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望春花油的抗炎机理



全 文 :望 春花 油 的抗 炎 机理
王文魁 1 ,沈映君 2 ,齐 云 3 ,刘晋平 1 ,宋金香 1  ( 1. 山西农业大学 动物科技学院 ,山西 太谷 030801; 2. 成都中医药
 大学 药学院 ,四川 成都 610075; 3. 中国医学科学院 协和医科大学 药用植物研究所 ,北京 100094)
摘要: 为探讨望春花挥发油的抗炎机理 ,向去肾上腺大鼠的胸膜腔及右后足皮下分别注射 1%角叉菜胶及 10%蛋清溶
液 ,诱发胸膜炎及足肿胀炎症模型。 结果显示 ,事先灌服望春花挥发油的试验组大鼠 ,其炎症表现显著轻于对照组 ,其
炎症介质 TN F、组织胺和 PGE2的产生显著少于对照组 ,炎症相关酶 PLA2的活性显著低于对照组。由此表明 ,望春花
油的抗炎效应不依赖于下丘脑 -垂体 -肾上腺轴 ,而是直接阻抑炎症介质的产生。
关键词: 辛夷 ;望春花 ;挥发油 ;抗炎机理
中图分类号: S853. 7   文献标识码: A   文章编号: 1005-4545( 2005) 03-0301-03
  中药辛夷有 3种基源 ,即玉兰、武当玉兰和望春花。 我们
曾对望春花油的药理效应进行了实验研究 ,证明其有明显的
抗炎作用 [1]。在炎症过程中 ,体内不仅有致炎因子与机体防御
反应之间的矛盾 ,还有炎症与抗炎症的矛盾过程 ,下丘脑 -垂
体 -肾上腺皮质轴是体内抗炎机能的主要体现者 [2]。本试验研
究旨在探讨望春花挥发油的抗炎效应是否依赖于下丘脑 -垂
体 -肾上腺皮质轴。
1 材料与方法
1. 1 受试药物的制备 辛夷 ,购自四川省药材公司 ,经成都
中医药大学中药鉴定室鉴定 ,为木兰科植物望春花 (Magnolia
biondii Pamp. )的干燥花蕾 ,符合我国药典要求。 参照药典附
录 X挥发油测定法提取、测定其挥发油 ,得率 2. 9%。 将所提
望春花挥发油 ( the vo la tile o il of Magnolia biondii Pamp. ,
VOMbP)装于棕色玻璃瓶内 ,密封 4℃保存。临用前 ,以 0. 5%
吐温 -80稀释至所需浓度。
提取的望春花挥发油用气质联用法进行分析 (仪器型号
为美国惠普 GC /M S( 5890 /5971) ) ,共检出 33种成分 ,其中相
对含量大于 1%的成分有 13种。在这 13种成分中 ,除 3种成
分尚难确定外 ,其他 10种成分为: 1, 8-桉叶素 ( 39. 29% )、β-
松油烯 ( 14. 64% )、樟脑 ( 9. 44% )、β -蒎烯 ( 4. 94% )、α-松油醇
( 4. 36% )、 1-甲基 -4-( 1-甲基乙基 )环己烯 ( 3. 51% )、己烷
( 2. 02% )、 芳樟醇 ( 1. 58% )、σ-荜澄茄烯 ( 1. 31% )、 莰烯
( 1. 18% )。此结果与有关报道差异不大 [3] ,说明望春花挥发油
的成分基本稳定。
1. 2 主要试剂和仪器 角叉菜胶 ( Ca rr ageenan)、四甲基偶
氮唑盐 ( M TT )、放线菌素 D、 rTNF标准品 ,为 Sigma产品 ;胎
牛血清 ( FCS)、 RPMI1640细胞培养液 ,为 GIB Co.产品。 RF-
5300荧光分光光度计、 7530-紫外可见分光光度计。
1. 3 动物及其分组 成年健康雄性 Wistar大鼠 ( 180~ 230
g) ,由山西医科大学实验动物中心提供。 从 50只大鼠中随机
抽出 10只 ,作为正常动物组 (灌服小剂量望春花油溶液 )。 其
余 40只全部实施肾上腺全切术 ,术后连续 3 d肌注青霉素和
链霉素抗感染 ,精心护理 ,饮水改为糖盐水 (直至试验结束 )。7
d后 ,从中挑出 30只精神状态好的大鼠 ,按体质量分层后随
机分成 3组:模型对照组 (灌服生理盐水 )和 2个试验组 (分别
灌服大、小剂量的望春花挥发油溶液 )。
1. 4 病理模型的制作 各组大鼠连续给药 5 d后 ,均胸膜腔
注射 1%角叉菜胶的无菌生理盐水溶液 (每 100 g体质量
0. 20 m L)诱发急性胸膜炎症 [4 ]。 同时 ,各鼠右后足跖部皮下
注射 10%新鲜蛋清的生理盐水 0. 1 mL ,制造足肿胀炎症模
型 [5]。
1. 5 炎症指标的测定
1. 5. 1 足肿胀 采用容积法测定致炎前及致炎后 60、 120、
180、 240、 300、 360 min 6个时间点右后足容积 ,计算肿胀程
度。
1. 5. 2 炎性物质及炎症介质 致炎后 8 h ,断头处死试验动
物 ,吸取胸腔渗出液 , 计数其白细胞总数 ;用双缩脲比色法测
定其蛋白质含量 ;用酸碱滴定法测定渗出液中磷脂酶 A2
( PLA2 )活性 [6];用 M TT法测定肿瘤坏死因子 ( TN F) [7]活性。
剥去右后足皮肤 ,自踝关节处横断并称重 ,采用分光光度
法测定炎症足组织中前列腺素 E2 ( PGE2 ) [8]及组织胺 [9]含量。
2 结果
  各组动物炎症指标测定结果见表 1, 2。
表 1 望春花油对去肾上腺大鼠足肿胀的影响 ( x± s )
组  别 n 药物 剂量 /
( mL· kg- 1)
致炎后 6个时间点的足肿胀程度 /mL
60 min 120 min 180 min 240 min 300 min 360 min
模型对照组 10 生理盐水 10 0. 68± 0. 19 0. 68± 0. 16 0. 67± 0. 15 0. 68± 0. 19 0. 66± 0. 16△ 0. 66± 0. 13△△
小剂量组 10 1%望春花油 10 0. 70± 0. 20 0. 68± 0. 18 0. 64± 0. 14 0. 60± 0. 16 0. 55± 0. 17 0. 53± 0. 14*
大剂量组 10 2. 5%望春花油 10 0. 68± 0. 20 0. 67± 0. 19 0. 62± 0. 19 0. 60± 0. 12 0. 53± 0. 16 0. 50± 0. 12*
正常动物组 10 1%望春花油 10 0. 66± 0. 21 0. 64± 0. 17 0. 58± 0. 16 0. 55± 0. 14 0. 51± 0. 15* 0. 46± 0. 16* *
  注: ( 1)足肿胀程度 /mL= 致炎后足容积 /m L-致炎前足容积 /m L。 ( 2)与模型对照组相比 ,* P < 0. 05; * * P < 0. 01;与正常动物组相比 ,
△ P < 0. 05,△△ P < 0. 01。 下同
  收稿日期: 2003-11-03
  作者简介:王文魁 ( 1962- ) ,男 ,副教授 ,博士。
301中 国 兽 医 学 报  2005年 5月 第 25卷 第 3期 Chin J Vet Sci  May 2005  Vol. 25  No. 3
DOI : 10. 16303 /j . cnki . 1005 -4545. 2005. 03. 024
表 2 望春花油对去肾上腺大鼠胸腔渗出液及炎症足组织中 PGE2、组织胺含量的影响 ( x± s )
组  别 n 药物 剂量 /
( mL· kg- 1)
胸  腔  渗  出  物
渗出量
/mL
白细胞数
/(× 109· L- 1)
蛋白
/(g· L- 1)
PLA2
/mL
TNF
/( IU· mL- 1)
炎症足组织
PGE2
/D278 nm
组织胺
/( ng· g- 1)
模型对照组 10 生理盐水 10 2. 20± 0. 48 15. 43± 3. 68△△ 4. 229± 0. 786△△ 5. 22± 1. 06△△ 51. 23± 5. 72△△ 0. 295 1± 0. 093 0△△ 2 611± 432△△
小剂量组 10 1%望春花油 10 2. 02± 0. 36 12. 16± 3. 13* 3. 680± 0. 612 4. 23± 0. 78* 43. 66± 6. 08* 0. 200 2± 0. 065 3* 2 220± 381* △
大剂量组 10 2. 5%望春花油 10 2. 10± 0. 51 11. 45± 2. 73* 3. 565± 0. 533* 3. 88± 1. 20* 44. 13± 6. 33* 0. 200 5± 0. 058 1* 1 930± 344* *
正常动物组 10 1%望春花油 10 1. 96± 0. 53 10. 77± 2. 16* * 3. 188± 0. 442* * 3. 16± 0. 91* * 41. 58± 4. 64* * 0. 197 2± 0. 053 8* * 1 883± 257* *
  注: PLA2的单位为消耗 0. 002 mol /L HCl的量 ( mL)
3 讨论
  当致炎因子作用于机体时 ,机体通过炎症反应消除致炎
因子 ,这是损害与抗损害的斗争。 炎症时还有另一对矛盾 ,即
炎症与抗炎之间的矛盾。 糖皮质激素不仅有极强的抗炎药理
作用 ,还是体内重要的生理性抗炎激素 [2]。 因此 ,在探究抗炎
药物的作用机理时 ,追寻其抗炎效应是否依赖机体下丘脑 -垂
体 -肾上腺皮质轴的存在 ,就成了重要环节之一 [5 ]。
本研究以去肾上腺大鼠为实验动物 ,向足跖部皮下和胸
膜腔内分别注射不同的致炎剂诱发炎症。结果显示 ,事先给予
望春花油的大鼠 ,其炎性足肿胀的消退较模型对照组动物快 ,
胸腔渗出液中白细胞总数和蛋白含量也显著少于模型对照
组。 从胸腔渗出液中炎症介质 TNF、炎症相关酶—— 磷脂酶
A2的活性 ,以及肿胀足组织中 PGE2和组织胺的含量看 ,望
春花油能显著抑制这些炎症介质的产生及 PLA2的活性。
活的机体受到损伤时 ,受伤组织及血液会产生和释放出
具有致炎作用的化学活性物质 (即炎症介质 , inflammato ry
mediato rs ) ,引起血管扩张、血管通透性增加、发热、疼痛、组
织损伤等。 因此 ,药物若能抑制炎症介质的产生释放 ,则会表
现出抗炎效应。望春花挥发油能抑制 TNF、 PGE2和组织胺的
产生 ,就是其抑炎机理所在。
PLA2通过水解膜磷脂产生花生四烯酸 ( AA )和血小板
活化因子 ( PAF)。 AA经环氧酶途径生成前列腺素 ( PGs) ,经
脂氧酶途径生成白三烯 ( LTs) ; PAF在乙酰转移酶的作用下
生成活化状态的 PAF[10, 11]。 PGs、 LTs及 PAF[12]都是很强的
炎症介质。 望春花油对 PLA2的抑制作用 ,相当于切断了 AA
及 PAF产生的总开关 ,阻碍了相应炎症介质的形成。 这也是
其抗炎效应的机理之一。
望春花油能减少上述炎症介质的产生 ,缓解炎症反应 ,且
这种作用不因摘除肾上腺而消失 ,表明望春花挥发油抑制炎
症介质的作用不是通过作用于机体下丘脑 -垂体 -肾上腺皮质
轴间接实现的 ,而具有直接阻抑炎症介质产生的作用。
比较正常动物组和小剂量组 ,二者所用药物及剂量完全
相同 ,只是前者是正常动物 ,后者是去肾上腺动物。 从炎症指
标的测定结果看 ,正常动物炎症足组织中组织胺含量显著小
于去肾上腺动物炎症足组织的组织胺含量 ,其他测定指标二
者虽无显著差异 ,但各指标都有相同的变化趋势 ,即正常动物
的炎症程度较去肾上腺动物轻。由此提示 ,正常动物除有药物
的抗炎作用外 ,动物自身肾上腺的抗炎功能也发挥了重要作
用。
参考文献:
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Anti- inflammatory Mechanism of the Volatile Oil of Magnolia biondii Pamp.
WANG Wen-kui
1 , SHEN Ying-jun
2 , QI Yun
3 , L IU Jin-ping
1 , SON G Jin-xiang
1
  ( 1. Animal Science and Technology Col lege of Shanx i Agricultural University , Taigu , Shanxi 030801,
 China; 2. Chengdu University of TCM ,Chengdu 610075,China; 3. Institute of Medical Plant Development
 of CAMS and PUMC , Beij ing 100094,China)
   Abstract: Wistar Rats w er e adr ena lectomized. 7 day s late r, 1% car rag eenan was injected into the ra ts′thor acic cav ity, and
10% egg-w hite subcutaneously on their right foo t. Th erefo re, pleurisy and inflamma tion o f fo ot occur red to the rats. The Voat-
302 中 国 兽 医 学 报  2005年 5月 第 25卷 第 3期 Chin J Vet Sci  May 2005  Vol. 25  No. 3
ile Oil of Magno lia biondii Pamp. ( VOM P) was g iv en to the tr ea tment rats befo r e the injection o f inflammagen. The results
show ed tha t VOM P can reliev e the inflamma tion, and inhibit the production of inflammato r y mediato rs, such as TN F, his-
tamine, PGE2 and th e activity of PLA2 . These indica ted tha t the anti-inflammato ry effect of VOM P wasn′t r elev ant to the ani-
mals′hypo thalamus-adenohypophy sis-adrenal axis.
   Key words: Flos magnoliae L. ; Magnolia biondii Pamp. ; v olatile oil; anti-inflamma to ry mechanism
《中国兽医学报》入选 2004年度《化学文摘》 ( CA)千名表
  根据美国化学学会出版的《 Ch emica l Abstr acts Service Source Index Quar terly No. 4》统计结果 , 2004年美国《化学文摘》
( CA)共收录中国 (含港台 )科技期刊 913种 ,其中有 94种 (含台湾地区 )科技期刊进入“ CA千名表”。 《中国兽医学报》位居其中
第 637位 ,这是该刊首次进入“ C A千名表”。 《中国兽医学报》 2004年共发表论文 210篇 , C A则收录了 200篇 ,在收录的国内科
技期刊中位居第 45位。 CA大范围收录《中国兽医学报》发表的论文 ,标志着《中国兽医学报》的学术质量已经充分得到了 CA的
认可 ,为该刊进入国际其他著名数据库打下了良好的基础。 现将入选期刊列出如下:
序号 刊     名 CA千名表名次 序号 刊     名
CA千名
表名次
1 高等学校化学学报 137 48 无机材料学报 684
2 世界胃肠病学杂志 (英文版 ) 191 49 中国医院药学杂志 693
3 第四军医大学学报 205 50 中国新药杂志 701
4 分析化学 217 51 高分子学报 703
5 化学学报 236 52 材料科学与工程学报 715
6 第三军医大学学报 255 53 稀有金属 721
7 光谱学与光谱分析 266 54 应用生态学报 733
8 中国化学快报 (英文版 ) 286 55 环境科学学报 737
9 世界华人消化杂志 287 56 中国公共卫生 738
10 钢铁 293 57 材料科学技术学报 (英文版 ) 744
11 中国给水排水 294 58 分析科学学报 748
12 化工学报 296 59 计算机与应用化学 751
13 物理学报 302 60 机械工程材料 752
14 高分子材料科学与工程 341 61 农药 766
15 科学通报 (英文版 ) 345 62 精细化工中间体 790
16 环境污染治理技术与设备 348 63 工程塑料应用 808
17 中国化学 (英文版 ) 355 64 中国药理学通报 822
18 有机化学 381 65 中华医学遗传学杂志 823
19 光谱实验室 382 66 农业环境科学学报 826
20 应用化学 391 67 中国医药工业杂志 830
21 无机化学学报 397 68 生物医学工程学杂志 838
22 中国塑料 398 69 高等学校化学研究 (英文版 ) 853
23 中国药理学报 (英文版 ) 420 70 第二军医大学学报 854
24 中国有色金属学报 446 71 工业催化 855
25 物理化学学报 459 72 燃料化学学报 863
26 中国病理生理杂志 467 73 高能物理与核物理 868
27 功能材料 474 74 郑州大学学报 (医学版 ) 877
28 中国生物工程杂志 480 75 中国稀土学报 878
29 石油化工 486 76 电池 882
30 化学通报 494 77 人工晶体学报 896
31 精细化工 502 78 药学学报 898
32 硅酸盐学报 509 79 食品科学 901
33 分析试验室 535 80 中国生物化学与分子生物学报 909
34 细胞与分子免疫学杂志 540 81 电源技术 912
35 中国有色金属学会会刊 (英文版 ) 544 82 中国动脉硬化杂志 917
36 第一军医大学学报 545 83 肿瘤防治杂志 918
37 稀有金属材料与工程 556 84 山东大学学报 (医学版 ) 942
38 中国化学会会志 (英文版 ,台北 ) 568 85 特种铸造及有色合金 943
39 中华医学杂志 (英文版 ) 576 86 半导体学报 957
40 色谱 579 87 光子学报 959
41 中国药学杂志 580 88 石油炼制与化工 962
42 金属学报 586 89 高校化学工程学报 968
43 催化学报 588 90 合成橡胶工业 977
44 中草药 618 91 中国激光 983
45 中国兽医学报 637 92 化工时刊 986
46 化学研究与应用 639 93 中国生化药物杂志 990
47 结构化学 640 94 合成化学 1000
(厦门大学化学化工学院资料室  黄秀菁 )
303中 国 兽 医 学 报  2005年 5月 第 25卷 第 3期 Chin J Vet Sci  May 2005  Vol. 25  No. 3