全 文 :2o 中国中西医结合杂志 l卯 8年 6 月第 8 1卷基础理论研究特集
有抑制作用 。 但在 0. 0 1拜M 水平 , 雷公藤红素只促进 s
期细胞升高 , 不诱导其凋亡 (资料未显示 ) 。
雷公藤及其制剂曾用于哮喘 (6) 、 类风湿性关节
炎 (7) 等肥大细胞相关疾病的治疗 , 取得良好的疗效 。
雷公藤红素可诱导 HMC 一 1细胞凋亡 , 有助于 了解雷公
藤及其制剂的作用机制 , 并对进一 步开发雷公藤红素
的临床应用提供理论基础 。
参 考 文 献
1
. 岗艳 云 ,张 正行 . 雷公藤及其单体的药理作用研究进 展 . 中
国药科大学学报 l卯 5 ; 26 (4) : 25 2一乃6 .
2
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l卯5 ; 146 : 3一 15 .
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b拍b l毗 b y c 一my c p ro t e in . Cel l卯 2 ;的 : 1 争一 128 .
6
.梁兴伟 . 雷公藤多贰治疗哮喘病 28 例 . 实用 中西 医结合杂
志 l卯5 ; 8 ( 4 ) : 24 7一 25() .
7
. 丁育民 . 小剂量雷公藤治疗类风湿性关节炎 .甘肃中医学院
学报 l卯 5 : 12 ( 3 ) : 12一 14 .
鱼腥草 、 田基黄和板蓝根对机体中性粒细胞 、
单核细胞化学趋化和超氧化物的调整作用
王潮临 ’ 赵晓琴 , 邝晓聪 , iV go F滋产 A sr al an hK~
内容提要 目的 : 为探讨鱼腥草 、 田基黄和板蓝根对机体中性粒细胞和单核细胞化学趋
化和超氧化物的调整作用 。 方法 : 应 用化学趋化试验和超氧化物产物侧定方法 。 结果 : 鱼腥
草 、 田基黄和板蓝根能显著增加两种细 胞的超氧化物产物 ,预先与以 上三种药物培养的中性
粒细胞的化学趋化被明显抑制 (化学趋化剂为甲跳肤和酵母多糖 ) ,但单核细胞的化学趋化无
明显变化 。 结论 : 鱼腥草等中草药参与中性粒细胞的氧化反应 (呼吸爆发 ) , 参与调节中性粒
细胞的趋化作用 、抗炎效应和杀菌功能 。
关键词 鱼腥草 田基黄 板蓝根 化学趋化 超氧化物 中性粒细胞 单核细胞
鱼腥草 ( oH l对切 , 7 au co 阳 h如 仆山山 . )具有清热解毒
作用 , 用于各种炎症疾病 ; 田基黄 (枷犯成帅 产砂 ,~仆山山 . ) , 具有清热利湿的功效 , 常用 于治疗肝炎 ;板蓝
根 ( 儿口山 `如勿八冶 )具有清热解毒作用 , 多用 于治疗病毒
感染 。 近年来研究发现这些中草药对实验动物的免疫
功能有增强作用 ( ’ , 2) , 我们运用化学趋化实验和超氧
化物产物测定来研究这些中草药对机体中性粒细胞和
单核细胞化学趋化和超氧化物产物的影响 , 以深人 了
解中草药与机体免疫功能的关系 。
材料与方法
1 药物 鱼腥草注射液 , 广西东 兰制药厂生产 ,
每毫升相当于生药 1 ;9 田基黄注射液 , 江苏常州武进
制药厂生产 , 每毫升相当于生药 1 9 ; 板蓝根注射液 , 湖
1
. 广西医科大学 (南宁 5 3( 刃 2 1 ) ; 2 . 丹麦哥本 哈根 大学
医院
北宜昌民康制药厂生产 , 每毫升相当于生药 190
2 中性粒细胞和单核细胞悬液制备 参照文献
方法 (3 .’) , 取健康献血者外周血 , 经葡聚糖 ( L绝x atln
,
RH
C O ll lpe 旧 y , eD n n讯浅 ) 沉降和淋巴 细胞分离液 ( 1刁m pho -
p re p
,场co n led , N 。叫 )分离二步方法分别获得 中性粒细胞悬液 (经低渗液除去红 细胞 , 纯度为 98 % )和单核
细胞悬液 (经非特异酷酶染色测定单核细胞占 23 % -
38 % )
。 上述两种细胞悬液的细胞活性 (台酚蓝法 )为
98 % 以上 、
3 化学趋化试验 用改进的 肠 yd e n 培养小室法
测定 ( ’ ) , 中性 粒细胞用 3阿 微孔滤膜 ( iM il op , , I划 -
fo 司 , MA
,
sU )A
, 单核细胞用 5脚 微孔滤膜 ( Nuc le pe er ,
lP
~
ot n
,以 , USA ) ) 上半室注人 o . s d 上述加 人不同
浓度药物的细胞悬液 (中性粒细胞 l x l护/ 词 , 单核细
胞 2 . 5 x l护/ mI )下半室注人趋化剂甲酸肚 (爪n 尸 )或酵
母多糖 ( z AS ) , 置 c q 培养 箱 ( 37 ℃ ) 内 , 单 核细胞
叨而 n , 中性粒细胞 150而 n , 取出小室 , 再取出上 一 F小室
中国 中西医结合杂志1 卯 8年 6月第1 8卷基础理论研究特集
间的微孔滤膜 , 趋化剂面朝上 , 固定在玻片上 , 苏木精
染色 ,脱水 ,透明后用树脂和盖玻片将滤膜固定好 , 用
显微镜计算机图像分析系统分析计算每个视野游走到
滤膜表面的细胞数 (每份标本做 3 个滤膜 , 每个滤膜观
察 5 个视野 ) 。
4 超氧化物产物测定 运用细胞色素 C 法 (4) 测
定 ,将上述细胞悬液 (中性粒细胞 5 x l护/耐 ,单核细胞 1
xl 护 / 耐 )与不同浓度的上述中草药和缓冲液 (对照组 )
混合培养 ( 37 ℃ ,印皿垃n) ,取上述细胞悬液 0 . 5耐 , 2% 血浆
活化酵母多糖 ( z了、S )0 . 2以 和 10 1留 d 细胞色素 C 0 . 1耐
加人试管 , 37 ℃水浴 〕加币 n 后用日本岛津 Nt 一 l如双波分
光光度计测出吸收峰值 (波长 5义ha n ) ,折算出超氧化物
的量。 以上所用试剂为 51 9 1坦 公司产品 。
结 果
超氧化物的影响 :见表 1一 3 。
1 鱼腥草可显著抑制中性粒细胞的趋化运动 , 尤
其是在 2 一 s n可间 浓度时 ( p < 0 . 01 ) ,低浓度时也出现
明显抑制 ( P < 0 . 05 ) ;对单核细胞有一 定的抑制作用 ,
但统计学上意义不显著 。 鱼腥草可 明显增加两种细胞
的超氧化物产物 , 由于 Z AS 是非特异的细胞激活剂 , 促
使细胞氧化代谢 , 产生超氧化物 , 实验结果无意义 ; 另
设立无 ZA S 实验组 , 结果有显著意义 (尸 < 0 05 ) , 提示
鱼腥草本身可促使两种细胞产生超氧化物产物
2 田基黄也可显著抑制中性粒细胞的化学趋化
运动 (药物浓度 s n州间 ) , 而对单核细胞无显 著作用 ,
田基黄可增加两种细胞的超氧化物产物 。
3 板蓝根具有一定的抑制中性粒细胞化学趋化
作用 , 同样对单核细胞无作用 。 板蓝根亦可增加两种
细胞的超氧化物产物 。
鱼腥草 、 田基黄及板蓝根对两种细胞化学趋化和
裹 1 鱼腥草 、 田基黄及板蓝 根对中性粒细胞化学趋化的影响 ( x 土 : )
药 物 中性粒细胞 (细胞数 / 视野 )未加药
86 士 6
10
.
0 ( n心尸司 )
鱼腥草
田墓黄
板蓝根
73 士 7
78 土 8
肠 士 5
80 士 12
74
士 6
7 士 7
进汉i 土 8
7 6 士 6
6 3 士 7
82 士 8
78 士 8
砧 土 5 ’
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士 6 .
68 土 8书
5 5 士 6 .
74 士 9 .
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土 10
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6 8 士
58 土
67 士 8 “
印 士 5 .
研 士 7 .
5 8 士 6 ’
70 士 13 ’
6 1 土 1 1 .
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注 :与未加药比较 , 份 P < 0 . 05 , ’ ` P < 0 . 01
衰 2 鱼腥草 、 田基黄及板蓝根对单核细胞化学趋化的影响 ( x 士 : )
药 物 单核细胞 (细胞数 /视野 )未加药
43
士 8
翻 土 7
4 2 士 6
4 8 土 8
5 2 士 8
65 土 7
10
.
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鱼腥草
田基黄
板蓝根
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40
士 6
印 土 6
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土 7
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土 10
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39 土 7
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5 1 土 9
57 土 10
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衰 3 鱼腥草 、 田基黄及板蓝根对两种细胞超氧化物的影响
药 物 中性粒细胞超氧化物
(~
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.
25 x l护 , x 士 , )
单核细胞超氧化物
未加药
18土 3
5 士 2
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4 士 2
17 士 4
4 土 2
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鱼腥草
fl ]基 黄
板蓝根
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7 土 2 .
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7 士 4
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未加药
12 士 4
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3 士 2
8 土 3
3 土 2
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10 士 4 ’
8土 5
8 土 4 .
7 士 3
6土 2 .
14 土 5
8 土 3 .
9 士 4
7 士 5 .
9 土 4
4 土 3
注 : 与未加药比较 , . P < 0 . 05
2 02 中国中西医结合杂志1 卯 8年 6月第1 8卷基础理论研究特集
讨 论
中草药调整免疫功能的机制正 日益受到重视 。 我
们运用化学趋化实验和超氧化物产物测定等方法研究
鱼腥草等中草药对机体外周血 中性粒细胞和单核细胞
的影响 , 以探讨鱼腥草等中草药对机体免疫功能影响
的作用机制 。
单核一巨噬细胞系统是机体免疫系统中的重要组
成部分 ,它担负着重要的免疫防御功能 。 其中中性粒
细胞具有趋化 、吞噬和消化作用 ,参与机体的炎症反应
和免疫反应 。 在炎症时 ,致炎物质产生 , 引起中性粒细
胞趋化到炎症部位 ,促进炎症反应 , 而过强的炎症反应
会加重组织的损伤 .(5 6) 。 本结果表明鱼腥草等具有一
定的抑制中性粒细胞趋化运动作用 , 尤其是鱼腥草较
为显著 , 这种作用可减少炎症细胞的游走 , 可能会减轻
炎症反应 , 有利于机体的抗炎效应 。 文献报道单核细
胞趋化作用较弱 (5) , 实验结果发现鱼腥草等对单核细
胞趋化的抑制作用不明显 , 这种不同作用有待进一步
研究 。
近年来研究认为中性粒细胞被激活或吞噬病原微
生物后 , 出现氧化代谢 (呼吸爆发 ) , 由此产生 的超氧化
物 (仇 一 等 )参与杀伤病原微生物氏 6) 。 实验结果表明
鱼腥草等均能不同程度上促进中性粒细胞产生超氧化
物 , 这种作用可能会提高机体的杀菌能力 ,这也可能是
鱼腥草等清热解毒 、 抗感染的免疫学机制。 鱼腥草等
调整中性粒细胞和单核细胞功能和增强机体免疫功能
的作用值得进一步研究 。
参 考 文 献
1
.宋志军 , 王潮临 ,程建祥 , 等 . 鱼腥草 、 田基黄和 丁公藤注射
液对大鼠免疫功能的影响 . 中草药 l卯3 ; 24 ( 12) :翻3-币4 .
2
.李逢春 . 朱作金 , 蔡福盛 ,等 . 鱼腥草和地耳草增 强免疫功能
的协同作用研究 . 实用 中西 医结合杂志 1卯 5 ; 8 ( 8 ) : 5 51 一
5 5 2
.
3
.
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加司〕~ t竹任
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A】Pha 山记 GM 一 6 F . 坛川川 n山 iof 19 8 8 ; 1刀 : 36 3一
3 70
.
5
.林飞卿 ,余传霖 , 何球藻 , 等 . 医学 基础免疫学 . 上海 : 上 海医
科大学出版社 , 1卯 :1 45 一4 9 .
6
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钊 e l 曳ien t讯。 l、 山l i c at i此 , 肠面记 , D心朋d , 1卯 1 : 4一7 .
白花蛇舌草和半枝莲增强 巨噬细胞吞噬活性的研究 `
贾泰元 , eB nj anl n sH u u Z
白花蛇舌草 ( 。` ` 了面翔阮 碗扔” 。 , 简称 O D )系茜草
科耳草属植物 ;半枝莲 (反吹丛犷必 仪犷加勿 简称 BS )系唇
形科黄芬属植物 ,均全草入药 。 中医用 以治疗肝 、 肺 、
及胃肠道肿瘤 , 有一定效果 (`》。 动物实验也证明它们
有显著抑制 鼠肾细胞癌生长及化学防癌变作用 (2, 3) 。
我们用细胞培养法研究了 oD 和 SB对小 鼠 J774 巨噬
细胞吞噬活性的影响 。 现将实验结果报告于下 。
材料与方法
1 药物及制备 O D 和 SB均购 自 Nhu e而 oC .
O司日 aZ记 .以 . USA .原药烘干 ,磨成细粉 。 取干粉 10 9 , 加
蒸馏水 10 而 ,混匀 , 置 56 ℃ 水浴箱热浴 hl , 悬液经
2 (x x〕r/ 而 n 离心 巧而n 。 上清液经 0 . 45 脚 醋酸纤维微
井
O四 1 hS un R~
兜h Fun ds for A ll污 an d C田 l e er
( B园 1仰卿讹 CA US A )资助课题
1
. 西安市中心 医院 ( 西安 71 X( 刃3 ) ; 2 . 珑钾功此 n t of 而 -
c汕10 0】留 an d 脚 e l ics , cs ho l of . 目 i e ine , 1田坦 石爪坛画~ ity
滤器 (伪而gn lG a8 W0 d侣 , . 而gn , N’Y , UsA )过滤消毒 ,
滤液在 4℃冰箱保存备用 。
2 7J 74 细胞株 由 A lne ir can T y伴 Cd t眠 肠Uec -
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.
( Roc k
v il e
,
MD
,
USA )提 供 , 该细胞株来 源 于
B AL气/ C 小白鼠网状细胞肉瘤 , 具有多种正常巨噬细
胞功能 , 已被广泛用于检测中草药生物活性 。 不口4 细
胞在补加 or % 小牛血清 ( FBS ) 、 青霉素 (50 以d )和链霉
素 ( 250 尸扩耐 ) 之 , D』卜沈 c了 S 改 良 D卿e ` 9 培 养 基
( DME M
,
G浏闭 b 肠叮d , NY , USA ) , 37 ℃ , 5 % C仇 湿润条
件下培养 3 一 4 天后 ,经锥蓝检查 , 活细胞 > 如% 者 , 用
于实验 。
3 方法 从培养瓶采集 7J 74 细胞 ,加 Han k , , 平
衡盐溶液 ( HA岱 )制成 2 x l护 / d 细胞悬液 , 滴加于 %
孔平底培养板上作微量培养 。 每孔 10 矛月 ,另加不同稀
释 O D 或 SB药液 l卿 , 同一浓度滴 3 孔为 1 组 。 留一
组 不 加药液作对照 。 每孔再 滴加经 HB豁 稀释 至
1 0
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g/ d 之酵母多糖 A or 川作激发剂 , 及 以三 甲基 亚
85 3
.
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.
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e t砂 . R es u lst : ( 1 ) 人因 p t , 15 of HM C, 1 e e lls co u ld b e e ff ie e n t ly in du e de b y t ir p t e ir n 。 州 t h t h e p r es n e e o f a p o p t o t ie
e ha呢e in n , Qpr 场 1呸粼 . D N A la dd e r on a r gr 哎芜℃ g e l e lce t r O I〕 h o esr is a n d a l刀 p t o t ie l x分k be fo r e lG p ih 嗽 o f e e ll e y e le on fl ow -
e yt or n e t尽 ; ( 2 ) hT e m叫和 I t u de of a详 ) p t仍15 i n e r ae 从妇 w it h th e a u g n l e n t a t i o n o f t ir p t e ir n e con e e n t ar t i o n a n d d aur t ,on o f
ex lx 招 u r e ; ( 3 ) W i t h d im in u t ion of 印俪哭 e el ls , a p o l〕 t o r ie e e lls in e r ae 狱妇. 1’ h e y 比 r e 5 1 , i fican t n哪 t iv e r e la t io n ( P ( 0 .
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.
C . 健 I回佣: hT e r es 己 t s s u g g es t司 t ha t t ir p t e r in e co u ld e f fi e i en t ly i n d u e e HM G l e e ll a p 0 p t , 15 , oc eurn 眼 rna in ly in s
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( (玉iig anl art i ca l o n 娜 g e 198 )
M o d u l a t ion
o f H u n . 口 N e u tor P h i l an d M on 仪 y t e C h e 价n o tax i s an d S u pe or x id e R es op n se b y
H e rb a H o u t t u yn iae a n d Ot h er H e r bS
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o lin (王潮临 ) , z ha ( 〕 为 a以4in (赵晓琴 ) , K ua ng 为 a仪习 n g (邝晓聪 ) , et al
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H e r ha H yl 犯 n e i Ja p o n l d , R a d ix Ias t id is , e h曰 1 10 tax i s , s u pe 找〕x id e r 《 s 「x 〕n义 , n e u -
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