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Prevention efficiency of Exserohilum monoceras with chemical herbicides against Echinochloa crus-galli in paddy field

尖角突脐孢菌与化学除草剂混用防治稻田稗草效果的研究



全 文 :尖角突脐孢菌与化学除草剂混用防治稻田
稗草效果的研究*
陈  勇1, 2  倪汉文2* *  张宏军3  李晓晶2  李健强4
( 1 华南农业大学农学院,广州 510642; 2中国农业大学农学与生物技术学院,北京 100094; 3 农业部农药检定所,
北京 100026; 4 农业部农药化学与应用技术重点开放实验室,北京 100094)
摘要  用平板表面萌发法测定化学除草剂对尖角突脐孢菌菌株 X27 分生孢子萌发的影响,在温室研究
该菌分生孢子干粉与化学除草剂的相互作用,在田间评价其混剂的除稗效果. 结果表明,二氯喹啉酸和苄
嘧磺隆对分生孢子的萌发影响不明显, 其它除草剂均有不同程度的影响. 在温室条件下, 菌 X27 干粉与二
氯喹啉酸混用具有明显的增效作用, 与敌稗混用具有加成作用; 在水田条件下, 单用菌 X27 干粉防除稗草
效果差, 防效只有 60% ,而与低量的二氯喹啉酸混用,防效明显提高, 达 90%以上.
关键词  尖角突脐孢菌  稗草  化学除草剂  增效作用  水稻
文章编号  1001- 9332( 2005) 06- 1104- 04 中图分类号  S365  文献标识码  A
Prevention efficiency of Exserohilum monoceras with chemical herbicides against Echinochloa crusgalli in
paddy field. CHEN Yong1, 2 , N I Hanwen2, ZHANG Hongjun3 , LI Xiaojing2 , L I Jianqiang 4( 1College of Agrono
my , South China Agricultural Univer sity , Guangzhou 510642, China; 2Depar tment of Pes ticides and Plant
Quarantine, College of Agronomy and Biotechnology , China Agr icultural Univer sity , Beij ing 100094, China;
3 I nstitute f or Control of Agrochemicals , M inistry of Agr icultur e, Beij ing 100026, China; 4Key Laboratory of
Pesticide Chemical Resear ch and Utiliz ation, Minis tr y of Agr iculture, Beij ing 100094, China) . Chin. J . A p
p l. Ecol . , 2005, 16( 6) : 1104~ 1107.
This paper studied the impact of sev er al herbicides on the conidium germination of Exserohilum monoceras str ain
X27 in petr i dish, and the syner gistic effects of the pathogen and chemical herbicide quinclorac or propanil against
Echinochloa crusgalli in greenhouse. The prevention efficiency o f the tankmix tur e o f pathogen and quinclo rac
was also evaluated in paddy field. T he results showed t hat test herbicides except quinclorac and bensulfulfuron
methy l could inhibit conidium germination and hypha growth to different degree. A significant synergism w as ob
served between the pathogen and quinclor ac. Adding quinclor ac could obviously increase the prevention efficiency
against Echinochloa crusgalli . Under field condit ion, the single use o f pathogen could only control about 60% of
the w eed, while the efficiency of pathogenquinclorac mix ture could r each 90% .
Key words  Ex serohilum monoceras , Echinochloa crusgalli, Herbicide, Synerg ism, Paddy field.
* 国家农业部农业结构调整重大技术研究专项 ( 20030703B)和华
南农业大学校长基金资助项目.
* * 通讯联系人.
2004- 04- 19收稿, 2004- 11- 01接受.
1  引   言
稗( Echinochloa crusgall i ) 是世界十大恶性杂
草之一.它与水稻的伴生性强,极难清除, 是水稻田
危害最严重的杂草[ 4] , 也是棉花、大豆、玉米、小麦
和蔬菜等旱作物的主要杂草.
虽然稻田的杂草防治方法和措施不少, 但是安
全、高效和使用方便的并不多.目前国内外防治农田
稗草的措施,主要是以丁草胺单用或与其它药剂混
用的化学防除方法[ 28] . 稗草在药剂的选择压力下,
易产生抗药性[ 8] .我国稗草对丁草胺已产生了明显
的抗药性, 部分地区的稗草对禾草丹的抗药性水平
也较高[ 16, 18, 19] . 长期使用敌稗(苯酰胺类除草剂) ,
稗草体内酰胺水解酶作用加强, 引起对敌稗的抗
性[ 22, 24, 25] .为了减轻稗草抗药性的压力, 生产技术
人员也有意增加药剂种类的轮换使用和推广,但并
不能彻底解决抗性和对环境的污染问题. 研究工作
者开始寻找新的防除稗草的方法[ 15, 17, 21, 27] . 利用植
物病原真菌控制稗草的危害将是一条有效的新途
径[ 5] . 其中生物除草剂的研究和开发已成为最活跃
的领域[ 6] . 目前已推广和应用了 8个商品化真菌除
草剂[ 12, 29] .
从 20 世纪 90年代初起, 研究工作者开始进行
微生物除稗剂的研究和开发.微生物除稗成为研究
应 用 生 态 学 报  2005 年 6 月  第 16 卷  第 6 期                               
CHINESE JOURNAL OF APPLIED ECOLOGY, Jun. 2005, 16( 6)!1104~ 1107
热点. 各国已采集到并显示出较好应用前景的稗草
病原菌有稗叶枯菌 ( H elminthosp or ium sativum )、
刺盘孢( Colletot richum graminicola)、弯孢( Curv u
lar ia lunata, C lunata)、链格孢( A lter naria al ter
nata, A  tenuissima, A  tr iti cina and A  br assicae)、
尖角突脐孢( Ex ser ohilum monoceras ) [ 26]等. 进展比
较快的国家和地区有日本、加拿大、澳大利亚和中国
等[ 2~ 4] ,主要集中在利用尖角突脐孢菌进行的商品
开发上.
由于生物除草剂使用活的微生物繁殖体, 所以
在适合的条件下微生物才能大量地繁殖, 快速侵染
寄主植物,使寄主病害大流行,从而杀死寄主, 发挥
药效. 生物除草剂在应用过程中对环境条件有比化
学除草剂更苛刻的要求: 一般需要在应用环境中有
较高的湿度和适宜的温度, 才能充分发挥生物除草
剂的防效;对其使用方法的要求不仅较杀虫剂、杀菌
剂等严格,且较化学除草剂的使用更严格.尖角突脐
孢菌的商品化进展一直较慢. 为了使该菌尽快应用
到生产中,采用二元混合药剂,研究了尖角突脐胞菌
与化学除草剂的互作作用, 并在大田条件下评价了
混剂对稗草的防效和对水稻的安全性.
2  材料与方法
21  供试材料
无芒稗种子采自北京水稻田,发芽率为 60% ~ 80% . 稗
苗用钵土培养至 2 叶 1 心期.尖角突脐孢菌 (菌 X27)分离自
江西石城稻田的病株稗草上,由中国农业大学农业与生物技
术学院杂草研究室提供. 菌 X27 分生孢子干粉的制备参照
文献[ 29]中液固两相生产分生孢子工艺并进行改良. 试验用
菌 X27 分生孢子干粉的含孢量为 12 ∀ 108 孢子#g- 1 . 药剂
采用 Tw een 20、60% 的丁草胺乳油(南通化工厂第二农药
厂)、50%二氯喹啉酸 (昆山化工厂)、10% 的苄嘧磺隆 (杜邦
公司)、20%敌稗乳油(北京市双桥农药厂) .
22  试验方法
221 对菌 X27分生孢子萌发影响试验  采用平板表面萌
发法,方法参照文献[ 7, 14]进行改良, 比较几种常用稻田除草
剂对菌 X27 分生孢子萌发的影响. 试验用除草剂终浓度分
别为 0 03 ml#ml- 1 60%丁草胺乳油、0 008 g#ml- 1 50%二
氯喹啉酸、0 009 g#ml- 110% 苄嘧磺隆、00005 g#ml- 120%
敌稗乳油.
222 混用效果试验  生物除稗剂用菌 X27 分生孢子干粉,
化学除稗剂用 50%二氯喹啉酸, 除稗混剂用菌 X27 分生孢
子干粉与 50%二氯喹啉酸混合.
单用生物制剂用量分别为 313、0 78、0196、0049、
0012 和 0003 g#m- 2 ,用清水配成药剂悬浮液. 单用化学制
剂用量分别为 00038、00019、0 0095、0 0048、0 0024 和
0 0012 g#m- 2 ,用清水配成药剂悬浮液. 混用的生物除稗剂
最高用量为 13 g#m- 2 ; 混用的化学除稗剂最高用量为
0 0019 g#m- 2 ,菌 X27 孢子干粉与二氯喹啉酸混合后用清
水配成药剂悬浮液, 并按 1/ 2 的倍数稀释 6 个递度, 另设清
水对照, 共计 20 个处理, 每处理重复 4 次, 所有处理均按
0 05%悬液体积的量加入 T ween 20, 化学除草剂均用有效
剂量. 喷雾量为 80 ml#m- 2 . 在 2 叶期稗草苗上进行药剂处
理后, 保湿 24 h 培养,再移到温室中培养. 处理第 10 d 记载
抑制率.
2 2 3 菌 X27 分生孢子干粉与敌稗混用试验  除稗混剂用菌
X27分生孢子干粉与 20% 敌稗乳油混合. 生物制剂用量同
上. 单用敌稗用量分别为 00072、0 0036、00018、0 009、
0 0045、0 0022 和 0 00011 g#m- 2 .混用的化学除稗剂最高
用量为 00072 g#m- 2. 其它同 2 2 2.
2 3 菌 X27 分生孢子干粉与二氯喹啉酸大田混用试验
除稗混剂用菌 X27 分生孢子干粉与 50% 二氯喹啉酸混
合.试验田设在北京市海淀区东北旺水稻田, 备没得比背式
喷雾器. 试验设单用生物除稗剂处理、单用二氯喹啉酸处理、
除稗混剂、清水对照,共 6 个处理, 重复 3 次. 试验设计采用
随机区组试验方法, 小区面积 15 m2 . 在水稻秧苗移栽后稗
草苗 2 ~ 4 叶期傍晚施用. 生物除稗剂单用量为 777 g#
hm- 2,二氯喹啉酸单用量为 40 g#hm- 2 ,每公顷除稗混剂用
量为 20 g 化学除稗剂量加上 777 g生物除稗剂. 喷水量为 99
L#hm- 2. 施药 7 d 后调查感病率,施药 14 和 30 d 后调查株、
鲜重防效和药害.
2 4 统计分析
温室试验数据在分析菌 X27 分生孢子干粉分别与二氯
喹啉酸和敌稗互作类型前, 用剂量反应曲线进行非线性回
归[ 10] ,用 4 个参数的 logist ic方程[ 9]来表示抑制率( Y )和剂
量对数( X )之间的关系:
ln Y = ln e{ (D - C)/ [ 1+ exp(- 2( a + blog10X ) )] + C}
(1)
其中, D 为上限, 即无药处理对照的平均反应; C 为下限, 即
极高剂量处理时的平均反应; a 为有效中剂量, 即引起 50%
的个体起反应的剂量, 它决定曲线的水平位置; b 为曲线在
有效中剂量附近的斜率, b值越大,曲线的坡度越陡. 用统计
软件 SPSS 非线性回归估计各参数.
菌 X27 分生孢子干粉分别与二氯喹啉酸或敌稗混用的
理论值, 用加成模型计算,共毒系数处在 05~ 2 6 为加成作
用, 小于 0 5为拮抗,大于 26 为增效作用. 大田试验结果直
接用多重比较进行.
3  结果与分析
31  稻田除草剂对菌 X27分生孢子萌发的影响
供试的除草剂对菌 X27分生孢子的萌发有不
同程度的影响.敌稗明显影响菌分生孢子的萌发,萌
发所需时间为8 h,比对照晚 4 h,而且部分萌发的分
生孢子菌丝生长不好. 丁草胺也明显推迟分生孢子
11056 期          陈  勇等:尖角突脐孢菌与化学除草剂混用防治稻田稗草效果的研究           
萌发时间,萌发所需时间为 6 h, 到 10 h 后才达到
90%的.二氯喹啉酸对分生孢子萌发的影响, 主要在
萌发开始时间, 萌发率明显低于对照, 但到 8 h后,
萌发率与对照一样.苄嘧磺隆对菌分生孢子萌发影
响不明显(图 1) .
图 1  除草剂对尖角突脐孢菌的分生孢子萌发的影响
Fig. 1 Ef fect of herbicides on conidium germinat ion of Exerohilum
monoceras.
32  菌 X27分生孢子干粉与二氯喹啉酸混用的除
稗效果
由图 2可见, 二氯喹啉酸与菌 X27分生孢子干
粉混用具有明显的增效作用. 菌 X27分生孢子干粉
与二氯喹啉酸按 026~ 074 混用, 其理论的 ED50
和ED80值分别为 1397和277 g#m - 2,而实际观察
值分别为 0395和065 g#m- 2. 按Finney 的方法计
算,在 ED50和 ED80剂量下的共毒系数分别为 354
和 426,两者均大于 26.
33  菌 X27分生孢子干粉与敌稗混用的除稗效果
由图 3可见, 敌稗与菌 X27分生孢子干粉混的
增效作用不明显. 菌 X27分生孢子干粉与敌稗按
026比 074混用, 其理论的 D50和 ED80值分别为
0899和 3042 g#m- 2,而实际观察值分别为 0388
和 1468 g#m- 2.按 Finney 的方法计算,在 ED50和
ED80剂量下的共毒系数分别为 2316 和 2073, 两
者均小于 26.

图 2  二氯喹啉酸与菌X27混用剂量与抑制率的反应曲线
Fig. 2 Relationship betw een biomass reduct ion and applicat ion rate of the
mixture of E monoceras plus quin clorac.
生物除稗剂的浓度回归前进行了转换(药剂用量 ∀ 10- 3) ,使生物除
稗剂的使用浓度与化学制剂的使用浓度在一个数量级中 Dose of
quinloac w as transformed ( the dose∀ 10- 3) before doing the nonlinear
regression . ∃、% 菌孢子粉 E . monoceras conidium flour; &、∋  二
氯喹啉酸 Quinclorac; (、) 混剂 Mixture of E . monoceras plus quin
clorae; ∗ 混剂理论曲线M ixture of E. monoceras plus quinclorae the
ory curve.下同T he same balow.
图 3  敌稗与菌 X27混用的剂量与抑制率的反应曲线
Fig. 3 Relationship betw een biomass reduct ion and applicat ion rate of the
mixture of E. monoceras plus propan il.
34  菌 X27分生孢子干粉与二氯喹啉酸大田混用
的除稗效果
施药后 7 d 水田稗草出现明显的病害,具有发
生大流行的趋势, 特别是混用药剂的处理区,发病明
显较重.单用生物除稗剂,株防效和鲜重防效均不理
想,而与二氯喹啉酸的混用, 效果明显增加,特别表
现在鲜重防效上的增加(表 1) .在试验期间各处理
小区水稻没有出现药害症状.
表 1  菌孢子粉与二氯喹啉酸混用的田间除稗效果
Table 1 Efficacy of the mixture of Exerohi lum monoceras plus quinclorac against Echinochlao crusgall i in rice
处理
T reatment
药量
Rate
( g#hm- 2)
14 d
株平均数
No.
株防效
No.
reduct ion
( % )
鲜重平均值
Fresh
w eight
( g)
鲜重抑制率
WT reduct ion
( % )
60 d
株平均数
No.
株防效
No.
reduct ion
( % )
鲜重平均值
Fresh
w eight
( g)
鲜重抑制率
WT reduct ion
( % )
EM CF菌孢子粉 Exerohilum
monoceras conidium flour
7 770 35b 45 161b 61 68b 28 2 060b 56
二氯喹啉酸
Quinclorac
400 14c 78 121b 71 17c 82 997c 79
混剂
M ixture
7 970 31b 52 40c 90 14c 85 557c 88
对照
U ntreated
63a 417a 95a 4 667a
每列数字后有不同小写字母,分别表示差异显著( P < 005) Follow ed by the same let ter in a column are not signif icant ly diff erent according to Dun
can+ s mult iple range test ( P < 005)M ixture: M ixture of E monoceras plus quinclorac.
1106                    应  用  生  态  学  报                   16 卷
4  结   语
  由于真菌除草剂的药效受环境条件影响较大,
在自然条件下单用的除草效果往往不理想. 尖角突
脐孢菌在 25~ 30 , 、24 h的露水期以上时, 可完全
杀死稗草植株[ 12] .在水田的环境条件下单用该菌的
分生孢子粉对稗草的效果较差, 防效只有 60% . 一
方面在大田状态下无法连续保持 24 h 高湿度条件,
满足该菌的侵染条件; 另一方面是该生物除稗剂剂
型不够成熟, 只加了一定比例的吐温 20,没有其它
任何助剂, 因此药效不能充分发挥[ 1, 11, 20, 23] . 同样
在大田环境下, 通过与二氯喹啉酸混用,降低了该菌
生物除草剂对湿度的依赖, 可使防效提高到 90% .
生物除草剂与化学除草剂的复配施用可能是一条很
好的途径.
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作者简介  陈  勇, 男, 1969 年, 副教授, 博士. 主要从事微
生物除草剂研究. Email: chenyongcwc@ tom. com
11076 期          陈  勇等:尖角突脐孢菌与化学除草剂混用防治稻田稗草效果的研究