全 文 ：收稿日期:2005-11-11;　修订日期:2006-05-30
作者简介:黄锁义(1964-),男(汉族),广西南宁人 ,现任右江民族医学院
副教授 ,学士学位 ,主要从事医用化学的教学和科研工作.
超声波提取鱼腥草总黄酮及鉴别
黄锁义 , 万承俊 , 邹永芳 , 李　容
(右江民族医学院化学教研室 ,广西 百色　533000)
摘要:目的 为充分利用鱼腥草植物资源 , 探讨鱼腥草总黄酮的提取及鉴别方法。 方法 采用超声波乙醇浸提法从鱼腥
草中提取黄酮类物质 , 对所提取的黄酮类物质进行验证 , 并用紫外分光光度法测定含量。结果 测得样品中总黄酮的含
量 C=6.48%,回收率为 102.4%, 其纯度和产率均较高。结论 该方法采用全物理过程 ,无任何污染 , 是提取鱼腥草黄酮
类物质的有效途径。
关键词:超声波提取;　鱼腥草;　总黄酮;　鉴别
中图分类号:R284.2;R282.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)11-2261-01
TheExtractionandIdentificationofTotalFlavanonefromHouttuyniaCordataThunb.by
UltrasonicWave
HUANGSuo-yi, WANCheng-jun, ZOUYong-fang, LIRong
(DepartmentofChemistry, YoujiangMedicalColegeforNationalities, Baise533000, China)
Abstract:ObjectiveInordertomakeuseoftheresourcesofHoutuyniacordataThunb., theextractionidentificationoftotal
flavanoneofHoutuyniacordataThunb.wasapproached.MethodsTheflavonoidswereextractedbyethanolasthesolventfrom
HouttuyniacordataThunb.withultrasonicwaveandethanolextraction.Usingspectrophotometrytoextractandchecktheflava-
noneofHoutuyniacordataThunb..ResultsThecontentofthetotalflavanoneofhouttuyniacordataThunb.wasC=6.48% and
therateofrecoverywas102.4%.ConclusionTheoutcomeandthepurityoftheflavanonearealveryhigh.Thismethodisa
purelyphysicalprocess, andhasnotanypolution.ItisanidealwaytoextracttheflavanoneofHoutuyniacordataThunb..
Keywords:UltrasonicwaveExtraction;　HoutuyniacordataThunb.;　Totalflavanone;　Identification
　　鱼腥草(HoutuyniacordataThunb.), 又名蕺菜。 别名丑菜 ,
侧耳根 , 猪鼻孔 , 臭根草 。列于 《名医别录 》下品 , 是味较常见的
中草药 , 广泛分布于长江以南各省 , 是一种很好的天然保健食品
原料 [ 1, 2] 。其味辛 , 性微寒 , 归肺经 , 其功能有清热解毒 , 消痈排
脓 , 利尿通淋 , 用于肺痈吐脓 , 痰热喘咳 [ 2] 。现代药理研究表
明 [ 3～ 6]:鱼腥草有抗病毒 、抗菌 、解热 、抗炎镇痛 、升白细胞等作
用。近年来鱼腥草有了新的用途 ,如:用来治疗喘息型肺炎 、病毒
性心肌炎 、小儿呼吸感染等 [ 7 , 8] 。
鱼腥草的主要化学成分有癸酰乙醛(也叫鱼腥草素)、月桂
醛 、2-十-烷酮 、甲基正壬基酮 、癸醛 、亚油酸及大量的黄酮类化合
物 [ 2～ 9] 。有文献报道鱼腥草中总黄酮的提取方法有乙醇提取
法 [ 2] 。但是 , 这种方法的提取效率仍然较低。近年来 ,超声技术
应用于提取植物中的生物碱 、苷类 、生物活性物质 、动物组织浆的
毒质等研究都已有报道 [ 10, 11] , 表明其具有耗能低 、效率高 、不破
坏有效成分的特点。 很多研究表明 , 利用超声波产生的强烈振
动 、高的加速度 、强烈的空化效应 、搅拌作用等 , 可加速植物材料
中的有效成分进入溶剂 ,从而增加有效成分的提取率 ,缩短提取
时间 , 并且还可避免高温对提取成分的影响 [ 11] 。但超声技术应
用于提取鱼腥草中黄酮类物质的研究尚未见报道 ,本文报道用超
声波提取鱼腥草总黄酮及鉴别。
1　仪器与试剂
1.1　仪器 KQ5200DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有
限公司);UV-755B紫外可见分光光度计(上海分析仪器总厂);
ZF-I型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂)。
1.2　试剂 95%乙醇;亚硝酸钠 AR;硝酸铝 AR;氢氧化钠 AR;三
氯化铝 AR;盐酸 AR;氨水 AR;冰醋酸 AR;醋酸乙酯 AR;芦丁标
准品(中国药品制品检定所);广西百色市东风菜市市售新鲜鱼
腥草。
2　方法与结果
2.1　总黄酮成分提取 取市售新鲜鱼腥草 , 烘干 , 粉碎。精密称
取鱼腥草粉末约 6g, 加 80ml95%乙醇 , 超声波提取 2.5h,抽滤 ,
滤渣再加 80 ml95%乙醇 , 超声波提取 2.5 h, 抽滤 ,合并滤液 , 减
压回收乙醇至仅剩 5～ 7 ml为止 ,放置 250 ml容量瓶中 ,用 60%
乙醇稀释至刻度 ,得样品液。
2.2　测定方法依据 以芦丁为对照品测定鱼腥草中总黄酮的含
量 , 加入铝离子试剂 , 同时控制适宜 pH值 ,使黄酮化合物与铝盐
形成络合物 ,在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。
2.3　定量实验-总黄酮的含量测定
2.3.1　波长的选择 取样品液适量 , 在 0.3 ml5%亚硝酸钠溶液
存在的碱性条件下 , 经硝酸铝显色后 , 以试剂为空白参比液在
420 ～ 700nm波长范围测定络合物的吸光度 ,络合物于 510 nm波
长处有最大吸收 ,故测定时选用此波长。
2.3.2　标准曲线的绘制 分别精密吸取芦丁对照液(0.1 mg/ml)
0.00, 0.50, 1.00, 2.00, 3.00, 4.00, 5.00 ml于 10ml容量瓶中 , 分
别加入 5%亚硝酸钠溶液 0.3 ml, 摇匀 , 静置 6 min;再加 10%硝
酸铝溶液 0.3 ml, 摇匀 , 静置 6 min;再加 4%氢氧化钠溶液 4.00
ml, 用 60%乙醇稀释至刻度 , 摇匀 , 静置 12 min, 以试剂作空白 ,
于 510 nm处测吸光度。结果见表 1。
表 1　紫外可见分光光度计测定芦丁对照液吸光度
C/mg· ml-1 吸光度
0.00 0.00
0.005 0.045
0.01 0.126
0.02 0.268
0.03 0.412
0.04 0.554
0.05 0.695
根据上表得回归方程:A=2.141 ×10-4 +14.377C, r
=0.999 9。
2.3.3　提取物含量的测定 精密吸取样品液 0.50 ml, 置 10 ml
容量瓶 , 按标准曲线的制备操作测定吸光度 , A=0.910,根据回归
方程:A=2.141×10-4+14.377C,计算样品中总黄酮的含量 C=
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.11 时珍国医国药 2006年第 17卷第 11期
6.48%。
2.3.4　回收实验 精密量取样品液 2 ml, 加入标准芦丁对照品 2
ml(0.1 mg/ml),同前样品测定方法操作测定吸光度 , 求出回收
率为 102.4% 。
2.4　定性实验-总黄酮的鉴别
2.4.1　颜色反应 紫外光下呈色反应:取该样品溶液点在滤纸
上 , 在可见光下呈灰黄色 ,在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。
浓氨水反应:取该样品溶液点在滤纸上 , 将滤纸在氨水上方
熏 0.5min, 立即在紫外光下观察 ,呈极明显的黄褐色荧光斑点。
三氯化铝反应:取样品溶液点在滤纸上 , 滴加 1%三氯化铝
乙醇溶液 , 吹干。在可见光下呈灰黄色 ,在紫外光下呈黄色荧光
斑点。
乙酸镁反应:取样品溶液点在滤纸上 , 滴加 1%乙酸镁甲醇
溶液 , 吹干 ,紫外光下呈黄色斑点。
盐酸-镁粉反应:取乙醇提取液 1 ml于试管中加镁粉 , 再加
入浓盐酸数滴(1次加入),在泡沫处呈紫红色。
2.4.2　纸层析 取样品溶液 10 μl点在滤纸上。用正丁醇:醋酸
∶水 =4∶1∶5为展开剂 , 上行展开 5 h, 取出晾干。喷 1%氯化
铝乙醇溶液。吹干后于紫外光下 ,可见荧光斑点。
3　讨论
实验结果表明 , 本实验方法工艺简单 , 回收率为 102.4%,利
用本文所提供的超声波提取 、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯
度较高。超声波可以强化乙醇浸提法 ,达到省时 、高效 、节能的目
的 , 此方法采用全物理过程 ,无任何污染 ,是一条理想的提取黄酮
类物质的途径 , 具有广阔的应用前景。
黄酮类化合物是一大类天然产物 , 广泛存在于植物界 , 是许
多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇 ,其
它包括双氢黄(醇)、异黄酮 、双黄酮 、黄烷醇 、查尔酮 、橙酮 、花色
苷及新黄酮类等 [ 12] 。天然来源的生物黄酮分子量小 , 能被人体
迅速吸收 , 能通过血脑屏障 ,能进入脂肪组织 ,进而体现出如下功
能:消除疲劳 、保护血管 、防动脉硬化 、扩张毛细血管 、疏通微循
环 、抗脂肪氧化 、抗衰老 、活化大脑及其他脏器细胞的功能。
黄酮类化合物具有抗癌 、抗肿瘤 、抗心脑血管疾病 、抗炎镇
痛 、免疫调节 、降血糖 、治疗骨质疏松 、抑菌抗病毒 、抗氧化 、抗衰
老 、抗辐射等作用 [ 13～ 18] 。近年来 , 世界上掀起了植物药开发的热
潮 , 植物药以其天然低毒的特点倍受青睐 , 而黄酮类化合物以其
广谱的药理作用引人瞩目。本文实验结果表明 ,鱼腥草中含有较
为丰富的黄酮。因此 ,鱼腥草具有广泛开发和利用价值。
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临床报道
收稿日期:2006-05-15;　修订日期:2006-07-12
黄芪注射液穴位注射足三里治疗化疗后白细胞减少的疗效观察
陈天池 ,秦志丰 ,文海英
(中国人民解放军第二军医大学长征医院 ,上海　200003)
关键词:黄芪注射液;　穴位注射;　白细胞减少
中图分类号:R245.9+5　　文献标识码:C　　文章编号:1008-0805(2006)11-2262-01
　　白细胞减少是肿瘤患者化疗后出现的一种常见毒副反应 ,它
不仅影响化疗药物的进一步使用 ,而且影响着患者的生存质量 ,
缩短了患者的生存期 。以往治疗上采用升白药(利血生 、鲨肝醇
等)治疗效果并不满意 ,而采用重组人粒细胞集落刺激因子(G-
CSF)病人经济上则难以承受 ,我科自 2004-03以来 , 对恶性肿瘤
化疗后白细胞减少的患者 ,采用黄芪注射液穴位注射足三里治疗
并设对照组进行临床观察 ,发现能有效地改善肿瘤患者化疗后白
细胞减少 , 现报道如下。
1　资料和方法
1.1　临床资料 2组 64例均为 2004-03 ～ 2006-01本院住院患
者 , 均经病理证实为恶性肿瘤 , 其中男 31例 , 女 33例;年龄 54 ～
68岁 , 平均 61岁;胃癌 26例 ,结肠癌 20例 ,肝癌 10例 , 直肠癌 8
例;白细胞临床分度依据世界卫生组织(WHO)抗癌药毒副反应
的分类标准 , Ⅰ 度(白细胞计数 3.0 ～ 3.9 ×109 /L)10例;Ⅱ度
(白细胞计数 2.0 ～ 2.9 ×109 /L)32例;Ⅲ度(白细胞计数 1.0 ～
1.9×109 /L)22例。两组在年龄 、性别 、病程病史 、分期等方面经
统计学处理 ,差异无显著性(P>0.05),有可比性。
1.2　治疗方法
1.2.1　治疗组 患者取仰卧位 , 取双侧足三里穴。以双侧足三
里穴为进针点 ,抽取黄芪注射液(成都地奥制药公司生产 , 含生
药 10g/ml,批号 0590010)。常规消毒快速进针 , 提插捻转 ,待患
者有针感且回抽无血后匀速推入药液 ,每侧 1 ml,快速起针 , 隔日
1次 , 连续 10次为 1个疗程。
1.2.2　对照组 口服升白药:鲨肝醇(常州亚邦制药有限公司 ,
规格牌号 cp2005), 参照其说明书服用 , 2片 /次 , 3次 /d。 连服
20 d为 1个疗程。疗程前后各抽血化验白细胞(下转第 2265页)
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 11期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.11