全 文 ：书参考文献
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苦 玄参叶抗炎药 理 作 用 研 究
陈 君1，甄汉深2，韦建华2(1. 广西柳州医学高等专科学校 柳州 545006;2. 广西中医药大学 南宁 530001)
摘要:目的 研究苦玄参叶抗炎药理作用。方法 采用小白鼠二甲苯耳廓肿胀法、抑制小白鼠腹腔毛细血管通透性实验法和小白鼠鸡蛋清足
跖肿胀法。结果 苦玄参叶 60%乙醇提取物对冰醋酸引起小白鼠腹部毛细血管通透性增加、二甲苯所致的小白鼠耳肿胀、小白鼠蛋清足跖肿
胀均具有抑制作用。结论 苦玄参叶有明显的抗炎作用。
关键词:苦玄参叶; 抗炎药理作用
中图分类号:Ｒ282. 71;Ｒ969 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2013)-02-0023-03
作者简介:陈 君，女(1980 －)。学历:硕士。主要从事中药、民族药
的有效成分与质量标准研究工作。现任柳州医学高等专科学校讲师。
联系电话:13737239915，E-mail:lzyzchenjun@ 163. com
Study on anti-inflammation of Picria fel-tarrae leaves
CHEN Jun1，ZHEN Han-shen2，WEI Jian-hua2 (1. Liuzhou Medical College，Liuzhou 545005，China;
2. Guangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanning 530001，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To study on anti-inflammation of Picria fel-tarrae leaves. METHODS The ear tu-
mefaction induced by dimethylbenzene，control capillary permeability and metatarsal tumefaction induced by egg
white in mice. ＲESULTS The 60% ethanolic extract of Picria fel-tarrae leaves could obviously inhibit the increase
of mices abdominal capillary permeability caused by glacial acetic acid，the formation of mices auricular tumefaction
caused by dimethylbenzene and inhibit the mice s metatarsal tumefaction caused by egg white. CONCLUSION
Picria fel-tarraeleaves could inhibit inflammation.
KEY WOＲDS:Picria fel-tarrae leaves;Anti-inflammation
广西道地药材苦玄参 Picria fel-tarrae Lour为玄参科苦玄
参属植物，又名苦草，蛇总管、鱼胆草、苦胆草。主要分布于广
西，广东、贵州及云南等地，印度至菲律宾也有分布〔1〕。苦玄
参在传统上是以全草作为药用部位并已进行了大量的化学成
分分析、药理研究、临床应用和毒性实验。苦玄参在治疗上呼
吸道炎症的疗效显著，但在毒性实验中也发现苦玄参具有一
定的毒性。傣、布朗、佤医取苦玄参 2 叶片，阴干，每日泡水代
茶饮治疗咽喉炎。因此，本文探讨苦玄参叶抗炎药理作用，为
苦玄参叶的应用提供实验依据。
1 材料和仪器
1. 1 实验动物 昆明种小白鼠，20 ± 2g，雌雄兼用，SPF 级，
由广西中医药大学实验动物中心提供(桂医动字第 11004 号、
第 11005 号)。
1. 2 苦玄参叶提取物的制备 将新鲜苦玄参叶晒干，粉碎成
粗粉，取 200g药材粉末，用配置好的 60%食用酒精 600mL加
热回流提取 3 次，每次 1h，合并乙醇提取液，减压回收乙醇，
浓缩成 100%的水煎剂(W·L －1) ，置于冰箱内备用。
1. 3 药品与试剂 阿司匹林肠溶片(桂林南药股份有限公
·32·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 25 No. 2 2013
书司) ;二甲苯(上海化学试剂总厂) ;伊文斯兰粉剂(上海化学
试剂采购供应站分装厂-进口分装) ;冰醋酸(广西南宁化学试
剂厂)。
1. 4 主要仪器与设备 AEU-210 型电子分析天平(日本岛
津) ;离心机(上海手术机械厂) ;721 分光光度计(上海精密
科学仪器有限公司)
2 实验方法〔2〕
2. 1 苦玄参叶60%乙醇提取物的急性毒性试验(MTD测定)
取体重(20 ± 2)g 小鼠 40 只，♀♂各半，分笼饲养，自由摄
食饮水，实验前禁食不禁水 12h后，称重，编号，ig给药 1. 7g·
mL －1(最大给药浓度)0. 3mL /(10g·次) (最大给药体积) ，总
给药量相当于 34g·kg －1。给药后立刻观察动物反应、外观、
四肢活动、摄食、饮水、排泄等。连续观察 14d，详细记录动物
反应情况，并计算增重率。根据总给药量算出相当于临床用
药量的倍数。
2. 2 苦玄参叶60%乙醇提取物对二甲苯致小白鼠耳廓肿胀
的抑制作用 取体重(20 ± 2)g的小鼠 60 只，♀♂兼用，随机
分成 6 组，分别为模型组(蒸馏水)、空白对照组(生理盐水
20mL·kg －1)、阳性对照组(阿司匹林肠溶片 0. 2g·kg －1)、苦
玄参叶 60% 乙醇提取物高、中、低剂量组 3. 2、1. 6、0. 8g·
kg －1，ig给药，每日 1 次，连续 7d。于末次给药后 1h，将各组
小鼠右耳两面分别涂抹二甲苯 20μL一次致炎，左耳对照(不
涂) ，15min后脱颈椎处死小鼠，沿耳廓基线剪下双耳，置于蛙
板上，并对齐左右耳片用直径 6mm 的打孔器冲下两耳，分别
称重，以右耳减去左耳的差值作为肿胀度，计算肿胀抑制率。
2. 3 苦玄参叶60%乙醇提取物抑制腹腔毛细血管通透性作
用 取体重(20 ± 2)g 的小鼠 60 只，♀♂兼用，随机分成 6
组，分别为模型组(蒸馏水)、空白对照组(生理盐水 20mL·
kg －1)、阳性对照组(阿司匹林肠溶片 0. 2g·kg －1)、苦玄参叶
60%乙醇提取物高、中、低剂量组 3. 2、1. 6、0. 8g·kg －1，ig 给
药，每日 1 次，连续 7d。于末次给药后 1h，小鼠均由尾静脉注
射 0. 25%伊文氏兰溶液(0. 1mL·10g-1) ，并立即腹腔注射
0. 6%冰醋酸溶液(致炎剂) ，每只 0. 2mL。15min 后，将小鼠
脱颈椎处死，用 6mL 生理盐腹腔注射冲洗腹腔，轻揉腹部
1min，剪开腹腔收集腹腔液，将腹腔液于 3000r·10min －1离心
10min。取上清液于 590nm处测定吸收度。
2. 4 苦玄参叶60%乙醇提取物对蛋清所致的小鼠足跖肿胀
的影响 取体重(20 ± 2)g的小鼠 60 只，♀♂兼用，随机分成
6 组，分别为模型组(蒸馏水)、空白对照组(生理盐水 20mL·
kg －1)、阳性对照组(阿司匹林肠溶片 0. 2g·kg －1)、苦玄参叶
60%乙醇提取物高、中、低剂量组 3. 2、1. 6、0. 8g·kg －1，ig 给
药，每日 1 次，连续 7d。用毛细管放大测量法测每只小鼠右
后足跖部位体积作为正常值。然后每组动物再给药一次，1h
后，于小鼠右后足掌皮下注入 10%的新鲜鸡蛋清 0. 05mL·
只-1 致炎，并分别于注射后 0. 5h，1h，2h，4h，6h测其容积。结
果以给药前、后足体积之差作为炎症指标。
3 实验结果
3. 1 苦玄参叶60%乙醇提取物的急性毒性试验(MTD测定)
用提取物给小鼠灌胃，给药后当天大部分小鼠活动次数减
少，眼睑下垂以及腹泻，粪便不成形，粪便黑色。第二天腹泻
现象明显好转，大便基本成形，活动正常。观察 14d，各鼠活
动正常，动物外观、行为、进食、四肢活动、呼吸及二便未见异
常，亦无死亡发生，各鼠发育正常。雄鼠增重 44. 97%，雌鼠
增重 40. 37%。最大耐受量(MTD)测定的结果为 34g·kg －1，
相当于临床拟用日剂量 297 倍，临床上人日拟用剂量为 0. 17g
(生药)/Kg(见表 1)。
表 1 MTD实验苦玄参叶60%乙醇提取物对小鼠体重的影响 (x ± s)
组别 动物 动物数(n)
给药前
(g)
给药后
14d(g)
体重长
率(%)
PFEE组 ♂ 20 21. 66 ± 1. 10 31. 40 ± 4. 13 44. 97
♀ 20 22. 07 ± 1. 28 30. 98 ± 4. 62 40. 37
空白对照组 ♂ 10 21. 29 ± 0. 66 31. 37 ± 2. 53 47. 35
♀ 10 21. 06 ± 0. 75 31. 58 ± 2. 68 49. 95
表 2 苦玄参叶 60%乙醇提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制作
用
组别
剂量
(g·kg －1)
动物数
(n)
肿胀度
(mg)
抑制率
(%)
空白对照组 20mL 10 8. 78 ± 4. 57
阿司匹林组 0. 2 10 3. 59 ± 2. 32※ 54. 96%
PFEE高剂量组 3. 2 10 2. 46 ± 1. 57※ 71. 9%
中剂量组 1. 6 10 3. 54 ± 2. 07※ 64. 6%
低剂量组 0. 8 10 5. 31 ± 3. 24 36. 3%
给药组与空白对照组比较:* P ＜ 0. 05，※P ＜ 0. 01
3. 2 苦玄参叶60%乙醇提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的
抑制作用 给药组与空白对照组相比，苦玄参叶高、中剂量组
对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀均有非常显著性差异(P ＜
0. 01) ，这表明苦玄参叶高、中剂量组能显著地抑制二甲苯致
小鼠肿胀的作用;而低剂量组与空白对照组相比无显著性差
异 P ＞ 0. 05，作用不明显(见表 2)。
3. 3 苦玄参叶60%乙醇提取物抑制腹腔毛细血管通透性作
用 给药组与空白对照组相比，苦玄参叶高、中、低剂量组对
冰醋酸所致的小鼠腹部毛细血管通透性增加有非常显著的抑
制作用(P ＜ 0. 01) (见表 3)。
表 3 苦玄参叶 60%乙醇提取物抑制腹腔毛细血管通透性作用
组别 剂量(g·kg －1) 动物数(n) OD值(x ± s)
空白对照组 20mL 10 0. 248 ± 0. 068
阿司匹林组 0. 2 10 0. 102 ± 0. 026※
PFEE高剂量组 3. 2 10 0. 098 ± 0. 051※
中剂量组 1. 6 10 0. 106 ± 0. 032※
低剂量组 0. 8 10 0. 131 ± 0. 031※
给药组与空白照组相比:* P ＜ 0. 05，※P ＜ 0. 01
3. 4 苦玄参叶60%乙醇提取物对蛋清所致的小鼠足跖肿胀
的影响 给药组与空白对照组比较，苦玄参高、中剂量组在蛋
清致炎后 0. 5h ～ 6h 均有显著抑制小鼠足跖肿胀作用(P ＜
0. 01 或 P ＜ 0. 05) ，而低剂量组仅在 2h、4h时表现出抑制作用
(见表 4)。
·42·
海峡药学 2013 年 第 25 卷 第 2 期
书表 4 苦玄参叶 60%乙醇提取物对蛋清所致的小鼠足跖肿胀的影响 (n = 10)
组别
剂量
(g·kg －1)
致炎后肿胀率(%，x ± s)
0. 5 1 2 4 6
空白对照组 20mL 102. 6 ± 22. 5 78. 7 ± 15. 2 67. 0 ± 18. 9 53. 4 ± 18. 6 36. 1 ± 10. 9
阿司匹林组 0. 2 88. 2 ± 19. 2※ 8. 8 ± 15. 1※ 45. 5 ± 15. 3※ 35. 7 ± 12. 5※ 17. 4 ± 4. 4※
PFEE高剂量组 3. 2 87. 7 ± 11. 2* 67. 5 ± 7. 4* 48. 0 ± 10. 6※ 36. 3 ± 9. 9※ 15. 2 ± 3. 0※
中剂量组 1. 6 90. 4 ± 9. 9* 68. 9 ± 10. 6* 43. 3 ± 8. 1※ 29. 6 ± 7. 7※ 17. 5 ± 3. 5※
低剂量组 0. 8 89. 2 ± 18. 0 72. 3 ± 11. 9 56. 8 ± 9. 6* 44. 0 ± 9. 4* 31. 0 ± 12. 7
给药组与空白对照组比较:* P ＜ 0. 05，※P ＜ 0. 01
4 小结
在毒性实验过程中苦玄参叶小鼠灌胃给药量为 34g·
kg －1，相当于临床拟用日剂量 297 倍，未发现急性毒性反应，
表明苦玄参叶对人体给药安全性较大。
本实验选择了 3 个常规性的实验来观察苦玄参的抗炎药
理作用，根据实验显示，苦玄参叶对冰醋酸引起小鼠腹部毛细
血管通透性增加、二甲苯所致的小鼠耳肿胀、小鼠蛋清足跖肿
胀均具有抑制作用。
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奥硝唑在小鼠睾丸组织中 ＲP-HPLC检测方法的建立
刘志刚(浙江省杭州市公安局安康医院 杭州 311113)
摘要:目的 建立一种测定睾丸组织中奥硝唑的 ＲP-HPLC检测方法，用于奥硝唑在小鼠睾丸组织中的分布和消除规律研究。方法 睾丸组
织匀浆液样品经液-液萃取后，以甲醇-水 = 25∶75( v /v) 为流动相，流速 1. 0mL·min －1，采用大连依利特 ODS 柱( 250mm × 4. 6mm; i. d. ，5μm) 色
谱柱分离，柱温 30℃，紫外检测波长 310nm。结果 标准曲线线性范围 0. 1 ～ 50mg·kg －1，线性关系良好( r ＞ 0. 999) ，定量限为 0. 1mg·kg －1，
回收率 95%以上，日内和日间变异系数均低于 10%。结论 该方法操作简便、灵敏、准确，适合于临床前药动学及组织分布的初步研究。
关键词:奥硝唑; HPLC方法; 睾丸组织; 分布
中图分类号:Ｒ969 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2013)-02-0025-02
作者简介:刘志刚，男(1979. 9 －)。毕业于河北医科大学。职称:主管药师。主要从事医院药学。联系电话:0571-88797695，E-mail:xiulianlu@
163. com
Determination of ornidazole concentration in rat testis tissue by ＲP-HPLC
LIU Zhi-gang(An Kang Hospital of Hangzhou Public Security Bureau，Hangzhou 311113，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To develop an ＲP-HPLC method for the determination of ornidazole and detect the
distribution and elimination of ornidazole in rat testis tissue. METHODS After a simple liquid-liquid extraction，
ornidazole was separated by elite ODS C18 column(4. 6mm × 250mm，5μm)and detected by UV spectrometry. The
detection wavelength was set at 310nm. The mobile phase consisted of methanol-water(25 ∶ 75)at a flow rate of
1. 0mL·min －1. The column temperature was set at 35℃. ＲESULTS The linear calibration curves were obtained
in the concentration range of 0. 5 ～ 50. 0mg·kg －1(r ＞ 0. 999). The lower limit of quantification was 0. 1mg·kg －1
. The recoveries were more than 95. 0%，and the intra-and is inter-day coefficients of variation were less than 10%
(ＲSD ＜10%). CONCLUSION The ＲP-HPLC method was specific，simple，sensitive and accurate，can be applied
to quantitate ornidazole in rat testis tissue.
KEY WOＲDS:Ornidazole;ＲP-HPLC;Testis Tissue;Distribution
·52·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 25 No. 2 2013