全 文 ：1164 环球中医药 2015 年 10 月第 8 卷第 10 期 Global Traditional Chinese Medicine，October 2015，Vol. 8，No. 10
·论著·
作者单位:100078 北京中医药大学东方医院皮肤科
作者简介:付蓉(1979 － ) ，女，博士，主治医师。研究方向:皮肤
真菌病学。E-mail:catibeauty@ 163． com
通讯作者:李元文(1962 － ) ，本科，主任医师，博士生导师，教
授。研究方向:中医皮肤性病学。E-mail:chmt1204@ 163． com
土槿皮等 5 种中药及其不同组合抗糠秕马
拉色菌的体外药敏试验研究
付蓉 李元文 周志强 赵雅静 赵凤珠 宋利梅
【摘要】 目的 测定土槿皮、侧柏叶、苦参、丁香、肉桂及其不同组合对糠秕马拉色菌的最小抑
菌浓度，观察其体外抑菌效果。方法 参照美国国家临床实验室标准化委员会制订的 M27-A 方案
中酵母菌微量稀释法，在此基础上进行改良，采用含油的培养基作为药敏试验的液基，制备微量药
敏板，对糠秕马拉色菌进行体外药敏试验。结果 最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，
MIC)依次为:5 种中药混合液(槿柏洗剂) :5． 5 mg /mL，土槿皮 +侧柏叶 +苦参 +丁香:16 mg /mL，
土槿皮 +侧柏叶 +苦参:8． 5 mg /mL，丁香 +肉桂:9 mg /mL，土槿皮:10 mg /mL。结论 相比于各单
味药及不同组合，槿柏洗剂全方 MIC为最小，5 种中药及其不同组合混合液均有抑制糠秕马拉色菌
生长的作用。
【关键词】 中药; 槿柏洗剂; 糠秕马拉色菌; 体外药敏试验; 头皮脂溢性皮炎
【中图分类号】 Ｒ285． 5 【文献标识码】 A doi:10. 3969 / j. issn. 1674-1749. 2015. 10. 002
Inhibitive effect of five kinds of Chinese herbal and their differentcombination on Malassezia furfur
in vitro FU Ｒong，LI Yuan-wen，Zhou Zhi-qiang，et al． Department of Dermatology，Dongfang Hospi-
tal，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100078，China
Corresponding author:LI Yuan-wen，E-mail:chmt1204@ 163． com
【Abstract】 Objective To observe the inhibitive effect of the cortex pseudolaricis，oriental arborvi-
tae，sophora flavescens ait，clove，cinnamon and their different combination on Malassezia furfur in vitro．
Methods Based on the M27-A scheme about yeast micro dilution method，which was developed by the
national clinical laboratory standardization committee (NCCLS) ，we prepared drug sensitive plate and liquid
medium with oil to test the sensitivity of Chinese herb to Malassezia furfur． Ｒesults Minimum inhibitory
concentration(MIC) :5 kinds of Chinese herbal mixture (the Jin Bai lotion) :5． 5mg /mL，cortex pseudolari-
cis + oriental arborvitae + sophora flavescens ait + clove:16mg /mL，cortex pseudolaricis + oriental arborvitae +
sophora flavescens ait:8． 5mg /mL，clove + cinnamon:9mg /mL，cortex pseudolaricis:10mg /mL． Conclusions
Compared to the single herb and the different combinations，the MIC of Jin Bai lotion was the smallest．
Five kinds of Chinese herbal and their different mixture can inhibit the Malassezia furfur．
【Key words】 Chinese Herbal; Jin Bai lotion; Malassezia furfur; Drug sensitivity test in
vitro; Seborrheic dermatitis of scalp
马拉色菌属酵母样真菌，为条件致病菌，是温
血动物及人类皮肤上的正常寄生菌，主要生长在人
类皮肤角质层，具有嗜脂性［1］。临床上常见的花斑
癣、马拉色菌毛囊炎、脂溢性皮炎等疾病均与此相
关，近年认为马拉色菌在头皮上的过度增生是导致
头皮脂溢性皮炎的重要原因［2］。实验表明，头皮上
存在的马拉色菌主要为糠秕马拉色菌、球形马拉色
菌、合轴马拉色菌［3］。目前针对马拉色菌的西药主
要为抗真菌制剂，但治疗不良反应大，易出现耐药
性，故寻找作用安全、疗效满意且价格合理的抗菌
药物的任务仍然艰巨［4］。抗真菌中药的筛选研究
已开展多年，相比传统的西药抗真菌药物具有不良
反应小、价格低廉、较少出现耐药等优点［2］。笔者
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团队根据多年应用中药治疗头皮脂溢性皮炎的经
验，总结出了临床疗效较好的槿柏洗剂，采用目前
成熟的液基微量稀释法，观察其组成成分及不同组
合混合液对糠秕马拉色菌的抑菌效果，为临床治疗
提供一定参考。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 药物 槿柏洗剂全方:土槿皮、侧柏叶、苦
参、丁香、肉桂(采用江阴天江药业有限公司生产的
中药配方颗粒剂剂型)。土槿皮、苦参、丁香、肉桂，
4 种中药颗粒剂各 1 g，加蒸馏水制成混悬液 10 mL，
浓度为 0． 1 g /mL(颗粒剂) ，因前期预试验结果表明
侧柏叶最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentra-
tion，MIC)值可能偏大，故侧柏叶 2 g 加蒸馏水制成
混悬液 10 mL，浓度为 0． 2 g /mL(颗粒剂) ，4℃存放
备用。
1． 1． 2 菌株 两株糠秕马拉色菌标准菌株
(CBS1878)购于中国医学科学院皮肤病研究所真
菌室。
1． 1． 3 主要仪器 比浊仪、高压灭菌锅(SANYO
MLS-3020)、水浴箱(北京市医疗设备厂)、恒温培育
箱(XMT-152C，重庆四达实验仪器厂)、超净台(造
鑫企业有限公司)、显微镜(OLYMPUS-BX6 0F5)、
8 × 12孔圆底酶标板(北京化工厂)。
1． 1． 4 培养基 橄榄油固体培养基:葡萄糖 20 g、
琼脂 17 g、蛋白胨 10 g、酵母浸膏 10 g、橄榄油 20 g、
氯霉素 0． 1 g、蒸馏水 1000 mL，将上述原料溶于蒸
馏水中，加热煮沸 3 次，使混合液充分溶化呈棕橙色
均匀半透明状态，高温高压灭菌，冷却凝固后放入
4℃冰箱备用。液体培养基:麦芽糖 20 g、酵母浸膏
2 g、葡萄糖 20 g、橄榄油 20 g、蒸馏水 500 mL，制法
同上。
1． 2 方法
土槿皮、侧柏叶、苦参、丁香、肉桂 5 种中药及其
不同组合情况:单味药 5 种、二药组合 10 组，三药组
合 10 组，四药组合 5 组，五药组合 1 组。
1． 2． 1 药液加样 将 5 种中药及其不同组合中药
贮备液分别用液体培养基稀释成试验浓度，从含药
液 100%、90%、80%，最终降为 10%(共 10 个浓度
梯度) ;将稀释后的药液加入微量稀释板(96 孔圆底
酶标板) ，每孔 100 μL;每种药同时做 2 组。
1． 2． 2 菌悬液制备 将标准糠秕孢子菌菌株接种
于橄榄油固体培养基上，37℃恒温温箱培养 4 天
后，生理盐水洗脱菌落，制成菌悬液，比浊仪调至
麦氏 4 号比浊管浓度，用血细胞计数板计数，调
其浓度为(1． 0 ～ 2． 0)× 107CFU /mL。用液体培养
基稀释上一步所得的菌液 10 倍，使其菌含量为
(1． 0 ～ 2． 0)× 106CFU /mL。取制备好的含药 96 孔
板，每孔加入上一步之菌液 100 μL，使其最终菌浓
度为(0． 5 ～ 1． 0)× 106CFU /mL，各中药药液的终浓
度分别为 50、45、40、35、30、25、20、15、10、5 mg /mL。
同时设一组阴性对照:每孔加入液体培养基
200 μL;一组阳性对照:每孔加入制备好的菌液
100 μL及液体培养基 100 μL。在摇床上将菌液及
药液混匀 5 分钟。
1． 2． 3 结果判读及统计 将接种好的微孔培养板
置 32℃温箱孵育，48 小时后观察结果。肉眼观察马
拉色菌菌落非常清晰，采用直接法读取数据。结果
判断的前提是阳性对照孔菌落生长良好，阴性对照
孔无菌生长，其他孔无菌落生长为抑制，有菌落生
长为无抑制。当存在拖尾现象时，则需与阳性对照
孔做比较，以生长被抑制 80% 判定为最低抑菌
浓度。
2 结果
各单味药及不同组合混合液的药敏试验均在
相同条件下重复 10 次，分别测得 MIC 值(已换算
成生药浓度) ，取均值后统计如下，详见表 1 ～
表 3。
表 1 单味药及两药组合混合液的 MIC均值(mg /mL)
单味药物 MIC均值 两药组合 MIC均值 两药组合 MIC均值
土槿皮 10 土槿皮 +侧柏叶 17 侧柏叶 +丁香 31
侧柏叶 45 土槿皮 +苦参 17． 5 侧柏叶 +肉桂 26
苦参 15 土槿皮 +丁香 16． 5 苦参 +丁香 10． 5
丁香 12． 5 土槿皮 +肉桂 11． 5 苦参 +肉桂 12． 5
肉桂 15 侧柏叶 +苦参 25． 5 丁香 +肉桂 9
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表 2 三药组合混合液的 MIC均值(mg /mL)
三药组合 MIC均值
土槿皮 +侧柏叶 +苦参 8． 5
苦参 +丁香 +肉桂 14
土槿皮 +侧柏叶 +丁香 12
土槿皮 +丁香 +肉桂 14． 5
土槿皮 +侧柏叶 +肉桂 24． 5
侧柏叶 +丁香 +肉桂 28
侧柏叶 +苦参 +丁香 25． 5
土槿皮 +苦参 +丁香 20
侧柏叶 +苦参 +肉桂 26
土槿皮 +苦参 +肉桂 15． 5
表 3 四药及五药组合混合液的 MIC均值(mg /mL)
四药组合 MIC均值
土槿皮 + 侧柏叶 + 苦参 +
丁香
16
侧柏叶 +苦参 +丁香 +肉桂 20． 5
土槿皮 +苦参 +丁香 +肉桂 17． 5
土槿皮 + 侧柏叶 + 苦参 +
肉桂
19
土槿皮 + 侧柏叶 + 丁香 +
肉桂
21
五药组合 MIC均值
土槿皮 +侧柏叶 +苦参 +丁香 +肉桂
(槿柏洗剂全方)
5． 5
各单味药及混合液均表现出一定的抑菌作用。
单味药中，土槿皮的抑菌作用最强(MIC 值为
10 mg /mL)，侧柏叶的抑菌作用最弱(MIC 值为
45 mg /mL);各混合液中，槿柏洗剂全方的抑菌作用
最强(MIC值为 5． 5 mg /mL)，其余混合液的 MIC 值
在 8． 5 mg /mL到 31 mg /mL 之间，均具有抑制马拉
色菌生长的作用。与各单味药及其他混合液相比
槿柏洗剂全方的抑菌作用比较明显。
3 讨论
本研究采用的是液基微量稀释法，在美国国家
临床实验室标准化委员会制订的 M27-A 方案基础
上进行了改良，加入了糠秕马拉色菌生长所必须的
油脂，该法具有可重复性、检测精确、误差小、观察
时间短、试验方法简便等优点［5］。在试验中阳性对
照孔菌落生长良好，中药处理孔随药物浓度梯度升
高而菌的生长受到抑制。
对于中草药抑菌作用的研究，近年来可见到许
多报道。王佳等［6］测定了 13 种中草药对限制性马
拉色菌的体外最低抑菌浓度，证明黄连、乌梅、鱼腥
草、大黄、姜半夏、蒲公英有相当强的抑菌能力。严
洲平等［7］研究了中药谷精草对合轴、糠秕马拉色菌
的体外敏感性，结果表明谷精草具有良好的抗真菌
效果。郭惠仪等［8］观察了二仙丸各单味药及其不
同组合对马拉色菌的体外抑菌效果，结果显示其对
合轴、糠秕、球形、钝形马拉色菌均有抑菌作用。
中医学认为脂溢性皮炎发病主要因素为湿热
内蕴，感受风邪所致［9］。过食肥甘厚味，湿热内蕴
可致皮脂异常溢出，使条件致病菌马拉色菌过度增
殖，破坏头皮微环境，从而出现丘疹、脱屑等炎症表
现［8］。槿柏洗剂是笔者团队在临床上治疗头皮脂
溢性皮炎的常用方，具有非常好的疗效。方中苦参
清热燥湿、祛风杀虫;土槿皮祛风除湿，以皮达皮、
直达病所［10］;侧柏叶祛风湿、散肿毒;丁香、肉桂可
杀虫疗癣。诸药合用共奏祛湿止痒、解毒杀虫去癣
之功效。
本次研究旨在通过体外药敏试验，观察槿柏洗
剂成分及全方的抑菌效果，为临床验方奠定试验基
础和疗效依据。试验所使用的药物均为颗粒剂型，
有很好的临床效果，在生产工艺上，质量和纯度控
制较好，尽可能减少了因药物提取问题而影响试验
结果的可能性。药敏试验结果表明各单味药及混
合液均具有抑菌作用，与各单味药及其他混合液相
比，槿柏洗剂全方的 MIC 值最小，说明其抑菌作用
最强。一方面佐证了其临床组方的有效性;另一方
面也表明:组成合理中药复方的单味药之间可能存
在协同作用，使得复方的抑菌效果得到扩大，抑菌
能力强于每一味单味药。目前中药单体研究是一
个热点，如黄欣等［11］报道了氧化苦参碱、苦参碱、麝
香草酚、丁香酚在体外药敏实验中对马拉色菌具有
较好的抑菌效果。但中药是复杂的，一种药物中往
往含有多种单体成分，中药复方就更为复杂，单体
成分之间是否存在协同的抑菌作用，尚处于进一步
研究中。
参 考 文 献
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［3］ 路永红，冉玉平，熊琳．从夫妻双方的头皮屑中分离和鉴定马
拉色菌［J］．中华皮肤科杂志，2010，35(5):369-370．
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(收稿日期:2015-05-30)
(本文编辑:董历华)
基金项目:北京中医药大学创新团队发展计划(2011-CXTD-15)
作者单位:100102 北京中医药大学中药学院［汤明杰、叶永山、苏浬、赵跃东、曹春琪(硕士研究生)、张旗(博
士研究生)、雷海民、李强］
作者简介:汤明杰(1990 － ) ，女，2012 级在读硕士研究生。研究方向:中药药效物质基础研究。E-mail:tang-
mingjie90@ sina． com
通讯作者:李强(1972 － ) ，博士，研究员，硕士生导师。研究方向:中药药效物质基础及功效成分组研究。
E-mail:lq_cn@ 126． com
牡丹皮对内毒素性急性肺损伤大鼠的保护
作用
汤明杰 叶永山 张旗 苏浬 赵跃东 曹春琪 雷海民 李强
【摘要】 目的 探讨牡丹皮对内毒素(lipopolysaccharide ，LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(acute
lung injury，ALI)的治疗作用，并探讨其可能机制。方法 60 只 wistar 大鼠随机分为生理盐水对照
组、模型组、地塞米松组、治疗组及预防组，每组 12 只，通过向气管内滴注 LPS 建立大鼠 ALI 模型。
观察造模 12 小时后的肺泡灌洗液中多形核白细胞(polymorphonuclear leukocytes，PMN)百分比、蛋白
浓度、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)及白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)水平和
肺组织的病理形态学变化。结果 牡丹皮、地塞米松能够有效地降低 PMN 百分比和蛋白浓度
(P ＜ 0. 01) ，下调 TNF-α、IL-6 的水平﹙ P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，显著减轻肺泡结构破坏、肺水肿和炎
症细胞浸润等病变。结论 牡丹皮能够抑制 ALI时的炎症反应，减轻肺部炎症损伤，从而对肺起到
保护作用。
【关键词】 牡丹皮; 急性肺损伤; 内毒素
【中图分类号】 Ｒ285. 5 【文献标识码】 A doi:10． 3969 / j． issn． 1674-1749． 2015． 10． 004
Protective effects of Moutan cortex on lipopolysaccharide-induced acute lung injury in rats TANG
Ming-jie，YE Yong-shan，ZHANG Qi，et al． School of Traditional Chinese Medicine，Beijing University of Chi-
nese Medicine，Beijing 100102，China
Corresponding author:LI Qiang，Email:lq_cn@ 126． com
【Abstract】 Objective To investigate the effects of Moutan cortexon lipopolysaccharide-induced acute
lung injury (ALI)in rats，and explore the underlying mechanism against ALI． Methods 55 wistar rats were
randomly divided into control group，model group，positive drug group，treatment group and prevention group，the
animal model of ALI was established by intratracheal administration oflipopolysaccharide． The percentage of neu-
trophils﹑ the concentration of protein exudation ﹑ cytokine(TNF-α、IL-6)levels in bronchoalveolar lav-
age fluid (BALF)and histopathological changes in lung tissue were observed 12 h after LPS administra-
tion． Ｒesults Moutan cortex and dexamethasone can effectively reduce the PMN percentage and protein