全 文 :2.5 指纹图谱的建立 精密吸取对照品溶液和供试品溶液各
10μl注入液相色谱仪 ,分别按 “ 2.1”项下色谱条件测定。经过详
细分析比较多批次味连样品的色谱图所给出的峰数 、峰面积和相
对保留时间等相关参数 ,确定 9个特征峰构成峨眉产味连的指纹
图谱 , 为方便分析 , 将整个色谱图谱分成 Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ 3组。第 Ⅰ组
包括 1 ~ 3号峰(保留时间范围 3 ~ 30 min), 其中 1号峰为溶剂
峰;第Ⅱ组包括 4 ~ 7号峰(保留时间 30 ~ 38min);第Ⅲ组包括 8
~ 9号峰(保留时间 38 ~ 43 min)。各特征峰峰号及保留时间见
表 2,代表性指纹图谱见图 1。
表 2 特征峰峰号及保留时间
峰号 t/min 峰号 t/min
1 3.0 6 34.5
2 18.5 7 35.1
3 29.0 8 39.3
4 33.0 9 41.2
5 33.8
图 1 峨眉产味连 HPLC-DAD指纹图谱
2.6 共有峰的归属 取盐酸药根碱 、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱
对照品以及各对照品的混合液各 10 μl, 分别按 “ 2.1”项中的色
谱条件测定 , 比较相应色谱峰的保留时间和峰面积的变化 , 确定
指纹谱中的 6号峰为药根碱 , 8号峰为巴马汀 , 9号峰为小檗碱。
3 讨论
建立简便有效的质量控制方法是中药标准化的重要内容 , 也
是中知药走向世界的重要课题 , 本实验采用 RP-HPLC法建立
了峨眉产味连的指纹图谱 , 方法简便重复性好 , 能完全分离黄连
中的 6个主要生物碱成分可用于峨眉味连的质量评价。
参考文献:
[ 1 ] 国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005:213.
[ 2 ] 徐锦堂 ,王立群 ,徐 蓓.黄连研究进展 [ J] .中国医学科学院学报 ,
2004, 26(6):704.
[ 3 ] 田智勇 ,李振国.黄连的研究新进展 [ J] .时珍国医国药 , 2004, 15
(10):704.
[ 4 ] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:人
民卫生出版社 , 1990:275.
[ 5 ] 黄小平 ,李隆云 ,瞿显有 ,等.石柱黄连指纹图谱研究 [ J] .中药材 ,
2006, 29(7):666.
资源开发
收稿日期:2007-07-05; 修订日期:2007-10-12
基金项目:湖南省怀化市科技局重点资助项目(No.2006-6);
怀化医专基金资助项目(No.kj0406)
作者简介:汪 冶 (1956-),男(汉族),湖南浏阳人 ,现任怀化医专中医药
现代化研究中心教授 、主任药师 ,学士学位 , 主要从事生药学 、民族药物
学 、药用植物栽培等工作.
黄蜡果野生改家种研究
汪 冶1 , 梅树模 1 , 肖聪颖1 , 文惠玲 2 , 孟铁兵1 , 郑 丽 1 , 钱立海1 , 符 珊 1 , 刘受先 1
(1.怀化医专中医药现代化研究中心 ,湖南 怀化 418000;
2.湖南省怀化市药品检验所 418000)
摘要:目的 研究黄蜡果野生改家种方法。方法 采用扦插 、带根移栽和种子繁殖方法。结果 扦插法成活率低 , 带根移栽
法成活率高 , 种子繁殖时种子要保持一定的含水量 , 并且要经过一定的休眠期。结论 该研究对黄蜡果野生改家种具有
实际指导意义。
关键词:黄蜡果; 野生改家种
中图分类号:R931.2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2008)07-1668-02
TheResearchonDomesticatingStauntoniabrachyanthera.
WANGYe1 , MEIShu-mo1 , XIAOCong-ying1 , WENHui-ling2 , MONGTie-bing1 , ZHENGLi1 , QIANLi-hai1 , FU
Shan1 ,LIUShou-xian1
(1.ResearchCenterofChineseMedicineModernization, HuaihuaMedicalColege, Hunan, Huaihua418000,
China;2.HuaihuaInstituteforDrugControl, Huaihua418000, China)
Abstract:ObjectiveToresearchdomesticatingStauntoniabrachyantheraHand.-Mazz.MethodsMultiplicationwasadopted
throughcutage, transplantingandseeding.ResultsWhensurvivalrateisconsideredascriterion, theresultofcutagewasthe
worstwhilethatoftransplantingwasthebest.Whenseedingdormancyforaspecificperiodwasnecessaryforseeds, atthesame
time, properwatercontentinseedswasneeded.ConclusionTheresearchondomesticatingStauntoniabrachyantheraHand.-
Mazzcanperformasguidetopractices.
Keywords:Stauntoniabrachyanthera; Domestication
黄蜡果为木通科野木瓜属植物黄蜡果 Stauntoniabrachyan-
theraHand.-Mazz.、野木瓜 StauntoniachinensisDC.Syst.和短药
野木瓜 StauntonialeucanthaDielxexWuinNotizbl.的果实 , 是一
种中草药 [ 1] , 为中药预知子的植物来源之一 , 能疏肝活血 , 理气
止痛 , 用于肝胃气痛 , 消化不良 ,烦渴 , 腰痛 ,小便不利 , 子宫 、肾下
垂 [ 2];民间将果皮用于治结石;其藤茎又作为木通药用;叶用于
外感风寒 , 头痛胸闷 ,吐泻腹胀。黄蜡果同时也是一种野生水果 ,
·1668·
时珍国医国药 2008年第 19卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.7
其果实怀化民间习称黄蜡瓜 、猪腰子 、牛茄子等 ,由于果肉含果糖
较多而味美 , 吃后甜而不腻 , 深受人们青睐。为对黄蜡果进行开
发 , 进行了野生改家种研究。现报道如下。
1 材料与仪器
1.1 材料 黄蜡果原植物采集于中方县新建乡分水坳 , 经梅树
模副教授鉴定为木通科野木瓜属植物黄蜡果 Stauntoniabrachy-
antheraHand.-Mazz.[ 3] 。
1.2 仪器与试剂 培养箱 , 生根粉(北京双吉尔生物技术开发中
心 , 批号 20040803)。
2 方法与结果
2.1 扦插试验
2.1.1 一年生枝条扦插试验 于 12月初取当年生枝条 , 剪成 10
~ 15 cm小段 ,每小段带节 2 ~ 3个 ,共 100小段 , 其中 50小段直
接扦插在花钵中 , 另 50小段用 0.02%生根粉浸泡 2 h后扦插在
花钵中 , 并全部放置在温室棚内 , 4月中旬气候变暖后移置室外 ,
观察生长情况。均长出小枝与叶 ,但到 6月下旬气温太高后 ,陆
续全部死亡。
2.1.2 二年生枝条扦插试验 于 12月初取二年生枝条 , 方法同
“ 2.1.1”项。结果均长出小枝与叶 , 但到 6月下旬气温太高后 ,
慢慢陆续全部死亡。
2.1.3 多年生枝条扦插试验 于 12月初取多年生老枝条(直径
1 ~ 1.5 cm),剪成 20 ~ 30 cm小段 ,每小段带节 2 ~ 3个 , 共 40小
段 , 其中 20小段直接扦插在花钵中 , 另 20小段用 0.02%生根粉
浸泡 2 h后扦插在花钵中 ,并全部放置在温室棚内 , 4月中旬气候
变暖后移置室外 , 观察生长情况。均长出小枝与叶 , 有的还长出
花枝 , 但到 6月下旬气温太高后 ,大部分陆续死亡 , 直接扦插的成
活 1株。
2.2 带根移栽
2.2.1 冬天移栽 11月中旬到分水坳山中采挖带不定根的藤
茎 , 仿照野生环境 ,栽培于富含腐殖质的表层土壤中 ,全部成活。
2.2.2 春天移栽 2月底到分水坳山中采挖带不定根的藤茎 ,仿
照野生环境 , 栽培于富含腐殖质的浅表土壤中 , 全部成活。
2.3 种子繁殖 首先用普通方法使种子发芽:①新鲜种子直接
置培养箱中 5 ~ 30℃催芽 ,均未见发芽;②自然干燥后 , 35℃干燥
4 d, 2℃冷藏 20 d,培养箱中 5 ~ 30℃发芽 , 多次试验均未发芽 ,
同时仿照昼夜温差试验 , 均未发芽;③上述种子 30℃水浴温浸 24
h后 , 春天进行土壤发芽 , 均未发芽。后来笔者采用下述方法进
行发芽试验。
2.3.1 用鸡吃消化后的种子发芽 选健康本地鸡雌雄各 1只 ,
分次喂黄蜡果种子各 20粒 , 4 d后杀鸡取种子 , 发现大部分种子
已破皮 , 立即播种。结果未见发芽。
2.3.2 用人吃消化后的种子发芽 一次吃成熟黄蜡果果肉 4个 ,
共排出黄蜡果种子 258粒。 ①当即在 25℃培养箱中催芽 , 未能
发芽;②自然干燥后 , 35℃干燥 4 d, 2℃冷藏 20 d, 室温放置过
冬 , 用下述方法发芽。见表 1。
2.3.3 新鲜成熟黄蜡果果实连果皮一起埋入土壤和花钵中自然
发芽 取新鲜成熟黄蜡果果实 , 于当年 11月中旬连果皮一同埋
入土壤和花钵中 , 于次年 4月初已分别长出幼苗 30株和 20株 。
2.3.4 置密闭容器中自然放置发芽 果实采收后 ,置采集箱中 ,
上面加盖数层卫生纸 , 室温放置。 3月底大部分种子萌动发芽 ,
取萌动发芽种子播种于土壤中 ,发芽后用于做其它试验。
2.3.5 各种处理方法及发芽结果 见表 1 。
以上 14批次种子 , 均每批 10粒。 样品来源与处理方法
如下:
1, 2:2004年采集 ,干燥后冰箱 2℃保存 420d,用 0.02%生根
粉 25℃浸泡 4 h;3, 4:2004年采集 , 干燥后冰箱 2℃保存 420 d,
用纯化水 25℃浸泡 4h;5, 6:2005年采集 ,连同果实置冰箱 2℃保
存 60d;7, 8:2005年采集 , 种子晾干后 , 置冰箱 2℃保存 60 d;用
0.02%生根粉 25℃浸泡 4 h;9, 10:2005年采集 , 种子晾干后 , 置
冰箱 2℃保存 60d,用纯化水 25℃浸泡 4h;11, 12:2005-10人吃
消化后的种子(见 “ 2.3.2”), 用 0.02%生根粉 25℃浸泡 4 h;13,
14:2005年 10月人吃消化后的种子(见 “ 2.3.2”), 用纯化水
25℃浸泡 4 h。
表 1 黄蜡果种子发芽情况表
编号 发芽条件 发芽数 发芽率(%)
1 培养箱 25℃ 0 0
2 室温 0 0
3 培养箱 25℃ 0 0
4 室温 0 0
5 培养箱 25℃ 10 100
6 室温 10 100
7 培养箱 25℃ 10 100
8 室温 10 100
9 培养箱 25℃ 10 100
10 室温 10 100
11 培养箱 25℃ 5 50
12 室温 4 40
13 培养箱 25℃ 4 40
14 室温 5 50
3 讨论
黄蜡果藤茎木质化程度高 , 导管大 , 木栓层厚 , 不定根生长
慢 , 一年生枝条木质化程度稍低 , 茎中空 , 老枝条实心 , 但扦插繁
殖成活率也低 , 主要是在盛夏酷暑时 ,由于导管大水分供不应求
而死亡 。故扦插繁殖有待进一步研究。
带根移栽容易成活 ,但由于植株生长不规则 , 采挖 、运输不方
便 , 栽培占地面积大。
第 1次种子发芽失败后 , 笔者以为黄蜡果种子表面有抑制种
子萌发酶 ,要去掉这种酶 ,种子才能发芽。笔者先后用酸 、碱 、有
机溶剂和胰蛋白酶处理干燥好的种子 ,也不发芽。笔者又以为有
些野生水果主要是通过生物消化道各种消化酶消化后才能繁殖 ,
故改为用鸡吃果实和人吃果实的方法 , 但鸡不吃种子 , 喂的种子
表面被消化道破坏而不能发芽。
种子植物用种子繁殖时 ,种子一般要经过干燥 、休眠过程 , 再
用水浸泡催芽 ,但黄蜡果的种子不同。在试验中笔者发现 , 干燥
后用水浸泡半月也不能使种子恢复原来的形状 ,时间再长种子腐
烂变质 。
为探索黄蜡果种子发芽方法 , 笔者在采摘黄蜡果回来后:①
将黄蜡果果实连果皮一起埋入土壤中;②将黄蜡果果实连果皮一
起埋入花钵中;③将黄蜡果果实连果皮一起置入密闭容器中 , 上
面加盖卫生纸 ,并密闭贮藏;④将黄蜡果果实自然放置在通风处 ,
春天发芽;⑤将黄蜡果种子自然干燥后 , 春天发芽。结果前面 3
种方法均发芽 ,后面两种方法均未发芽。 综上所述笔者认为 , 黄
蜡果的种子发芽必须同时满足下述两个条件:种子要保持一定的
含水量 ,不能过分干燥 , 并且要经过一定的休眠期;或者种子经过
生物消化道各种消化酶消化后 ,再干燥 、休眠 , 发芽 , 但发芽率较
低。这与文献报道三叶木通种子发芽情况有所不同 [ 4] 。 此外 ,
黄蜡果种子发芽用 0.02%生根粉 25℃浸泡 4 h或纯化水 25℃浸
泡 4 h,其效果一样。
参考文献:
[ 1 ] 谢宗万 ,余友岑.全国中草药名鉴 , 上册 [ M] .北京:人民卫生出版
社 , 1996:176.
[ 2 ] 湖南省卫生厅.湖南省中药材标准 [ S] .长沙:湖南科技出版社 ,
1993:268.
[ 3 ] 刘克明.湖南植物志[ M] .长沙:湖南科学技术出版社 , 2000:740.
[ 4 ] 熊大胜 ,郭春秋 ,谢 彬.三叶木通种子品质性状研究 [ J] .中草药 ,
2005, 36(11):1710.
·1669·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.7 时珍国医国药 2008年第 19卷第 7期