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!系列研究成果报道作者简介
沈行良!男!汉族!#$!年 月出生!浙江省镇海市人!#%&年 ’ 月(#%’年 )月就读于上海第二
医学院医学系六年制#!从事临床内科工作 * 年!#)#年 #月+#’&年 %月西安医学院生理学专业!
并获医学硕士学位$ 现任中国生理学会理事!中国生理学会教育工作委员会和科普工作委员会委员!
海南省生理学会理事长!海南省运动医学学会常务理事$ %年的专业研究包括在国内从事针灸%激光
镇痛原理和中药作用机制的研究!在国外从事 ,-. 在医学上应用研究和从植物药中提取脑内受体活
性化合物研究$ 参加过国家科委课题%国家&攀登计划’ 课题!主持与国外合作课题等$ 曾获陕西省医
学科技成果二等奖及陕西省中医药科技成果二等奖各一项$ 曾获陕西省和海南省自然科学优秀学术
论文奖共三项$ &**!年获得海南省高等学校&教学名师奖’$ 先后在省级以上专业学术刊物公开发表学术%教学论文 /%篇!
其中国家级核心期刊 %篇$ 参编&临床生理学’%&心血管生理学’%&医学生理学’%&生理学名词比较’%&实验生理科学’%&现
代中医生理学基础’%&实用生理学题库’和&现代科技综述大词典’等专业教材和专业参考书近 * 部$ 目前是&中国热带医
学杂志’编委%和&海南医学院学报’的常务编委$
沈行良 !,012314 -&! 5066 -.&
7海南医学院生理学教研室!海口 /)8#&791:;<6=146 >? @0>AB1=0363:06;2! 914=;$摘要% 目的!从阿拉伯艾蒿中提取脑内苯二氮杂卓@I(受体活性化合物$ 方法!用体外的放射配
体J受体结合测定)..K(和高压液相法)ELMN(提取%分离%纯化 @I 受体活性化合物!用核磁共振
和质谱仪确定活性化合物的结构$ 后用 OK@K 比和 DA;6AB;

6 分析确定它们的作用特性$ 结
果!提取%分离到毛地黄黄酮和玄参黄酮 & 种活性化合物$ 它们在体外可抑制 !EJ地西泮和大鼠脑
细胞膜的结合!QN/8 值分别为)7!R87( !=>2 S M 和)&&7)T&7/( !=>2 S M$ & 种化合物还在体外抑制
!EU呱唑嗪和 U肾上腺素受体的结合!QN/8 值分别为 )$ !=>2 S M 和 )88 !=>2 S M$ & 种化合物的
OK@K 比值分别为 78 和 7&8!而且它们均使 !/DUV@LD 与脑膜结合轻度升高!提示 & 种黄酮化合
物是 @I受体的拮抗剂或部分激动剂$ DA;6AB;

6 分析显示*&种化合物对 !EU地西泮和脑细胞
膜结合的抑制作用是通过竞争性与非竞争性混合机制而实现的$结论!毛地黄黄酮和玄参黄酮是脑
内 @I受体的拮抗剂或部分激动剂$ 它们的抑制作用是通过竞争性与非竞争性混合机制而实现的$
$关键词% 阿拉伯艾蒿+毛地黄黄酮+玄参黄酮+苯二氮杂卓受体+脑+细胞膜
$中图分类号% .#%& $文献标识码% K $文章编号% 88)U&!))&88$#8!U8&#U8$
&’&(&)&*’ *+ !#,&-./0-1 (&’,&’2 )* 3-) (3-&’ 1/1(3#
-’/4 &’ 5&)3* (6 ,&’-)&’ -’, 473*+89/&’
DEW, X04YU20;4Y! ,012314 -! 5066 -.
%91:;<6=146 >? LBC30>2>YC!E;04;4 -1P0A;2 N>221Y1!E;0F>Z /)8!NB04;&
[收稿日期\ &**$J*$J&/
海南医学院学报 &**$!*%!&’&#J!&
]>Z<4;2 >? E;04;4 -1P0A;2 N>221Y1 !#
DOI:10.13210/j.cnki.jhmu.2004.03.002
! 卷海南医学院学报
!#$%&’%( )*+,-./0,! #$ %&$’()* (+, -./%01 )2* (3)%4* 3$5-$.+,& () )2* 6*+7$,%(7*-%+* /*38
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从药用植物中分离$ 提取到作用于中枢神经
系统的化合物已见报道U!V% 阿拉伯艾蒿是一种在阿
拉伯各国广泛使用的传统的药用植物ULV% 已经有人
从阿拉伯艾蒿中提取到具有生物学活性的黄酮化
合物UGV% 探讨阿拉伯艾蒿内是否存在脑内受体活性
化合物&以解释其具有的药理作用&以及明确其生
化特性和作用机制是有重要意义的% 更重要的是
也为我们提供了发现新型结构的化合物& 作为开
发药物的一条新途径%
苯二氮杂卓!OW类镇静剂产生的药理作用是
通过调节抑制性神经递质 Q9O9 对脑内 Q9O9 K
OW8离子通道复合体的变构效应而实现的%我们尝
试用体外的放射配体8受体结合测定法!DD9&结
合高压液相!>?@A法来筛选药用植物中可能存
在的脑内受体的活性化合物&从中寻找 OW 受体的
配体&看有无发现新化学结构的 OW 受体配体的
可能%
? 材料与方法
?@? 材料
阿拉伯艾蒿由埃及开罗大学药学院药理学教
研室提供% 甲基8G>8地西泮 !G:!I #OX K 55$’和
GIR8#O?R!G:P! #OX K 55$’购自美国杜邦新英格兰
核素公司%所有高压液相溶剂!>?@A等级来自苏
格兰 D()26./+ 化学品公司%
?@A 活性化合物的分离
先用酒精对干燥阿拉伯艾蒿进行提取并过
滤&再用石油醚和乙酸乙酯提取干燥% 将干燥乙酸
乙酯提取物 L 5= 溶解于 Y Z水8L Z乙腈&注
入制备型的 O$+,(-(F A8!Y 反相层析柱 !![ 55
\!I 55& 流量为 P 5@ K 5%+& 用 >?@A 进行分
离% 把每 L 5%+收集的标本作 DD9测定以确定活
性化合物的存在% 从第一步 >?@A 中发现活性物
质分别出现在滞留时间分别为 GP]G^ 5%+ !9 部
和 P]P! 5%+!O 部&分别收集汇总 9 部$O 部活
性物并低温干燥% 将 9部$O部活性物分别溶解于
:I 5@!MI Z水8LI Z乙腈&应用 A8!Y _SR 反
相成析柱!G:[ 55\!I 55&流量为 ! 5@ K 5%+&
进行第二步 >?@A&在吸收峰为 L! +5&滞留时间
分别为 ! 5%+和 LL 5%+时& 分离到 9L和 OL部%
将分别收集汇总的 9L 和 OL 部再进行第三步
>?@A!M Z水8G Z乙腈% 此步所用的分离层析
柱$流量和操作过程与第二步相同&获得滞留时间
分别为 I 5%+ 和 !L 5%+ 的 L 种纯化的单体物质&
分别称之为 9物质和 O物质%
?@B 脑膜标本的制备
取体重为!LNL = 雄性 ‘%&)(/ 大鼠迅速
处死后&在 P a冰水盒内获取大脑皮层$小脑皮
层和海马区脑组织&制备用作 DD9 的标本UP&IV% 用
#/%& 83%)/()* 缓 冲 液 !I 55$’ K @&-> M:! 制 成
匀浆 &然后在低温高速离心机 !G \=离心
! 5%+% 所取得的样品再用上述缓冲液清洗 L次&
最后再用缓冲液配制成脑膜受体标本 !每毫升含
有 L 5= 原组织备用% 取 ! 5@ 已制备的脑膜受
体标本与甲基8G>8地西泮!:Y +5$’ K @作结合测
!#
! 期 沈行良等毛地黄黄酮和玄参黄酮抑制 !#$地西泮和体外大鼠脑膜的结合
定!用加入 %&’()*+,-./ !-*+ 0 1#作为非特异性
结合的空白对照$ !23$4563结合测定根据 7&8+98:
等;<=方法对标本再进行 !次清洗$ 相继加入脑膜受
体标本%一系列不同浓度化合物和放射配体&在
< >冰水盒内孵化 起 2/ ?抑制的化合物浓度 @A2/’;<=&@A2/值可信度
范围为 B2 ?$ 数值用均数C标准差表示&并计算它
们的 #&++系数$
! 结 果
通过用 .#$7%D 和质谱仪分析鉴定&并且和
数据库中已知黄酮类化合物的比较& 得出 E 物质
和 5物质分别是毛地黄黄酮和玄参黄酮$ 它们的
化学结构式见图 .$
毛地黄黄酮和玄参黄酮 F 种化合物抑制甲
基$!#$地西泮和大脑皮层膜标本的结合&@A2/值分
别为 .!和 FFG/ !-*+ 0 1图 F’$
F种黄酮化合物对大脑皮层%小脑皮层和海马
区脑细胞膜受体结合的 @A2/值无显著差异表 .’$
HE5E 比 是 指 在 缺 乏 和 存 在 HE5E
./ !-*+ 0 1’条件下 &放射受体结合测定的 @A2/
值之比 $ 毛地黄黄酮的 HE5E 比分别是 .!/
/B/ I.G/’ !-*+ 0 1 无 HE5E’和 ..J /B/ I
.2/’ !-*+ 0 1有 HE5E’!而玄参黄酮的 HE5E比
分 别 为 FK// F.2./I!FK/’ !-*+ 0 1$ 因此&毛地黄黄酮和玄参
黄酮的 HE5E比分别为 ../和 .F/$
毛地黄黄酮和玄参黄酮 F 种化合物对 !23$
4563与大脑皮层的结合产生轻度升高见图 !$
毛地黄黄酮和玄参黄酮 F 种化合物的
3L(MLN(O’ P+*M 分析结果见图 <$
毛地黄黄酮和玄参黄酮 F 种化合物在体外能
够抑制 !#$呱唑嗪和 .$肾上腺素受体的结合&它
们的 @A2/ 值分别为 G< !-*+ 0 1 和 G// -*+ 0 1$ 但
是不能抑制以下配体和大鼠脑膜的结合(!#$毒蝇
蕈醇)HE5E 受体’&!#$蝇蕈硷乙酰胆碱受体’&
!#$3A#F!!B/ QE.受体’ 和 !#$螺呱隆 QEF受
体’$
毛地黄黄酮 玄参黄酮
@A2/!-*+ 0 1’ #&++ 系数 @A2/!-*+ 0 1’ #&++ 系数
大脑皮层 .!/BI.G’ /BG/B2I/BB’ FK/F小脑皮层 .海马 F./BI!!’ /BJ/BFI.//’ F表 毛地黄黄酮和玄参黄酮抑制 #$%地西泮和大鼠脑在体外结合的 &’()值!*+#
,-./ &*01.1213* 34 51*-21* -*6 78934:;<1* 3* #$= 61->.9-1* 1* B1293/ *+# 9-2C
!!
! 卷
! 讨 论
毛地黄黄酮和玄参黄酮是首次报道从阿拉伯
艾蒿中提取到的黄酮化合物!它们在体外和 #$ 受
体有很高的亲和力 % 种化合物不能鉴别 #$! 和
#$%受体亚型!因为它们对大脑皮层和海马区脑细
胞膜受体结合的 &’(值较接近
#$ 受体的配体根据它们的药理作用!可调节
)(*+,#-* 的结合率! 一般认为 #$ 受体的激动剂
可显著增强 )(*+,#-* 的结合率!拮抗剂无显著作
用 !而反相激动剂则会降低 )(* +,#-* 的结合
率./!01 加之 23#3比值稍大于 !!这些都提示它们
是 #$受体的拮抗剂或部分激动剂
*45647589 :;<6 分析表明# 它们对 )=+地西泮
和脑细胞膜 #$ 受体结合的抑制是通过竞争性与
非竞争性混合机制而实现的! 因为它们既降低了
结合的亲和性!也减少结合部位最大数目$#>5?%&
曾有报道双黄酮化合物 5>@A6外和脑 #$受体有高度亲和力’另一种黄酮化合物
478DEFA!也是从植物中提取到的!其对体外 #$ 受
体结合具有显著的抑制作用& 而且脑室给予活体
小鼠 478DEFA!呈现明显的抗惊厥作用.GH& 我们从阿
拉伯艾蒿中提取到的 % 种黄酮化合物在活体内的
可能的药理学作用有待进一步研究&
. 参 考 文 献 H
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