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老鹳草水提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用



全 文 :Journal of Medical Science Yanbian University Sep.2009 Vo l.32 No.3
[ 收稿日期]  2009-06-02
*[ 通信作者]  李镐(1968—), 男(朝鲜族), 教授 , 博士 , 研
究方向为天然药物开发.
老鹳草水提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用
郑铁1 ,周微2 ,徐铁2 ,宫雪2 ,朴光春2 ,李镐2*
(1.武警延边朝鲜族自治州支队医院;2.延边大学药学院:吉林 延吉 133000)
[ 摘要]   [目的] 研究老鹳草水提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用.[ 方法] 灌胃给予
小鼠老鹳草水提取物 ,利用四氯化碳制作小鼠急性肝损伤模型 ,采用比色分析法测定小鼠血清天冬氨酸
转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性和肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛
(MDA)含量.[ 结果] 老鹳草水提取物可显著降低四氯化碳所致小鼠血清 AST , ALT 活性 , 升高肝组织
GSH-Px 活性 ,降低肝组织 MDA 含量.[ 结论] 老鹳草水提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤具有良
好的保护作用.
[ 关键词]  肝疾病;植物 , 药用;四氯化碳;小鼠
[ 中图分类号]  R 285.5   [ 文献标识码]  A   [ 文章编号]  1000-1824(2009)03-0166-03
Protective effects of the aqueous extract of Geranium wilf ordii Maxim
for acute liver injury induced by CCl4 in mice
ZHENG Tie1 , ZHOUWei2 , XU Tie2 , GONG Xue2 , PIAO Guang-chun2 , LI Gao2*
(1.Armed Police Hospita l o f Yanbian;2.Yanbian University College o f Pharmacy :Yanj i 133000 , J ilin , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To investig ate the pro tect ive effects o f the aqueous ex t ract of Geranium wil f or-
d ii Maxim fo r acute liver injury induced by carbon tet rachlo ride (CCl4)in mice.METHODS The mice w ere
performed by int rag ast ric administ ration w ith the aqueous ext ract o f Geranium wil f ordii Maxim and
induced by CCl4 to the acute hepatic injury models , and the activi ties of A LT and AST in the serum , the
activi ty of GSH-Px and the concent of MDA in live r tissue w ere detected by co lorimetric me thod.
RESULTS The aqueous ext ract of Geranium wil f ordi i Maxim decreased signif icant ly the activi ties o f A LT
and AST in serum and the content of MDA in liver , and improved the act ivity of GSH-Px in live r.
CONCLUSION The aqueous ext ract of Geranium wil f ordi i Maxim has favo ri te protect ive effects for the
acute live r injury induced by CCl4 .
Key words:liver diseases;plants , medicinal;carbon tet rachlo ride;mice
  老鹳草(Geranium wil f ordii Maxim.)为牻牛
儿苗科多年生草本植物 ,为常用中药 ,与同科植物拢
牛儿苗(Erodium stephanianum Willd.)的干燥地
上部分作为中药老鹳草入药.老鹳草具有祛风湿 、通
经络及止泻痢之功效 ,用于风湿痹痛 、麻木拘挛 、筋
骨酸痛及泄泻痢疾等症[ 1] .此外 ,长白山区还有同属
植物鼠掌老鹳草(Geranium sibiricum L.),其干燥
地上部分具有同等药效[ 2] .老鹳草的主要化学成分
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延边大学医学学报 2009 年 9 月 第 32卷 第 3期
有鞣质 、黄酮 、有机酸和挥发油类化合物.通过体外
筛选实验发现 ,老鹳草水提取物具有较强的清除自
由基的能力 ,亦据报道老鹳草可减轻实验性盐酸-酒
精性溃疡的发作 ,并具有超氧化物歧化酶样作用和
抗氧化活性[ 3] .本实验观察了老鹳草水提取物对四
氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用 ,并对它的
抗氧化作用机制进行了探讨 ,旨在为进一步开发应
用长白山地区自然生长老鹳草提供实验依据.
1 材料与方法
1.1 材料 老鹳草采自吉林省延边地区长白山东
北坡一带 ,经延边大学药学院吕惠子副教授鉴定为
真品.取 0.5 kg 老鹳草切碎后 ,加 8倍量蒸馏水加
热回流提取 3次 ,每次1 h ,合并滤液减压浓缩 ,得老
鹳草浸膏 58 g .试剂与仪器:水飞蓟宾购自西安华萃
生物技术有限责任公司 ,丙氨酸氨基转移酶(alanine
t ransaminase , ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspar tate
t ransaminase , AST)、谷 胱 甘 肽 过 氧 化 物 酶
(glutathione periox idase , GSH-Px)和 丙 二 醛
(malondialdehyde ,MDA)试剂盒均购自南京建成生
物工程研究所 ,其他试剂均为国产分析纯.使用的仪
器有小型离心机(Sigma 1-13型)、722型分光光度
计(中国厦门分析仪器厂)及 SP 4430型生物化学分
析仪(SPOTCHEME2)等.实验动物采用雄性昆明
种小鼠 ,体重为 18 ~ 22 g ,由延边大学医学部实验动
物科提供.
1.2 方法 取 60只雄性昆明种小鼠 ,按照随机数
字表法分为正常对照组 、模型对照组 、水飞蓟宾组 、
老鹳草水提取物大 、中 、小剂量组.后 3 组分别按
2.0 , 1.0 , 0.5 g/kg 的剂量灌胃给予老鹳草水提取
物;水飞蓟宾组按 0.5 g/kg 的剂量灌胃给予水飞蓟
宾;正常对照组和模型对照组灌胃给予等体积生理
盐水;每日 1次 ,连续 7 d.末次给药 1 h后 ,除正常
对照组外 ,其余各组均按照 5 mL/kg 剂量腹腔注射
给予 1.5 g/ L 四氯化碳花生油溶液 ,禁食 ,不禁水.
18 h后眼球取血 ,分离血清 ,备用.取血后脱颈椎处
死小鼠 ,剖腹 ,迅速取出肝脏 ,在肝右中叶相同部位
取 0.1 g 肝脏 ,放入置有生理盐水的匀浆器中 ,在冰
浴中制备成 100 g/ L 肝匀浆液 ,备用[ 4] .按照试剂盒
说明测定各组小鼠血清 A LT , AST 活性和肝组织
GSH-Px 活性及 MDA 含量.所有数据以均数士标
准偏差( x ±SD)表示 ,各组样本均数间差别的假设
检验采用方差分析(ANOVA).
2 结果
2.1 老鹳草水提取物对血清 ALT和 AST活性的
影响 由表 1 可见 , 模型对照组小鼠血清 A LT ,
AST 活性较正常组明显升高 ,相比较有显著性差异
(P<0.01),表明急性肝损伤模型制作成功;老鹳草
水提取物大 、中 、小剂量组小鼠血清 ALT , AST 活
性较模型对照组明显下降 ,相比较均有显著性差异
(P<0.01),提示老鹳草水提取物可显著抑制四氯
化碳所致急性肝损伤小鼠血清 ALT , AST 活性的
升高.
表 1 老鹳草水提取物对四氯化碳所致肝损伤小鼠血清
ALT和 AST活性的影响( x±SD)  μmol· s-1/ L 
组别 n 剂量/(g/ kg) ALT  AST 
正常对照组 10 - 0.79±0.12* 1.20±0.19*
模型对照组 10 - 9.58±0.98 4.23±0.63
老鹳草水提取物
大剂量组 10 2.00 3.91±1.10* 2.54±0.51*
老鹳草水提取物
中剂量组 10 1.00 4.80±0.61

2.95±0.53*
老鹳草水提取物
小剂量组 10 0.50 5.81±0.54* 3.13±0.32*
水飞蓟宾组 10 0.10 2.15±1.09* 2.0±0.14*
*与模型对照组比较 , P<0.01
2.2 老鹳草水提取物对肝组织 GSH-Px 活性和
MDA含量的影响 由表 2可见 ,老鹳草水提取物
大 、中 、小剂量组小鼠肝组织 GSH-Px 活性明显高
于模型对照组 ,MDA 含量明显低于模型对照组 ,相
比较均有显著性差异(P <0.05 , P<0.01),提示老
鹳草水提取物对四氯化碳急性肝损伤具有保护
作用.
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Journal of Medical Science Yanbian University Sep.2009 Vo l.32 No.3
表 2 老鹳草水提取物对四氯化碳所致肝损伤小鼠肝组织
GSH-Px活性和MDA 含量的影响( x±SD) μm ol/ g 
组别 n 剂量/(g/ kg) GSH-Px MDA
正常组 10 - 328.16±28.72** 1.79±1.32**
模型对照组 10 - 183.57±19.48 12.39±1.95
老鹳草水提取物
大剂量组 10 2.00 298.25±32.61
**
6.57±1.81**
老鹳草水提取物
中剂量组 10 1.00 286.17±14.08** 6.70±1.75**
老鹳草水提取物
小剂量组 10 0.50 240.50±20.83* 5.71±1.93**
水飞蓟宾组 10 0.10 298.98±11.90** 4.48±1.52**
与模型对照组比较 , * P<0.05 , ** P<0.01
3 讨论
肝损伤是由多种病因引起的 ,具有多种因素共
同参与的复杂过程.建立实验性肝损伤模型是筛选
保护肝脏药物所必需的 ,对研究肝病的发病机制和
保护肝脏药物的作用原理具有重要意义.体内模型
特别是化学性肝损伤模型是目前国际上常用的肝损
伤模型 ,具有操作简便 ,模型病理模拟性及重复性好
等优点[ 5-6] .其中 ,四氯化碳是经典的化学性肝损伤
动物模型的毒剂 ,在整体或离体被广泛应用于肝坏
死及肝损伤的研究.此模型指标明确 ,重复性好 ,可
准确地反映肝细胞的功能 、代谢及形态变化.目前 ,
公认四氯化碳引起肝损伤的机制系四氯化碳在肝微
粒体细胞色素 P450激活下生成自由基 CCl3 ·及
C l· ,这些自由基可与肝细胞内大分子发生共价结
合 ,亦攻击膜下不饱和脂质 ,引起脂质过氧化 ,使肝
细胞损伤 ,细胞质内 A LT , AST 渗入血液 ,引起血
清 ALT ,AST 浓度升高.本实验结果表明 ,老鹳草
水提取物对四氯化碳所致小鼠血清 A LT , AST 浓
度的升高有明显的抑制作用.自由基是人体正常生
物化学过程的中间产物 ,在正常机体及病理过程中
均存在 ,同时机体在进化过程中获得了灭活氧自由
基的一些酶 ,如 GSH-Px.因此 ,只有当自由基产生
过多或者机体内的酶系统不足时才会导致疾病.氧
自由基可促使不饱和脂肪自由基形成而脂质自由基
可引起细胞膜的流动性 、通透性和完整性的破坏 ,进
而使细胞膜的双层结构发生断裂 ,引起膜镶嵌一系
列酶的排列紊乱 ,功能丧失 ,细胞的能量产生系统瘫
痪.GSH-Px 是重要的催化过氧化氢分解的酶 ,它特
异地催化还原型 GSH 对过氧化氢的还原反应 ,从
而起到保护细胞膜结构与功能完整的作用.MDA
是脂质过氧化的最终产物 ,可严重破坏细胞膜的结
构 ,导致细胞肿胀 、坏死 ,它的含量可反映组织过氧
化的损伤程度[ 7] .本实验结果表明 ,老鹳草水提取物
大 、中 、小剂量组小鼠肝组织中 GSH-Px 活性较模
型对照组显著升高 ,而 MDA 含量则显著降低 ,提示
老鹳草水提取物可能通过保护细胞膜 ,清除氧自由
基 ,抑制脂质过氧化而对受损肝细胞起到保护作用.
[参 考 文 献]
[ 1]  中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国
药典中药彩色图集[ M] .广州:广东科技出版社 , 1995.
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[ 2]  祝庭成 , 严仲铠 , 周守标.中国长白山植物[ M] .北京:
北京科技出版社 , 2003.254.
[ 3]  中西由香.老鹳草对实验性大鼠盐酸-酒精性溃疡的保
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[ 4]  徐淑云 ,卞如濂 , 陈修.药理实验方法学[ M ] .北京:人
民卫生出版社 , 2002.1346.
[ 5]  朴丽花 ,金政 , 尹哲洙.悦肝口服液对四氯化碳所致小
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