全 文 ：第 24 卷 第 2 期
1 9 9 1年 6 月
实 验 生 物 学 报 V o 】. 2 4 , N o . 2
A e t a B i o lo g i a e E x P e r i m e n t a l is S i n i e a J u n e 1 9 9 1
黄蝉花生殖细胞有丝分裂期间微管的动态
徐是雄
(香港大学植物系 香港 )
近期有多位研究者用微管免疫荧光方法对
存在于花粉和 花粉管中的生效细胞内的微管作
了观察 , 发现在很多植物生殃细胞中都有一个
状 似 笼 子 的 微 管 , r }, 架 结 构 ( m i e r o t u b u l e
e a g e ) [
` 一 ` 2 ] 。 R a u d a s k o s k i 等 ( 1 9 8 7 ) L“ ]及 T a y l o r
等 ( 1 9 8 9 ) 【。 ’进一步跟踪了生砧细胞在有丝分裂
时的微管动态 , 发现烟草和杜鹃花生袱细胞的
有 丝分裂过程 获本上与一般细胞无异 , 其微管
的分布变化七.索形 也大致 ” J一般细胞相同 。 但最
近 aP l e v i t Z 和 C r c s t i ( 1 9 8 9 ) 跟 踪观察了紫露草
( T r ad e s c a n t i a v i r g￡n i a n a ) 封三殃细胞形成精子的
过程却发现在生殃细胞形成精子过程中 , 微管
的分布变化与其他的生效细胞不全相同 , 件如
其生效细胞在有丝分裂 1」·夕卜不 形 成 明 t浓的 `户
期 、 末期 、 纺锤体和成膜体等 。
应 J!1荧光显微技术研究生殃细胞微管在 花
粉管内的分布变化 ’ }占形 , 是当前一个非常 热门
的课题 。 但山干这些观察只局限在少数儿种植
物 , 故此无 i仑在研究的广 度和深度方而都还有
许多空白 。 为 了进一 步 r 解微竹在生狱细胞内
的 动态 , 本文对黄蝉花生砧细胞从花粉中释放
以后在萌发的花粉管 内进行有丝分裂形成精子
期间的微管分布变化情形作了观察 , 现将结果
报道如下 。
材 料 和 方 法
采 J下」黄蝉花 ( A l l a m a 儿 d a 竹 e r i艺f o正i a H o o k ) 成熟的
花粉为材料 , 经 l)J’] 发 、 固定 、微悴免疫荧光处理后 , 在
荧光镜下观察 。免疫荧光的方法墓本土依照 D er k se n 等
( 1 9 8 5 ) [
2 ’所发 丧, 可} l不肖作修改 。
花粉 ,4’j 发用 B r e w b a k e r 不日 K w a e k ( 2 9 6 3 ) “ 3 ’ 液体
培养基 , 加入 30 %蔗糖和适量抗 生 素 , 在 5 . 5 x l . 5
c m 的培养皿中浅层培养 , 培养温度 28 ℃ , 反 复振荡
8 0 次 /分钟 。 并于培养 4 . 5小时和 17 小时取样固定 ,
固定液用 M s B 缓 川,液 ( 1 0 0 m m o l / L p ip e s , 5 m m o l / L
E G T A 不Ir 5 m m o l / L M g S O ; , P H 川 N a 0 H i周至 6 . 9 )
配制的 」 % 甲醛溶液 。 固定在室温分 二 步 进 行 , 先
将附加 25 %蔗拙的 4 % 甲醛固定液 , 加入等 鼠的待16
定的花粉溶液中 , !司定 1小时 , 然 后换入 」% 甲醛固
定液继续固定 2 小时 , 固定 了.亏) 1}磷酸缓 2,! ,液 ( P B S )清
洗 3 次 , 侮次约 1 5分钟 , 然后进行酶解 。 酶解液用以
下方法配制: 2 %纤维素酶 , 1% m c c er oz y m e 溶解在
2 0 0 m m o l / L P ip e s
,
2 m m o l / L E G T A
,
1 m m o l / L M g
一
5 0
; 和 0 . 魂 m o l / L 一f才·露粘醉济液 I t , , pH i周而: 5 . 6 , 酶
解 18 分钟 , 35 `C 。 酶解后 , 用磷酸缓冲液清洗 3 次 ,
协次 15 分钟 , 固定和酶解都是在离心管 中 进行的 ,
梅次低速离心 5 分钟 。 然后将花 粉 公浮 液滴在涂 」`
p o l y
一 L一 ly s i n e ( 1 m g / m l 水溶 液 )的 盖 玻 片 _ l几, 静置
最少 1 0 分钟 , 介; !出多余的溶液 , 空气干燥 。 再 J千〕 3 ; `
N o n id e t P一 4 0 (溶解 N o n i d e t 的溶液 , J酶的相 }, lJ , 但P H
调至 6 . 9) 室温处理 2 小时 , 用磷酸缓冲液清洗 3 次 ,
下于次 5 分钟 , 再月I N a B H . ( l m g / m l , 溶于磷酸缓冲液
, ! : )
, 处理 3 次 , 侮次 5分钟 , 磷酸缓冲液清洗 3 次 ,
梅次 5 分钟 。然后将单克隆 a 一微竹蛋 白杭体 (s ig m a 产
占}. , -T 9 0 2 6 ) 几l磷 酸 缓冲液稀释 , 稀释 J乌 l : 5 0 0 , 温
度 37 ℃处理 2 小时 , 磷 酸 缓 冲 液 洗 3 次 , 梅 次 15
分钟 。 )月罗丹明 ( T R I T C ) 标 记 的 抗 氏t 的 一I一羊抗体
( S i g m a 产况: T 一 5 3 9 3 )于 3 7℃处理 心5 分钟 , 磷酸缓冲
液清洗 3 次 , 再川蒸馏水淋洗 。 用对 D N A 专一的 H -
3 3 2 5 8 ( H o e c h s t 3 3 2 5 5
,
p o l y s e ie n e e 产 品 ) 荧 光染料
( 2 林g/ m l) 染 1 0 分钟 , 蒸馏水淋洗 , 甘油封片 。
对照 ( l) 用无抗微竹性能的 I gG 加 T R I T C 标记的
木文 1 9 9 0 年 7 月 1 5 日收至,1。 1 0 9 0 年 1 2 月 1 2 日
接受 。
徐是雄 2 4 卷
抗鼠的山羊抗体及 ( 2 ) 磷酸缓 i ,! ,液加 T R I T C 标记的杭
鼠的山羊打汇体 i一王琳j都无反厂了。
荧光观察用西德 Z ie s 丧面荧光镜 , 绿 色滤光片
及紫外光激发 , K o d a k T M A X 4 0 0 吧 白底 )犷拍少亏。
结 果
应用微管免疫方法可以专一地显示微管在
黄蝉花花粉管 内以 及生叭细胞中的分布情形 。
在生长的花粉管中微管通常与花粉管的长轴平
行 , 有些并且呈波浪状 (图版 工 , 图 1 ) 。 在生
殖细胞 内的微管分布情况则比 花粉管 内的分布
复杂得多 , 变化也更多。
花粉萌发后 , 生殖细胞紧随着营养核进入
花粉管 。 当生殖细胞进入花粉管后 , 便开始有
丝分裂 。 在分裂的第一 个阶段— 即早前期 ,生殖细胞的外形呈蛾抖状 , 有一个椭圆形的头
( 内含细胞核 )和一个尖长的尾 (图版 I , 图 2
A ) , 核内的染色体还未散开 (图版 I , 图 Z C ) 。
但在细胞质中则有一个结构紧密的网状微管笼
子 ( 图版 1 , 图 Z A , Z B ) 。 当生殖细胞进入前
期时 , 生殖细胞的外型由姗 蛾 状 变 为椭圆形
状 , 核内染色体变祖并散开 (图版 I , 图 3 C ) 。
在胞质内的微管笼子结构逐渐松开 , 形成一个
比早前期更为松散的网状笼子 (图 版 I , 图 3
A , 3 )B
。 分裂进入晚前期 , 生殖细 胞 由椭圆
形变为纺锤形 , 其中一端往往稍微弯曲 (图 版
I
, 图 4 A ) 。 这一弯曲着的前端部 分 通 常与
位于生殖细胞前端的营养核相连接 形 成一 “ 雄
性生殖单位 ” [` ’ 。 在 此阶段 , 染 色体进一步缩
短变粗 (图版 I , 图 4 B 、 。 胞质 内的 网 状微管
转变为与细胞长轴平行的微管 (图 版 I , 图 4
A )
。 这些微管仍以 笼子的形式存在着 。 之后 ,
分裂进入早中期 , 染 色 体 散 开 (图版 I , 图
S B )
。 在此阶段构成笼子的微管束由粗变 细 ,
由直变曲 , 呈波浪状 (图版 I , 图 S A ) , 显示
在晚前期形成的笼子结构正在消失 , 代之在生
殖细胞内形成一种 与笼子结构很不同的纺锤微
管系统 。 换言之 , 在这一阶段可能两种截然不
同的微管系统正在此消彼长的进行更替 。 细胞
分裂到了中期 , 染 色体都排列在赤道 而 _ il( %l1
版 丑 , 图 6 )B , 纺锤体微管正式形成 。 在纺锤
体 内可以 看到两种不同的微管束 : 一种为附着
在染 色体上的微管束 , 另一种为从纺锤体一极
贯穿到另一极的连续微管束 (图版 五 , 图 6 A ) 。
分裂进入早后期 , 姊妹染 色体开始分离并移 向
两极 。图版 l , 图 7 B ) 。 在赤道而附近 的 微管
荧光明显减弱 ( 图版 1 , 图 7 A ) , 但两极部位
荧光则加强 。 在分裂快将完成阶段 (即晚后期 )
姊妹染 色体在 两极 分 别 并 合 成 IJ] (图版 1 ,
图 S B ) 。 但在两个染色休团之间则 又出现弧烈
的荧光 , 显示有新的微管在两核之间 重 组 (图
版 n , 图 S A ) 。 有丝分裂到了末期 , 两个核内
的染 色体逐渐散开 ( 图版 1 , 图 g B ) ,在赤道面
上则 出现一荧光暗区 (图版 1 , 图 g A ) 。 这一
暗区看来 , J T a y j o r 等 ( 1 , 5 9 )〔 ” ]在主l: 鹃花 的 生
殖细胞内所见到的 “ 成膜 休连 接 区 ” ( uj n ct io n
, n p h r a g m o p la s t )类似 。 在核部位 荧 光 却很微
弱 , 显示在核部位微管不但稀少 ,而且很漫散 。
讨 论
黄蝉花生殖细胞在 进入花粉管后约半小 时
便开始有丝分裂 。 约经 4 . 5 小时后有丝分裂 基
本完成 , 形成两个相互连接着的精子 。
在文献中有关卜细胞花 粉中 的 生殖细胞
有丝分裂过程以 及微管的分布变化情形 , 已有
多篇报道 ` 2 , 6 · ’ , 。 ’ 。 但这些报道只集中于微管在
有丝分裂前期和末期的分布变化情况 , 至于微
管在其他各期的情况则还未曾 有 过 详 细的报
道 。 本文利用黄蝉花花粉作为材料较详细地揭
示了微管在生殖细胞有丝分裂过程中的分布和
演变的全过程 。
生殆细胞有丝分裂过程中 , 微管的分布变
化情形与一般高等植物细胞 内所见到的不完全
一样 。 譬如 , 在一般高等植物分裂的前期 , 围
绕着赤道面 已存在着一条 微管带 ( p r e p or p h “ s “
比 n d m i e r o t u b u 一e s ) t ’ ` · ’ 6 1。 但 在黄蝉花生殖细
胞的分裂前期 , 则看不到有这一条微管带存在 ,
而只看到先后出现三种不 同结构形态的微管笼
2期 黄蝉花生殖细胞有丝分裂期间微管的动态
子 , 包括在早前期出现的紧密网状微管笼子 ,
在中前期出现的疏松状微管笼子以 及在晚前期
出现的微管与细胞纵轴平行分布的笼子结构 。
此外 , 一般高等植物细胞在分裂末期通常
都会在赤道面 _ L形成成膜体 , 然后再在成膜体
内形成细胞板 ,将细胞一分为二 。 但在生殖细胞
的分裂末期 , 细胞似乎并不形成明显的成膜体
和细胞板 , 而是形成一个看起来 与杜鹃花【” ’ 和
烟草〔毛 , ` ” 相当类似的两个精子相互连接着的结
构— “ 成膜体连结区 ” 。 当然 , 黄蝉花生殃细胞分裂的末期是否确实是形成这 样 一 个 “ 成膜
体连接 区 ” , 还有待进一步用电子显微镜证实。
从微管在生殖细胞有丝分裂 时的分布变化
可以看到微管在 各分裂期会根据结构 上 (或功
能上 )的需要而快速消失和重组 。 L IO y d 不*1 B a r -
l o w ( 1 9 8 2 ) [
’ “ ’及W a n g 等 ( 1 9 5 9 ) 〔 ` 7 ’根据高等植
物有丝分裂 中微管的消长规律区分出以下四种
不同类型的微管系统 : ( l) 间期微管 ; (2 ) 早
前期微管带 ; ( 3) 纺 锤体微管 , ( 4) 成膜体微
管 。 但在黄蝉花生殖细胞分裂过程中则可以 区
分更多不 同类型的微管系统 , 包括 : ( 1) 早前期
紧密网络微管笼子 , ( 2) 中前期疏松网络微管
笼子 ; ( 3) 晚前期纵轴平行微管笼子 , ( 4) 早
中期幼细微管笼子 , ( 5) 中期 纺 锤 休微 管 ,
( 6 ) 早后期两极微管 , (7 ) 晚后期 两 极 间 微
管 , (8 ) 末期成膜体微管 。 以上 ( 1 )至 ( 3 )期
的特点是微管都是以 笼子 、 m ie r o t u b u l e c a g e )的
形式分布在细胞内 , ( 4 )期的特点是微管处于
变化消长的阶段 ( t r a n s i t io n a l s t a g e ) ; ( 5 ) 至
( 8 )期的特点是微管丛本上都是以纺锤体或两
极微管或类似成膜体微管的形式 分 布 在 细胞
内。 至于生殖细胞微管结构为什 么在分裂的过
程中会如此多变 , 尚未有解释 , 但相信这可能
与生殖细胞需要适应新环境的变化 , 如花粉管
的快速生 长 , 花粉管 内胞质的运 动以 及生殖细
胞本身可能具有游动能力等有关 。
摘 要
用微管免疫荧光方法观察了黄蝉花生殖细
胞在花粉竹中进行有牡分裂 时的微竹功态 。 微
管在不同分裂期的分布情形很不一样 。 、 ` i 产1三殖
细胞由花粉进入花粉管后 , 细胞便立刻开始分
裂进入早前期 , 在这阶段微管以一个紧密微管
网笼子形式存在生殖细胞内 。 之后 , 细胞进入
中前期 , 在 此阶段细胞核扩大 , 染 色休 变粗 ,
而存在细胞内的微管网逐渐变为疏 松散漫状 ,
跟着细胞进入晚前期 , 而微竹笼子则 山网状变
为纵 向排列状 。 分裂进入早中期微针变细井呈
波浪状 , 微管由笼子结构过渡到纺锤体结构 。
进入 中期 , 纺锤体全部形成 , 在 纺锤休内可以
清楚地看到两种不同类型的微管 束 , 一种附着
在染 色体上 , 而另一种则从一极 延 仲 至 另一
极 。 跟着细胞进入早后期 , 在这一阶段 姊妹染
色体分开并分别移向两极 , 在赤道板位置微管
明显减少 。 之后 , 细胞进入晚后 1彗l , 姊妹染 色
体集 中在 两极 , 极端有新微管出现 。 在 两个染
色体团之问又汇集了许多类似成膜休微管的微
管 。 细胞进入分裂末期 , 存在赤道板位代的微
管又再次减少 , 而在中央部位则新 形 成一 “ 成
膜体联接区 ” , 把两个新 J衫成的 精子 连接着 。
关锐词 : 黄娜花 生殖细胞 徽管 有丝分裂
参 考 文 献
[ l 〕 C h a r z y n s k a , M . , M . M u r g i a , C . M i l a -
n e s i a
n d M
.
C r e s t i
,
1 9 8 9
,
o r i g i n o f
s P e r m e e l l a s s o e i a t io n i n t h e
“
m a l e g e r m
u n i t
” o f B r a s s i e a P o ll e n
.
P r o ro P la s ” 才a , 1 4 9 :
1一小
[ 2 〕 D e r k s e n , J . , E . 5 . P i e r s o n , 1 . A . T r a a s ,
一9 5 5 , M i e r o tu b u le s i n v e g e t a r i 、 , e a n d g e -
n e r a t i v e e e l l s o f P o l l e
n t u b e s
.
E u r
.
J
.
C e l l B i o l
. ,
3 8 : 1 4 2一 1 4 8 ·
〔 3 〕 H e s lo p一 H a r r i s o n , J . a n d Y . H e s l o P一 H a r ·
r i s o n
,
1 9 8 8
,
T u b u l i n a n d m a le 一 g a m e t e
i n t e r e o n n e e t i o n s i n t h e P o l l e n t u b e s o f th e
g r a s s A l o P e e u o u s p r o t e 了z s i s
.
A ” 灯 . B o 亡. ,
61 : 2 4 9一 2 5 4 .
[ 4 〕 M o s e a t e ll i , A . , A . T i e z z i , R . V i g n a n i ,
G
.
C a i
,
A
.
B a r t a l e s i a n e M
.
C r e s t i
,
1 9 8 8
.
P r e s e n e e o f k i n e s i n i n t o b a e e o P o l l e n t u b e
.
I n
“
S e x u a l R e P r o d u e t i o n i n H i g h e r P l a n
·
丈s ” C r e s t i , M . , P . G o r i a n d E . P a c i n i
8 2徐是雄 24 卷
(Eds
.
) : 205 一 20 9. S p r in ge r一V e r la g.
〔5 〕P a le v itz, B . A . a n d M . C r e s t i , 2 9 5 8 , M i -
e r o t u b u le o r g a n i z a t i o n in t h e s P e r m o f
T r a des e a ” 才i a , r` g i n葱a ” a . P r o 亡o p王a sm a , 15 0 :
5 4一 7 1 .
[ 6 」 P a l e v i t z , B . A . a n d M . C r e s t i , 2 9 5 9 , C y -
t o s k e l e t a l e h a n g e s d ur 如 9 g e n e r a t i v e e e l l
d iv i s i o n a n d s P e r m f or m a ti o n i n rT ad e s
-
e a ” 犷i a v 墓r g i外 ia 摊a · P r o 忿o P正a s川 a , 15 0 : 5 4一
7 1
.
[ 7 ] P ie r s o n
,
E
.
5
.
a n d J
.
D e r k s e n
,
J
·
A
.
T r a
-
a s , 2 9 8 6
,
M i e r o t u b u l e s i n N fe o 亡i a ” a P -o
l l e n t ub e s : u lt r a s t r cu t u r a l
,
im m un o f l u o r e
-
s e e n e e a n d b ico h e m i e a l d a t a
.
I n : C r e s t五,
M
. ,
D a l l a i
,
R
.
( E d s )
. “
B io l o g y o f r e p r o
-
d u e t i o n a n d e e ll m o t i li t y i n P la n t s a n d
a n im a l s
” : 8 7一9 4 · U n i v e r s i t y o f S ie n a ,
S ie n a
.
〔 8 〕 R a u d a s k o s k i , M . , H . A s t r o m , K . P e r t t i l a ,
1
.
V i r t a n e n a n d J
.
L o u h e l a i n e n
,
1 9 8 7
,
R o l e o f t h e M i e r o t u b u l e e y t o s k e le t o n i n
P o l l e n t u b e s : a n im m u n o e y t oc h e m i e a l a n d
u l t r a s t r uc t ur a l a PP r o a e h
·
B io 之o g y 0 1 t h e
Cd l
,
61 : 1 7 7一 1 8 8 ·
[ 9 ] T a y l o r
,
P
. ,
J
·
K e n r ie k
,
Y
.
L
. ,
V
.
K a u l
,
B
.
E
.
5
.
G u n n i n g a n d R
.
B
.
K n o x
,
1 9 8 9
-
T h e m a l e g e r m u n i t o f R h诫do 助d r o ” :
q u a n ti ta t i v e e y t o lo g y
,
t h r e e一 d im e n s i o n a l
r e e o n s t r u e t i o n
,
is o la t io n a n d d e t e e t i o n
u s i n g f lu o r e s e e n t P r o b e s
,
S e x
.
P l a儿才 R e -
P r od
·
2 : 2 5 4一2 6 4 ·
[ 1 0 ] T ie z z i
,
A
. ,
A
.
M o s e a l l e l ]i
,
F
.
C i a m po lim
,
C
.
M i la n e s i
,
M
.
M ur g i a a
n
d M
.
C r e s t i
,
2 9 8 8
,
T h e e y t o s k e l e t a l a P p a r a t u s o f t h e
g e n e r a t i v e e e ll i
n s e v e r a l a n g io s P e r m s P e
-
e ie s
.
I n C r e s t i
,
M
. ,
P
.
G o r i a n d E
·
P a e in i ( E d s
.
)
“
S e x u a l R e P r o d u e t io r l i n
H ig h e r P l a n t s
” : 2 1 5一2 2 0 . S P r i n g e r一 V e r la g .
[ 1 1〕 Y u , H一 5 . , 5 . Y . H u a n d C · Z h u · , 1 9 -
8 9
,
U l t r a s t r u e t u r e o f s P e r m e e l ls a n d t h e
m a l e g e r m u n it i n P o l le n t u b e s o f N ie o
-
t玄o ” a t a b a e u m · P r o 才o P之a s川 a , 15 2 : 2 9一 3 6 ·
[ 1 2 ] Z h o u
,
C
. ,
K
.
O r d o r f f
,
C
.
P
,
D a g h l i a n
a n d A
.
E
.
D e M a g g io
,
1 9 8 8
,
I s o l a te d g e
-
n e r a t iv e e e l ls i n s o m e a n g i o s P e r m s : a f u r
-
t h e r s t u d y
.
S e x P l a 灯才 R e P r诫 · 1 : 9 7一 1 0 2·
[ 1 3〕 B r e w b a k e r , J . L . a n d B . H . K w a e k ,
1 9 6 3
,
T h e e s s e n t ia l r o l e o f e a l e i u m i o n
i n P o l l e n g e r m i n a t io n a n d P o ll e n t u b e
g r o w t h
.
A 川 . J . B o t . 5 0 : 8 5 9一 8 6 5 .
[ 1 4〕 M e l n t o s h , J . a n d K . L . M e D o n a ld , 1 9 5 9 ,
T h e m i t o t i e s Pi n d l e
·
S e i e ” t i f ie A ” Z e r止e a n
o e t o b e r : 2 6一 3 4 .
[ 1 5〕 W i e k , S · M . a n d J . D u n i e s , 1 9 8 3、 Im m u -
n o f l u o r e s e e n e e m i e r o s e o Py o f t u b u ] i n a
n d
m i e r o t u b u l e a r r a y s i n P l a n t e e l ls
.
1
.
P r e
-
P r o P h a s e b a
n
d d e
v e l o P m e n t a n d e o n e o m i
-
t a n t a PP e a r a n e e o f n u e l e a r e n v e l o P e
一 a s s o -
e i a t e d t u b u l i n
.
J
.
C e ll B i o l
.
97 : 2 3 5一 2 4 3 .
〔 1 6〕 L lo y d , C · W . a n d P · W . B a r l o w , 1 9 8 2 ,
T h e C o
一 O t d in a t io n o f C e l l d iv ls io n a 一l d e -
l o n g a t io n : T h e r o l e o f t h
e c y t o s k e l e t o n
.
I n : C
.
W
.
L l o y d ( e d
.
) :
“
T h e C y t o s k e l e t o
n
i n P l a n t G r o w t h a
n d D e v e lo Pm e n t
”
2 0 3一
2 2 8
.
A e a d e m ie P r e s s
.
[ 1 7 〕 W a n g , H . , A · J · C u t le r , M , S a l e e m a n d
C
.
C
.
F o w k e
,
2 9 8 9
,
M i e r o t u b u l
e s i n m
a i
-
z e P r o t o P l a s t s d e r i v e d f r o m c e l ] s u s P c n
-
5 io n e u l t u r e s : e f f e e t
o f e a le i u m a 门 d m a g
-
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界沙f卜
8 4 徐是雄 2 4 卷
圈 版 说 明
图 版 I
图 1 花粉管中的微管束 。 x 1 2 5。
图 Z A Z B Z C 为同一细胞。 经微管免疫荧光标记及 H 一 3 3 2 5 8 的 D N A 专一荧光染料染色 , 细胞处于早
前期阶段 。 Z A 和 Z B 为两个在不同焦距拍摄的影象 : Z A 在细胞中央 , Z B 在细胞近衷而的部位 , 示
微管束成紧密网状 , Z C 用 H 一 33 2 5 8 染色 , 示细胞核位置。 x 了8 7 。
图 3 A 3 B 3 C 为同一细胞。 经微管免疫荧光和 H 一 3 3 2 : 8 处理细胞处于中前 )刀阶段 , 示疏松网状微管束
的分布情形 。 3 A 和 3 B 为不同焦距影象 。 3 C 为 H 一 3 3 2 0 8 染色 , 示核位民 。 x 1 2 5。
图 4 A 4 B 为同一细胞 , 处于晚前期阶段 。 4 A 示与细胞纵轴平行排列的微管束。 注 意微 价束看来粗而
直 。 4 B 用 H 一 3 3 2 5 8染色 , 示染色体位置 。 又 1 2 5 0
图 s A S B 为同一细胞 , 处于早中期阶段 。 S A 示与细胞 下行的微锌束 , 这些微订束比在晚耐 :的 (图 4 A )
的微管束为细 , 且有些还呈波浪状 。 S B 用 H 一3 3 2 5 8 染色 , 示染色体东这一阶段的结构形态 。 、 1艺二。
奋
E X P L A N A T I O N O F F I G U R E S
P L A T E I
F i g
。
1 M ie r o g r a P h o f im m u n o f l u o r e s e e
r二e e P r e F a r a t i o n f r o m r o l l e n t u b e s h o w i卜 9 r h e d i s t r i b u t i o n
o f m i e r o t ub u le s
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e t h a t s o m e o f t h e m ie r o t u b u l公: a r e w a v e一 l ik e i里1 a Pp e a r a 厂 e e
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x l
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2 5 0
F i g s
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Z A & 2 B S u e e e s s iv e o P t i e a l s e e t i o n s o f a n e a r l y 一 P r o Ph a s e g e n c r a t iv e e e l l
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2 A
n e a r t h e
m id r e g io n o f t h e e e l l
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Z B r e a r t h e e e l l s u r f :飞e e
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T h e m ie r o t u b u le s i
n t h e g e n e
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r a ti v e e e l ] a r e 1
1, t h e f o r m o f a t i g h t ly w o v e 21 r e t ie u la t e e a g e a r d t h e s h a P e o f
t h e g e n e r a t iv e e e l l lo o k s ] ik e a ta d p o j e
。
N 二 r u e l e u s 。 x 7 8 7
F lg
.
2 C H一 3 32 5 8 5 ! a in e d s h o w i n g t h e s h a P o a 只d P o s i t io , o f t h e n u e l e u s o f t h e g e r e r a t i v e e e l l
s h o w n i n Z A & Z B
。 x 7 8 7
Fi邵 。 3 A & 3 B S u e e e s s iv e o P t i e a l s 己 e t i o n s o f a m i d一 P r o p h a s e g e n e r a t i v e e e l l . 3 A n c a r t h e m i d
r e g i o n o f t h e e e l l
.
3 B n e a r t h e e e l l
s
ur f a e e
.
T h e
n e t w o r k o f
r e t ie u l a t e m ie r o
-
t u b u le s 15 m o r e o P e n a t t h i s s ta罗 。 又 1 , 2 5 3
F i g
。
3 C H一 3 3 2 58 s ta i n e d s h o w i , 9 e h r o m o s o m e s i n a n e r l a r g i r
·
g 一, u e l e u s ( N )
.
x z
,
2抓。
F i g
。
4 A L a t e一 P r o P h a s e , s h o w i几9 t h e P r e s e n e e o f a x i a l m ie r o tu b u le e a g o in t h e e e l l
.
N o t e t h a t
t h e s e m i e r o t u b川 e b u n d le s a r e q u it e s t r a i g h t a r d t h i e k . x l , 2 5 )
F i g
.
4 B S a m e e e l l a s 在A b u t H一 3 3 2 5 5 s ta i n e d s h o w i r g e h r o m o s o m a l e o r d e r s a t i o n . x z , 2 5 0
F i g
.
5 A P r o m e t a P h a s e
.
M ie r o t u b u le s a t t h is s t a g e a r e t h i打 r e r a r d m o r e w a v y t h a n t h o s e s h o w n
i n 4 A s u g e s t i n g t h a t a t t h i s s t a g e t h e m ie r o t u b u le e a g e is t一
n d e r g e i ; 9 r e o r r a n g e m e
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o r i n a s t a te o f t r a n
s i t io n
。 沉 1 , 2 5 0
F i g
.
5 B S a m e e e ll a s 5 A b u t H 一 3 3 2 5 8 s ta i n e d s h ow i
几 9 e h r o m o s o m o s u o d e r g o i” 9 r e a r r a n g e m e n t
,
X l
,
2 5 0
鼓
2 期 黄蝉花生殖细胞有丝分裂期间微管的动态
图 版 工
加 徐是雄 2 4卷
图 版l
奋
`
2 期 黄蝉花生殖细胞有丝分裂期间微管的动态 8 7
图 版 l
,
图 6 A 6 B 为同一细胞 , 处 于中期 。 6 A 示纺锤休 。 箭夕、示有些微管束炸不附着染色体而是从一 极 延 伸
至另 一极 。 6 B ,J/ H一 3 25 8染色 , 小喂色体聚集在赤进板位置 。 x 1 2 5 0
图 7 A 7 B 为同一细胞 , 处 于早 !引川阶段 , 7 A 示在纺锤休中央部位荧光较弱 , 显示在这一 区 域 微管较
少 。 但近极端荧光很强 。 7 B 一勺 H 一 3 3 2 5 8 染色 , 示姊妹染色体正在分开向两极移动 。 x 1 2 5 0
图 8 A S B 为 4 一同细胞 ,处 J几晚 ! ,刊明阶段 。 S A 示类似成膜体微竹正在形成 。 因为在两核之间部位荧光特别
强 , 显示在这区域微管浓度个!!当 };石。 但在两极荧光也颇强 。 S B 为 H 一 3 3 2 5 8 染色 , 示在这阶段染色体
团已在两极形成 。 x 1 2 5。
图 g A g B 为同一细胞 , 处 一 j二末期 。 g A 能头示类似 “ 成膜体连接区 ” 结构 。 S : 精 r 。 g B 为 H 一 3 3 2 5 8 染
色 , 示染色体团又开始散开 。 火 1 2 5 0
P L A T E 五
F i g
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e o f m i e r o t u b u le s 15 n o I o n g e r o b v i o u s a t t h i s s t a s e
·
A r r o w i n
-
d ie a t e s t h e p r e s e n e e o f n o n 一 k i n e t o e o r e m i e r o t u b u le s
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s o m e s a l ig n i n g t h e m s e l v e s o n t ll e e q u a t o r i a l P la t e
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一 a n a p h a s e ( o r a n a p h a s e A ) s h o w i n g t h a t t h e r e 15 a w e a k e n i n g i n t h e i n t e n s i t y o f
f l u o r e s e e n e e a t t h e e q u a t o r ia l P la t e r e g i o n
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B u t t h e r e 15 s t r o
n g f l u o r e s e e n e e a t t h e P o l a r
r e g i o n s
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F i g
.
7 B S a m e e e l l a s 7 A b u t H 一 3 3 2 5 3 s ta i n e d , s h o w i n g s i s te r e h r o m a t i d s s e P a r a ti n g a n d m o v -
i n g t o w a r d
s o P P o s i t e P o le s
.
x l
,
2 5 0
F i g
.
8 A L a t e
一 a n a P h a s e ( o r a n a Ph a s e B )
.
N o t e t h e r e 一 a P P e a r a n e e o f s t r o n g m i e r o t u b u l e i m m u n o -
f l u o r e
s e e n e e ( p r o b a b ly
r e p r e s e n t i n g p h r a g m o p l a s t m i e r o t u b u l e s ) i n t h e m i d r e g i o n o f t h e
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A l s o n o te t h e P r e s e n e e o f f l u o r e s e e
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9 B S a m e e e l l a s 9 A b u t s t a i n e d w i t h H 一 3 3 2 5 8 . N o t e t h a t t h e e h r o m o s o m e s w i t h i n t h e n u -
e l e i a r e l o s e n i n g 即 . x z , 2 5 0