全 文 ：吉林农业大学学报 9 918 .2 0 (增刊 )
J ou r、 乙 qf J诬乙诬, A g r诬e , l : u ar 乙 U 。滋* r s诬: ,
侧耳纤维素酶基因的克隆与表达研究 ’
杨国良 李丽娜 陆师义 艾福彪 杨秀琴 黄普新
(河北大学生物技术中心 保定 0 71002 ) (河北三和食品有限奋司 保定 07 10 02 )
S t u d ie s o n C lo n i n g a n d E x P r e s s io n
o f C e l lo b ia h y d r o la s e G e n e o f P le u r o tu s o s t r e a t u s
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摘 要 采用能够转化细菌和真菌的双功能质粒 p DL I .与部分醉切的糙皮侧耳 ( lP 。成“ : os taer t su )荃因组
D N A 片段进行体外重组 。 再用重组质粒 D N A 转化玉米黑粉菌 ( 认 ilt a go , , la 州 is) 的原生质体 , 在平皿上筛选
抗新霉素的转化子 , 转化率达 80 0 转化子 / 拌9 D N A , 由此在玉米黑粉菌中建立 了糙皮侧耳的荃 因文库 。 随机
选出 25 个转化子提取其 D N A , 以 32 P 标记的 ne u 荃 因醉切片段作为探针进行打点杂交 . 全部显示阳性 , 证明
抗性菌落不是来源 于敏感细胞的回复突变 。 利用李氏木霉 ( T ir cl 司 er ” 。 洲云 )的纤维二搪水解酶 ( eC llob 添
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,简称 C BH . )比 H n荃因末端片段为探针 , 从阳性克隆菌株中提取 D N A 进行 助ut h er n 转移并杂交 , 结
果证明 , 本研究 已成功的克隆 了糙皮侧耳纤维二糖水解酶 C BH 任荃因 。 荃因的表达检 测证明 , 克隆菌株具有
纤维二搪水解酶活力 。
关键词 糙皮侧耳 玉米黑粉菌 纤维素酶 基因克隆
正 红 菇 生 理 特 性 研 究 ’
莫天砚 黄福常
( -f 西大学农学院 南宁 5 30 0 0 5 )
S t u d ie s o n t h e P h y s io lo g i e a l C h a r a e t e r e s t ie s o f R u s s u la v in o s a
M o T i a n y a n H u a n g F u e h a n g
( A g r 诬e u i r ` ar 乙肠乙乙塔 e , G o a o x ￡U 。￡* r s i : , , N a 。 。 派n g 5 3 0 0 0 5 )
摘 要 为了制备红菇接种剂和研究红菇的菌根合成 , 笔者着重研究了从正红菇 ( R “ “ “ al 饭” 。 as iL dn bl )子实
体组织分离得到的纯培养物 (菌株 )的生理特性 。 表明该菌可利用葡萄搪 、 蔗糖 、 甘露糖 、 果搪 、 甘兹醇 、 麦芽
糖 、可溶淀粉和柠稼酸 . 、纤维二搪等 , 尤以蔗糖处理的苗丝生物 a 最大 , 葡萄搪和甘露搪也很好 , 麦芽搪 、 果褚
和淀粉效果中等 , 但不利用纤维素 ( C M )C 。 最好的氮源是酵母膏 、 牛肉膏和 蛋白陈 , 硫酸铁是较好的无机氮 ,
谷氨酸 、赖氨 酸和硝态氮虽可被利用 , 但生长较差 。 最佳的 C/ N 是 20 。 该培养物对磷很敏感 . 缺磷不生长 ;钾
与镁的影响也较大 , 钙与钠则作用很小 , 能耐盐 ( N aCI )达 4 9 / L 。 在 20 ℃ 一 35 ℃ 范围 内均能生长 , 最佳 30 ℃ ;
4 0 ℃生长停止 。 在 p H 3 . 4 以下和 8 . 5 以上不能生长 ;最适 p H 值为 6 . 0 左右 。 在黑暗和光照 70 0 lx 下可以正
常生长 , 但以 5 0 一 2 00 lx 更好 。
关键词 正红菇 子实体 培养
收稿 H期 : 1 9 98 一 0 6 3 0
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DOI : 10. 13327 /j . j jl au. 1998. s1. 066