全 文 ：第 24卷 第 10期
20 0 6年 1 0月
中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 24 No. 10
Oct 2 0 0 6
中医药
1910
学刊
蚤休和半边莲对大鼠脑出血后
血浆细胞间黏附分子 - 1 肿瘤坏死因子 - A的影响
于 君 1,周庆博2,毕建忠 2
( 1.山东中医药大学附属医院, 山东 济南 250011; 2. 山东大学第二医院,山东 济南 250033)
摘 要 :目的:观察清热解毒药物蚤休、半边莲大鼠脑出血后血浆细胞间黏附分子 - 1( ICAM - 1)、肿瘤坏死
因子 ( TNF -A)的影响, 以探讨蚤休、半边莲治疗脑出血的作用机制。方法:实验大鼠随机分为假手术 1组、2组,
模型 1组、2组, 中药 1组、2组,采用胶原酶×诱导大鼠脑出血模型,术后 2h,中药 1组、2组给予蚤休、半边莲水
煎剂灌胃, 另 4组给予等量生理盐水,连续用药 ( 1次 /日 ), 分别在 3天、7天后取血, 应用酶联免疫吸附法和放射
免疫分析法测定血浆 ICAM - 1、TNF -A含量。结果: 与假手术组比较, 模型组血浆 ICAM - 1和 TNF -A含量均
明显升高 ( P < 0. 01),与模型组比较, 中药组血浆 ICAM - 1和 TNF -A含量均明显下降 ( P < 0. 01, P < 0. 05)。
结论: 中药蚤休、半边莲对脑出血后神经细胞损伤具有保护作用, 其机制可能与减少 ICAM - 1和 TNF - A的产
生, 抑制炎症反应有关。
关键词 :脑出血; 大鼠;细胞间黏附分子 - 1;肿瘤坏死因子 -A
中图分类号: R - 33 文献标识码: B 文章编号: 1009 - 5276( 2006) 10 -1910 - 03
收稿日期: 2006 - 04 - 24
作者简介:于君 ( 1963 - ) ,女,山东济南人,讲师,学士,主要从事中
医感染研究。
脑出血后白细胞向血肿周围浸润,引发炎症反应, 造成
脑组织损害 [1]。研究表明 [2 - 3], 该过程中存在细胞间黏附
分子 - 1( ICAM - 1)、肿瘤坏死因子 ( TNF -A)等炎症因子
的参与。近年来清热解毒药物应用于治疗急性脑出血, 获
效显著 [4 -5 ]。本研究采用胶原酶诱导大鼠脑出血模型, 观
察清热解毒药物蚤休、半边莲对大鼠脑出血后血 ICAM -
1、TNF -A的影响,以探讨其治疗的作用机制。
1 实验材料
1. 1 实验动物 健康 W istar雄性大鼠 60只,体重在 250
~ 300g,由山东大学医学院动物实验中心提供。
1. 2 药品及试剂 蚤休、半边莲由山东中医药大学附属
医院提供, 水煎浓缩至每 mL含生药 1. 20g; ×型胶原酶: 美
国 S igm a公司提供; 10% 水合氯醛: 山东齐鲁制药厂生产;
ICAM - 1试剂盒: 深圳晶美生物公司提供, TNF - A试剂
盒: 中国人民解放军总医院东雅医学免疫研究所提供。
2 方 法
2. 1 动物分组及给药 根据随机数字表将大鼠分为 6组,
即假手术 1组, 假手术 2组, 模型 1组, 模型 2组, 中药 1
组, 中药 2组,每组 10只。模型制备成功后 2h开始给药,
假手术组和模型组分别给予生理盐水 2mL灌胃, 中药组给
予蚤休、半边莲汤剂灌胃 ( 0. 5m L /100g), 连续用药 1组 3
天、2组 7天, 均每日 1次。
2. 2 大鼠脑出血模型制作 大鼠适应喂养 3天后, 参考
Rosenbe rg等 [6 ]造模方法, 将大鼠以 10%水合氯醛溶液按
360m g /kg腹腔注射麻醉后, 俯卧位固定在大鼠立体定向仪
上, 暴露颅骨,在前囟前 0. 2mm, 中线右旁开 3mm 处,用 7#
注射针头钻透颅骨,成一直径约 3mm小孔, 用微量注射器
沿针孔垂直进针 6mm 后,将 0. 5u /1LL胶原酶×缓慢匀速
注入脑组织,留针 10m in后, 缓慢退出。缝合切口, 消毒, 肌
注 0. 3m L庆大霉素注射液。假手术组操作同上, 但不注入
胶原酶, 注入等量的 1LL生理盐水。术后根据 Longa法进
行神经功能评分, 无神经功能缺失症状、意识丧失、死亡大
鼠被剔除,最终符合实验录入要求的各组大鼠计数如下: 假
手术 1组 9只,假手术 2组 9只,模型 1组 9只,模型 2组 9
只,中药 1组 8只, 中药 2组 8只, 共 52只。
2. 3 血 ICAM -1 TNF -A的测定 分别于模型制备后 3
天、7天, 大鼠下腔静脉取血 4mL, 装入含 30LL10% EDTA
Na2和 40LL抑肽酶的抗凝试管, 离心, - 20e 备测。血浆
ICAM - 1和 TNF -A分别采用酶联免疫吸附法和放射免疫
分析法测定。
2. 4 统计方法 实验数据以均数 ?标准差 ( …X ? s )表示,
验证组与对照组之间采用 t检验判断比较差异的显著程度。
3 结 果
对大鼠脑出血后血浆 ICAM - 1、TNF -A含量的影响,
与假手术组比较, 模型组血浆 ICAM - 1和 TNF -A含量均
明显升高 ( P < 0. 01), 与模型组比较, 中药组血浆 ICAM -
1和 TNF -A含量均明显下降 ( P < 0. 01, P < 0. 05), 与模
型 1组比较,模型 2组血浆 ICAM -1和 TNF - A含量均明
显下降 ( P < 0. 05)。见表 1。
表 1 对大鼠脑出血后血浆 ICAM - 1 TNF -A
含量的影响 ( …X ? s )
n ICAM - 1( Lg /L) TNF -A( ng /m L)
假 手 术 1组 9 0. 116 ? 0. 010 0. 210 ? 0. 065
模 型 1 组 9 0. 167 ? 0. 012x x 0. 470 ? 0. 069x x
中 药 1 组 8 0. 138 ? 0. 011n n 0. 295 ? 0. 089n n
假 手 术 2组 9 0. 109 ? 0. 010 0. 207 ? 0. 050
模 型 2 组 9 0. 151 ? 0. 011x x 0. 310 ? 0. 068x x
中 药 2 组 8 0. 127 ? 0. 015n n 0. 238 ? 0. 072n
注:与假手术组比较, x x P < 0. 01; 与模型组比较, n P <
0. 05, n n P < 0. 01。
1910
DOI：10.13193/j.archtcm.2006.10.136.yuj.063
第 10期 于 君等: 蚤休和半边莲对大鼠脑出血后血浆细胞间黏附分子 -1 肿瘤坏死因子 -A的影响
中医药
1911
学刊
4 讨 论
中风病是人类三大主要病死原因之一, 严重危害人类
健康。在中医理论的指导下,参考古今文献, 结合现代医学
研究, 发现毒邪与中风病密切相关, 认为火热内灼、痰瘀交
阻、成毒犯脑、发为卒中是中风病发生的主导病机 [7 ]。基
于 /热毒致卒中0的观点, 选择传统常用于治疗蛇毒咬伤的
清热解毒中药: 蚤休、半边莲,观察其对脑出血的治疗作用。
Cong等 [ 2]研究, 脑出血后血肿周围有较多的白细胞和
巨噬细胞浸润, 活化的白细胞和巨噬细胞释放一些细胞毒
性介质, 从而加重脑出血的继发性损伤。而血肿周围炎症
反应的前提条件是炎症细胞黏附于血管内皮细胞, ICAM -
1是介导黏附的重要因子。 ICAM - 1广泛分布于上皮细
胞、血管内皮细胞、网状细胞、单核巨噬细胞和淋巴细胞等,
以血管内皮细胞表达最强, 且中枢神经系统中几乎所有细
胞均表达 ICAM -1。正常情况下, ICAM - 1在血管内皮细
胞及其他细胞有低水平表达,但当组织损伤、缺血、炎症时,
ICAM -1呈现高表达, 引起一系列病理反应。研究资料表
明 [2], 脑出血后血肿周围的神经细胞和血管上均有大量
ICAM -1表达, 神经细胞表达的 ICAM - 1, 3天时达高峰,
持续 10天后减少,血管表达的 ICAM -1, 7天时达高峰, 持
续 2周。本实验结果表明, 大鼠脑出血后 3、7天血 ICAM -
1含量均明显升高,出血后 7天血 ICAM -1水平较 3天下
降, 但仍高于对照组。脑出血后的 ICAM - 1过度表达, 使
白细胞与血管内皮细胞黏附而外渗,浸润病区, 启动炎症反
应。过多的白细胞与血管内皮细胞黏附可阻塞微血管, 造
成局部缺血; 血管外的白细胞产生大量的氧自由基、蛋白水
解酶及细胞因子, 加重脑组织损害 [8]。有研究表明 [9 ], 脑
出血后的 ICAM -1表达增高与血肿周围的炎性细胞因子
的过度表达有关。
TNF -A是一种主要由激活的单核 /巨噬细胞分泌的
炎性细胞因子。临床研究表明 [10], 脑出血患者早期血浆
TNF -A含量升高,并持续一定时间。实验研究证实 [3], 脑
出血后血肿周围脑组织 TNF -A表达明显增强。本实验结
果表明, 大鼠脑出血后 3、7天血 TNF -A含量均明显升高,
出血后 7天血 TNF -A水平较 3天下降, 但仍高于对照组。
S tanim irov ic等研究表明 [11], TNF -A能使培养的人脑微血
管内皮细胞 ICAM -1表达明显上调。笔者推测 ,脑出血后
TNF -A等炎性因子大量产生, 诱导血管内皮细胞 ICAM -
1表达增加, 促使白细胞聚集、黏附、浸润, 引发炎症反应,
造成脑损伤。M ayne等 [3 ]研究发现, 胶原酶诱导大鼠脑出
血后 24h,脑内 TNF - AmRNA及蛋白水平明显增高, 使用
反义寡核苷酸减少 TNF - A表达对大鼠具有神经保护作
用。亦有研究表明 [ 12 ], 应用 ICAM - 1单克隆抗体可减轻
缺血性脑组织损伤。本研究结果显示, 中药 1组、2组血浆
ICAM -1、TNF -A含量均较模型 1、2组显著降低, 表明蚤
休、半边莲具有减少 ICAM - 1和 TNF -A的产生、释放, 抑
制炎症反应, 保护脑组织的作用。
脑出血的发病急、病情重, 病死率和致残率高, 其病理
生理机制十分复杂。近年来, 大量的研究肯定了清热解毒
药物治疗中风病的疗效。笔者在局灶性脑缺血再灌注的大
鼠动物模型上, 观察到清热解毒方药能够明显升高血中
SOD、NO含量,降低血中 MDA、ET、TNF含量, 具有神经细
胞保护作用 [13]。本研究采用胶原酶诱导大鼠脑出血模型,
观察清热解毒药物: 蚤休和半边莲对脑出血后炎症反应变
化的影响。实验结果表明, 蚤休和半边莲通过减少 ICAM
- 1和 TNF -A的产生、释放, 抑制炎症反应, 达到保护神
经细胞的目的。该研究探讨了清热解毒中药治疗脑出血的
效应机理, 为推广清热解毒中药在中风病急性期的应用提
供了实验依据。
参考文献:
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lis S inen sisPharm aco logiaeque Shangha,i 2002, 16( 3 ): 50
1911
E ffect o f Rhizoma Parid is and Herba Lobe liae Rad icantis on Changes of Superox ide
Interce llu larAdhesion Mo lecu lar-1( ICAM - 1) and TumorNecros is Factor-A( TNF -A)
Content in P lasma after In tracerebra lHemorrhage in Rats
Yu Jun1, Zhou Q ingbo2, B i Jianzhong2
( 1. A ffilia ted Hosp ita l o f Shandong Unive rsity o f TCM, Jinan 250011, Shandong, China;
2. The Second Hospita l o f Shandong Un ive rsity, Jinan 250033, Shandong, Ch ina)
Abstrac:t Ob jec tive: To observe Rhizoma Paridis and H e rba Lobe liae Radicantis on changes of Supe roxide Intercellu la rAdhe-
sion Mo lecu la r- 1( ICAM - 1) and Tum o rNec rosis Factor -A( TNF -A) content in p lasm a a fter in trace rebra l hemo rrhage in rats
and m ake a study on mechanism o f trea tment o f i.t M ethod s: R ats w ere random ly div ided into six g roups: sham - ope ra tive group1
and 2, m ode l g roup1 and 2, H erb s g roup1 and 2. C ollagenase× w as injected in to cauda te nuc leus to establish ratm ode l o f intrac-
e rebra l hemo rrhage. A fte r 2 hours, Rhizom a Parid is and H e rba Lobeliae Radican tis decoction w as g iven by gastrogavage in H e rb-
s g roup1 and 2, salinew as g iven in the o ther 4 groups. Th is kind of m anagem ent was consecutive ly done, once a day fo r 3 and 7
day s. F luo rospectropho tom e try and radioimmunoassay we re used tom easure the content o f ICAM - 1, TNF -A in plasm a. R esults:
Com pa red w ith sham - operative g roup, ICAM - 1 and TNF - A conten t in p lasm a w ere obv iously highe r( P < 0. 01) in m ode l
g roup. Com pared w ith m ode l g roup, ICAM - 1 and TNF - A con ten t in p lasm a w ere obv iously low er( P < 0. 01, P < 0. 05) in
H erbs g roup. C onclusion: Rh izom a Paridis and H erba Lobe liae Radicantis had an ev iden t protective e ffec t on inju red neuron after
intrace rebra l hemo rrhage in rats, which m ay be re lated to decreasing ICAM -1, TNF -A conten t in p la sm a and inhabiting inflam-
m atory reaction.
Key words: intracerebral hem orrhage; ra;t inte rce llu la r adhesion mo lecu la r- 1; tum o r necrosis facto r-A
收稿日期: 2006 - 04 - 30
作者简介:陈静君 ( 1969 - ) ,女,广东潮州人,讲师,硕士研究生,研究方向:药理学教学和研究。
第 24卷 第 10期
20 0 6年 1 0月
中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 24 No. 10
Oct. 2 0 0 6
中医药
1912
学刊
安胃和中冲剂止呕及促胃动力作用的实验研究
陈静君,张玉祥
(广东化工制药职业技术学院制药系,广东 广州 510520)
摘 要 :目的:探讨安胃和中冲剂止呕、促胃动力的药效学研究。方法:用硫酸铜造模致家鸽外周性呕吐、盐
酸去水吗啡造模致家犬中枢性呕吐,再分别给予高、中、低剂量的安胃和中冲剂, 并与吗叮啉组及对照组比较, 以
了解安胃和中冲剂的止呕作用;观察高、中、低剂量安胃和中冲剂对正常小鼠及多巴胺抑制后的小鼠胃排空的影
响, 以了解安胃和中冲剂的促胃动力作用。结果: 安胃和中冲剂对硫酸铜所引起的外周性呕吐和去水吗啡所致的
中枢性呕吐均具有良好的止呕作用,可以显著地促进正常小鼠及多巴胺抑制后的小鼠的胃动力。结论:本实验为
安胃和中冲剂的临床应用提供了实验依据。
关键词 :安胃和中冲剂; 止呕;促胃动力; 药效学
中图分类号: R285. 5 文献标识码: B 文章编号: 1009 - 5276( 2006) 10 -1912 - 02
安胃和中冲剂是根据广东省名老中医经验方而组成的
一个医院内制剂 ,由法夏、苏梗、救必应等 8味中药组成, 具
有理气化湿、和中安胃的功能, 主治脾胃虚弱、气滞湿阻所
致的各种胃炎、溃疡、消化不良等症见胃胀胃痛、恶心呕吐
者, 临床应用有良好的疗效。为进一步验证该药止呕及促
胃动力作用的疗效,笔者进行了如下实验研究。
1 实验材料
1. 1 药品 安胃和中颗粒 (自制 ),受试物为其浸膏, 每克
浸膏相当于 1. 15g原药材,临床每日拟用量为 69g原药材 /
60kg。吗丁啉片 (西安杨森制药有限公司生产, 批号:
20050306) ,每片 10mg。盐酸去水吗啡注射剂 (沈阳制药厂
生产, 批号 20041203), 每瓶 10m g。多巴胺注射剂 (广东宇
宙制药厂, 批号为 20040806 ), 20m g /m L。硫酸铜 (广州增
城化工厂, 批号 20040811), 分析纯。
1. 2 动物 清洁级昆明种小鼠, 体重 18 ~ 24g; 家犬 ,体重
600~ 1000g;家鸽, 体重 250~ 500g。实验动物雌雄各半, 由
广东省医学实验动物中心提供。
2 实验方法
2. 1 止吐试验 参照徐叔云等主编5药理实验方法学6中
的实验方法 [1 ]进行。
¹ 安胃和中冲剂对硫酸铜致家鸽呕吐的影响:实验用家
鸽 50只, 实验前按体重性别分为空白对照组、吗丁啉片组以
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