示 ,可以看出不同的碳源对菌的生长
影响是不同的 ,在相同的时间内 ,利用葡萄糖作为碳
源时 ,菌落的生长直径要比其余两种碳源的长 ,且菌
落的颜色也深 ,另外两种碳源的颜色基本很浅 ,这说
明对于此菌种葡萄糖非常易吸收利用 ,且碳源影响
着此菌种的颜色深浅的程度[ 9] 。
2.2.2　不同氮源对霉菌生长的影响　分别以筛选
出的最适碳源做培养基的碳源 ,改变氮源 ,观察不同
氮源对霉菌生长的影响 ,霉菌最适氮源为 KNO3 ,最
不宜利用氮源为蛋白胨(见表 2与图 4)。
表 2　不同氮源对生长的影响
Tab2 Theefectofdifferentnitrogensource
onthegrowthofdecayfungi
菌种 霉菌(菌落直径)单位:mm
KNO3 40
蛋白胨 23
马铃薯 31
如表 2所示 ,可以看出不同的氮源对菌的生长
影响是不同的 ,在相同的时间内 ,利用 KNO3作为氮
源时 ,菌落要比利用其余两种氮源大且紧凑 ,这说明
对于此菌种 KNO3非常易吸收 ,且氮源只影响菌落
的大小稀疏 ,不影响颜色的深浅 。
2.2.3　不同 pH值对霉菌生长的影响　分别用上面
筛选的碳源和氮源 ,改变培养基的 pH值 ,霉菌的最
适生长 pH为 6.7(见表 3与图 5)。
表 3　不同 pH对生长的影响
Tab3 TheefectofdifferentpHonthegrowthofdecayfungi
菌种 霉菌(菌落直径)单位:mm
pH5.0 6
pH6.7 40
pH8.0 18
图 5　不同 pH值对霉菌生长的影响曲线
Fig5 TheeffectcurveofdiferentpH
onthegrowthofdecayfungi
如表 3所示 ,从环境因子 pH值的变化可以看
出 ,不同的 pH对菌的生长影响是不同的 ,在相同的
时间内 , pH值为 6.7时 ,菌落的生长直径最长 ,而
pH值为 5.0时菌基本不生长 ,这说明此时菌的生长
是受抑制的 ,还说明在较强酸性环境下可以杀死或
抑制该菌的生长 [ 10] 。
2.3　不同碳源 、氮源和 pH对霉菌生长的优化(正交
实验)
234 内 蒙 古 农 业 大 学 学 报　　　　 　　　　　　　　2010年
表 4　培养基正交实验因素水平
Tab4 Thefactorslevelofmediumorthogonaltest
水平 碳源(A) 氮源(B) 培养基 pH值(C)
1 蔗糖 KNO3 5.0
2 可溶性淀粉 马铃薯 8.0
3 葡萄糖 蛋白胨 6.7
表 5　正交试验及结果分析
Tab5 Theresultoforthogonaltest
编号 A B C 菌落直径(mm)
1 1 1 1 9.00
2 1 2 2 27.00
3 1 3 3 31.00
4 2 1 2 32.00
5 2 2 3 33.00
6 2 3 1 5.00
7 3 1 3 39.00
8 3 2 1 8.00
9 3 3 2 35.00
K
1 67.00 80.00 22.00
K2 70.00 68.00 94.00
K
3 82.00 71.00 103.00
X1 22.33 26.67 7.33
X2 23.33 22.67 31.33
X3 27.33 23.67 34.33
R 5.00 4.67 27.00
图 6　正交实验因素水平曲线
FigThefactorslevelcurveoforthogonaltest
霉菌的正交试验结果详见表 4和表 5与图 6。
本实验所设的三因素对生长的影响顺序为:C>A
>B,说明 pH是影响菌生长的主要因素 ,碳源次之 、
氮源影响最小;而其中又以 A因素的水平 3(葡萄
糖), B因素的水平 1(KNO3)和 C因素的水平 3
(pH6.7)的组合在培养 2d后测得菌落直径最大 ,即
初步认为 A3B1C3为最佳配比 ,在以此比例配置的培
养基条件下生长 ,在相同时间内 ,菌落的直径最长 ,
密度最大 ,且颜色也最深 ,这说明此配比是各方面营
养因子与环境因素协调最好的配比 [ 11, 12] 。
3　结论
3.1　通过鉴定 ,从发霉的沙柳上筛选出霉菌的 2个
种 , Fl为半知菌亚门 ,丛梗孢目;F2为半知菌亚门 ,
球壳孢目。
3.2　通过单因素试验对霉菌生长条件的优化 ,得
出了最适宜霉菌生长的碳源为葡萄糖 , 氮源为
KNO3 , pH值为 6.7。
3.3　通过正交试验得出培养基的最佳配比为碳
源:葡萄糖;氮源:硝酸钾;pH值:6.7。其中 pH值的
变化对霉菌的生长影响最显著 ,碳源次之 ,氮源影响
最小。
参　考　文　献:
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