作 者 :徐是雄;Organ-单位: 香港大学植物系;
期 刊 :Journal of Integrative Plant Biology 1991年 10期 页码:776-779+819-820
关键词:分离;渗透压法;生殖细胞;分裂;黄蝉;
摘 要 :本文采用改进的二步渗透压法,分离黄蝉(Allemanda neriifolia)的生殖细胞。先将花粉放在含50%蔗糖的BK培养液内,28℃,往复振荡90次/分,培养2小时。在此条件下花粉不但能够萌发,且能形成长约300μm的花粉管。培养2小时后加入适量的不含蔗糖的BK培养液,使原培养液的蔗糖浓度由50%骤降至30%,大量花粉管受到渗透压冲击在末端破裂,释放出包括生殖细胞在内的内含物,经过滤、荧光素二醋酸酯鉴定,具有酯酶活性和完整的细胞膜,生殖细胞仍然保持生活力。生殖细胞从花粉管释出后,在很短的时间内(约30分钟)便全部由纺锤形变为圆球形。在含30%蔗糖的BK培养液内悬浮培养,离体的生殖细胞不但...