免费文献传递   相关文献

考来木离体培养及产业化研究



全 文 :园林科技 2013年第2期 总第128期
近年来,上海绿化行业注重新优植物引种、筛
选、驯化和推广应用,显著增加了本市植物多样性水
平,改善了城市生态环境,提升了城市景观效果。 但
是,大多数景观植物的花期主要集中在早春到初夏
时期,虽然开展了色叶植物的推广应用工程,起到了
一定效果,但秋冬季节植物景观仍相对单调,广大市
民对于冬季开花植物的需求十分渴望。 市园科所针
对本市冬季开花植物较少的现状,从 2008年起就致
力于冬季开花植物的引种,收集了较多秋冬季节开
花植物。 其中从澳大利亚重点引进的考来木经过科
技人员近三年的研究最终繁育成功,并通过组织培
养方式进行了规模化繁育,其中两年生组培苗已经
高达 1m,冠幅达 60cm,并开始绽放花朵[1],其繁育技
术也申请了国家发明专利保护。
考来木(Correa carmen)是芸香科、考来木属常
绿小灌木。 该属有 11 个种,原产澳大利亚,分布较
广泛,树型不规则,有的直立、有的半匍匐生长。 叶
片短小,对生,背面多有绒毛,逆光观察时可见半透
明的油滴状斑点。花多着生于叶腋处,钟状、灯笼状、
长管状或细长管状,长 2.5cm 左右,单株花朵数量众
多,花瓣顶端多反卷呈星状,花蕊突出花瓣外,花期
长,多数品种从夏末开至晚冬、甚至初春。 花色多,
有火红色、白色、绿色、粉色、橘红色等。 在寒冷的冬
日,考来木以其浓绿的叶片、纤细可爱的繁花、五彩
缤纷的色彩夺人眼球,宛如冬季里的精灵[1]。
考来木生长环境类型多样,从沿海沙地到内陆
半干旱山地都有分布,有的生长在林下或靠近溪流
的阴凉环境中,有的暴露在海岬或沙丘中。考来木花
朵易吸引吸食花蜜的鸟类,为天然杂交种的产生创
造了条件,各属之间也易杂交。 一些品种寿命较短,
每隔 3~5年应更新,顶端修剪可促进灌木丛形成。
1 材料与方法
1.1 材料
‘风铃’考来木(Correa ‘Dusky Bells’):株型紧
凑、花朵繁茂,深红色,花期冬季,火红的花色渲染了
冬天的热闹氛围,符合国人的审美视角,园林绿化应
用价值大(图 1A)。
白花考来木(Correa alba):产于澳大利亚南部
沿海,生长繁茂,高可达 1m,冠幅 1.8m。 叶片背面有
绒毛,花朵小,白色,星形,芳香宜人,花期冬季至翌
年春季。 耐盐、耐霜冻、较耐旱,适宜海滨绿化(图
1B)。
春季取带腋芽的上述 2种考来木的节段做外植
体,进行组织培养。
1.2 方法
1.2.1 培养基配方设计
初代和增殖阶段分别采用 MS、1/2MS、WPM 为
基础培养基,添加 NAA0.1mg/L,BA 设置为 0.1、0.5、
1.0、2.0mg/L 4 种浓度梯度。
生根阶段采用 1/2MS 为基础培养基,NAA、IBA
分别设置为 0.1、0.5、1.0、2.0mg/L 4种浓度梯度。
1.2.2 培养条件
无菌苗于光照条件下培养,光照强度为 1500lx,
项目基金:上海市科技兴农重点攻关项目“优良栎类树种单株选优和扩繁技术研究”[沪农科攻字(2009)第 9-5号]资助
考来木离体培养及产业化研究
吕秀立
(上海市园林科学研究所, 上海 200232)
摘 要: 以带腋芽的茎段为外植体,对2个考来木品种进行了离体培养研究。结果表明:在1/2MS培养基上,当NAA浓
度为0.1mg/L,BA浓度取1.0mg/L时,2种考来木的增殖系数分别为3.48、2.61;生根用培养基1/2MS+IBA1.0mg/L效果
较佳,2种考来木的生根率分别可达90.00%、83.33%,适时移栽成活率可达90%。
关键词: 考来木;离体培养
11· ·
园林科技 2013年第2期 总第128期
表 1 不同激素及不同激素水平对芽增殖的影响
培养基/(mg·L-1) 接种数
诱导率/% 增殖芽数 增殖系数
风铃/白花 风铃/白花 风铃/白花
MS +BA 0.1+ NAA 0.1 30 6/4 20.00/13.33 13/7 2.17/1.75
MS +BA 0.5+ NAA 0.1 30 11/7 36.67/23.33 25/11 2.27/1.57
MS +BA 1.0+ NAA 0.1 30 13/9 43.33/30.00 31/14 2.38/1.56
MS +BA 2.0+ NAA 0.1 30 15/10 50.00/33.33 35/13 2.33/1.30
1/2MS +BA 0.1+ NAA 0.1 30 14/9 46.67/30.00 41/19 2.93/2.11
1/2MS +BA 0.5+ NAA 0.1 30 23/17 76.67/56.67 79/39 3.43/2.29
1/2MS +BA 1.0+ NAA 0.1 30 25/18 83.33/60.00 87/47 3.48/2.61
1/2MS +BA 2.0+ NAA 0.1 30 23/17 76.67/56.67 70/35 3.04/2.06
WPM +BA 0.1+ NAA 0.1 30 11/8 36.67/26.67 29/18 2.63/2.25
WPM +BA 0.5+ NAA 0.1 30 18/13 60.00/43.33 61/39 3.39/3.00
WPM +BA 1.0+ NAA 0.1 30 19/14 63.33/46.67 62/41 3.26/2.93
WPM +BA 2.0+ NAA 0.1 30 19/12 63.33/40.00 57/35 3.00/2.92
出芽外植体
风铃/白花
光周期 12h/d,温度 25℃。 各种培养基的 pH 调为
5.75,蔗糖 3%,琼脂 0.64%,分装后在高压灭菌锅中
121℃条件下保持 18min。
1.2.3 数据统计
统计数据时,每种处理调查 30个,统计诱导率、
芽增殖系数、生根率。
诱导率=出芽外植体数/接种数;芽增殖系数=增
殖芽数/出芽株数;生根率=生根株数/接种数。
1.2.4 试管苗的移栽
将生根试管苗洗净培养基后,移栽于泥炭珍珠
岩与蛭石的混合介质中,移栽初期注意保湿。
2 结果与分析
2.1 无菌苗的获得
带节茎段去叶后剪成 2 cm长的外植体,带一个
节,用自来水洗净,于超净工作台上,先用 72%的乙
醇浸泡 30s,再用 10%的“84消毒液”浸泡 12 min,最
后用无菌水冲洗 5~6次,接种于初代培养基中。
2.2 分化和增殖
接种后第 15 天可观察到,接种在 MS 培养基上
的外植体均生长不良,外植体萎蔫,叶片下垂,培养
30 天后,逐渐衰弱,直至死亡;在 1/2MS 为基础培养
基的处理中,考来木组培苗叶片绿色,生长良好,增
殖迅速;而 WPM 为基础培养基的几种处理中,组培
苗生长纤细,黄化。 由此可见,大量元素的含量以及
种类对考来木组培苗的生长影响明显。
增殖培养一般以 2~3 个芽为一丛,粗壮的大芽
可切成带两个节位的茎段,插植于增殖培养基上诱
导不定芽的分化。随着细胞分裂素浓度的提高,诱导
率及增殖系数都随之升高,当 BA 浓度达到 1.0mg/L
时,二者达到最高值(表 1)。 当 BA 浓度为 2.0mg/L
时,腋芽也容易萌发形成丛生芽,但叶柄基部易产生
愈伤组织,致使叶片从产生愈伤组织的地方脱落,继
续培养,在丛生芽的基部也形成愈伤组织团块,进而
影响丛生芽从培养基中吸收营养,致使生长变缓慢,
降低了增值系数。 这与同科异属的日本无刺花椒 [2]、
两面针[3]组培时情况类似。
综合考虑,初代和增殖培养以培养基 1/2MS+BA
1.0mg/L+NAA 0.1mg/L 比较适宜, 在该培养基上两
种考来木的诱导率分别为 83.33%和 60.00%,增殖
系数分别为 3.48(图 1C)和 2.61(图 1D)。
2.3 生根培养
生根培养时,发现添加 NAA的培养基容易引起
组培苗基部愈伤化,生根率较低;而添加 IBA 的培
养基容易生根,且没有愈伤组织生成,培养 15 天左
右幼苗基部即可分化出许多白色的根原基,30 天后
根可伸长至 4~6cm, 且须根众多, 枝叶均能正常生
长,形成完整的试管苗。 附加 IBA浓度低于 1.0mg/L
时,生根率随浓度的增加而增加,产生不定根的时间
随浓度的增加而缩短,当超过这一域值时,生根率开
始下降,同时产生的不定根有畸形现象,并出现愈伤
组织。 在培养基 1/2MS+IBA 1.0mg/L 中,2种考来木
生根率分别达到 90%(图 1E)、83.33%(图 1F),因此
该培养基可以作为合适的生根培养基(表2)。切割不
定芽诱导生根时,基部要注意切除干净,切口平整,
保留芽的高度以 2cm左右为宜。
12· ·
园林科技 2013年第2期 总第128期
2.4 试管苗移栽
根系长至 0.5cm 左右时,选择根系发达生长健
壮的无菌苗,室内开瓶炼苗 3天,取出后洗净根部琼
脂,在温室中驯化 15天后,即可移栽室外,给予肥水
管理。考来木在 9、10月份试管苗移栽其成活率可达
90%(图 1G、H)。
3 讨论
考来木属是澳大利亚的特有属,我国首次引种,
引种费用极高,在上述研究的基础上,项目组进行了
考来木组培苗的产业化生产,生产出了种性一致的
考来木种苗 30万株,为进一步进行考来木的绿化栽
培和适应性试验奠定了种源基础。
考来木作为新引进的园林观赏树种,它有常绿、
冬花、耐干旱、耐盐碱的优良特性,并通过本研究种
苗产业化也取得了突破,但该属植物在我国尚属首
次引种,其适应性、抗逆性以及栽培特性还不很清
楚,需经进一步引种试验再行推广。
参考文献
[1] 吕秀立. 冬之精灵-考来木[J]. 园林,2011(6):76
[2] 陈宵鹏,吕瑞娥. 日本无刺花椒的组培快繁技术[J]. 林业
实用技术,2005(9):23-25
[3] 王小敏,蒋 波,徐敏慧,马华材,苏文韬. 两面针的组织
培养与快速繁殖 [J]. 玉林师范学院学报 (自然科学 )
2005,26(5):70-74
培养基/(mgoL-1) 接种数/ 个
生根外植体/个 生根率/% 愈伤程度
风铃/白花 风铃/白花 风铃/白花
1/2MS + NAA 0.1 30 4/3 13.33/19.76 有愈伤组织
1/2MS + NAA 0.5 30 9/10 30.00/33.3 有愈伤组织
1/2MS + NAA 1.0 30 11/13 36.67/43.33 有愈伤组织
1/2MS + NAA 2.0 30 11/12 36.67/40.00 愈伤组织严重
1/2MS + IBA 0.1 30 7/8 23.33/26.67 无愈伤组织
1/2MS + IBA 0.5 30 17/18 56.67/60.00 无愈伤组织
1/2MS + IBA 1.0 30 27/25 90.00/83.33 无愈伤组织
1/2MS + IBA 2.0 30 18/19 60.00/63.33 少量愈伤组织
表 2 不同激素及不同激素水平对生根的影响
图 1 A:‘风铃’考来木;B:白花考来木;C:‘风铃’考来木增殖培养;D:白花考来木增殖培养;E:‘风铃’考来木生根;F:白花考来
木生根;G~H:考来木移栽
A B C D
E F G H
13· ·