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从长寿花嫩叶直接诱导体细胞胚和出芽



全 文 :从长寿花嫩叶直接诱导体细胞胚和出芽
马国华* 刘 念(中国科学院华南植物研究所 , 广州 510650)
Direct Somatic Embryogenesis and Shoot Formation from Cultured Young Leaf
of Kalanchoe blossfeldiana
MA Guo-Hua*, LIU Nian (South China Institute of Botany , Chinese Academy of Sciences , Guangzhou 510650)
1 植物名称 长寿花(Kalanchoe blossfeldiana),
又名寿星花 、矮生伽蓝菜 。
2 材料类别 盆栽植物的嫩叶片 。
3 培养条件 基本培养基为 MS 。诱导培养基:
(1)MS +NAA 1.0 mg·L -1(单位下同)+6-BA
1.0;(2)MS+NAA 1.0;(3)MS+6-BA 1.0 。生根
培养基为:(4)1/2MS 不加任何生长调节剂。以上
培养基含 2%蔗糖 、0.6%琼脂 , pH 5.8。培养温度
(25±2)℃。
4 生长与分化情况 嫩叶外植体经 70%酒精消
毒15 s和 0.1%升汞消毒8 min后 ,以无菌水清洗。
切成 1 cm×1 cm 大小的切段 ,接种于诱导培养基
上培养。
嫩叶外植体在诱导培养基(1)上暗培养 2 周
后 ,切口部位脱分化 ,逐渐长出致密的绿色愈伤组
织 ,并伴有白色丝的形成 。在愈伤组织的表明形成
多个体细胞胚突起。培养 20 d内在愈伤组织表面
(少部分在叶外植体表面),体细胞胚直接萌发长出
丛芽 。
嫩叶外植体在诱导培养基(2)培养 1 个月 ,外
植体基本无变化 ,既不能诱导愈伤组织 ,也不褐化
死亡。外植体在该培养基上培养 1个月后 ,将外植
体转移到诱导培养基(1)上暗培养 1 个月 ,仍然可
直接诱导体细胞胚和丛芽 。
嫩叶外植体在诱导培养基(3)上培养 1 个月 ,
绝大部分外植体褐化并逐渐死亡 ,只有个别外植体
的切口部位长出少量愈伤组织 ,但无直接出芽 。
丛芽可在诱导培养基(1)上暗培养进行多次的
丛芽继代增殖。可见 ,诱导长寿花嫩叶外植体直接
出芽的合适培养基含 NAA 1.0 、6-BA 1.0。说明长
寿花嫩叶外植体直接出芽需要生长素和细胞分裂
素的平衡使用。单独使用生长素或细胞分裂素均
不能诱导其直接出芽。将芽接种于生根培养基上
培养 ,2周内有根的形成 , 1 个月后可移栽入盆 ,几
乎完全成活 。
5 意义与进展 长寿花为景天科伽蓝菜属植物 。
其株型优美 ,花色鲜艳 ,花期持久 ,栽培容易 ,是南
北各地常见的观赏植物。由于其叶片可以扦插生
根并长出新植株 ,这一特别的繁殖方法 ,引起人们
极大的兴趣 。通过对长寿花嫩叶的离体培养 ,我们
探索了外源生长调节剂诱导嫩叶外植体直接体细
胞胚胎发生和芽的器官发生 ,并建立了有效的再生
和繁殖体系 。虽然由长寿花嫩叶诱导愈伤组织和
植株再生已有报道[ 1 , 2] ,但由嫩叶直接诱导体细胞
胚和直接出芽 ,则尚未见报道。
参考文献
1 陈利萍 ,汪炳良 ,陈竹君.长寿花叶片愈伤组织的诱导和植株再
生.植物生理学通讯 , 1999 , 35(6):471
2 吴丽芳 ,屈云慧.长寿花的组培快繁.云南农业科技 , 2001 ,(4):
21
收稿 2002-10-14    修定 2003-06-27
资助 广州市天河区科技项目。
 * E-mail:magh@scib.ac.cn , Tel:020-37252869
625植物生理学通讯 第 39 卷 第 6 期 , 2003 年 12 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2003.06.023