全 文 ：薄层扫描法测定水蜡树果实及叶子中齐墩果酸的含量
金　瑛 , 许英爱 , 王艳军 , 梁　毅(吉林军医学院 , 吉林　132013)
摘要:目的:建立水蜡树(Ligustrum obtusifolium Sieb.et Zucc.)中齐墩果酸的含量测定方法。方法:采
用双波长薄层扫描法对水蜡树果实及叶子中齐墩果酸进行含量测定 。结果:测得水蜡树果实中含
量为 0.395%,叶子中含量为0.228%,平均回收率为 99.3%, RSD 为 2.08%。结论:本法简便可靠 ,
结果稳定 ,重现性好 。
关键词:水蜡树 ,齐墩果酸;薄层扫描
中图分类号:R927.2　　　文献标识码:B　　　文章编号:1006-0111(2000)03-0157-02
Determination of oleanolic acid in the fruit and leaves of Ligustrum obtusi-
folium .by thin-layer scanning chromatography
JIN Ying ,XU Ying-ai ,WANG Yan-jun ,LIANG Yi(Jilin Military Medical College , Jilin 132013)
ABSTRACT:OBJECTIVE:To establish a mothod for the determination of oleanolic acid in the fruit and
leaves of Ligustrum obtusifolium Sieb.et Zucc.METHOD:Thin-layer scanning chromatography(TLC)was
used.RESULTS:The concentration of oleanolic acid was 0.395%in the fruit and 0.228% in the leaves.The
average recovery rate was 99.3% and RSD was 2.08%.CONCLUSION:The method is simple and reliable.
The results are steady and reappearance is good.
KEYWORDS:Ligustrum obtusifolium;oleanolic acid;thin-layer scanning chromatography
　　水蜡 树(Ligustrum obtusifolium Sieb.et
Zucc.)是木犀科女贞属植物 ,其中含有活性成
分齐墩果酸。近年来研究表明齐墩果酸有抑
瘤 、防治肝炎 、肝硬化 、升白 、生血 、增强机体免
疫功能等作用 , 是当前治疗肝炎的有效成
分[ 1 ,2] 。本文采用薄层扫描法对吉林地区水蜡
树果实及叶子中齐墩果酸的含量进行测定 ,以
期对水蜡树的资源开发利用提供科学依据。本
方法简便 、快速灵敏 、稳定性好 ,提供了一种简
便可靠的分析方法。
1　仪器和材料
Cs-930双波长薄层扫描仪(日本岛津);
点样定量毛细管(Drummond J厂)。
水蜡树果实及叶子 ,1998年 12月采自吉林
市 ,经本院孙三省教授鉴定为水蜡树(Ligustrum
obtusifoLium Sieb.et Zucc.),果实及叶子均 80℃
烘干 ,研碎 ,(果实带有核)备用;齐墩果酸标准
品(中国药品生物制品检定所);硅胶 G(青岛海
洋化工厂);其他试剂均为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　实验条件
2.1.1　吸附剂　硅胶 G-0.5%CMC-Na搅拌
均匀 ,涂布于玻璃板(20cm×20cm),105℃活化
1h。
2.1.2　展开剂　环已烷∶丙酮∶乙酸乙酯(4∶2∶
1)展开 10cm 。薄层层析图谱见图 1。
2.1.3 　显色剂 　10%硫酸乙醇液 , 90℃烘
10min ,齐墩果酸斑点呈紫色。
2.1.4　仪器参数　钨灯光源 , λs =530nm , λR =
680nm ,Sλ=3 ,定量方法 EXT2 ,外标两点法 ,反
射锯齿扫描 ,获缝 1.2mm×1.2mm 。
157药学实践杂志 2000 年第 18卷第 3 期
图 1　薄层层析图谱
1.标准品溶液　2.果实供试品溶液
3.叶子供试品溶液
2.2　线性关系试验
精密吸取 1mg/ml齐墩果酸标准液 1 、2 、4 、
6 、8 、10μl点于同一薄层板上 ,依法展开 ,显色后
进行扫描测定。以齐墩果酸点样量(X)为横坐
标 ,以峰面积(Y)为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,其
回归方程为 Y =32486 6.37X -12161.98 , r 为
0.9985 ,表明齐墩果酸在 1 ～ 8μg 范围内 , 其含
量与峰面积成线性关系 ,并需采用外标两点法
测定齐墩果酸含量。
2.3　精密度试验
精密吸取 1mg/ml齐墩果酸标准品溶液 2μl
于同一薄层板上点 5 个点依法展开 ,显色 、扫
描 、测定面积积分值 。结果 RSD 为 2.06%。
2.4　稳定性试验
取齐墩果酸标准品 2μl点样展开显色后每
30min测定 1次 ,结果在 3h内斑点面积积分值
基本稳定 。测定结果 RSD 为1.02%,说明在3h
内稳定性良好。
2.5　回收率试验
取水蜡树果实 、叶子的样品溶液 2μl 点于
薄层板上各 3个点 ,再分别点加标准液 2μl ,并
随行点标准品溶液 2μl和 3μl ,果实及叶子的样
品液 2μl ,展开 、显色 、扫描 ,测定面积积分值 ,计
算回收率结果。结果见表 1。
表 1　齐墩果酸回收率试验结果
序号 样品量(μg)
加入量
(μg)
测得量
(μg)
回收率
(%)
平均
回收率
(%)
RSD
(%)
1 0.91 2.0 2.85 97.0
2 0.91 2.0 2.94 101.5
3 0.91 2.0 2.89 99.0
4 1.18 2.0 3.22 102.0
5 1.18 2.0 3.13 97.5
6 1.18 2.0 3.15 98.5
99.3 2.08
2.6　含量测定
称取水蜡树果实 5h 、叶子 10g ,加入适量氯
仿于 85℃恒温水浴中回流提取 5h ,趁热过滤 ,
残渣再加入氯仿回流 2h , 过滤 ,合并滤液 ,浓
缩 ,转移至 10ml容量瓶 ,定容至刻度 ,摇匀 ,作
为样品供试液。在同一块薄层板上点上标准品
溶液 2μl和 3μl及供试品溶液各 2μl ,展开后显
色 ,扫描 ,测定斑点面积积分值。结果见表 2。
表 2　水蜡树果实及叶子中齐墩果酸的含量
序号 测得值(μg) 齐墩果酸含量(%,g/ g)
1 1.938 0.3876
2 1.967 0.3934
3 2.025 0.4042
4 2.352 0.2352
5 2.256 0.2256
6 2.232 0.2232
1 、2 、3为水蜡树果实, 4 、5 、6为水蜡树叶子
3　讨论
本文采用双波长薄层扫描法对吉林地区水
蜡树的果实及叶子中齐墩果酸进行含量测定 。
结果表明 ,果实中含齐墩果酸 0.395%,叶子中
含齐墩果酸 0.228%。目前 ,齐墩果酸的植物
来源较少 ,不能满足临床 、科研等的需求。而水
蜡树资源丰富 ,不仅果实中含有较丰富的齐墩
果酸 ,而且叶子中齐墩果酸的含量也较高 ,所以
水蜡树可以做为提取齐墩果酸的药用植物 。
参考文献:
[ 1] 　宓鹤鸣 ,曹永兵 ,宋洪涛 ,等.女贞子中齐墩果酸含量的
动态变化研究[ J] .中草药, 1995 , 26(5):258.
[ 2] 　袁　珂.冬凌草叶中齐墩果酸的提取分离及含量测定
[ J] .中草药 , 1998 , 29(4):234.
收稿日期:1999-12-12
158 The Journal of Pharmaceutical Practice Vol.18 2000 No.3