全 文 ：HPLC法测定望春花花蕾中辛夷脂素的含量
于宗渊 1, 2　张希林1　刘　青 1　苏本正 1
(1.山东省中医药研究院 ,济南 250014;2.山东中医药大学 ,济南 250014)
　　摘要　采用高效液相色谱法测定 ,色谱柱为 μBondapakC18柱(3.9mm×300mm, 10μm),流动相为甲醇-水(60
∶40),检测波长 283 nm。辛夷脂素在 0 ～ 10μg范围内与峰面积呈良好线性关系 , 平均回收率为 98.74%, RSD为
1.58%。
关键词　辛夷脂素;望春花蕾;辛夷;高效液相色谱法
　　中国药典 2005年版一部规定辛夷为木兰科植
物望春花 MagnoliabiondiPamp.、玉兰 Magnoliade-
nudeataDesr.和武当玉兰 MagnoliasprengeriPamp.
的干燥花蕾 。望春花蕾为辛夷药材的主流品种 ,约
占 80%。辛夷中木兰脂素的含量测定方法已见文
献报道 〔1〕 ,中国药典 2000年版一部及 2005年版一
部均采用测定木兰脂素含量以控制辛夷药材的质
量 。已知望春花蕾中含有辛夷脂素 、松脂素二甲醚 、
木兰脂素和里立脂素 B二甲醚等木脂素类成分 〔2〕 ,
这些成分均具有血小板活化因子受体拮抗活性 ,其
中辛夷脂素的效价最高〔3〕。因此 ,辛夷药材中辛夷
脂素的含量也应作为评价其内在质量的指标之一。
本文建立了测定辛夷主流品种望春花蕾中辛夷
脂素含量的高效液相色谱法 ,并测定了 4批望春花
蕾样品中辛夷脂素的含量 。
1 　仪器与试药
Waters高效液相色谱仪:600泵 , 7725i定量进
样阀 , 996二极管阵列检测器 , Milennum32色谱工作
站;甲醇为色谱纯 ,水为超纯水;辛夷脂素对照品系
自制 , 经高效液相色谱归一化法测定其纯度为
99.58%;4批望春花蕾样品分别购自河南郑州 、陕
西西安 、河北安国和山东济南 ,经本院钟方晓副研究
员鉴定 ,均为木兰科植物望春花 Magnoliabiondi
Pamp.的干燥花蕾 。
2 　方法与结果
2.1 　色谱条件　μBondapakC18柱 (3.9 mm×300
mm, 10μm),柱温 25℃;流动相为甲醇 -水(60∶40),
流速 1.0 ml/min;检测波长 283 nm;进样量 10 μl。
在此色谱条件下 ,以辛夷脂素峰计算的理论板数不
低于 4900。
2.2 　对照品溶液制备　取辛夷脂素对照品适量 ,
精密称定 ,加甲醇制成每 1 ml含 1 mg的溶液 ,即
得 。
2.3 　供试品溶液制备　取望春花蕾样品粗粉约
1.00g,精密称定 ,置圆底烧瓶中 ,准确加入 100 ml
甲醇 ,称定重量 ,回流提取 30min,冷却至室温 ,称定
重量 ,用甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,提取液用 0.5
μm微孔滤膜过滤 ,即得 。
2.4　线性关系考察　精密吸取辛夷脂素对照品溶
液 0, 2, 4, 6, 8, 10 ml,分别置 10 ml量瓶中 ,加甲醇
稀释至刻度 ,摇匀。按上述色谱条件 ,分别进样测定
辛夷脂素峰面积(A)。以峰面积对进样量进行线性
回归 ,得回归方程:A=915367C+28820,相关系数 r
=0.9996。结果表明辛夷脂素对照品在 0 ～ 10 μg
范围内与峰面积呈良好线性关系 。
2.5　精密度试验　在上述色谱条件下 ,吸取同一
份供试品溶液 ,重复进样 6次 ,测定各个辛夷脂素峰
面积值 , RSD为 1.04%。
2.6　稳定性试验　取同一份样供试品溶液 ,分别
于室温条件下放置 0, 1, 2, 4, 8, 12 h进行测定 ,结果
辛夷脂素峰面积的 RSD为 1.09%,表明样品溶液在
12 h内稳定性良好 。
2.7　重复性试验　取同一批望春花蕾样品 6份 ,
照 “供试品溶液制备 ”项下方法制备供试液 ,测定辛
夷脂素含量 ,结果含量平均值为 0.23%, RSD为
1.32%。
2.8　回收率试验　取上述已测知含量的望春花蕾
样品粉末 6份 ,每份约 0.50 g,精密称定 ,分别精密
加入辛夷脂素对照品适量 ,按 “供试品溶液制备”项
下方法制备供试溶液 ,测定辛夷脂素的含量 ,计算回
收率 ,结果辛夷脂素的平均回收率为 98.74%, RSD
为 1.58%。
2.9　样品测定　用上述方法测定了 4批望春花蕾
样品辛夷脂素的含量 ,结果见表 1。
　表 1　望春花蕾样品中辛夷脂素的含量测定结果(n=3)
样品编号 样品来源 辛夷脂素含量(%)
1 河南郑州 0.23
2 陕西西安 0.15
3 河北安国 0.26
4 山东济南 0.20
·897·中药材第 28卷第 10期 2005年 10月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2005.10.017
参 考 文 献
1　方红 , 等 .高效液相色谱法测定中药辛夷中木兰脂素的
含量 .药物分析杂志 , 2002, 22(5)∶342
2　马玉良 , 等 .辛夷中木脂素成分的研究 .中国中药杂
志 , 1995, 20(2)∶102
3　Jing-xingPan, etal.LignanswithPlateletActivatingFacter
AntagonistActivityfromMagnoliaBiondii.Phytochemistry,
1987, 26(5)∶1377
(2005-06-01收稿)
两面针中乙氧基白屈菜红碱和氯化两面针碱的测定
梁广华1　张建浩2
(1.广州市药品检验所 ,广州 510160;2.广东药品审评认证中心 ,广州 510080)
　　摘要　目的:制订了两面针中乙氧基白屈菜红碱和氯化两面针碱的 HPLC测定。方法:以 1 mmol/L庚烷磺酸
钠-乙腈(30∶70)为流动相 , 检测波长 272 nm。 结果:加样回收率乙氧基白屈菜红碱 RSD=2.6%;氯化两面针碱
RSD=2.5%;方法重现性好 , RSD为 1.4%和 1.5%。可用于两面针的质量控制。
关键词　两面针;乙氧基白屈菜红碱;氯化两面针碱;HPLC法
　　两面针是两广地区民间常用药材 ,为芸香科植
物两面针(Zanthoxylumnitidum“Roxd” Dc)的干燥
根 ,文献〔1〕记载主含:乙氧基白屈菜红碱 (Ethoxy-
chelerythrin)、氯化两面针碱(NitidineChloride)和异
岩椒定碱(Isofagaridine)等成分及其同系物。中国
药典 2005年版一部主要采用薄层扫描法测定氯化
两面针碱含量〔2〕 ,有人曾用高效液相色谱法测定其
氯化两面针碱 、L-芝麻脂素和 L-细辛脂素的含
量 〔3、 4〕。本文重新设计了高效液相色谱方法 ,着重
对各地市场销售的两面针药材中乙氧基白屈菜红碱
和氯化两面针碱的含量进行测定 ,从中考察其质量
的差异。方法灵敏 ,准确 ,重现性好 ,能更有效地反
映其药材的质量情况 。
1　材料与仪器　供试样品:从不同地区药材商店
购买的两面针药材 ,按中国药典 2005年版一部 “两
面针 ”项下鉴定为两面针 (Zanthoxylumnitidum
“Roxd”DC)的干燥根;两面针对照药材和氯化两面
针碱(中国药品生物制品检定所),乙氧基白屈菜红
碱(本所)。
仪器和试剂:岛津 LC-10AT高效液相色谱仪 ,
SPD-10AVP检测器。日立 U-3200紫外分光光度
计 , N2000色谱工作站 (浙江大学智能信息研究
所)。所有化学试剂均为色谱纯和分析纯 。
2 　实验方法和结果
2.1 　检测波长的选择　称取乙氧基白屈菜红碱和
氯化两面针碱对照品适量 , 用甲醇分别配成每 ml
含 30μg的溶液 ,在 200 ～ 400 nm波长处扫描测定 。
乙氧基白屈菜红碱在 208, 227, 282, 389 nm波长处
有最大吸收 , 氯化两面针碱在 235, 272, 292, 329,
388 nm有最大吸收 。考虑到乙氧基白屈菜红碱在
282 nm波长处响应值较大 ,为简化检验方法 ,采用
氯化两面针碱在 272 nm波长的最大吸收位置作为
两个特征成分的测定波长。
2.2　色谱条件　色谱柱为 WatersNova-PakC18柱
(3.9×150nm, 5μm),流动相为 1mmol/L庚烷磺酸
钠(用 3mol/L磷酸调 pH2.6)-乙腈(30∶70),检测
波长 272nm,外标法定量 。在此色谱条件下测定对
照品和样品的色谱图 ,乙氧基白屈菜红碱和氯化两
面针碱理论板数分别为 3000和 3500。
2.3　对照品溶液的制备　精密称取乙氧基白屈菜
红碱和氯化两面针碱对照品适量 ,加甲醇溶解制成
每 ml各含 0.3 mg的混合溶液。再精密量取 1 ml
上述溶液置 10 ml量瓶中 ,用流动相稀释至刻度 ,摇
匀 ,为混合对照品溶液。
2.4　标准曲线的制备　分别精密量取对照溶液
(0.3 mg/ml)各 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.2, 1.4 ml,分别
置 10 ml量瓶中 ,加流动相稀释至刻度 ,摇匀即得。
取 10 μl进样测定 ,每个浓度进样 3次 ,以平均峰面
积为纵座标 ,各对应的浓度为横座标 ,分别得直线方
程:乙氧基白屈菜红碱 Y=400.4X-15088.2(n=
7), r=9.9998;氯化两面针碱 Y=1647.2X-3995.5
(n=7), r=0.9990。乙氧基白屈菜红碱和氯化两面
针碱在 0.12 ～ 0.42 mg之间均呈良好的线性关系。
2.5　精密度试验　取样品测定项的供试品溶液 ,
·898· 中药材第 28卷第 10期 2005年 10月