全 文 ：华西药学杂志
W C J P S　2007, 22(5):522 ～ 524 　　
药 ,未见其其他活血类有效成分共同进行体内的药
物动力学方面的研究 。试验中发现 ,采用《中国药
典》灯盏细辛项下的甲醇 -水系统的分离效果并不
理想 ,加入少量乙腈可取得满意的分离效果 。由于
灯盏细辛注射液中成分复杂 ,在保证灯盏花乙素获
得良好分离的基础上 ,曾尝试加入多种内标物质 ,但
均未取得良好的分离效果 ,故最后采用了外标法 。
为了减少血样的处理步骤 ,仅用甲醇对血样进行了
蛋白沉淀处理 ,未再将样品进行萃取 、浓缩等处理 ,
可减少血样中成分的损失 。
灯盏细辛注射液在临床上的给药方式为静脉
滴注 ,文中采用了尾静脉注射的方式给药。在预
实验中我们发现 ,当剂量超过按灯盏花乙素计为
1.34mg kg -1时 (约为临床剂量的 30倍 ),动物会
出现血尿 (可能是由于突然大剂量注射给药引起
的 )。所以实验选择了静脉注射的最大剂量为给
药剂量进行药物动力学研究 。在预实验中 , 曾取
血到 420、480 m in,发现此时灯盏花乙素的血药浓
度低于定量限 ,仅能做定性分析 。所以最后一个
时间点定在 360m in。
文献[ 6]报道灯盏花素口服后会产生多峰现象 ,
文中给药途径为静脉给药 ,药 -时曲线也出现了多
峰现象 ,故多峰现象是否与肝 、肠循环有关 ,尚需进
一步实验证实 。实验发现 ,灯盏细辛注射液中灯盏
花乙素的大鼠体内过程符合二室模型 ,而文献[ 3, 4]
对于灯盏花乙素的报道多为三室模型 ,少有报道二
室模型 ,是否与咖啡酸酯类成分的影响有关有待进
一步研究 。
参考文献:
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收稿日期:2007 - 04
作者简介:黎秀丽(1981 -),女 ,四川达县 ,正攻读药物分析专业的硕士学位。
*通讯作者(Correspondent author), E - am il:rb ch ao@ scu. edu. cn
芦竹根中双吲哚生物碱的分离鉴定及药效研究
黎秀丽 ,杨　柳 ,晁若冰*
(四川大学华西药学院 ,四川 成都 610041)
摘要:目的　分离 、鉴定芦竹根中的生物碱 , 并对其进行药效试验。方法　采用柱层析法从国产芦竹根中分离得一种生物
碱 , 用 NMR、HR -E IMS、 IR和 UV等分析方法测定其波谱数据和理化常数 ,鉴定其化学结构;考察其对 2, 4 -二硝基酚所致大
鼠发热和角叉菜致炎大鼠足跖肿胀的作用。 结果　该化合物为 3 -(N, N -二甲氨基乙基) - 4 -(3 -甲氨基乙基 -吲哚 -
1 -) - 5 -羟基吲哚(arundam ine,芦竹胺),对 2, 4 -二硝基酚致热大鼠有明显解热作用 ,对角叉菜致炎大鼠足跖肿胀有明显抑
制作用。结论　芦竹胺系首次从中国芦竹根中分离得到 ,为芦竹根的有效成分。
关键词:芦竹根;双吲哚生物碱;芦竹胺;解热作用;抗炎作用
中图分类号:R284.2, R96 文献标识码:A 文章编号:1006 -0103(2007)05 - 0522 -03
Isolation and identification of dmi er ic indole alkaloid from Rhizom e A rundo donax L. and
study on its pharmacodynam ics
LIX iu - li, YANG Liu, CHAO Ruo -b ing*
(West China S chool of Pharmacy, S ichuan University, Chengdu 610041, China)
Abstrac t:OBJECTIVE　 To iso la te and iden tify a lka lo id from rhizom e Arundo donax L. and exp lo re its pharm aco log ica l effec ts.
METHOD S　 An a lkalo id wa s iso lated from Chine se rhizom e o fArundo donax L. by co lumn chrom a tog raphy. 1HNM R, 13CNMR,
DOI牶牨牥牣牨牫牫牱牭牤j牣cnki牣wcjps牣牪牥牥牱牣牥牭牣牥牨牫
HR -E IMS, IR and UV spectrom e try we re applied to identify its struc tu re. The effects of the alka lo id on the fever ra ts induced by
2, 4 -d initropheno l and the edem a paw s o f rats induced by carrageen we re explored. RESULTS　 The a lkalo id w as confirm ed to be
3 -(N , N -d im ethy lam inoethy l) - 4 -(3 -m ethy lam ino - ethy l - indole - 1 - y l) - 5 - hydroxy indole (arundam ine), which ha s an
obvious effect on the fever rats and the edema paw s of rats. CONCLU SION　 Arundam ine is iso la ted from Chine se rhizom e o fArundo
donax L. fo r the first tim e. It is one of the ac tive com ponents.
K ey words:Rhizome Arundo donax L. ;Dim e ric indo le a lkaloid;A rundam ine;An tipyretic activ ity;Anti - inflamm a to ry ac tivity
CLC num ber:R284. 2, R96 D ocum ent code:A A rticle ID:1006 -0103(2007)05 - 0522 - 03
　　芦竹根为禾本科植物芦竹 Arundo donax L. 的
新鲜或干燥根茎 , 具有清热泻火 、止呕生津的功
效 [ 1] ,为中药制剂芦黄冲剂和去感热注射液的主
要原料药材 。文献 [ 2]报道 ,芦竹根含有 N , N -二
甲基色胺 、蟾毒色胺 、蟾蜍特尼定等生物碱成分 ,
中国产芦竹根的化学成分未见文献报道 。我们从
国产芦竹根中分离得到了一种双吲哚生物碱 ,用
NMR、HR - E IM S、IR和 UV等分析方法 ,测定其波
谱数据和理化常数 ,并鉴定其化学结构 。该生物
碱仅在乌兹别克斯坦芦竹根中曾分离得到 , 名为
芦竹胺 (arundam ine)[ 3 ～ 6] ,在中国产芦竹根中系首
次报道 。以芦竹胺的文献为基础 ,我们对其药效
进行了考察 。结果表明 ,芦竹胺具有明显的解热 、
抗炎作用 ,为芦竹根的有效成分 。
1　实验部分
1.1　试药 、动物和仪器
芦竹根药材 (四川省食品药品检验所鉴定 ,批
号:03002);2, 4 -二硝基酚 (上海试剂三厂 );角叉
菜 (S igma公司 );其余试剂均为分析纯 。成年
W istar大鼠 (四川大学华西实验动物中心 ,合格证
号:川实动管会实验动物生产许可证第 10号 )。
RD - 1熔点测定仪 (湖南供江煤矿设备厂 );GBC
C intra 10e型双波长紫外分光光度计 (澳大利亚
GBC科学仪器公司 );Vev to r 22型傅里叶变换红外
光谱仪 (德国 B ruker公司 );V arian unity inova 400
高分辨超导 NMR(400 MH z, 美国 V arian公司 );
B io TOF Q型高分辨质谱仪 (美国 B ruke rD aLton ics
公司 );欧姆龙 MC - 3B型电脑数字式体温计 (欧
姆龙大连有限公司);大鼠足容积测量仪 (自制 )。
1.2　方法与结果
1.2.1　提取分离　取芦竹根药材粗粉 2 kg,加 5倍
量水浸泡 2 h,煎煮 1 h,过滤 ,药渣再加 3倍量水煎
煮一次 ,合并水煎液并浓缩 ,用乙醇调至含醇 80%
进行醇沉 ,静置过夜 ,抽滤 ,滤液浓缩 ,得醇浸膏 。醇
浸膏用浓氨水碱化至 pH10,用等体积三氯甲烷萃取
3次 ,合并三氯甲烷层 ,回收溶剂 ,即得芦竹根中总
生物碱的粗提物 。粗提物经反复硅胶柱色谱分离 ,
以二氯甲烷 -甲醇 -氨水梯度洗脱 ,分离得到约 80
mg生物碱成分(Ⅰ )。
1.2.2　结构鉴定　生物碱 Ⅰ为类白色结晶 , mp
199℃ ～ 200℃;UV (甲醇 , λm ax /nm ):208 , 223 ,
281;IRKBrm ax cm - 1:3420 ～ 3222, 2958 ～ 2706, 1465 ～
1361 , 1610 ～ 1528 , 952 ～ 756;HR - E IM S(m /z):
377.2336 [M +H ] + , 推断该化合物分子式为
C23H 28N4O;1HNMR(400 MH z, DMSO - d6 ):在极
低场区显示两个活波氢信号:δ11.2(1H , d, J =
2.4), 9.02(1H , s);低场区显示 8个芳香质子信
号:一个尖锐单峰:δ7.34 (1H , s), 3个双峰:
δ7.36(1H , d, J =8.8)、 7.18(1H , d , J =2.4)、
6.94(1H , d, J =8.8),其余 4个为多重峰:δ7. 74
(1H , m , )、7.12(2H , m , )、 6.81(1H , m);高场区
显示有四个亚甲基信号:δ3. 24、3.16、2.67 /2.54、
2.21 /2.02(各 2H , m),三个与 N原子相连的甲基
信号:δ2.60(3H , s), 2.15(6H , s)。 13CNMR(100
MHz, DMSO - d6)显示有 16个芳香碳信号 , 7个脂
肪碳信号 ,结合 DEPT和 HMQC可以推断其中 3个
伯碳(CH 3)、4个仲碳 (CH2)、8个叔碳 (CH)、8个
季碳(C)。根据以上数据以及生源关系初步断定
该化合物为双吲哚类生物碱 。分析其 1D - NMR
和 2D - NMR 数据 (1HNMR、13 CNMR、DEPT、CO-
SY、HMQC、HMBC), 确定其结构 (图 1), 并对
1
HNMR和 13CNMR数据进行了全归属 (表 1)。化
合物Ⅰ的结构与 arundam ine[ 3]一致 。
表 1　芦竹胺的 NMR数据(d6 - DM SO , 400MHz)
Tab le 1　NMR data of arundam ine (d6 - DMSO , 400MHz)
Atom 1H 13C A tom 1H 13C
1 11. 2 - 1’ - -
2 7. 18 125.6 2’ 7. 34 129. 1
3 - 107.3 3’ - 110. 4
3 a - 124.8 3’ a - 127. 1
4 - 114.7 4’ 7. 12 122. 1
5 9. 02 147.5 5’ 7. 74 118. 8
6 6. 94 112.3 6’ 6. 81 110. 8
7 7. 36 112.9 7’ 7. 12 119. 3
7 a - 131.7 7’ a - 138. 2
8 2. 21 /2.02 19. 8 8’ 3. 16 21. 7
9 2. 67 /2.54 57. 2 9’ 3. 24 48. 5
10 2. 15 41. 4 10’ 2. 60 32. 4
523第 5期 黎秀丽 , 等。芦竹根中双吲哚生物碱的分离鉴定及药效研究 　　　
图 1　芦竹胺化学结构
F ig 1　Structure of arundam ine
1.2.3　对 2, 4 -二硝基酚所致大鼠发热模型的作
用　健康成年 W istar大鼠 ,适应性喂养 3 d ,试验
前禁食不禁水 12 h。选取 150 ～ 200 g、体温
36.6℃ ～ 38.3 ℃、0.5 h之内温差不大于 0.5℃的
大鼠 30只 , ♀♂兼用 ,均分成正常组 、模型组和给
药组 。除正常组外 ,先全部 sc 2 m l kg- 1致热剂
(1.25%2 , 4 -二硝基酚无水乙醇液 ),给药组同时
im 0.8 g L -1芦竹胺溶液 (生理盐水为溶剂 , 1 m l
kg
- 1),模型组同时 im生理盐水 1 m l kg- 1 ,正常组
不致热 ,但给予与模型组相同剂量的相同生理盐
水 。各组自注射后 0.5、1、2、3、4 h分别测量大鼠
体温。芦竹胺对 2 , 4 -二硝基酚致热大鼠有明显
的解热作用 (表 2)。
1.2.4　对角叉菜致炎大鼠足跖肿胀模型的作用　健
康成年♂W istar大鼠 20只 ,适应性喂养 3 d。随机
均分成模型组和给药组。各组每只鼠分别右后足
跖 sc 0. 1m l 1%角叉菜溶液 。给药组同时 im 0.8
g L - 1芦竹胺溶液 (生理盐水为溶剂 , 1 m l kg -1),
模型组同时 im 1 m l kg- 1生理盐水 。各组给药前
和自注射致炎剂后 1、2、3、4、5、6 h ,用大鼠足容积
测量仪分别测定鼠足体积 ,计算肿胀率 。结果表
明 ,芦竹胺对角叉菜致炎大鼠足跖肿胀有明显消
炎作用 (表 3)。
表 2　芦竹胺对 2, 4 -二硝基酚致热大鼠的作用( x±s, n=10)
Table 2　Effects of arundam ine on fever rats by 2, 4 - dinitropheno l( x±s, n=10)
G roups
Dose /
mg kg- 1
N orm oth erm ia /
℃
V ariations of body tem peratu re /℃
0. 5 h 1 h 2 h 3 h 4 h
Norm al - 36. 44±0. 29 - 0. 30±0. 56 -0. 06±0. 52 - 0. 28±0. 56 - 0.23±0. 48 -0. 18±0. 57
C on trol - 36. 83±0. 36 0. 95±0. 38* 1. 07±0. 56* 1. 41±0.67* 1. 40±0. 49* 1. 34±0. 51*
A rund am ine 0. 8 36. 60±0. 38 0. 41±0. 47** 1. 14±0. 54 1. 68±0.65 1. 40±0. 65 1. 02±0. 49
C om pared w ith norm al group:* P <0. 001;com pared w ith con trol group:**P <0. 01
表 3　芦竹胺对角叉菜致炎大鼠的作用( x±s, n =10)
Table 3　Effects of arundam ine on edem a paws of ra ts by carrageen ( x±s, n=10)
G roups Dose /mg kg- 1 Value of rats paw edem a /%
1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h
C on trol - 25. 0±10. 3 25.2±14. 0 41. 6±13. 6 33. 2±14. 6 36.4±13. 9 34. 1±19. 7
A rund am ine 0. 8 3. 5±3.2** 18.3±11. 9* 31. 0±11. 8* 24. 5±9.7* 20.6±11. 3* 28. 5±12. 3*
C om pared w ith con trol group:*P <0. 01, **P <0. 001
2　讨论
用 HPLC分析 ,发现芦竹根中含有十余种生物
碱成分 。除芦竹胺外 ,我们还从芦竹根中分离到一
种新型的双吲哚生物碱芦竹辛 (donasine),芦竹根
中的其他生物碱有待进一步研究。
据文献[ 3]报道 ,芦竹胺含有一分子结晶水 ,其
NMR图谱测定采用氘代吡啶为溶剂 。本实验室分
离得到的芦竹胺不含结晶水 ,难溶于氘代吡啶 ,采用
d6 -DMSO为溶剂作 NMR图谱 ,二者的 NMR数据
基本一致。由于结晶水的差异 ,导致了两者熔点的
显著差异(不含结晶水为 199℃ ～ 200℃,含一分子
结晶水为 104℃ ～ 105℃)。
根据初步的药效学试验结果 ,芦竹胺和芦竹辛
均具有一定的解热和消炎作用 。结合芦竹根的功能
和主治 ,芦竹胺和芦竹辛等双吲哚生物碱应为芦竹
根的有效成分。其药理作用有待进一步研究。
致谢:承杜俊蓉 、王锋鹏教授和陈东林副教授的指导。
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收稿日期:2007 - 03
524 　 华 西 药 学 杂 志　　　 第 22卷