全 文 ：1．威灵仙 2．扬子铁线莲 3．粗齿铁线莲 4．毛蕊铁线莲
5．柱果铁线莲 6．山木通
图 5 水浸液的紫外光谱图
收稿日期:2012 － 10 － 22
作者简介:王泓(1990 －) ，男，浙江杭州人，研究方向:药学。
通讯作者:何昱(1974 －) ，女，浙江人，副教授，硕士研究生导师，研
究方向:药物质量控制。E-mail:heyu0923@ hotmail． com。
(2)研究石油醚、氯仿、无水乙醇、蒸馏水 4 溶剂浸提
后测得的紫外谱线组图谱后发现，4 溶剂的紫外谱线组图
谱峰形除了无水乙醇提取液外，其余的水浸液、氯仿浸液和
石油醚浸液均十分接近，表明 6 种铁线莲属植物的主要成
分是类似的。同一提取液也存在明显区别的特征峰，可获
得较好的鉴别效果。
紫外光谱组法依据四种不同极性溶剂所溶解的物质不
同，其提取液的紫外吸收光谱的吸收峰位也不同，它们构成
6 种铁线莲属植物的特征性紫外谱线组图谱。同一提取液
不同种植物间既存在一些共有的吸收峰，也存在明显区别
的特征峰。因此，采用多溶剂紫外谱线组法，可以检测出不
同极性溶剂提取液的紫外吸收，通过综合比较六种铁线莲
属植物的图谱差异可获得较好的鉴别效果。本文所用薄层
层析法制样简便、灵敏度高。两者的结合应用，充实了传统
的鉴别方法。从资源开发的角度上来看，其余五种植物与
威灵仙含有相似的化学成分，应结合定量研究加以判断，本
文为威灵仙药材开发利用的后续研究作了铺垫。
参考文献
［1］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典:1 部［S］．北京:中国
医药科技出版社，2010:234．
［2］ 浙江药用植物志编写组．浙江药用植物志．上册［M］． 杭州:
浙江科学技术出版社，1980:317．
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中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
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地瓜儿苗地上部分和地下部分中熊果酸
和齐墩果酸的含量测定
王泓，何昱
(浙江中医药大学，浙江 杭州 310053)
摘 要:目的:在薄层色谱定性的基础上，采用高效液相色谱法同时测定地瓜儿苗地上部分与地下部分中熊
果酸和齐墩果酸两种有效成分的含量，为扩大泽兰药源提供参考。方法:硅胶薄层色谱定性，高效液相色谱法定
量测定，色谱柱为 Agilent Eclipse XDB － C18(4． 6 mm × 150 mm，5 μm) ;流动相为甲醇 －磷酸二氢钠水溶液(7． 8 g
磷酸二氢钠用水溶解并定容至 1000 mL)88 ∶ 12;流速 0． 8 mL /min;柱温 20 ℃;检测波长:210 nm。结果:地瓜儿苗
地上部分与地下部分均含有熊果酸和齐墩果酸，但地下部分的含量较低，约为地上部分的 1 /6。结论:地瓜儿苗
可作为泽兰的原植物入药，但地下部分是否适合作为入药部位还需结合其它成分的研究，尚有待探讨。
关键词:地瓜儿苗;齐墩果酸;熊果酸;含量测定;HPLC;TLC
中图分类号:R284． 1 文献标志码:A 文章编号:1673 － 7717(2013)03 － 0657 － 03
Determination of Ursolic acid and Oleanolic acid in the Aerial Part and
Underground Part of Lycopus lucidus Turcz
WANG Hong，HE Yu
(Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，Zhejiang，China)
Abstract:Objective:To simultaneously determinate the two active ingredients:ursolic acid and oleanolic acid in aerial
and underground parts of Lycopus lucidus Turcz． after qualified by TLC，which provides a reference for medicinal source
expansion of lycopi herba． Methods:The qualitative analysis was achieved by silica gel TLC，and the quantitative chromato-
graphic separation was achieved by using HPLC system consisting of an Agilent Eclipse XDB － C18 column(4． 6 mm × 150
mm，5 μm) ，with the mobile phase consisting of methanol and sodium dihydrogen phosphate solution(7． 8 g sodium di-
hydrogen phosphate was dissolved in water and then diluted to 1000 mL)88 ∶ 12． The flow rate was 0． 8 mL /min，and the
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DOI：10.13193/j.archtcm.2013.03.211.wangh.073
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column temperature was controlled at 20 ℃ ． The UV detection wavelength was set at 210nm． Result:Both aerial and un-
derground parts contained oleanolic acid and ursolic acid，but underground part had lower content which is about one －
sixth of aerial part． Conclusion:Lycopus lucidus Turcz． can be used as original plant of lycopi herba，but whether the un-
derground part is suitable as medicine remains to be explored in combination with other ingredients research．
Key words:Lycopus lucidus Turcz．;oleanolic acid;ursolic acid;determination;HPLC;TLC
中药泽兰为临床常用的活血药，具有活血化瘀、行水消
肿的功效，用于月经不调，经闭，经痛，产后瘀血腹痛及水
肿。现代药理学研究也表明，泽兰具有抗凝作用，能改善血
液流变性、抑制血小板聚集和抗血栓形成，改善微循环;并
能降低血脂、防治肝硬化、镇痛镇静、增强子宫平滑肌收缩、
利胆等，表现出多方面的药理活性［1］。其主要的有效成分
为熊果酸和齐墩果酸等三萜类成分以及咖啡酸、迷迭香酸
等酚酸类成分［2］。
泽兰的来源 2010 版《中华人民共和国药典》收载的为
唇形科植物毛叶地瓜儿苗(Lycopus lucidus Turcz． Var． hir-
tus Regel．)的干燥地上部分［3］。同科植物地瓜儿苗(Lyco-
pus lucidus Turcz．)常作为泽兰的习用品种，但缺乏相关的
实验依据;同时，泽兰的入药部位为地上部分，虽有文献报
道其地下根状茎也可入药［1］，但尚未见对其地下部分的任
何研究。针对这种情况，本文在薄层定性的基础上，测定了
地瓜儿苗地上部分和地下部分中两种有效成分———熊果酸
和齐墩果酸的含量，为地瓜儿苗作为泽兰的药用资源提供
依据;并对比了地瓜儿苗地上和地下部分中两种成分的含
量，为扩大泽兰药源提供参考。
1 样品、仪器与试药
1． 1 样品
采自浙江绍兴上虞，经浙江中医药大学资源与鉴定教
研室陈孔荣副教授鉴定为唇形科植物地瓜儿苗(Lycopus lu-
cidus Turcz．)。晒干后分拣成地上部分与地下部分，干燥，
粉碎过 60 目筛。
1． 2 仪器与试药
1． 2． 1 仪器 Agilent 1200 型高效液相色谱仪:G1311A系
列四元泵，G1322A脱气机，G1329A自动进样器，G1316A柱
温箱，G1314B紫外检测器，XS105 型十万分之一分析天平
(上海卫兆电子科技有限公司) ，JA2003N 型千分之一分析
天平(上海沪粤明科学仪器有限公司) ;数显恒温水浴锅
(上海江星仪器有限公司)。
1． 2． 2 试药 齐墩果酸对照品(批号 110709 － 200505)和
熊果酸对照品(批号 110742 － 200518)均购自中国药品生
物制品检定所。甲醇为色谱纯，环己烷、三氯甲烷、乙酸乙
酯、甲酸均为分析纯(成都科龙化工试剂厂) ，水为 Millipore
超纯水。
2 薄层色谱法鉴别地瓜儿苗地上部分和地下部分中的熊
果酸
2． 1 对照品溶液的配制
精密称取熊果酸对照品 0． 20 mg，置于 5 mL 容量瓶
中，加甲醇溶解并稀释至刻度，配制成 0． 04 mg /mL 的熊果
酸对照品溶液。
2． 2 供试品溶液的制备
精密称取地瓜儿苗地上部分和地下部分粉末各 5． 0 g，
分别加丙酮 50 mL回流提取 2 次，每次 2 h。滤液蒸干，残
渣加石油醚(30 ～ 60 ℃)50 mL，浸泡 2 min，倾去石油醚，蒸
干，残渣加甲醇溶解并转移至 25 mL容量瓶中定容至刻度，
得相应的供试品溶液［3］。
2． 3 方法与结果
取熊果酸对照品溶液、地瓜儿苗地上部分和地下部分
供试品溶液 10 μL，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以环己
烷 －三氯甲烷 －乙酸乙酯 －甲酸(40 ∶ 5 ∶ 8 ∶ 0． 5)室温展
开，展开结束后晾干，喷以 10%硫酸乙醇溶液，在 105 ℃加
热至斑点显色清晰。薄层色谱见图 1。
A 可见光下观察 B 紫外光(254nm)下观察
1．地瓜儿苗地上部分 2．地瓜儿苗地下部分 3．熊果酸对照品
图 1 地瓜儿苗地上部分和地下部分的薄层色谱图
3 高效液相色谱测定地瓜儿苗地上部分和地下部分中熊
果酸和齐墩果酸的含量［2，4 －5］
3． 1 色谱条件
色谱柱为 Agilent Zorbax SB － C18(250 mm × 4． 6 mm，5
μm) ;流动相为甲醇 －磷酸二氢钠水溶液(7． 8 g 磷酸二氢
钠定容至 1000 mL)88 ∶ 12;流速为 0． 8 mL /min;柱温为 20
℃;检测波长为 210 nm;进样量 5 μL。
3． 2 对照品溶液的配制
精密称取熊果酸对照品 4． 68 mg、齐墩果酸对照品
2． 60 mg，置于 2 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，
配制成熊果酸浓度为 2． 34 mg /mL 和齐墩果酸浓度为1． 30
mg /mL的混合对照品溶液。
3． 3 供试品溶液的制备
同“2． 3 项下”，过 0． 45 μm滤膜后进样。
3． 4 方法与结果
3． 4． 1 对照品及样品的色谱分离 熊果酸和齐墩果酸混
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合对照品、泽兰地上部分、泽兰地下部分的 HPLC图谱见图
2。
A．混合对照品图谱
B．泽兰地上部分图谱
C．泽兰地下部分图谱
1．齐墩果酸，2．熊果酸
图 2 混合对照品和泽兰样品的 HPLC色谱图
3． 4． 2 方法学考察 标准曲线的绘制:制备梯度浓度的
熊果酸和齐墩果酸混合对照品溶液，按“3． 1”项下的条件
进样，测定峰面积。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，得
到标准曲线为:Y熊果酸 = 621． 43X － 0． 4767，r = 0． 9998;
Y齐墩果酸 = 638． 47X + 3． 9333，r = 0． 9996;说明熊果酸在浓
度 0． 18 ～ 2． 34 mg /mL 范围内、齐墩果酸在浓度 0． 10 ～ 1．
30 mg /mL范围内线性关系良好。
精密度考察:取熊果酸浓度为 0． 18 mg /mL 和齐墩果
酸浓度为 0． 10 mg /mL 的混合对照品溶液，按上述色谱条
件，重复进样 6 次。熊果酸和齐墩果酸峰面积的 RSD 值分
别为 1． 22%和 0． 82%。
稳定性考察:供试品液在制备好的 0、2、8、12、24 h 进
样，熊果酸和齐墩果酸峰面积值计算 RSD分别为 0． 81%和
1． 19%。表明样品在 24 h内稳定。
重复性考察:精密称取泽兰地下部分粉末 6 份，每份约
5． 0 g，按供试品溶液方法制备，进样测定，根据峰面积值和
标准曲线计算含量，得熊果酸含量的 RSD 为 2． 08%，齐墩
果酸含量的 RSD为 1． 85%。
加样回收率实验:取泽兰地下部分粉末 6 份，每份 2． 5
g，每份加 0． 680 mg熊果酸对照品和 0． 226 mg齐墩果酸对
照品，按“2． 3 项下”制备供试品溶液，进样分析，计算回收
率。结果熊果酸的加样回收率分别为 95． 74%、95． 44%、
96． 03%、97． 79%、97． 21%、94． 85%，平均回收率为
96． 18%(RSD = 1． 16%) ，齐墩果酸的加样回收率为 95．
58%、96． 02%、95． 58%、97． 79%、96． 90%、94． 25%，平均
回收率为 96． 02%(RSD = 1． 27%)。
3． 4． 3 样品中熊果酸和齐墩果酸的含量测定 精密称取
地瓜儿苗的地上部分和地下部分粉末 5． 0 g各 3 份，按“2．
3 项下”制备供试品溶液，按“3． 1 项下”进样分析，结果地
瓜儿苗的地上部分含熊果酸 1． 670 mg /g，齐墩果酸 0． 556
mg /g;地瓜儿苗的地下部分含熊果酸 0． 267 mg /g，齐墩果
酸 0． 091 mg /g，见表 1 ～ 2。
表 1 地瓜儿苗地上部分含量测定结果(mg /g)
项目 1 2 3 平均 RSD
熊果酸 1． 659 1． 688 1． 662 1． 670 0． 95%
齐墩果酸 0． 549 0． 555 0． 563 0． 556 1． 32%
表 2 地瓜儿苗地下部分含量测定结果(mg /g)
项目 1 2 3 平均 RSD
熊果酸 0． 262 0． 269 0． 271 0． 267 1． 73%
齐墩果酸 0． 089 0． 091 0． 092 0． 091 1． 29%
4 讨 论
4． 1 薄层色谱
由于没有文献报道地瓜儿苗的地下部分含有熊果酸或
齐墩果酸，故先通过薄层色谱进行定性鉴别。所用条件参
考《中华人民共和国药典》中泽兰的薄层色谱条件，并根据
实际展开情况进行了比例调整。由于熊果酸和齐墩果酸是
同分异构体，薄层色谱无法将分开，所以只使用熊果酸作为
对照品。从展开结果来看，证明了地瓜儿苗的地上和地下
部分可能含有熊果酸(或齐墩果酸)。
4． 2 高效液相色谱条件的考察 由于熊果酸和齐墩果酸
是同分异构体，液相分离有一定的困难。实验尝试了文献
报道的多种色谱分离条件，均未能获得完全理想的分离。
最终选择本文的条件，使两种成分得到尽可能的分离，以垂
直分割来计算色谱峰面积。方法学考察的结果说明，这种
方法具有可行性。
4． 3 熊果酸和齐墩果酸的含量比较 地瓜儿苗的地上部
分含熊果酸 1． 670 mg /g、齐墩果酸 0． 556 mg /g，与文献报道
的毛叶地瓜儿苗中熊果酸的含量相近，而齐墩果酸的含量
约为 1 /2［2］;地瓜儿苗的地下部分含熊果酸 0． 267 mg /g、齐
墩果酸 0． 091 mg /g，含量约为地上部分的 1 /6。
本实验证实了地瓜儿苗全草均含有熊果酸和齐墩果
酸，地瓜儿苗作为泽兰入药有一定的依据;但地瓜儿苗地下
部分中两种成分含量较低，是否适合作为入药部位还需结
合其它有效成分的研究，有待进一步探讨。
参考文献
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