全 文 ：基金项目：国家自然科学基金资助项目(30772635)
作者简介：郭竹君（1983-），女，硕士在读，研究方向：药物分析；段宏
泉（1965-），男，教授，博士生导师，研究方向：中药和天然药物活性物
质的现代研究。
［摘要］目的：研究委陵菜黄酮在 SD 大鼠小肠内的吸收行为。 方法：应用缚管翻转肠囊法，考察委陵菜黄酮在高、中、
低 3 个浓度下在大鼠小肠内的吸收行为。 结果：在一定浓度范围内，随着委陵菜黄酮溶液浓度的升高，委陵菜黄酮在
小肠内的转运量也增加，表明委陵菜黄酮的转运具有浓度依赖性。 结论：委陵菜黄酮在大鼠小肠内的吸收过程符合一
级消除动力学模型，符合被动转运的特征。
［关键词］ 委陵菜黄酮；翻转肠囊法；肠吸收；大鼠
［中图分类号］ R969.1 ［文献标识码］ A ［文章编号］1006－8147（2009）03-0348-03
Study on absorption of potentilla flavone in isolated rat small intestine
utilizing everted-gut technique
GUO Zhu-jun1, CUI Zhi-qing2, DUAN Hong-quan1
（1.School of Pharmaceutical Sciences, Basic Medical Research Center of Tianjin；2.School of Medical Sciences,
Tianjin Medical University, Tianjin 300070，China）
ABSTRACT Objective: To study the absorption of potentilla flavone in isolated rat small intestine.
Methods: Everted-gut technique was utilized to study the absorption properties of potentilla flavone at
three different concentration range (high range, middle range and low range). Results: The absorption of
potentilla flavone increased according to their concentration in a definite concentration range, as well as a
concentration-depent. Conclution: The pharmacokinetics of gut absorption studies showes the absorption
of potentilla flavone fits to linear absorption model and the passive transport features.
KEYWORDS Potentilla flavone; Everted-gut technique; Intestinal absorption; Rat
郭竹君 1，崔志清 2，段宏泉 1
（天津医科大学 1.基础医学研究中心，药学院；2.基础医学院，天津 300070）
缚管翻转肠囊法研究委陵菜黄酮
在大鼠小肠内的吸收行为
中药委陵菜（Potentilla chinensis）又名翻白菜、
白头翁、蛤蟆草、天青地白，是一种常见的中草药，被
收载于《中国药典》2005年版。 其性寒，味苦，具有清
热解毒，凉血止痢的作用[1]。 其根含有水解鞣质和缩
合鞣质，并含有黄酮类，全草含有三萜类 [2,3] 、没食子
酸、槲皮素、柚皮素等[4,5]。有研究表明，其提取物黄酮
可以通过提高抗氧化力来体现其抗糖尿病作用[6]。通
过本课题组的前期工作， 已经分离筛选出具有抗糖
尿病作用的活性成分—委陵菜黄酮 (反式和顺式委
陵菜黄酮)，即山柰酚-3-O-β-D-(6-O-trans-对羟基
桂皮酰基）葡萄糖苷和山柰酚-3-O-β-D-(6-O-cis-
对羟基桂皮酰基）葡萄糖苷[7,8]。本文拟在前期研究结
果的基础上，通过缚管翻转肠囊法，考察在不同浓度
下委陵菜黄酮 （反式结构） 在大鼠小肠内的吸收行
为，测定其吸收转运的指标，对委陵菜黄酮药代动力
学吸收特征进行初步实验。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SD 大鼠，雄性，（200±20）g，天津医
科大学实验动物中心提供。
1.2 药物与试剂 委陵菜黄酮样品（自制，经 HPLC
天 津 医 科 大 学 学 报
JOURNAL OF TIANJIN MEDICAL UNIVERSITY
第 15卷 3期
2009 年 9 月
Vol． 15, No． 3
Sep. 2009348
分析纯度为 98%），二甲基亚砜（天津基准化学试剂
有限公司，分析纯），甲醇（天津基准化学试剂有限公
司，分析纯），台氏液（1 000 ml台氏液含：氯化钠 8 g，
氯化钾 0.2 g，氯化钙 0.2 g，二水合磷酸二氢钠 0.065 g，
七水合硫酸镁 0.26 g，碳酸氢钠 1 g，葡萄糖 1 g。用水
溶解，搅拌均匀，用前新鲜配制）。
1.3 实验仪器 恒温水浴锅 （科伟电热恒温水浴
锅，控温型 HH-2AS）；离心机（雷勃尔 LG16-B）；高
效液相色谱仪：LC-6A（输液泵），SCL-6B（检测器），
日本岛津公司 SCL-6B （控制器）， CTO-6A （柱温
箱）， 色谱柱 （Kromasil C18，250 mm×4.6 mm，5μm,
TIANHE）；混合氧气（体积比 O2:CO2=95:5，天津四知
气体厂，普通级）。
1.4 色谱条件 流动相： 甲醇∶水 （50∶50，3‰冰醋
酸）；检测波长：254 nm；柱温：30℃；流速：1.0 ml/min；
进样量：20 μl。
1.5 实验方法
1.5.1 缚管翻转肠囊模型的制备 选择禁食 24 h
（自由饮水）的健康大鼠 1 只，剪断其股静脉放血，断
颈椎处死，沿腹白线切开。从胃幽门以下 10 cm开始
向下取 14 cm 的空肠肠段，在 37 ℃充氧台氏液中小
心剥离肠表面的组织和血管 （注意不能损伤肠管），
并将肠段冲洗干净，至流出液不再浑浊，无肠内容物
为止。用玻璃棒小心将肠腔面向外翻出，使黏膜侧在
外，浆膜侧在内。 将翻转后的肠段一端用线系住，另
一端缚于中空细玻璃管凸起的一段，系牢，使得肠段
被结扎成 3 cm 长的肠囊，并将平头针头通过细玻璃
管伸至肠囊底部，在小囊内注满新鲜台氏液 1 ml。把
处理好的充满空白台氏液的肠囊放入 37 ℃充氧台
氏液中，待用。 实验装置见文献[9]。
1.5.2 供试品溶液的制备 精确称取委陵菜黄酮样
品 6 mg溶解于 0.25 ml二甲基亚砜后加入台氏液中，
分别定容为 200、75和 50 ml，配制成浓度分别为 30、
80和 120 μg/ml的供试品溶液。
1.5.3 委陵菜黄酮在离体大鼠翻转肠囊内的吸收
将翻转结扎好的肠囊分别放入高、中、低 3 个浓
度的委陵菜黄酮供试品溶液中，通入混合氧气并保
持 37 ℃恒温，考察不同浓度不同时间下肠囊对委陵
菜黄酮的吸收。在开始后 0、15、30、45、60、75、90 min
用取样针取出肠囊内所有液体（1 ml），立即液氮冻
存， 同时在肠囊内注入等量新鲜不含委陵菜黄酮的
37℃通氧台氏液，继续实验。
1.5.4 肠囊内样品液的处理方法 将不同时间点取
出的肠囊内样品液解冻后，加入等体积（1 ml）甲醇
沉淀蛋白，离心 10 min，转速 14 000 r/min。 将离心后
的上清液全部取出，微孔滤膜过滤，定容为 2 ml。 取
20 μl进液相，以外标法测定委陵菜黄酮的含量。
1.5.5 肠囊的肠面积测量 待 90 min 实验结束后，
取出肠囊，放出肠囊内的液体并用滤纸吸干。 剖开
肠段，平铺于坐标纸上，画出肠囊表面积的轮廓。
根据坐标纸上标注的肠囊表面积的范围， 来计算
肠面积。
1.6 数据处理与统计分析 以各时间点肠囊浆膜
侧溶液内的药物累积转运量(μg)与肠面积的比值对
时间(t)作图，求得转运速率 vt。其中，累计转运量 Qn=
CnV+Σ civi（n：取样次数；V：肠囊内溶液体积；c：
样品浓度；vi：取样体积）。 以委陵菜黄酮高、中、低供
试液的浓度值与其对应的转运速率 vt 进行回归，得
线性方程。 通过线性回归方程的斜率计算吸收速度
常数 Ka。
2 结果
高、中、低 3 个浓度下的吸收实验结果如表 1。
实验表明在同一浓度下，随时间的增加，委陵菜黄酮
的累计转运量呈增长趋势。 而比较不同浓度下黄酮
的转运量，则可以看出，供试液浓度增加，委陵菜黄
酮的转运量也增加。
以委陵菜黄酮在不同时间的药物累积转运量
(Q)与肠面积的比值对时间(t)回归，得到高、中、低 3
个浓度下的转运速率 vt 分别为 0.023 1、0.119 1 和
0.299 8 μg/min。随着委陵菜黄酮供试液浓度的升高，
其转运速率也增大。
以委陵菜黄酮高、中、低 3 个浓度供试液的浓
度值（C0，μg/ml）与其对应的转运速率（Vt , μg/min）
进行回归，可得线性回归方程 vt=0.003C0-0.084 7，
r=0.9716。 通过方程的斜率可得吸收速度常数 Ka=
0.003 min-1。
n-1
i-1
表 1 不同浓度和时间下委陵菜黄酮的累计转运量（μg）
时间
t(min)
0
15
30
45
60
75
90
低浓度 C 低
（30 μg/ml）
0
2.01
4.33
5.09
6.09
6.79
7.09
中浓度 C 中
（80 μg/ml）
0
5.11
9.43
14.51
20.62
27.41
34.51
高浓度 C 高
（120 μg/ml）
0
5.5916
15.024
29.546
50.158
77.560
112.05
郭竹君，等.缚管翻转肠囊法研究委陵菜黄酮在大鼠小肠内的吸收行为第 3 期 349
3 讨论
实验结果表明， 委陵菜黄酮的转运具有浓度依
赖性，且在 30~120μg/ml浓度范围内没有饱和现象[10]。
同时其吸收过程属于被动转运， 符合 Fick’s 扩散定
律[11]。 在一定的浓度范围之内，转运的速率随浓度的
升高而升高，符合一级消除动力学模型[10]。
含委陵菜黄酮的台氏液在未接触肠囊时性质比
较稳定，在 2 h之内只分解了不到 5 %，3 h 之内其中
黄酮的量分解不到 10%。 因而在 90 min 的实验中，
因台氏液的影响而分解的黄酮的量很少， 对实验数
据的影响不大。
离体组织实验不同于活体动物实验， 必须考虑
到肠囊有可能因离体时间太长而失去活性。 参考了
文献资料[12~14]，目前实验大部分在 60～90 min 内。 时
间过长不能保证肠囊的生理活性， 有可能导致肠囊
膜的通透性也发生变化。除了时间限制外，在整个实
验进行过程中还要将肠囊始终处于 37 ℃恒温的台
氏液中，同时通入混合氧气。
有文献报道指出， 黄酮类化合物易受肠组织内
的酯酶影响而水解或转化成其他物质 [14]。 因而推测
本实验中是否也存在着委陵菜黄酮的分解现象。 根
据委陵菜黄酮的化学结构和理化性质分析， 其最初
分解产物可能为肉桂酸和山柰酚-3-O-β-D-葡萄
糖苷，我们将利用高效液相-质谱联用技术进行代谢
产物的分析鉴定。
参考文献：
［1］ 冉先德 . 中华药海 （上册）[M]. 哈尔滨： 哈尔滨出版社，1996：
528-528
［2］ 王庆贺,李志勇,沈阳,等.委陵菜三萜类化学成分研究[J].中国中
药杂志, 2006,31（17）：1434
［3］ 刘普 ,段宏泉 ,潘勤 ,等 .委陵菜三萜成分研究 [J].中国中药杂志 ,
2006,31(22): 1875
［4］ 陈勇,张晴.五羟基黄酮的药理学研究近况[J].中草药,1998,29(8):
569
［5］ 冯卫生,郑晓坷,吉田隆志,等.委陵菜根中可水解丹宁的研究[J].
天然产物研究与开发,1996,8(9):26
［6］ 邹志坚. 翻白草黄酮对糖尿病大鼠抗氧化的作用[J].江西中医学
院学报,2007,19（3）:64
［7］ 赵川, 乔卫 , 张彦文，等 .委陵菜抗糖尿病有效部位及有效成分
的研究[J].中国中药杂志，2008，33(6)：680
［8］ 段宏泉，刘普，乔卫，等 .委陵菜黄酮化合物提取分离方法和应
用:中国，ZL200610015591.5[P].2006-2-21
［9］ 陈颖，郭健新，李正荣，等．翻转小肠囊法研究环孢素 A 口服纳米
脂质体在大鼠小肠的吸收行为[J]．中国药科大学学报，2003，34
(2)：137
［10］ 刘昌孝.实用药物动力学[M].北京：中国医药科技出版社，2003：3-4
［11］ 崔翰明，武凤兰. 双硒唑烷及其羟丙基-β-环糊精包合物在大鼠
胃肠道的吸收特性[J].中国新药杂志，2006，15(21)：1837
［12］ 何盛江, 栾立标. 翻转肠囊法研究吸收促进剂对小肠吸收苦参
碱的作用[J].药学进展, 2004, 28（3）:126
［13］ 郭建新, 平其能, 董隽, 等. 聚糖包衣脂质体经肠道及 Caco-2 细
胞转运机制[J].药学学报, 2005，40（1）：65
［14］ 韩国柱. 药物在肠道的代谢及其对药物作用的影响 [J]. 药学通
报，1985，20（5）：294
(2008-12-09 收稿)
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天 津 医 科 大 学 学 报 第 15 卷350