全 文 ：为临床治疗中晚期结直肠癌患者 ,提高生存率开辟一
条新的治疗途径 。
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收稿日期:2002-12-20
＊云南省自然科学基金资助项目
遍地金提取物对大鼠脑突触体单胺氧化酶抑制作用评价＊
赵　晶1　何洪静1　高　玮1　李红全2　赵见宝2
1.成都军区昆明总医院药剂科(昆明　650032)　2.云南省大理医学院(云南大理　671000)
摘要　目的:评价遍地金提取物对大鼠脑突触体单胺氧化酶的抑制作用。方法:通过大鼠脑突触体单胺氧化酶的抑制实
验 ,测定其重摄取量 cpm及抑制百分率。结果:遍地金提取物组平均抑制百分率为 93.0%, IC50=269.15mg/ml。St.John s
Wort组平均抑制百分率为 93.0%, IC50=71.22mg/ml。结论:遍地金提取物与在欧美上市的抗抑郁药物 St.John s Wort均
能抑制大鼠脑突触体单胺氧化酶的活性 , 二者差异无统计学意义。
关键词　单胺氧化酶抑制剂　重摄取量　抑制百分率
中国图书资料分类法分类号　R971
The inhibitory effect of hypericum wightianum extracts on brain synaptic monoamine oxidase in rats
ZHAO Jing1 ,HE Hong-jing1 , GAO Wei1 , LI Hong-quan2 , ZHAO Jian-bao2.1.Department of Pharmacology , Kunming General Hos-
pital of Chengdu Military Command , Kunming 650032.2.Dali Medical College , Dali 671000.
Abstract Objective:To evaluate the inhibitory effect of hypericum wightianum extracts on brain synaptic monoamine oxidase in rats.
Methods:The inhibitory experiment of brain synaptic monoamine oxidase was employed to detect the reintake and inhibition percentage.
Results:The average inhibition percentage and IC50in hypericum wightianum extracts group were 93.0% and 269.15ml/ ml , respective-
ly , and that in St John s Wort group were 93.0% and 71.22mg/ ml , respectively.Conclusion:Both hypericum wightianum extracts and
antidepressant St John sWort can inhibit the activity of monoamine oxidase , and there is no statistics significance between them.
Keywords:monoamine oxidase inhibitor , reintake , inhibition percentage
　　抗抑郁药的出现始于二十世纪 50年代初的异丙
肼 ,属于单胺氧化酶抑制剂(MAOI);因发现易于引起
肝脏损害等严重副反应而逐渐淘汰 。单胺氧化酶选
择性抑制剂类抗抑郁药既可以发挥其较好的抗抑郁
作用 ,还可以避免无选择性单胺氧化酶抑制剂的副反
应。采集于云南地区的金丝桃属植物遍地金具有与
在美国和欧洲广泛用于抗抑郁的同属植物贯叶连翘
提取物 St.John s Wort 相近似的化学成分 ,通过研究
遍地金提取物对大鼠脑突触体中单胺氧化酶的抑制
作用可作为评价其抗抑郁活性的初步依据 。
1　材料与方法
1.1　药物与试剂　遍地金提取物 (含 0.027%Hyper-
icin)由本实验室制备;St.Johns Wort (含 0.15%
Hypericin)由美国 Good N Natural Manufacturing Corp
(UAS)生产 , 批号:034621801;克-享氏碳酸氢盐
·469·西南国防医药 2003年第 13卷第 5期
缓冲液 (每 100ml 中含 NaCl 0.692g , KCl 0.035g ,
CaCl 0.028g , KH2PO4 0.016g , Mg2SO4 7H2O 0.029g ,
NaHCO3 0.21g 及 Glucose 0.2g);5 -Hydroxy 〔3H〕
tryptamine trifluoroacetate (3H-5HT)购自英国 Amer-
sham Pharmacia Biotech 公司 , Analysed 13th December
2001;磷酸缓冲液 (每 100ml 中含 Na2HPO3 13.4g
KH2PO4 6.8g , pH=7.4);TritonX-100;闪烁液 。
1.2　仪器　DY89-1型电动玻璃匀浆机 (宁波新芝
科 器 研 究 所);BECKMAN.ALLEGRA.64R GEN-
TRIFAGE高速冷冻离心机;NAPCO MODEL5430细胞
培养箱;BECKMAN LS6500液体闪烁计数器 。
1.3　动物 　Wistar 大鼠 , 雄性 , 150g ～ 200g 。动物
合格证号:9714 , 由中科院昆明动物研究所提供。
1.4实验方法
1.4.1　组织悬液制备　选体重150g ～ 200g 雄性健康
Wistar大鼠 3只 ,断头后 ,迅速取出脑组织 ,于预先冰
冻的生理盐水冰面上去除小脑 ,分离脑膜和血管 ,加
入9倍体积的冰冷的 0.5mol/L 磷酸缓冲液 ,在 Potter
-Elve jhen匀浆器中匀浆 1min ～ 2min后 ,将匀浆液在
0℃～ 4℃,1000g 离心 10min ,取出上清液 ,18000g 离心
20min。沉淀用原体积的 0.25mol/L蔗糖溶液悬浮 ,作
为组织的线粒体单胺氧化酶组织悬液。
1.4.2　药液配制　遍地金提取物5个剂量组分别为
12.17mg/ml 、 24.33mg/ml 、48.66mg/ml 、 97.33mg/ml 、
194.65mg/ml;St.Johns Wort 分 别 为 2.86mg/ml 、
5.72mg/ml、11.44mg/ml 、22.88mg/ml 、45.75mg/ml 5 个
剂量组。以上样品均用二甲亚砜溶解配制。
1.4.3　测定方法　(1)各试管加入:组织悬液 200μl ,
H2O 450μl;A 管:不同浓度药液 100μl;B 管:溶剂
100μl;C 管:溶剂 100μl。(2)孵育:将以上各管中液体
混匀后 , 于 95.0%O2 +5.0%C02 环境下 , 37℃孵育
15min后每管加入 100μl3H -SHT ,每管间隔 10s , 37℃
下再次孵育 30min 后加入 2mol/L 盐酸终止反应 。B
管:第一次孵育 (即 15min)后加盐酸及底物后再孵
育30min。A 、 B管 37℃孵育 , C 管0℃孵育 。(3)测
定:以上各管加入乙醚7ml , 加盖后于旋涡震荡器上
剧烈振荡 5min , 使脱胺代谢物进入有机相 , 静置
30min , 使有机相与水相分离。取醚层 4ml置闪烁杯
中 , 加闪烁液 10ml计数 , 记录 cpm值 。
2　实验结果
　　实验数据及计算结果见表1 、表 2。
表 1　遍地金提取物 cpm 测定值及抑制百分率
检测项目 药物浓度(mg/ml)
12.17 24.33 48.66 97.33 194.65
溶　剂
B管 C管
均值(cpm) 4206±20.9
3736.7
±90.7
3623
±107.7
7961.3
±614.4
7402
±796.7
54088.5
±8240.6
1990.3
±94.5
平均重摄
取量(cpm) 2215.7 1745.7 1632.7 5974 5411.7 52098.2
抑制百分
率P(%) 85.75 96.65 96.87 88.53 89.61
　　注:IC50=269.15mg/ml, 95.0%可信限=269.15±113.85
表 2　St.Johns Wort cpm 测定值及抑制百分率
检测项目 药物浓度(mg/ml)
2.86 5.72 11.44 22.88 45.75
溶剂
B管 C管
均值(com) 9556.1±250.7
5179.7
±149.3
2142.7
±130.0
2188.3
±82.7
9122.1
±1387.6
54088.5
±8240.6
2008.7
±134.1
平均重摄
取量(CPm) 7546.4 3171.0 134.0 179.6 7113.4 52079.8
抑制百分
率P(%) 85.51 93.91 99.74 99.66 86.34
　　注:IC50=71.22mg/ml ,95.0%可信限=71.22±30.1
　　以37℃或0℃孵育的样品平均 cpm 值之差代表平
均重摄取量 (UT);抑制百分率 P= [ (正常平均重
摄取量-加药物后平均重摄取量)÷正常平均重摄
取量] ×100%;IC50用概率单位法计算。
3　讨论
3.1　实验结果表明 , 遍地金与St.Johns Wort均具有
较强的抑制单胺氧化酶作用 , 平均抑制率均为
93.0%以上 , 且无显著性差异 , P>0.05 , 两者同浓
度相比也无显著性差异 。
3.2　抑制率与药物浓度不呈线形关系 , 而是按二次
函数关系变化 (即在中间浓度有一个最大抑制率)。
由此推测 , 在某一特定浓度 , 以上两种物质对单胺
氧化酶的抑制可达最大限度 。遍地金提取物 IC50 =
(269.15 ±113.85)mg/ml , St.Johns Wort 为 IC50 =
(71.22±30.13)mg/ml。
4.3　据报道 , 国外用于治疗抑郁症的贯叶连翘甲醇
提取物体外具有弱的抑制单胺氧化酶 (MAO)活性
(IC50大于 100μg/ml)〔1〕 。单胺氧化酶抑制剂对非典型
抑郁症治疗效果较好 , Robinson 等做了大量的实验
室研究及临床实验 , 结果发现单胺氧化酶抑制剂在
非典型抑郁症的治疗中与丙咪嗪无显著性差别 , 但
对于伴有人际关系敏感 、 偏执 、 强迫等症状的非典
型抑郁症患者 , 单胺氧化酶的治疗效果要优于丙咪
嗪。对于内源性抑郁及其他抑郁症的治疗 , 单胺氧
化酶抑制剂与丙咪嗪相比无显著性差异〔2〕 。天然药
物中的单胺氧化酶抑制剂副作用较少 , 使用更为安
全有效。
·470· 西南国防医药 2003年第 13卷第 5期
参考文献
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收稿日期:2002-07-31
作者简介:魏敏 (1964～ ), 女 , 成都人 , 助教。
严重烧伤后早期大鼠肝脏细胞粘附分子 1和白介素 6的表达
魏　敏1　刘开军1　刘　杰2　鲁华玉2　王德文2　张　燕2
1.第三军医大学成都军医学院军事医学教研室 (成都　610083)　2.军事医学科学院放射医学研究所 (北京　100850)
摘要　目的:观察严重烧伤早期大鼠肝脏细胞粘附分子 1 (Intercellular adhesion molecule—1 , ICAM-1)、 白细胞介素 6
(Interleukin6 , IL-6)在不同时间点的表达及早期病理变化 , 为阐明烧伤早期肝脏损伤机制及为伤后早期损伤的防治
打下基础。方法:(1)光镜和电镜观察大鼠在烧伤后早期 (5min至 72h)肝脏的病理变化。(2)免疫组织化学 、 原位
杂交和图橡分析技术对伤后不同时间点肝脏 ICAM-1进行染色和分析。 (3)免疫组织化学 、 原位杂交和图像分析技
术对伤后不同时间点肝脏 IL-6 进行染色和分析。结果:(1)伤后早期主要病理变化为出血 、 充血和水肿;电镜显
示:肝脏毛细血管内皮细胞受损。 (2)伤后 30min , 免疫组化和原位杂交显示 ICAM-1、 IL-6 表达增强;伤后 2h～
24h明显增强 , 呈阳性或强阳性;伤后 72h , 表达逐渐减弱。结论:伤后早期肝脏的损伤可能与内皮细胞损伤有关 , I-
CAM-1、 IL-6 在伤后早期肝脏损害机制中占有重要地位 。
关键词　严重烧伤　肝细胞粘附分子 1　白介素 6
中国图书资料分类法分类号　R644
Expression of hepatic intercellular adhesion molecule and interleukin 6 in rats after severe burns
WEI Min1 , LIU Kai-jun1 , LIU Hua-yu2 , ZHANG Yan2.1.Department of Military Medicine , Chengdu Military Medical School ,
Third Military Medical University , Chengdu 610083.2.Institute of Radiation Medicine , Academy of Military Medicine science , Bei-
jing 100850.
Abstract Objective:To observe the expression and early pathologic changes of intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) and in-
terleukin 6 (IL-6) in rats after severe burus so as to demonstrate the mechanisms of early hepatic injuries and provide theoretic basis
for prevention and treatment.Methods:Light and electron microscopes were employed to observe the early hepatic pathologic changes
(5 minutes to 72 hours after burn).The expressions of ICAM-1 and IL-6 were observed by immunocytochemistry , in situ hybridiza-
tion and image analysis.Results:Main early pathologic changes in liver were edema , hemorrhage and congestion.Injuries of the ep-
ithelium cells of capillary vessels were observed by electron microscope.Immunocytochemistry and in situ hybridization showed that I-
CAM-1 and IL-6 began to increase 30 minutes after burns , significantly increased 2 hours to 24 hours later , and gradually decreased
72 hours later.Conclusion:ICAM-1 and IL-6 may play an important role in early hepatic injuries , and the major target cell may
be the endothelium cell.
Keywords:severe burn , ICAM-1 , IL-6
　　严重烧伤早期 , 脏器损害就已经存在 , 并持续
作用 , 是造成严重烧伤病人早期死亡的主要原
因〔1 ,2〕 。其中 , 肝脏的早期损伤可最终造成肝功能衰
竭 , 并带来一系列病理变化 , 但肝脏早期损害主要
由哪些因素造成 , 其主要抗制至今未明 , 本研究主
要从内皮细胞的角度对肝脏的早期损害机制进行了
研究 , 以期为烧伤早期损害的早期防治奠定基础 。
1　材料与方法
1.1　动物模型制备　参照文献〔3〕 , 制备大鼠深二度
烧伤动物模型 。
1.2　照射方式及条件　健康Wistar大鼠 36 只 , 雌
性 , 体重 180g ～ 220g , 由军事医学科学院动物中心
提供 。动物随机分组 , 按照动物模型对大鼠造成深
二度烧伤 , 烧伤面积占体表总面积的 40.0%。各组
动物伤后即刻腹腔注射生理盐水 40ml/kg 抗休克 ,
背部涂碘酊抗感染 。
1.3　动物分组　分为两组 , 正常对照组和烧伤组。
·471·西南国防医药 2003年第 13卷第 5期