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高通量表达谱芯片和MAS工具探讨普洱茶保健作用的分子机制



全 文 :云南农业大学学报 Journal of Yunnan Agricultural University,2014,29 (6) :853 - 860 http:/ /xb. ynau. edu. cn
ISSN 1004 - 390X;CODEN YNDXAX E-mail:xb@ ynau. edu. cn
收稿日期:2013 - 04 - 09 修回日期:2014 - 07 - 07 网络出版时间:2014 - 11 - 04 14:07
* 基金项目: 云南省科技创新强省计划 (2009AB021) ; 云南省自然科学基金面上项目 (2012FB151)。
作者简介: 宋爽 (1982 -) ,男,吉林通化人,博士,讲师,主要从事茶叶功效机理研究。
E-mail:bob. song@ 126. com
**通信作者Corresponding author: 盛军 (1962 -) ,男,辽宁本溪人,博士,教授,主要从事云南特色植物资源保健
作用研究。E-mail:Shengjunpuer@ qq. com
网络出版地址:http: / /www. cnki. net /kcms /detail /53. 1044. S. 20141104. 1407. 017. html
DOI:10. 3969 / j. issn. 1004 - 390X (n). 2014. 06. 011
高通量表达谱芯片和 MAS工具探讨普洱茶
保健作用的分子机制*
宋 爽1,2,王宣军2,郝淑美3,盛 军1,2**
(1. 吉林大学 生命科学学院,吉林 长春 130012;2. 云南农业大学,普洱茶学教育部重点实验室,云南 昆明 650201;
3. 云南大学 校长办公室,云南 昆明 650091)
摘要:为了解饮用普洱茶 2 个月后健康小鼠肝脏中 mRNA表达情况及关信号通路的变化,本研究选用健康昆
明鼠为模型,自由饮用普洱茶 2 个月,使用高通量基因芯片分析肝脏细胞中 mRNA变化情况,通过聚类分析
软件 Cluster以及分子作用注释系统 MAS 对基因芯片的结果进行统计分析。试验共得到 409 个表达差异的基
因,其中 291 个表达差异基因参与了 123 条信号通路; 在胆固醇和不饱和脂肪酸生物合成、胰岛素信号通路、
PPAR信号通路成分的 mRNA表达变化都很明显。这些变化表明普洱茶在防治高血脂、脂肪肝、糖尿病等疾
病有很好的效果。本研究为研究普洱茶保健作用的机制提供了线索。
关键词: 普洱茶功效; 表达谱芯片; 分子功能注释系统; 代谢调节
中图分类号:R 151. 3 文献标志码:A 文章编号:1004 - 390X (2014)06 - 0853 - 08
Analyzing the Molecular Mechanism of Pu-erh Tea Function by High
Throughput Expression Microarray Combined with MAS Tool
SONG Shuang1,2,WANG Xuanjun2,HAO Shumei3,SHENG Jun1,2
(1. College of Life Sciences,Jilin University,Changchun 130012,China;
2. Key Laboratory of Pu-er Tea Science,Ministry of Education,Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,China;
3. Yunnan University,The Office of Headmaster,Kunming 650091,China)
Abstract:The mRNA expression variation in healthy mice liver after 2 month puerh-tea drinking was in-
vestigated and some clues from the change of cell signaling pathway was found. In this study,healthy Kun-
ming mice were selected to study the effect of Pu-erh tea. High throughout expression micro-array and mo-
lecular annotation system (MAS)were employed to analyze the alteration in gene expression. Total 409
genes expression were changed after 2 month Pu-erh tea drinking (2 mg /mL),out of which 291 genes were
involved in 123 signaling pathways,and obviously change involved in biosynthesis of steroids,biosynthesis
of unsaturated fatty acids,insulin signaling,and PPAR signaling. It is suggested that the puerh-tea play a
important role in the prevention of hyperlipidemia,fatty liver disease,diabetes and other diseases in healthy
individuals. These results provided clues for the research of Pu-erh tea functions in future.
Key words:Pu-erh tea function;expression microarray;molecular annotation system (MAS);metabo-
lism regulation
随着经济发展、人民生活水平的提高以及饮
食结构的改变,以高血糖、高血脂为特征的糖尿
病、肥胖、高血脂、脂肪肝等疾病随着社会人口
老龄化的趋势而急剧增加,对社会发展和经济建
设造成极大负担。利用茶叶中的活性成分进行糖
尿病和高血脂的治疗、普洱茶在病理学模型中的
功能验证等研究已取得显著效果,如高脂饮食模
型、肥胖模型[3 - 6]、糖尿病模型[7]等。但是普洱
茶水溶物成分复杂[1],特别是功能物质茶褐素分
离单体困难[2],制约了普洱茶功效的研究,对于
健康状态下饮用普洱茶的保健防病作用研究还很
少,在肝脏基因表达谱以及蛋白表达谱等方面还
处于空白。表达谱芯片是近年来发展较快的高通
量 mRNA表达检测的一种生物学检测芯片,其应
用广泛、技术成熟。本文利用表达谱芯片对健康
昆明鼠饮用普洱茶后,肝脏和肌肉中 mRNA 表达
变化进行了聚类分析,为揭示普洱茶的功能作用
机理提供参考。
1 材料与方法
1. 1 普洱茶水提物制备
选用普洱茶树良种厂普洱茶熟茶,按 1∶10 加
水,煮沸浸提 10 min,用喷雾干燥器将茶汤的水
分去除,制成干粉。
1. 2 试验动物及其饮水
SPF级小鼠 8 周龄雄性昆明鼠 10 只,购入时
体重 (20 ± 3)g,随机分笼,每笼 5 只,饲料为
鼠用全价颗粒饲料,高压灭菌,常温贮存。试验
组饮水为普洱茶水,按 2. 5 mg /mL 将普洱茶提物
干粉用煮沸的矿泉水溶解,每天更换新鲜饮水,
并对水瓶消毒; 对照组饮水为煮沸放凉的矿泉水。
1. 3 组织中 RNA提取
小鼠采用以上饮水和饲料喂养 8 周后,将小
鼠引颈处死。在肝脏相同部位采样,每次采样
0. 1 g,每组 5 只样品混合在一起,浸入液氮冷冻
后放入预冷的研钵,不断加液氮研磨,研磨均匀
后,加 Trizol 搅拌,直至恢复室温。将研钵中的
混合物转移至 1. 5 mL EP管中,按照 Trizol说明书
对 RNA进行提取; 提取后的总RNA 使用 70%乙
醇沉淀后,保存在 90%乙醇中, - 80 ℃保存,干
冰运输,取少量送至北京博奥进行反转录探针合
成、芯片杂交和扫描,其余样品用于后续分析。
1. 4 扫描与图像获取
选取的芯片类型为 affymetrix 小鼠基因组 430
2. 0,采用的扫描仪类型为 affymetrix scanner 3000
7G,扫描软件版本为 Affymetrix GeneChip Oper-
ating Software Version 1. 4。扫描与图像获取步
骤为:
(1) 杂交结束前,打开GCOS 软件,建立实
验信息,包括输入芯片的 Barcode;
(2) 准备Fluidics Station,运行 Prime;
(3) 在Fluidics 对话框中,选择 Experiment
Name,根据芯片类型不同选择相应的 Protocol,
点击运行,开始芯片清洗染色;
(4) 芯片扫描,芯片可以在4℃避光贮存直
至扫描;
a. 芯片清洗染色结束前,将扫描仪激光灯打
开,预热 10 min。将芯片从 4℃环境中取出,平
衡至室温,扫描;
b. 芯片清洗染色结束后,清除芯片后面隔片
周围的液体;
c. 仔细地将 Tough-Spots 分别贴到 2 个隔片
上,压紧确保 spots 平整。如果 spots 不平整,有
突起、气泡、水珠或者边缘不整齐,则弃之并更
换新的 spots;
d. 检查玻璃表面,如有必要用无摩擦的毛巾
或者棉纸清洁玻璃表面;
e. 将芯片放入扫描仪中,开始扫描,检查自
动聚焦,确保 Tough-Spots 没有干扰聚焦。如果观
察到提示聚焦错误信息,则弃之并更换新的
spots。如果聚焦正常,芯片开始扫描,根据 Affy-
metrix小鼠基因组 4 302. 0 要求,在最大分辨率下
扫描;
(5) 芯片数据通过Affymetrix microarry suite
version 5. 0 进行处理,应用 GCOS 软件将芯片信
号转变成数字信号。
1. 5 聚类分析
利用斯坦福大学开发、北京博奥提供的聚类
分析软件 Cluster 3. 0 对表达有差异的基因进行层
次分析。具体方法如下: 将两组样品扫描后得到
的数据制作成纯文本格式,打开 Cluster3. 0,将数
据导入,用差异大于 2 或者小于 0. 5 作为筛选条
件,对数据进行过滤,选择 average inkage 按钮,
分析好的图像用 TreeView输出。
458 云南农业大学学报 第 29 卷
1. 6 GO (Gene ontology) 分析
采用博奥生物芯片公司开发的 MAS3. 0 分子
注释在线分析系统对扫描后得到的数据进行分析,
待分析完成后,选择 GO—all input symbols—GO
mapping,点击 next level和 initialize查看结果,输
出格式选择 JPG格式。
1. 7 细胞信号通路分析
用 MAS3. 0分子注释在线分析系统对扫描后得
到的数据进行分析。待分析完成后选择 pathway—
all input symbols—index by pathway—KEGG—data
table在 KEGG中查询细胞信号通路并计算相应的
显著性差异 (P值) 与误差 (Q值)。
2 结果与分析
2. 1 芯片杂交和扫描质量分析
在芯片杂交后整张芯片的扫描图像四周呈现
明暗交替 ( 图1) ,左上角GeneChip Mouse 4302
字迹清晰亮度适中; 内参基因β-actin 和 GAPDH,
杂交对照 bioB,bioC,bioD 和 cre,PolyA 对照
lys,phe,thr,dap以及 trpn扫描得到的平均背景
值在 20 ~ 100 之间,杂交后能检测到杂交对照和
PolyA信号均呈递增趋势,说明杂交合格,扫描
数值可信度较高; 内参探针组Cy5 /Cy3 的比值大
于 3. 0,表明芯片中应用的样品合格探针质量达
标; 对扫描数值中样品表达P 值、芯片背景平均
值以及噪点的统计得到的数值均在适当范围内,
芯片扫描数值可用于后续分析。通过数据分析发
现,与对照组相比,自由饮用普洱茶水提物 2 个
月后,小鼠肝脏中基因表达情况发生明显改变,
共发现 409 个基因变化,其中 198 个基因下调,
211 个基因上调。
2. 2 聚类分析
如图 2 所示,表达谱图谱中以对照组和普洱
茶组的荧光强度值作图,每一个数据点代表芯片
上一个基因的杂交信号 (Cy5 /Cy3 的比值) ,对
数值为正用红色表示,值越大红色越亮,表示基
因表达的水平越高,受到的诱导越强; 对数值为
负用绿色表示,值越小绿色越亮,表示基因表达
的水平越低,受到的抑制越强; 黑色是无变化的
基因。可以看出,在肝脏表达谱中,无论受诱导
的基因谱还是受抑制的基因谱,饮用普洱茶组与
对照组都存在很大区别。
2. 3 GO分析
如表 1 所示,经过第 2 层次 GO 分析后,
差异基因被分成若干类别,按所占比例由高到
558第 6 期 宋 爽,等: 高通量表达谱芯片和MAS工具探讨普洱茶保健作用的分子机制
低排序,前 5 位的生物功能分别是: 细胞过程
(GO: 0009987 cellular process)、生 理 过 程
(GO:0007582 physiological process)、生物学
调节 (GO:0065007 biological regulation)、代
谢 (GO:0008152 metabolism)、生物学过程调
节 (GO: 0050789 regulation of biological
process)、催 化 活 性 (GO:0003824 catalytic
activity) ,总占比超过45%。经过 GO 分析后,
在 MAS3. 0 的辅助下对生物功能按比例进行了
排序 ( 图3)。
表 1 差异表达基因 GO功能分类
Tab. 1 Classification of expression difference gene by GO function
GO功能分类
GO term
数量
count
所占比例 /%
percent
细胞过程 GO:0 009 987 cellular process 346 0. 147 359
生理过程 GO:0 007 582 physiological process 332 0. 141 397
生物学调节 GO:0 065 007 biological regulation 164 0. 069 847
新陈代谢 GO:0 008 152 metabolism 156 0. 066 44
生物学过程调节 GO:0 050 789 regulation of biological process 139 0. 059 199
催化活性 GO:0 003 824 catalytic activity 120 0. 051 107
发育过程 GO:0 032 502 developmental process 118 0. 050 256
多细胞有机生命过程 GO:0 032 501 multicellular organismal process 116 0. 049 404
其他 GO other items 111 0. 047 274
结合 GO:0 005 488 binding 101 0. 043 015
细胞 GO:0 005 623 cell 90 0. 038 33
细胞组分 GO:0 044 464 cell part 90 0. 038 33
蛋白定位 GO:0 051 179 localization 67 0. 028 535
应激反应 GO:0 050 896 response to stimulus 65 0. 027 683
定位建立 GO:0 051 234 establishment of localization 64 0. 027 257
生物过程正向调节 GO:0 048 518 positive regulation of biological process 58 0. 024 702
细胞器 GO:0 043 226 organelle 54 0. 022 998
免疫系统过程 GO:0 002 376 immune system process 35 0. 014 906
细胞器组分 GO:0 044 422 organelle part 34 0. 014 48
生物过程负向调控 GO:0 048 519 negative regulation of biological process 30 0. 012 777
转运活性 GO:0 005 215 transporter activity 24 0. 010 221
宏观分子复合物 GO:0 032 991 macromolecular complex 20 0. 008 518
分子传感器活性 GO:0 060 089 molecular transducer activity 14 0. 005 963
其中,与代谢功能相关的变化基因共有 156
个,但实际上另外几种功能分类如生理过程、生
物学调节、生物学过程调节以及催化活性都与能
量代谢相关。这就说明,普洱茶在肝脏代谢过程
中起着非常重要的作用; 在降血脂、降血糖等方
面也有这些信号的参与。
2. 4 细胞信号通路分析
数据经 MAS 3. 0 中细胞信号通路分析 (sig-
naling pathway) 查询KEGG 数据库后显示,291
个差异表达基因参与到 123 条细胞信号通路中,
其中 59 条通路显著富集 P < 0. 01。根据各条信号
通路的显著性 (P) 进行排序 ( 表2) ,表明主要
的代谢相关功能信号通路包括: 固醇生物合成、
不饱和脂肪酸生物合成、胰岛素信号和 PPAR
信号。
将代谢相关信号成分展开,在固醇类生物合成
信号通路中所有成分都下调 ( 表3) ,说明普洱茶
对固醇类化合物的生物合成很可能普遍具有抑制作
用。受抑制的基因包含胆固醇合成的关键限速酶,
如鲨烯环氧酶、三羟基三甲基戊二酰-CoA合成酶。
不饱和脂肪酸合成的信号通路成分中包含硬脂酰辅
酶 A去饱和酶 1 (SCD-1) ,这种蛋白早在2002 年
就被发现与肥胖相关[8],普洱茶能显著抑制肝脏组
织 SCD-1的表达,推测普洱茶抗肥胖的功效可能是
通过 SCD-1调节相关靶基因来实现的。
除代谢相关的信号通路的基因表达发生显著
变化以外,普洱茶在小鼠肝脏中引起明显变化的
还有 B细胞信号通路和肿瘤生成相关基因,也发
生了基因表达变化,且 P 值均小于 10 -5,Q 值均
小于 10 -4 ( 表3)。
658 云南农业大学学报 第 29 卷
表 2 差异表达基因参与的细胞信号通路
Tab. 2 Expression difference gene related signaling pathway
信号通路
signaling pathway
基因数量
count
P Q
固醇生物合成 biosynthesis of steroids 8 2. 48E - 16 3. 70E - 14
前列腺癌 prostate cancer 8 4. 14E - 11 3. 08E - 09
细胞因子及其受体相互作用 cytokine-cytokine receptor interaction 9 6. 13E - 09 2. 67E - 07
不饱和脂肪酸生物合成 biosynthesis of unsaturated fatty acids 5 7. 17E - 09 2. 67E - 07
脂肪细胞因子信号 adipocytokine signaling pathway 6 1. 02E - 08 3. 02E - 07
B细胞受体信号 B cell receptor signaling pathway 6 1. 22E - 08 3. 02E - 07
PPAR信号 PPAR signaling pathway 6 2. 02E - 08 4. 30E - 07
胰岛素信号 insulin signaling pathway 7 2. 80E - 08 5. 22E - 07
急性骨髓白血病 acute myeloid leukemia 5 2. 19E - 07 3. 63E - 06
钙信号 calcium signaling pathway 7 3. 89E - 07 5. 80E - 06
药物代谢细胞色素 P450 drug metabolism-cytochrome P450 5 1. 18E - 06 1. 59E - 05
细胞连接 gap junction 5 2. 59E - 06 3. 22E - 05
生理节律 circadian rhythm 3 3. 94E - 06 4. 52E - 05
视黄醇代谢 retinol metabolism 4 1. 87E - 05 1. 74E - 04
Jak-STAT信号 Jak-STAT signaling pathway 5 2. 81E - 05 2. 46E - 04
MAPK信号 MAPK signaling pathway 6 3. 08E - 05 2. 55E - 04
造血细胞系 hematopoietic cell lineage 4 4. 45E - 05 3. 49E - 04
EGFR信号 EGFR signaling pathway 4 4. 87E - 05 3. 52E - 04
萜类生物合成 terpenoid biosynthesis 2 4. 97E - 05 3. 52E - 04
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表 3 部分信号通路组分
Tab. 3 Detail of several signaling pathway
部分信号通路
part of signaling pathway
信号通路中富集的基因
gene enrichment in signaling pathway
变化的倍数
fold
固醇类生物合成
biosynthesis of steroids
比如鲨烯环氧酶 (sqle) 0. 335 2
三羟基三甲基戊二酰 - CoA合成酶 (hmgcs) 0. 311 5
异戊烯基 -二磷酸 - Δ异构酶 (Idi1) 0. 179 8
甲羟戊酸脱羧酶 (Mvd) 0. 368 5
细胞色素 P450 家族 51 (Cyp51) 0. 388 5
NADPH脱氢酶 (Nqo1) 0. 419 9
NADP依赖的固醇脱氢酶 (Nsdhl) 0. 467 5
固醇 C4 甲基氧化酶 (Sc4mol) 0. 481 2
固醇 C5 去饱和酶 (Sc5d) 0. 487 0
不饱和脂肪酸生物合成
biosynthesis of unsaturated fatty acids
乙酰辅酶 A硫酯酶 3 (Acot3) 0. 231 0
硬脂酰辅酶 A去饱和酶 (SCD1) 0. 367 7
乙酰辅酶 A硫酯酶 3 (Acot4) 0. 427 7
OTU去泛素酶 1 (Yod1) 0. 452 8
脂肪酸合成酶 (Fasn) 0. 485 5
胰岛素信号
insulin signaling pathway
细胞因子信号抑制因子 3 (Socs3) 0. 312 2
v-raf鼠肉瘤病毒 3 611 病毒同源致癌基因 (Araf) 0. 39
脂肪酸合成酶 (Fasn) 0. 485 4
过氧化物酶体增殖物激活受体 γc1α (Ppargc1a) 2. 024
真核生物翻译起始因子 4E结合蛋白 (Eif4ebp1) 2. 061
MAP激酶相互作用丝氨酸苏氨酸激酶 (Mknk2) 2. 10
葡萄糖 - 6 -磷酸酶 (6pc) 2. 941
PPAR信号
PPAR signaling pathway
细胞色素 P450 家族 4a14 (Cyp4a14) 0. 058
细胞色素 P450 家族 4a10 (Cyp4a10) 0. 284
硬脂酰辅酶 A去饱和酶 (SCD1) 0. 367 7
泛素 C (Ubc) 2. 164
脂蛋白酯酶 (Lpl) 2. 688
类血管生成素 (4Angptl4) 3. 906
急性骨髓白血病
acute myeloid leukemia
v-raf 鼠肉瘤病毒 3611 病毒同源致癌基因 (Araf)
IKK,核因子 kB激酶抑制蛋白 (Ikbkg)
类转录因子 7,T细胞特异 (Tcf7l2)
真核生物翻译起始因子 4E结合蛋白 (Eif4ebp1)
锌指结构和 BTB包含蛋白 16 (Zbtb16)
0. 39
0. 459
0. 468
2. 061
2. 127
前列腺癌
prostate cancer
血小板来源生长因子 (Pdgfc) 0. 389 7
v-raf 鼠肉瘤病毒 3 611 病毒同源致癌基因 (Araf) 0. 39
IKK,核因子 kB激酶抑制蛋白 (Ikbkg) 0. 459
类转录因子 7,T细胞特异 (Tcf7l2) 0. 468
cAMP反应元件结合蛋白 1 (Creb1) 0. 498
表皮生长因子受体 (Egfr) 2. 079
NFkB轻链基因增强子 (Nfkbia) 2. 092
固醇 5α -还原酶 (Srd5a1) 2. 544
细胞因子及其受体相互作用
cytokine - cytokine receptor interaction
催乳素受体 (Prlr) 0. 3192
血小板来源生长因子 (Pdgfc) 0. 389 7
抑制素,βE,(Inhbe) 0. 448 4
c-c序列趋化因子配体 6 (Ccl6) 2. 07
白血病抑制因子受体 (Lifr) 2. 087
表皮生长因子受体 (Egfr) 2. 079
白细胞介素 - 6 受体 α (Il6ra) 2. 207 5
包含 c-x-c结构趋化因子配体 14 (Cxcl14) 4. 237 5
858 云南农业大学学报 第 29 卷
如表 3 所示,试验结果中健康小鼠在饮用普
洱茶后胰岛素相关基因发生变化,即: 细胞因子
信号抑制因子 3 (Socs3,0. 3122) 下调至对照的
1 /3,说明对胰岛素信号有正向调节作用。SOCS
是一类酪氨酸磷酸酶,对受体酪氨酸激酶的激活
有抑制作用,体现在对信号的负调控方面[9]。在
能量消耗方面,过氧化物酶体增殖物激活受体
γc1α,真核生物翻译起始因子 4E 结合蛋白
(Eif4ebp1) 和葡萄糖- 6 - 磷酸酶 (6pc) 均上
调,说明普洱茶可以进行双向调节,一方面增强
胰岛素信号,另一方面增加能量消耗。单从 SOCS
在转录水平的降低一方面就能说明饮用普洱茶的
习惯对于预防糖尿病,增加胰岛素敏感性方面有
促进作用。
3 讨论
普洱茶的保健功效研究取得了比较理想的效
果[1 - 10],本研究结果与这些现象相对应,且这些
现象与结果虽然可以被分门别类,列入某一种细
化的功能或者细胞信号通路中,但动物体并不是
一台复杂的机器,可以拆分出不同的部分,不同
的细胞功能与繁复的细胞信号相互配合可以体现
为极为简单的临床效果,比如体重的增减。从比
较高层的 GO 分析来看,普洱茶的保健功能体现
在调节代谢方面,众多信号成分参与其中。在研
究验结果中显著变化的信号通路包括固醇生物合
成信号、不饱和脂肪酸合成信号、胰岛素信号和
PPAR信号。这些信号或者机制在已有研究中均
得到体现,如促进高密度脂蛋白的合成及受体
mRNA表达; 降低低密度脂蛋白的合成[11 - 13]; 抑
制鲨烯合成酶的表达和活性; 抑制3H -甲羟戊酸
掺入细胞胆固醇合成[11]。
炎症因子与炎症反应是现代医学研究热点,
炎症反应与代谢疾病、与自身性免疫疾病、与肿
瘤发生密切相关。普洱茶中富含茶色素,对免疫
细胞炎症因子的合成与释放具有抑制作用。方崇
业等[10]对普洱茶水提物抑制白细胞介素 1β 分泌
的相关研究显示,茶色素能够抑制 LPS 引起巨噬
细胞炎症反应。李春磊等[14]发现茶色素对肿瘤坏
死因子 α的分泌具有抑制作用,于海双[15]研究证
明茶色素在抑制 LPS 引起的巨噬细胞白细胞介素
6 的分泌,而胰岛素抵抗的糖尿病病人的发病与
炎症相关。流行病学调查结果显示: 人血清中炎
症因子 IL - 6 的含量与肥胖、胰岛素抵抗现象正
相关[16]。DUNCAN等[17]通过为期 9 年的临床病
例调查发现: 长期的低水平炎症反应会导致II 型
糖尿病的发生;FRANK 等[18]也得到了类似的研
究结果。此外,肿瘤坏死因子 α[19]和白细胞介素
1β两种细胞因子也与糖尿病发病十分相关[20]。
这些证据说明饮用普洱茶可以通过抑制炎症因子
分泌来预防糖尿病,本试验结果同样显示炎症因
子信号、脂肪炎症因子信号、趋化因子受体和白
介素 6 受体表达变化都会通过这条途径起作用。
普洱茶熟茶中富含没食子酸,有文献显示没
食子酸对 PPAR信号通路具有激活作用[21]。张冬
英等[22]证明没食子酸可以明显激活 PPAR 信号通
路。肥胖、低水平炎症反应与胰岛素抵抗为特点
的 II型糖尿病中间的联系极有可能是将代谢相互
联系的 PPARγ[22 - 23],其中的信号网络关系极为
复杂,至今仍是研究的热点。本研究发现的代谢
信号通路方面的基因表达变化可能参与临床上降
血脂、降血糖功能[24 - 26]的体现,因为代谢紊乱是
很多机体富营养病症的主要特点,在代谢方面对
机体进行调节也许是对这类疾病进行治疗的途径
之一。
ZHAO等[27]发现普洱茶能下调突变 P53,具
有抗肿瘤作用,这与本研究在信号通路分析中得
到的信息比较相符。此外,在试验结果中,B 细
胞信号变化也许与普洱茶提高机体免疫力的功能
相关,即: 茶多糖具有增强体液免疫作用[28 - 29]。
这些结果与普洱茶预防和治疗肿瘤密切相关,为
普洱茶临床应用提供了线索。但由于试验条件所
限,单从基因表达水平来分析普洱茶的保健作用
有一定的局限性,因此,蛋白磷酸化水平以及蛋
白表达水平检测会在将来的工作中继续进行。
4 结论
饮用普洱茶可以在健康昆明鼠肝脏中改变多
个层次基因的表达,这些基因通过参与脂类代谢、
糖代谢、肿瘤形成等多方面信号通路,多条信号
通路互相参与,反映在表象上的效果是减肥、降
血脂、降低糖尿病发病风险。这些结果为深入研
究普洱茶保健功能提供了线索。
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068 云南农业大学学报 第 29 卷