全 文 :Chin J Dermato Venerol Integ Trad W Med 2011, Vol.10 No.1··
马拉色菌(Malassezia)是一种皮肤寄生菌,从头皮、胸、背
部取检阳性率可达 74%~100%[1],可诱发或加剧皮炎、毛囊
炎、瘙痒病等症状,其特征与其它病菌引起的皮肤病基本相
似,虽然临床上抗菌药物的出现给真菌病的治疗带来转机,
但由于毒副作用大等特点,使患者难以接受。近几年来,随
着糖皮质激素、广谱抗生素、放化疗的广泛应用,马拉色菌
引起的皮肤感染日益增多,愈来愈受到临床医师的关注。国
内许多学者将研究重点转移到中药抗真菌作用方面。中药
辞海记载谷精草有抗皮肤浅表真菌作用,且安全无毒副作
用 [2,3],而谷精草有无抗马拉色菌作用,国内至今尚无报道。
为开发谷精草的临床应用,本实验采用 CLSI M27 A2方法对
其进行了体外抗马拉色菌实验研究。
1 材料和方法
1.1 材料 谷精草 500 g(青岛海慈医疗集团中药房提供),
蒸馏水(青岛海慈医疗集团制剂室提供),三乙醇胺(青岛精
细化工厂,生产批号:20090408)。
受试菌株:糠秕马拉色菌(2-1878),合轴马拉色菌(2-
2081),由复旦大学附属华山医院皮肤科真菌室提供。
1.2 谷精草洗剂制备
1.2.1 制备方法 ①中药谷精草加蒸馏水浸泡 30min,用挥
发油提取器按水蒸汽蒸馏法提取挥发性成分,蒸馏后的水溶
液另器收集;余药渣煎煮 2次,第 1次 2 h,第 2次 1.5 h,合并
煎液,滤过,离心,浓缩滤液,加入挥发成分共 1 000mL,50%
浓度。②用三乙醇胺调节 pH值至 6.0~7.0。搅匀即得。
1.2.2 分组 A组:50%谷精草洗剂(批号 20090623),B组:
50%谷精草洗剂(批号 20100324)。
1.2.3 质量控制
1.2.3.1 性状和 pH值 本品性状为均匀、细腻的水煎洗剂。
测 pH值为 6.0~7.0。
1.2.3.2 其它 符合《中华人民共和国药典》2005版附录Ⅰ
下洗剂有关的各项规定[4]。
1.3 Leeming 和 Notman 培养基 1%蛋白胨、0.5%葡萄糖、
0.1%酵母浸膏、0.4%牛胆盐、0.1%甘油、0.05%单硬脂酸甘油
脂、0.05%吐温 60、1%全脂牛奶、2%橄榄油、1.2%琼脂、0.5%
放线菌酮、0.05%氯霉素[5]。
1.4 药敏实验方法
1.4.1 培养基成分 麦芽浸膏 2g,酵母浸膏 2g,蛋白胨 2g,
葡萄糖 2g,玉米油 2mL,蒸馏水 100 mL,121℃,15 min,高压
灭菌消毒[6]。
1.4.2 采用液体微量稀释法 按照 CLSI M27 A2的方法,把
待测样本用上述培养基作倍比稀释,所有样本均按 100%浓
度为计,测试浓度 25%~0.024%。同时作阴性对照(培养基空
白对照)。菌液的终浓度为 1~5×104 cfu/mL。
1.4.3 菌液的制备 将马拉色菌接种在 Leeming和 Notman
培养基斜面上 32℃孵育 7~14 d,挑取适量成熟菌落,以无菌
生理盐水制成混悬液。在血球计数板上计数调节菌液浓度为
1~5×106cfu/mL备用。
2 结果
2.1 判定标准 32℃孵育 5 d开始观察菌落生长情况,若阳
性则菌落生长孔内可见混浊。最小不生长的含药浓度的孔为
该药的 MIC。培养基空白对照应为生长对照。
2.2 观察结果 见表 1。本实验表明,中药谷精草洗剂有抗
合轴马拉色菌和抗糠秕马拉色菌的作用,其 MIC为 3.13%;
此外,该中药洗剂 10个月前与 10个月后配制的 MIC相同,
从另一方面说明该药抗合轴马拉色菌和抗糠秕马拉色菌药
效有一定稳定性。
3 讨论
由马拉色菌引起的除汗斑、糠秕孢子菌毛囊炎外,也与
中药谷精草对合轴马拉色菌和糠秕马拉色菌的敏感性检测研究
严洲平 1,王清玲 1,颜晓波 1,丁月芳 1,章强强 2
(1.青岛市海慈医疗集团,青岛 266033;2.复旦大学附属华山医院,上海 200040)
摘要:目的 评价谷精草洗剂对合轴马拉色菌和糠秕马拉色菌的杀菌效果,为开发谷精草的临床实际应用提供
实验依据。方法 采用 CLSI M27 A2方法(美国临床实验室标准研究所制定的 M27A2方案)对谷精草洗剂进行体外
敏感性检测。结果 10个月前配制的和 10个月后的中药谷精草 MIC均为 3.13%,提示药效有一定稳定性。结论 中
药谷精草可应用于马拉色菌性皮肤病的治疗。
关键词:合轴马拉色菌;糠秕马拉色菌;谷精草;抑菌实验;CLSI M27 A2方法
中图分类号:R285, R756 文献标识码:A 文章编号:1672-0709(2011)01-0028-02
基金项目:青岛市科技局 2007年度青岛市科技发展指导计划(007-
KZD-03)
表 1 50%谷精草洗剂样本体外抑菌试验结果 MIC %
注:采用液体微量稀释法,所有样本均按 100%浓度为计,测试浓度
25%~0.024%
样本名称
A组
B组
阴性对照(培养基空白对照)
合轴马拉色菌
3.13
3.13
(-)
糠秕马拉色菌
3.13
3.13
(-)
·研究报告·
28
中国中西医结合皮肤性病学杂志 2011年第 10卷第 1期 ··
白癜风是一种常见的以皮肤局限性或泛发性色素脱失
为特征性的皮肤科疾病。尽管其发病机制还不十分明确,但
多项研究表明白癜风的发病与自身免疫有关[1,2]。转化生长因
子 β(transforming growth factor-β, TGF-β)作为一种促生长因
子参与了许多重要的生理和病理过程,在维持机体免疫平衡
中起着重要作用[3]。近年来研究重点集中在 TGF-β作为一种
免疫调节剂在自身免疫中可能起到的作用。我们研究了 60
例白癜风患者血清中 TGF-β和免疫球蛋白 IgG、IgA、IgM的
水平,结果如下。
1 对象和方法
1.1 对象 白癜风患者血清 60例,男 28例,女 32例;年龄
16~48岁,平均 31岁。其中寻常型白癜风患者进展期 30例,
稳定期 18例;节段型白癜风进展期 8例,稳定期 4例。所有
患者采血前 1个月内未接受糖皮质激素、免疫调节剂、光化
学治疗。正常对照组 30例,男 14例,女 16例,年龄 15~50
岁,平均 32岁。所有血清分离后冻存-80℃备用。
1.2 试验方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测
TGF-β的血清学水平,试剂盒购自武汉博士德公司。采用单
向免疫定量扩散法检测免疫球蛋白 IgG、IgA、IgM的血清学
水平。
1.3 统计学处理 实验数据用 x±s表示。采用两样本均数比
较的 t检验。显著性检验水平为 0.05。
2 结果
2.1 各组血清中 TGF-β水平 见表 1。白癜风患者组血清
TGF-β水平与正常对照组相比,差异有统计学意义(t=4.6,
P<0.01)。寻常型白癜风患者进展期和稳定期之间 TGF-β水
间擦疹、脂溢性皮炎、头屑过多、银屑病、特应性皮炎等皮肤
科的常见病有关 [1];近年来,对马拉色菌的研究很少 [7],主要
以培养鉴定为主,特别是培养方法的改进,使培养的阳性率
有很大的提高[8]。但对预防和治疗药物研究[9],中药制剂尤其
很少。
谷精草具有清热祛风等功效。谷精草(1:6)在试管内对奥
杜盎氏小孢子菌、铁锈色小孢子菌等具有不同程度抑菌作
用,此外,水浸剂(试管内双倍稀释法)对絮状表皮癣菌、羊毛
状小孢子菌、须癣毛癣菌、石膏样小孢子菌等皮肤真菌有抑
菌作用[2,3]。现代药理研究谷精草尚具有抗细菌、抑制癌细胞
作用,因此从中医药理角度综合考虑,谷精草可能具有良好
的抗真菌、抑菌的疗效。本课题试图研究中药谷精草的抗马
拉色菌敏感性,有利于临床开发应用。
本实验表明,中药谷精草洗剂有抗合轴马拉色菌和抗糠
秕马拉色菌的作用,其次该中药于配制 10个月后仍有抗菌
作用,提示 10个月内该药药效有一定稳定性。
中药在我国有几千年的发展历史,本研究中的中药谷精
草资源丰富,价格低廉,使用、携带均方便,易为患者所接受,
开发中药谷精草的广谱抗真菌作用,有利于在临床治疗马拉
色菌性疾病的外用推广,加之其本身的广谱抗皮肤浅表真菌
优势,相信具有广阔的应用前景。
参考文献:
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杂志,1996,25(2):98.
(收稿日期 2010-10-13)
白癜风患者血清中转化生长因子β水平的研究
肖汉龙,罗建华,闫军峰,王军
(武汉市武警湖北总队医院,武汉 430061)
摘要:目的 探讨转化生长因子 β(TGF-β)与白癜风之间的关系。方法 血清中 TGF-β和免疫球蛋白 IgG、IgA、
IgM的检测分别采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)和单向免疫定量扩散法。结果 ①白癜风患者组的血清 TGF-β水
平均低于正常对照组;同时血清免疫球蛋白 IgG、IgA、IgM水平均高于正常对照组。②寻常型白癜风患者中,进展期患
者血清 TGF-β水平低于稳定期患者。结论 TGF-β可能在白癜风的发病机制中发挥重要作用。
关键词:白癜风;转化生长因子 β;血清免疫球蛋白
中图分类号:R758.4+1 文献标识码:A 文章编号:1672-0709(2011)01-0029-02
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