全 文 ：华西药学杂志
W C J P S　2007, 22(4):416 ～ 418 　　
作者简介:徐伟娟(1982 -),女 ,正攻读生物药剂学专业的硕士学位。
*通讯作者(Correspondent author), E -m ail:jxh1013@ vip. 163. com
千金藤素在大鼠肠道内的吸收动力学
徐伟娟 ,蒋学华* ,张若琪
(四川大学华西药学院 , 四川 成都 610041)
摘要:目的　考察千金藤素在大鼠肠道内的吸收动力学。方法　采用大鼠在体肠吸收方法 , 用 H PLC对循环液中的千金藤
素进行分析。结果　千金藤素在大鼠肠道内无特定吸收部位 ,全肠道均有较好吸收。 十二指肠 、空肠 、回肠 、结肠的每小时吸
收百分率(中浓度)分别为 16. 99%、17.09%、18.00%、 15. 4%。不同浓度千金藤素在大鼠肠道内的吸收速率常数 ka经方差分
析无显著性差异(P >0. 05), 千金藤素吸收机理为被动扩散。结论　千金藤素在整个肠道内均有吸收 , 其口服制剂应以提高
生物利用度为主要目标。
关键词:千金藤素;吸收动力学;在体肠循环;高效液相色谱法
中图分类号:R969.1　　 文献标识码:A　 　文章编号:1006 - 0103(2007)04 -0416 - 03
Absorption kinetics of Cepharanthine in the intestines of rats
XU Wei- juan, JIANG Xue -hua* , ZHANG Ruo - qi
(West China S chool of Pharmacy, S ichuan University, Chengdu 610041, China)
Abstrac t:OBJECTIVE　To inve stiga te the abso rption k ine tics o f Cepharanthine(Cep) in intestine s of ra ts and the influence of the
diffe rent d rug so lution concen tra tion on the abso rption. METHODS　The abso rption kine tics w as inve stiga ted using the me thod of in
situ perfusion in ra ts and the sam plesw ere de te rm ined by HPLC. RESULTS　Cep w as abso rbed qu itew e ll at all segm en ts o f intestine
in ra ts and no spec ific absorption w as founded in differen t segm ent. The abso rption percen tage in one hou r(P%, m edium concen tra-
tion) in each segm ent(duodenum , jejunum , ileum and co lon) o f intestines w as 16.99%、 17. 09%、18.00% and 15.4%, respective-
ly. Com pa red ka o f th ree differen t concentration o f Pe rfusion so lu tion w ith variance ana ly sis me thod, ka o f Cep had no significant d iffe r-
ence s(P >0.05). Cep was abso rbed m a in ly via passive transpo rt mechanism. CONCLU SION　Cep can be abso rbed in the who le
intestina l segm ents, and Cep susta ined re leased form ula tions can be prepared. The p repa ra tion o f o ra l fo rmu lations o f C ep should be
considered to enhance the bioavailability o f Cep.
K ey words:Cepharanthine;Abso rption kine tics;In situ pe rfusion expe rim ent;HPLC
CLC num ber:R969.1　 D ocum ent code:A　 A rtic le ID:1006 - 0103(2007)04 - 0416 -03
　　千金藤素 (Cepharanthine, Cep)为双苄基异喹
啉类生物碱 ,是从防己科千金藤属药用植物中提取
分离所得 ,不但具有抗肿瘤 、抗疟疾 、消炎 、抑菌 、调
节免疫功能等作用[ 1] ,而且还具有刺激网状内皮系
统 、活化造血组织 、促进骨髓组织增生的功能。临床
上用于防治肿瘤患者因放 、化疗及其他原因所致的
白细胞减少症 ,被认为是一种低毒有效的升白细胞
药物[ 2] 。现采用大鼠原位灌注模型 ,考察了 Cep在
大鼠胃肠道的吸收特征及机理 ,为开发更安全有效
的口服新制剂打下基础。
1　实验部分
1.1　仪器 、试药与动物
LC - 10AT高效液相色谱仪包括 SPD - 10AV
紫外检测器 , LC - 10AT泵 (日本岛津 );HL - 2型恒
流蠕动泵 (上海青浦沪西仪器厂 );TU - 1800紫外
可见分光光度计 (北京普析通用仪器有限公司 )。
千金藤素 (Cep)原料药 (昆明长春花科技有限公
司);Cep对照品 (中国药品生物制品检定所 )。 SD
大鼠 (四川大学华西实验动物中心 , 合格证号
0003481), ♂,体重 250±20 g。
1.2　方法与结果
1.2.1　溶液的制备　取约 5 mg Cep对照品 ,精密
称定 ,置 10 m l棕色量瓶中 ,乙醇定容 , 摇匀 , 即得
Cep对照品溶液 , 4℃冷藏保存 。取约 25 mg Cep,精
密称定 ,置 50m l棕色量瓶中 ,乙醇定容 ,摇匀 ,即得
Cep贮备液 , 4℃冷藏保存 。称取 7.8 g N aC l、0.35 g
KC l、0.37 g CaC l2 、1.37 g NaHCO3 、0.32 g NaH2PO4、
0.02 gM gC l2 、1.4 g葡萄糖 ,加适量二次蒸馏水使成
1 L,然后用稀盐酸调 pH5.0,即得 K - R试液。将
此试液进行大鼠小肠循环灌注 2 h ,即得空白循环
液。取酚红适量 ,精密称定 ,用 K - R试液定容 ,配
成 20 μg m l-1的酚红液 。分别精密量 Cep贮备液
适量 ,置棕色量瓶中 ,用酚红液定容 ,摇匀 ,配制得每
DOI牶牨牥牣牨牫牫牱牭牤j牣cnki牣wcjps牣牪牥牥牱牣牥牬牣牥牨牰
50 m l含 Cep 0.36、0.72、1.80 mg,酚红 1 mg的低 、
中 、高剂量的肠循环供试液。 HPLC法所用溶剂均
为色谱纯;水为二次重蒸水 。
1.2.2　循环液中酚红的测定　用 K - R试液配制
10、20、30、40、50、60μg m l-1的酚红液 (以 0.2mol
L
- 1的氢氧化钠溶液显色 ), 分别测其吸光度。以吸
光度对浓度进行线性回归 , 得回归方程为:A =
0.015C+0.006(r=0.9999)。酚红在 10 ～ 60 μg
m l
-1与吸光度的线性关系良好 。 60、30、10 μg m l-1
的平均回收率分别为 100.9% , 101.0%, 100.2%,
RSD分别为 1.15%, 1.10%, 1.04%(n=5)。
1.2.3　循环液中 Cep的 HPLC测定　色谱柱为 Di-
amosilTM C18(250mm ×4.6 mm , 5 μm), D iamosil保
护柱;流动相为甲醇 -水 -三乙胺 (85： 15：
0.05);流速 1.0 m l m in- 1;柱温 30℃;测定波长 283
nm;进样量 20 μl。取空白循环液 、Cep对照品溶液 、
Cep空白循环液 ,用乙醇等量稀释 ,取 20 μl进样 ,在
上述色谱条件下分离测定 (图 1)。结果表明 ,空白
循环液不干扰药物的测定 , Cep对照品峰与样品中
Cep峰的保留时间一致 ,约为 9.2 m in。样品溶液中
其他成分在此色谱条件下不干扰测定 。量取 Cep对
照品液适量 , 置 10 m l棕色量瓶中 ,用无水乙醇定
容 ,摇匀 ,得系列标准工作液 , 取 20 μl进样测定 。
在上述色谱条件下分离测定 ,记录色谱图 ,以浓度
(μg m l-1)为横坐标 ,分别以 Cep峰面积为纵坐标 ,
直线回归 ,得回归方程为:A=1.036×104C +16.362
(r2 =0.9999)。在 4.0 ～ 100.4μg m l-1浓度与峰面
积呈良好的线性关系 。配制低 、中 、高 3种浓度的肠
灌注液 ,乙醇等量稀释后进样 ,其回收率 、日内精密
度 、日间精密度见表 1。
图 1　空白人工胃液(A)、CEP对照品溶液(B)和样品溶液 (C)的
HPLC色谱图
F ig 1　HPLC chroma togram s of C ep blank perfusion solution(A),
CEP contro l so lution(B) and sample solution (C)
1.2.4　大鼠的在体小肠吸收　取大鼠 15只 (实验
前禁食 12 h、自由饮水 ) , 随机均分为 3组 , ip戊巴
比妥钠 40mg kg -1 , 麻醉后固定。切开腹部 , 在实
验肠管两端各切一小口 , 在上端小口处插入玻璃管
并结扎。用注射器将 37℃的生理盐水缓缓注入肠
管 , 洗净肠管内容物。在实验肠管下端小口处插入
玻璃管并结扎 。取 50 m l用 K - R试液配制的供试
药液 (含酚红 20 mg L -1) , 以 5m l m in- 1流速循环
10m in后 ,将流速调为 2.5m l m in-1 , 2 h内 , 每隔
15m in取两份 0.5m l样品 ,补加 1m l酚红溶液。由
酚红浓度的改变校正小肠中 Cep的剩余药量 。
表 1　回收率与精密度的测定结果(n=5)
Tab le 1　R esults of recovery and precision (n=5)
Dose
M easu red
w ith in day /
μg m l- 1
M easured
between days /
μg m l- 1
Recovery /
% X /%
RSD /
%
Low 1. 213 2. 201 98. 40 97. 65 0. 6546
M ed ium 1. 091 1. 209 95. 45 0. 499
H igh 0. 546 1. 012 99. 11 0. 1536
1.2.5　稳定性考察　取低 、中 、高浓度的小肠循环
液 , 置 37℃水浴中 , 分别于 0、0.5、1.0、1.5、2.0 h
取样 , 乙醇等量稀释溶解 ,测定峰面积。计算 Cep
在空白灌注液中的剩余百分数 (表 2)。由表 2可
知 , 2 h内千金藤素在肠循环液中稳定。
1.2.6　肠壁对 Cep的物理吸附 、代谢和摄取　剪取
大鼠小肠 ,剖开洗净 ,置 “ 1.2.1”项下供试液中 ,孵
育(37℃±0.5℃)2 h,测定孵育前后 Cep的浓度 ,计
算孵育后 Cep的剩余百分比 ,低 、中 、高浓度分别为
98.9 %、98.4 %、99.3 %。可认为大鼠肠壁对 Cep
无显著物理吸附 、代谢或摄取 。
表 2　Cep在空白灌注液中的剩余百分数(%, n=3)
Tab le 2　R est percentage of Cep in b lank perfusate (%, n =3)
Dose 0 h 0. 5 h 1. 0 h 1. 5 h 2. 0 h
Low 100. 0 99. 7 100. 1 99. 2 99.0
M ed ium 100. 0 99. 2 99. 5 99. 3 99.1
H igh 100. 0 99. 5 99. 0 99. 3 99.6
1.2.7　小肠对药物的吸收　取健康 SD大鼠 15只 ,
随机分成 3组 ,按照 “ 1.2.4”项方法 ,自十二指肠上
部及回肠末端插管 ,分别用高 、中 、低供试液进行原
位肠灌注实验 ,定时取样 ,测定各时间点的 Cep和酚
红浓度 ,计算剩余药量 ,并计算 ka、 t1 /2 、P%(表 3)。
由表 3、4可见 ,给予不同剂量 Cep时 , 吸收速率常
数 ka经方差分析 ,存在统计学差异 (P <0.05)。给
药剂量增大 , ka值减小 ,说明 Cep吸收机理可能为
促进扩散 。将小肠内剩余药量 3个剂量的对数对取
样时间作直线回归 , r>0.9, 提示 Cep的吸收属一
级动力学过程 。
417第 4期 徐伟娟 , 等。千金藤素在大鼠肠道内的吸收动力学 　　　
表 3　肠灌注液中剩余的 Cep药量(μg, x±s, n =5)
Table 3　Am ount of the rest Cep in perfusate(μg, x±s, n =5)
Dose
T ime
0 h 0.25 h 0.5 h 0. 75 h 1. 00 h 1.25 h 1.50 h 1.75 h 2.00 h
Low 360.63±13.21 308.68±11.02 237.98±13.58 207.87±12.95 168.10±13.69 147.24±12.87 112. 39±12.11 96.15±12.56 80.12±13.99
M edium 722.21±12.23 685.69±13.33 621.11±13.58 562.1±13.47 502.65±13.74 471.01±12.87 435. 65±11.25 409. 14±12. 83 359.62±13. 84
H igh 1789.23±11.02 1724. 96±11. 56 1652. 69±12. 16 1627.30±12.05 1574.81±11.95 1552.74±11.25 1439.23±13.21 1402.17±1. 47 1384.25±11.94
表 4　不同剂量组吸收参数(x±s, n =5)
Table 4　Absorption parameters in different concentra tion o f drug
(x±s, n=5)
Dose k a /h - 1 t1 /2 /h P /%
Low 0. 757±3. 15 0. 915±3. 15 38. 89±3. 69
M ed ium 0. 349±2. 21 1. 986±2. 21 25. 10±3. 52
H igh 0. 131±2. 47 5. 29±2. 47 11. 32±1. 25
1.2.8　在小肠内的最佳吸收部位　取 20只健康
SD大鼠 ,随机分成 4组 ,分别考察十二指肠 、空肠 、
回肠 、结肠 4个部位的吸收 。按 “ 1.2.4”项方法(灌
注液为中剂量肠循环供试液 ),自各肠道区段的两
段插管 ,进行原位灌注实验。定时取样 ,测定 Cep和
酚红浓度 ,计算各时间点供试液中剩余药量 (表 5),
并计算 ka、 t1 /2和 P%(表 6)。由表 5、6结果可知 ,结
肠 、十二指肠 、空肠至回肠四个肠段的 ka经 t检验 ,
无统计学差异 (P >0.05)。说明 CEP在整个肠段均
有吸收 ,且无特异吸收部位。
表 5　不同肠段的 CEP剩余药量(μg, x±s, n=5)
Table 5　The rest am ount of Cep in different segm ent of intestines(μg, x±s, n =5)
Segment 0 h 0.25 h 0.50 h 0. 75 h 1. 00 h 1. 25 h 1. 50 h 1. 75 h 2. 00 h
Duod enum 724. 5±14. 56 701. 0±18. 75 677. 1±21. 80 629. 1±12. 74 601. 9±25. 32 571.3±9. 51 521.3±8. 25 506.8±15. 52 465. 9±14. 79
Jejunum 730. 5±25. 82 715. 3±31. 56 681. 9±56. 32 643. 1±14. 32 598. 5±25. 68 568.6±45. 30 515.3±13. 26 499.4±11. 24 451. 8±9. 36
Ileum 718. 9±12. 89 662. 3±21. 56 635. 3±74. 21 608. 1±12. 35 589. 3±11. 11 527.2±14. 77 492.5±26. 83 459.5±24. 73 419. 9±11. 37
C olon 717. 2±14. 20 700. 3±52. 31 689. 3±45. 63 652. 5±35. 25 521. 1±12. 48 601.8±65. 21 588.2±21. 45 544.1±11. 02 505. 6±21. 40
表 6　不同肠段的吸收参数(x±s, n =5)
Table 6　Absorption param eters in different segm ent(x±s, n =5)
Segments k a /h t1 /2 /h
-1 P /%
Duod enum 0. 225±0. 32 3. 08±0. 32 17. 85±1. 25
Jejunum 0. 246±0. 25 2. 82±0. 25 19. 08±1. 58
Ileum 0. 256±0. 65 2. 71±0. 65 20. 80±2. 45
C olon 0. 171±0. 41 4. 05±0. 41 14. 75±2. 14
2　讨论
原位灌注模型常用大鼠作为实验动物 , 其吸收
特点与人体吸收具相关性[ 3] 。千金藤素为双苄基
异喹啉类生物碱 ,用盐酸调 pH5.5时可完全溶解 ,
但在实验中发现 ,循环 1 h后 , 由于肠道的调节功
能 ,循环液的 pH升至 7.0。为避免高剂量循环液中
千金藤素不能完全溶解的问题 ,将循环前 K - R液
调至 pH5.0, 2 h后循环液约为 pH6.2,此时千金藤
素的稳定性良好 ,最终使用 pH5.0的 K - R液配制
供试肠循环液 。结果显示 , 千金藤素在大鼠整个肠
道均有吸收。
参考文献:
[ 1] 　 Pam ela A , Tam ez1, D an Lan tv it, et a l. Chem osensi tiz ing action
of cepharan th ine again st d rug - resistan t humanm alaria, P lasm o-
dium fa lciparum[ J] . J E thnopharm acology, 2005, 7(98):137 -
142.
[ 2] 　 王庆端 ,江金花 ,孙文欣 ,等 .千金藤素抗炎镇痛作用的实验
研究 [ J] .中国药学杂志 , 1999, 34 (9):275 - 278.
[ 3] 　 聂淑芳 ,潘卫三 ,杨星钢 ,等 .对大鼠在体肠单向灌流技术中
重量法的评价 [ J] .中国新药杂志 , 2005, 14(10):17 - 18.
收稿日期:2006 - 11
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418 　 华 西 药 学 杂 志　　　 第 22卷