全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2012，27(5)∶576 ～ 578
基金项目:国家科技支撑计划项目(2012BAI27B07) ;四川省科技支撑计划(2011SZ0233) ;四川省杰出青年学术技术带头人后续计划
(2011JQ0051) ;四川省中医药管理局科技专项(2008 － 32)
作者简介:李莹(1982—) ，女，吉林伊通，正攻读中药学专业的博士学位。
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:yuanliu163@ yahoo． com． cn
HPLC测定蜀五加和糙叶藤五加中的金丝桃苷
李 莹1，2，3，左 旭1，李艳丹1，刘 圆1* ，夏 清2
(1．西南民族大学民族医药研究院，四川 成都 610041;2．四川中医药高等专科学校，四川 绵阳 621000;3． 成都中医药大学药
学院，四川 成都 611137)
摘要:目的 采用 LC － MS定性鉴别蜀五加和糙叶藤五加中的金丝桃苷;采用 HPLC测定蜀五加和糙叶藤五加中金丝桃苷的
含量，并比较两种五加不同药用部位的金丝桃苷含量。方法 采用 Kromasil C18柱(150 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，柱温 30 ℃，流动
相以甲醇(A)和 0． 5%磷酸水溶液(B) ，梯度洗脱，检测波长 358 nm，流速 1． 0 mL·min －1。结果 金丝桃苷 0． 0250 ～ 1． 25 μg
与峰面积具有良好的线性关系，回归方程为:Y = 4 × 106X + 1． 327 × 104(r = 0． 9999) ，平均回收率为 100． 25 %，RSD = 0． 96 %
(n = 9)。结论 所用方法简便、准确、重复性好，可用于蜀五加和糙叶藤五加药材质量控制方法的研究。
关键词:蜀五加;糙叶藤五加;金丝桃苷;LC － MS;高效液相色谱法
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2012)05 － 0576 － 03
Determination of hyperoside in Acanthopanax setchuenensis and Acanthopanax leucorrhizus
var． fulvescens by HPLC
LI Ying1，2，3，ZUO Xu1，LI Yan － dan1，LIU Yuan1* ，XIA Qing2
(1． Ethnic Medicine Institute of Southwest University for Nationalities，Chengdu，Sichuan，610041 P． R． China;2． Sichuan College of
Traditional Chinese Medicine，Mianyang，Sichuan，621000 P． R． China;3． Traditional Chinese Medicine College of Pharmacy，Cheng-
du University of TCM，Chengdu，Sichuan，611137 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To determine hyperoside of Acanthopanax setchuenensis Harms ex Diels and A． leucorrhigus var． fulvescens
Harms ＆ Rehd by LC － MS． And to establish a RP － HPLC method to determine the hyperoside content from different medical parts of
those two plants．METHODS The analysis was carried out at 30 ℃ on a Kromasil C18 column eluted with a mobile phase consisted of
methanol(A)－ 0． 5% phosphoric acid(B)． The detective wavelength was at 358 nm with the flow rate of 1． 0 mL·min －1 ． RESULTS
The calibration curve was linear within the concentration range of 0． 025 － 1． 25 μg with r of 0． 9999． The average recovery was
100. 25% with RSD of 0． 96%(n = 9)． CONCLUSION This method was simple，accurate and replicable． It was useful for the study
of the quality control of A． setchuenensis Harms ex Diels and A． leucorrhigus var． fulvescens Harms ＆ Rehd．
Key words:A． setchuenensis Harms ex Diels;A． leucorrhigus var． fulvescens Harms ＆ Rehd．;Hyperoside;LC － MS;RP － HPLC
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2012)05 － 0576 － 03
蜀五加 Acanthopanax setchuenensis Harms ex
Diels 和糙叶藤五加 A． leucorrhigus var． fulvescens
Harms ＆ Rehd．分别为五加科五加属植物。二者在
民间都作为五加皮类药材使用，在四川和陕西等地，
蜀五加主要以茎皮入药，在湖南、广东、广西、四川个
别地区的糙叶藤五加主要以茎皮或根入药［1］。课
题组在四川阿坝州、甘孜州实地考察发现:四川藏、
羌地区的民间广泛食用其嫩芽，认为具有驱风除湿、
强壮筋骨的作用，是极具开发价值和发展前景的新
药食同源植物。蜀五加和糙叶藤五加同科同属药用
植物刺五加和红毛五加中均含有金丝桃苷 (Hyp)
成分［2 － 3］。Hyp是黄酮醇苷类化合物，具有显著的
局部镇痛作用，效果介于吗啡和阿司匹林之间，且无
依赖性，是一种新型局部镇痛药［4 － 5］;Hyp 对心肌、
肝脏、脑缺血损伤和脑梗死等均有保护作用，对循环
系统、神经系统、消化系统、免疫系统等具有调节活
性，还具有抗氧化、抗乙肝病毒的作用，临床上主要
用于治疗心脑血管疾病，抗菌、抗炎、止咳、平喘、祛
痰等疗效突出。实验拟先采用 LC － MS联用技术定
性鉴别蜀五加和糙叶藤五加中的金丝桃苷;进而采
用 RP － HPLC 测定并比较两者不同药用部位中金
丝桃苷的含量，以期为两种药材的质量控制、资源的
合理应用和寻找金丝桃苷新的药材来源提供参考。
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2012.05.017
1 实验部分
1． 1 试药与仪器
2695 高效液相色谱系统(美国 Waters) ;Em-
power 色谱工作站;LCQ 型质谱仪(美国 Finigan)。
金丝桃苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号:
111521 － 200303) ;甲醇为色谱纯;其余试剂为分析
纯;药材样品来源见表 1，均采自四川省甘孜藏族自
治州康定县，并经鉴定。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 检测条件 质谱条件为电喷雾电离源(ESI) ，
鞘气为 N2，流速为 30 arb;辅助气为 N2，流速为 5 arb;
雾化电压 3． 5 kV;毛细管电压 9． 66 V;毛细管温度
300 ℃;离子极性为负离子。色谱柱为 Krosmasil C18
(150 mm × 4． 6 mm，5 μm) ;流动相 A 为甲醇，B 为
0. 5%磷酸，梯度洗脱程序为:0 ～ 5 min、A － B 30% ～
35%，5 ～ 15 min、35% ～ 40% A，15 ～ 30 min、40% ～
50% A;检测波长 358 nm;柱温 30 ℃;流速 1． 0 mL·
min －1。对照品及样品溶液的色谱图见图 1。
A B C D E F
2 10 18 26 2 10 18 26 2 10 18 26 2 10 18 26 34 2 10 18 26 34 400 450 500 550
t/min
H
yp
er
os
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H
yp
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462.88
图 1 金丝桃苷对照品(A)、蜀五加茎皮(B)、蜀五加叶(C)、糙叶藤五加茎皮(D)、糙叶藤五加叶(E)溶液的色谱图和金丝桃苷的质谱图(F)
Fig 1 HPLC chromatograms of control solution (A)，cortex solution of A． setchuenensis(B)，leaf solution of A． setchuenensis(C)，cortex
solution of A． leucorrhigus var． fulvescens(D)，leaf solution of A． leucorrhigus var． fulvescens(E)and MS chromatograms of hypero-
side control(F)
1． 2． 2 溶液的制备 精密称取金丝桃苷对照品适
量，加甲醇配制成 25． 00 μg·mL －1的对照品溶液。
取药粉(过 40 目筛)约 2 g，精密称定，置圆底烧瓶
中，加入石油醚 25 mL，加热回流 1 h，取出，过滤，弃
去滤液，挥去溶剂，滤渣中加入 25 mL 甲醇，精密称
定重量，回流 2 h，取出，放冷，用甲醇补足减失的重
量，摇匀，过滤，取续滤液作为样品溶液。
1． 2． 3 线性关系的考察 按“1． 2． 1”项下的色谱
条件，分别精密量取金丝桃苷对照品溶液 1、2、4、6、
10、20、50 μL，进样，测定峰面积。以进样量(μg)为
横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，回归方程
为:Y = 4 × 106X + 1． 327 × 104(r = 0. 9999) ，线性范
围为 0． 025 ～ 1． 25 μg。
1． 2． 4 精密度试验 精密吸取对照品溶液 10 μL，
重复进样 6次，记录色谱图，按峰面积计算金丝桃苷
含量，RSD =0． 97 %(n =6)。表明仪器精密度良好。
1． 2． 5 稳定性试验 精密量取样品溶液 10 μL，分
别于 0、2、4、6、8 h时按“1． 2． 1”项下的色谱条件测
定。按金丝桃苷峰面积计算其含量，RSD = 1. 07%。
表明样品溶液在配制后 8 h内稳定。
1． 2． 6 重复性试验 取蜀五加茎皮样品 6 份，按
“1． 2． 2”项下方法制备样品溶液，按“1． 2． 1”项下色
谱条件测定。计算得蜀五加茎皮中金丝桃苷含量的
均值为 88． 53 μg·g －1，RSD = 1． 1 %(n = 6) ，表明分
析方法的重复性良好。
1． 2． 7 加样回收率试验 称取已测定的蜀五加叶
样品 9 份，每份 2 g，精密称定，依次加入低、中、高浓
度金丝桃苷对照品溶液，按“1． 2． 2”项下方法制备
样品溶液，按“1． 2． 1”项下色谱条件测定。计算得
平均回收率为 100． 25%，RSD = 0． 96 % (n = 9)。
1． 2． 8 样品的测定 对比对照品和样品，质谱图见
图 1F。金丝桃苷的［M － H］－为 m/z 462． 88。将对
照品溶液及样品溶液按“1． 2． 1”项下色谱条件测
定，每次进样 10 μL。测定时发现:蜀五加叶中金丝
桃苷的含量超过标准曲线的线性范围，故取该样品
按“1． 2． 2”项配好的溶液 2 mL 稀释到 10 mL，再按
“1. 2. 1”项下色谱条件测定，每次进样 10 μL。测定
结果见表 1，色谱图见图 1。
2 讨论
文中蜀五加叶中金丝桃苷的含量远高于糙叶藤
五加叶、刺五加叶(260． 30 μg·g －1)和红毛五加叶
(645． 31 μg·g －1) ;几种五加中茎皮中的金丝桃苷含
量次之，根或根皮中不含此成分［2 － 3］。因此，建议经
更多相关化学成分的分析和药理实验研究后，蜀五
加可优先作为金丝桃苷的一个新资源植物。金丝桃
苷的提取方法较多，曾分别考察了用甲醇作为提取
溶剂超声 0． 5、1 h、乙酸乙酯索氏提取及石油醚先脱
775第 5 期 李 莹，等。HPLC测定蜀五加和糙叶藤五加中的金丝桃苷
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脂，再加甲醇回流的提取等 4 种方法，测定同批试样
中的金丝桃苷含量，经比较，采用文中实验方法提取
最完全［2，6 － 8］。金丝桃苷因其广泛的药理活性，在临
床上对很多疾病有非常好的疗效，故作为衡量蜀五
加和糙叶藤五加的质量评价指标是切实可行的，为
开发和合理利用两种药材提供了科学的依据。
表 1 蜀五加和糙叶藤五加不同部位金丝桃苷的含量(n =3)
Table 1 Hyperoside in different medical parts of A． setchuenensis Harms ex Diels and A． leucorrhigus var． fulvescens Harms ＆ Rehd(n =3)
药材名称及入药部位 产地 海拔 /km 金丝桃苷含 /μg·g － 1
蜀五加 A． setchuenensis茎皮 四川甘孜康定熊家坡 2760 88． 53
蜀五加 A． setchuenensis叶 四川甘孜康定熊家坡 2760 4486． 40
糙叶藤五加 A． leucorrhigus var． fulvescens茎皮 四川甘孜康定泥巴山 2780 32． 50
糙叶藤五加 A． leucorrhigus var． fulvescens叶 四川甘孜康定泥巴山 2780 760． 89
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收稿日期:2011 － 08 － 25
作者简介:曾彬(1980—) ，男，四川广汉，硕士，讲师，从事中药药剂的教学和科研工作。Email:zengbinbobo@ sina． com
HPLC指纹图谱对比研究川芎和当归的化学成分
曾 彬1，刘玉红2，刘云华2，刘倩伶2，金 虹1
(1．四川中医药高等专科学校，四川 绵阳 621000;2．四川省中医药科学院，四川 成都 610041)
摘要:目的 对比川芎、当归药材水溶性和脂溶性成分的 HPLC指纹图谱。方法 分别收集 12 批川芎、10 批当归药材，采用
HPLC建立指纹图谱;色谱条件为 LUNA C18色谱柱(150 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，流动相为甲醇 － 1%冰醋酸，进行梯度洗脱，检
测波长 280 nm，流速 1． 0 mL·min －1，柱温 35 ℃。结果 分别建立了川芎、当归药材水溶性和脂溶性成分的 HPLC指纹图谱共
有模式。结论 所建立的指纹图谱可作为区分川芎、当归药材的参考依据。
关键词:川芎;当归;阿魏酸;高效液相色谱法;指纹图谱
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2012)05 － 0578 － 04
Comparison of components between Ligusticum chuanxiong and Angelia sinensis by HPLC
fingerprints
ZENG Bin1，LIU Yu － hong2，LIU Yun － hua2，LIU Qian － ling2，JIN Hong1
(1． Sichuan College of Traditional Chinese Medicine，Mianyang，Sichuan，621000 P． R． China;2． Sichuan Academy of Chinese Medicine
Sciences，Chengdu，Sichuan，610041 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To establish a method to distinguish between Ligusticum chuanxiong and Angelcia sinensis by HPLC finger-
prints of the water － soluble and fat － soluble constituents in them．METHODS The HPLC assay was used to establish the fingerprints
of Ligusticum chuanxiong and Angelica sinensis，and 12 pieces(L． chuanxiong)or 10 pieces (A． Sinensis)of goods were compared． The
HPLC separation was performed on LUNA C18(2) ，150 mm × 4． 6 mm column by gradient elution with a mixture consisting of methanol
and 1%HAC at a flow rate of 1． 0 mL·min －1 ． Detection wavelength was set at 280 nm． The temperature of column was at 35 ℃．