全 文 ：食用菌学报２０１４．２１（２）：５４～５６
收稿日期：２０１３－０６－２７原稿；２０１３－０９－１１修改稿
基金项目：上海市农委重点攻关项目［编号：沪农委攻字（２００８）第８－２号］、上海市农科院青年基金［编号：农青年科
技２０１２（１４）］的部分研究内容
作者简介：李　玉（１９８５－），男，２００８年毕业于福建农林大学，硕士，助理研究员，主要从事食药用菌栽培方面研究。
＊本文通讯作者　Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｇｙａｎ９２００＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
文章编号：１００５－９８７３（２０１４）０２－００５４－０３
不同品种猴头菌子实体粗多糖含量及体外免疫活性比较
李　玉，李巧珍，吴　迪，于海龙，唐传红，周　峰，李正鹏，杨　焱＊
（上海市农业科学院食用菌研究所，农业部南方食用菌资源利用重点实验室，
国家食用菌工程技术研究中心，国家食用菌加工技术研发分中心，
上海市农业遗传育种重点开放实验室，上海２０１４０３）
摘　要：对１０株猴头菌（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ　ｅｒｉｎａｃｅｕｓ）菌株栽培获得的子实体多糖含量和体外免疫活性进行比较。结
果表明：不同的猴头菌菌株在同样条件下栽培所获子实体在粗多糖含量和体外刺激ＲＡＷ２６４．７产生ＮＯ的能
力上有明显差异，其中Ｈ５粗多糖含量最高且体外刺激ＲＡＷ２６４．７的活性也最强。
关键词：猴头菌菌株；子实体多糖；巨噬细胞；ＮＯ
　　猴头菌（Ｈｅｒｉｃｉｕｍ　ｅｒｉｎａｃｅｕｓ）是一种食药兼
用菌，不仅营养美味，且具有多种药用活性作用。
国内外研究报道猴头菌的活性物质主要有多糖、
萜类、脂肪酸、甾醇类、酚类等，其中最主要的活
性成分是猴头菌多糖，具有保肝护胃、降血糖、增
强人体免疫力、抗癌、抗氧化等功效［１－４］。猴头菌
多糖可从栽培子实体和发酵菌丝体中提取得到，
李巧珍等［５］发现不同菌株的发酵菌丝体多糖的
产量及其体外免疫活性有较大差异，笔者对收集
到的１０个猴头菌菌株栽培得到的子实体多糖含
量和体外免疫活性进行了比较，为筛选多糖产量
高、体外免疫活性好的菌株提供帮助，也为猴头
菌栽培菌株筛选提供了一定的依据。
１　材料与方法
１．１供试菌株及来源
　　供试菌株０６２７、０６０８、０６１７、０６１１、０６０５分别
编号为 Ｈ１～Ｈ５，由上海市农业科学院食用菌研
究所提供；长刺猴头、９１１、９２０、猴头王、华中猴头
分别编号为Ｈ６～Ｈ１０，其中长刺猴头和华中猴头
由华中食用菌栽培研究所提供，９１１和９２０由江
苏高邮食用菌研究所提供，猴头王由牡丹江海丰
食用菌研究所提供。
１．２子实体培养
　　按照８５％木屑、１４％麸皮、１％石灰搅拌培养
料并调整其含水量为６４％，装入聚丙烯塑料袋
（１７ｃｍ×３３ｃｍ×０．０５ｃｍ），每袋装湿料１ｋｇ，
１２１℃灭菌１２０ｍｉｎ，接种后２５℃避光培养；菌丝
满袋后转入培养房，在１８～２３℃、８５％～９５％相
对湿度、自然散射光条件下培养子实体；当子实
体菌刺长约０．５ｃｍ时采收，分别将１０个菌株子
实体样本烘干备用。
１．３子实体多糖含量的测定
　　分别将１．２中的子实体充分磨碎，取粉末样
品２ｇ，加９０ｍＬ蒸馏水，沸水浴提取２ｈ，提取液
过滤后加蒸馏水定容至１００ｍＬ，量取１０ｍＬ，加
无水乙醇１５０ｍＬ摇匀，４℃放置１２ｈ后４０００　ｇ
离心２０ｍｉｎ，弃上清，沉淀用１０ｍＬ　９５％的乙醇
洗涤２次，用蒸馏水将沉淀定容至５０ｍＬ，用苯
酚－硫酸法测定总糖含量［３］。
子实体多糖含量＝总糖含量×０．９
１．４子实体粗多糖的制备
　　取１．２中烘干的子实体研磨成粉末，取１０ｇ
子实体粉末，按１∶１８料水比加入蒸馏水，沸水浴
提取２ｈ，过滤，滤渣重复提取一次（条件同前），
滤液合并，旋转蒸发仪上减压浓缩至３０ｍＬ，
１５０００　ｇ离心３０ｍｉｎ，取上清加入无水乙醇使乙
醇终浓度达到７０％，摇匀，４℃放置１２ｈ后４０００　ｇ
离心２０ｍｉｎ，弃上清，沉淀用９５％的乙醇洗涤２
次，挥干乙醇，蒸馏水将沉淀溶解，用截留分子量
DOI:10.16488/j.cnki.1005-9873.2014.02.015
第２期 李　玉，等：不同品种猴头菌子实体粗多糖含量及体外免疫活性比较
为３５００Ｄａ透析袋４℃透析３ｄ，将透析后的袋
内溶液冷冻干燥，得子实体粗多糖样品，分别命
名为ＨＦＰ１～ＨＦＰ１０。
１．５子实体粗多糖对ＲＡＷ２６４．７细胞释放ＮＯ产
量的影响
　　分别取１．４中冻干的 ＨＦＰ１～ＨＦＰ１０各
５ｍｇ，加１ｍＬ　ＰＢＳ将其配成５ｍｇ／ｍＬ的母液，
１５０００　ｇ离心３０ｍｉｎ，将上清液转移至另一离心
管中，然 后 取 一 定 量 稀 释 成０．５ｍｇ／ｍＬ和
２ｍｇ／ｍＬ样品 （作用终浓度分别为 ５０、２００、
５００!ｇ／ｍＬ），按文献［５］的方法测定各多糖样品
对巨噬细胞释放ＮＯ产量的影响。
２　结果与分析
２．１不同菌株猴头菌子实体多糖含量分析
　　采收不同猴头菌菌株栽培得到的成熟子实
体，子实体的形态见封三图１。不同菌株子实体
中的多糖含量见表１，１０个菌株中子实体多糖含
量最高的是 Ｈ５菌株，其次为 Ｈ１０菌株，与其余
菌株之间存在显著性差异，Ｈ２菌株子实体多糖
含量最低，其余菌株子实体多糖含量不存在显著
性差异。
表１　１０个猴头菌菌株的子实体多糖含量
Ｔａｂｌｅ　１　Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＰＳ）ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ
Ｈ．ｅｒｉｎａｃｅｕｓ　ｆｒｕｉｔ　ｂｏｄｉｅｓ
菌株
Ｓｔｒａｉｎ
多糖含量
ＰＳ　ｃｏｎｔｅｎｔ（％）
Ｈ１　 １．４１±０．０５Ｂ
Ｈ２　 １．１７±０．０３Ｃ
Ｈ３　 １．４６±０．０９Ｂ
Ｈ４　 １．３７±０．０４ＢＣ
Ｈ５　 １．７４±０．１０Ａ
Ｈ６　 １．４９±０．０８Ｂ
Ｈ７　 １．４６±０．１０Ｂ
Ｈ８　 １．４０±０．０７Ｂ
Ｈ９　 １．４６±０．０６Ｂ
Ｈ１０　 １．７０±０．０５Ａ
大写字母表示Ｐ＜０．０１的差异显著性
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｈｉｇｈｅｒ　ｃａｓｅ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ａｔ
Ｐ＜０．０１
２．２子实体粗多糖对ＲＡＷ２６４．７释放ＮＯ产量的
影响
　　不同样品对ＲＡＷ２６４．７释放ＮＯ的结果见
图２。样品刺激 ＲＡＷ２６４．７产生 ＮＯ量与样品
浓度呈正相关，其中 Ｈ５和 Ｈ６活性较强，Ｈ９和
Ｈ１０活性相对较弱。
＊与ＰＢＳ比在０．０１水平上有显著差异
＊Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ ＜０．０１）ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ＰＢＳ
图２　１０株猴头菌株子实体粗多糖对
ＲＡＷ　２６４．７细胞ＮＯ释放量的影响
Ｆｉｇ．２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｈ．ｅｒｉｎａｃｅｕｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ
ｏｎ　ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ＲＡＷ２６４．７ｃｅｌｓ
３　讨论
　　从实验结果可以看出猴头菌不同菌株在同
样条件下栽培所获子实体在粗多糖含量及其体
外刺激巨噬细胞 ＲＡＷ２６４．７产生 ＮＯ的能力上
存在明显差异，且与李巧珍［５］之前报道的这１０
株猴头菌发酵产生的菌丝体粗多糖量和体外免
疫活性有较大差别，发酵菌丝体中 Ｈ８和 Ｈ１０多
糖产量较高、Ｈ１和 Ｈ１０菌株多糖体外免疫活性
较好；而子实体中Ｈ５和 Ｈ１０多糖的含量明显高
于其它菌株，Ｈ５、Ｈ６和 Ｈ７体外免疫活性较高。
这些结果说明菌丝体和子实体阶段形成的多糖
含量与体外刺激巨噬细胞产生 ＮＯ的能力没有
完全的对应关系。多糖的活性与其初级、高级结
构特别是三维空间构象密切相关，而且还和分子
量、溶解度、粘度等物理化学性质有关［６］。从不
同的菌株所获多糖，虽然分子量可能相同，但是
由于其溶解度、粘度等物理化学性质和单糖组
成、种类、比例等特征差异可导致其体外免疫活
性上的差异。因此，对猴头菌进行深度开发利用
时，需根据所用子实体或菌丝体的原料及目标活
性成分对菌株进行筛选，以明确不同菌株最适宜
的利用方向。
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Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｈｅｒｉｃｉｕｍ　ｅｒｉｎａｃｅｕｓ
Ｆｒｕｉｔ　Ｂｏｄｉｅｓ　ａｎｄ　Ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｎｉｔｒｉｃ
Ｏｘｉｄｅ　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙＲＡＷ２６４．７Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ
ＬＩ　Ｙｕ，ＬＩ　Ｑｉａｏｚｈｅｎ，ＷＵ　Ｄｉ，ＹＵ　Ｈａｉｌｏｎｇ，ＴＡＮＧ　Ｃｈｕａｎｈｏｎｇ，ＺＨＯＵ　Ｆｅｎｇ，
ＬＩ　Ｚｈｅｎｇｐｅｎｇ，ＹＡＮＧ　Ｙａｎ＊
（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｅｄｉｂｌｅ　Ｆｕｎｇｉ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ；Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｉｂｌｅ　Ｆｕｎｇｉ
Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ　Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ（Ｓｏｕｔｈ），Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ；Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ
ｏｆ　Ｅｄｉｂｌｅ　Ｆｕｎｇｉ；Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｒ＆Ｄ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　Ｅｄｉｂｌｅ　Ｆｕｎｇｉ　Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ；Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ
ａｎｄ　Ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２０１４０３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＰＳ）ｌｅｖｅｌｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｆｒｕｉｔ　ｂｏｄｉｅｓ　ｏｆ　ｔｅｎ　Ｈｅｒｉｃｉｕｍｅｒｉｎａｃｅｕｓｓｔｒａｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ａｎｄ
ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＰＳ　ｏｎ　ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ（ＮＯ）ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ＲＡＷ２６４．７ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ．Ｈｉｇｈｅｓｔ
ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ａｎｄ　ｔｏｔａｌ　ＮＯ　ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｗａｓ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ｆｏｒ　ｆｒｕｉｔ　ｂｏｄｉｅｓ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｈ．
ｅｒｉｎａｃｅｕｓ　ｓｔｒａｉｎ　Ｈ５．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｈｅｒｉｃｉｕｍ　ｅｒｉｎａｃｅｕｓ；ｆｒｕｉｔ　ｂｏｄｙ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ＲＡＷ２６４．７ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ；ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
［本文编辑］　曹　晖
６５
图1 10株猴头菌栽培得到的子实体(p.55)
Fig. 1 Fruit bodies of H.erinnceus strains