全 文 :植物激素在毛地黄叶离体培养
形态发生中的互作效应
倪德祥 张不方 王凯基
(复旦 大学生物 系 )
冯文煦
(上海市农科 院植保所 )
斤`à介自 a八 tl JQU 1口` nU丫吕 11八匕性月 J任 0.3nUn Jlǐ一胜ù招上 I.…` :0nU Cǎ 1ù 01ō入乙
口 a九 b
毛地黄 (D£ g艺 t a乙玄 5P u r p u r e a )是中国广泛栽培
的药用及观赏植物。 所含的毛地黄普在医学上用于
治疗心脏病颇有价值。 据报道 , 毛地黄的大规模细
胞培养是植物组织培养技术在药用植物方面具有实
用价值的少数实例之一 , 这是因为植物组织培养技
术具有生长周期短 、 繁殖系数高的优点 , 适合于作
为提供提取毛地黄普原材料的手段 , 便于做到工厂
化、 集约化 。
迄今为止 , 已有的植物激素对毛地黄形态发生
稠控方面的工作均着眼于 N A A及 B A 的不同用量
组合上 , 而涉及更多激素互作效应的报道则很少见 .
在某种程度上 , 要想高效取得这些药用化合物 , 正
取决于外植体形态发生的调控。 鉴此 , 本实验以大
规模细胞繁殖及器官发生的调控为中心 , 研究了几
种不同的植物激素对毛地黄离体形态发生的互作效
应 , 以期得出具有实用意义的结果 。
材料与方法
将采自毛地黄继代培养材料的叶外植体接种于
M S 培养基中 , 辅以不同的植物激素及其组合 。 组
t合方案及编号如下 :
1
. 不含激素的标准培养基
2
.
N A A ( 0
.
5m翻 1)
3
.
B A ( l m g / l )
4
.
G A : ( 0
.
sm g / 1)
5
.
N A A ( o
.
s m习 l ) + B A ( l m g / l )
6
.
N A A ( 0
.
5 m郎 I ) + G A : ( 0 . s m g / 1)
7
.
G A 。 ( 0
.
s m彭 l ) + B A ( l m g / l )
8 N A A ( 0
.
s m g / l ) + G A
。
( 0
.
5m盯1) + B A
( l m郭 1)
培养物于 2 5士2 ℃下培养 , 每天用辐照度为 3 . 2
WM
一“ 的冷白荧光灯光照 10 小时 。 一个半月后测
定其生物量 、 干重 、 台水量 、 出苗数 、 出根数 、 苗
长及根长。 测定结果表示为 : 平均误士标准误 。
” 结果与讨论
、 所测定培养物的生物量 、 干重及含水量如表 . 1
表 1 不同处理的毛地黄培养物生物且 、 千重及含水 t
处理组 ! 生物量 (克 ) } 干 重 (克 ) }含水量 (% )
0
.
0 5 4+ 0
.
0 1 2
0
.
4 75士0 . 0 5 8
0
.
9 2 2+ 0
.
1 63
0
.
2 9 6士0 . 0 55
4
.
4 3+ 0
.
6 8
1
.
2 5士 0 . 36
6
.
8 6士0 . 70
5
.
5 5 + 1
.
0 1
8 7
.
0 4
8 8
.
4 2
7 8
.
7 2
7 8
.
8 9
9 6
.
9 8
8 8
.
0 4
9 7
.
5 3
9 8
.
0 0
所列 。 数据表明 : N A A 、 B A 和 G A : 在不同程度
上能提高培养物的生物量 , 其中B A更为有效 . 由于
生物量在一定程度上体现了愈伤组织生长的情况 ,
上述结果实际上表明 , 植物生长激素 (无论生长素
类 、 细胞分裂素类还是赤霉素类 ) 的存在是愈伤组
织形成的必要条件 , 愈伤组织的形成 , 不同程度地
受到N A A 、 B A和G A :的促进 (仅就本实验所用浓度
而言 ) ,尤其是组合使用时 , 效果更为明显。 即上述
激素在促进毛地黄叶外植体愈伤组织形成上具有协
同效应 , 两者共同作用的效果超过两者单独作用时
效果的简单叠加 。
对器官发生而言 , 植物激素的种类及其组合决
定了器官发生的形式和程度。 单 独使 用 N A A 和
G A消琶有效地促进生根 , 其中N A A更有效 ; B A 则
_ 任…). ,粼1.。出苗及发根数
留田 出苗数 ,口 发蜂教
一 3 1 一
「代赛
_馨 _
_锻一
丁 湖 广
( 福建省古 田县供梢社 )
香菇是世界上
著名的食用菌 , 我
国传统的 出 口特
产 , 换汇率高 。 长
期以来采用段木栽
培法 , 每 10 公斤木
材 , 三年只产干菇
1公斤 , 单产低 ,周
期长 , 不能满足国
内外市场需求。
近年来 , 福建
省古田县采用塑料
袋装杂木屑或木棉
籽壳 , 玉米芯 、 甘
蔗渣等原料 , 进行
接种袋栽 , 室内发
菌 , 野外大田脱袋
长菇 。 每 10 公斤
代料 , 9 个月内可
收干菇8~ 13 公斤 ,
单产提高 10 倍 ,周
期缩短三分之二 ,
成为我国现今发展
香菇速生高产新技术。 1987 年 3泪 中旬 , 全国26 个
省市 1 0 0 0多名科研 、 生产单位的专家 、 学者和栽培
者 , 于古田县 , 参观了代料大田栽培香菇的现场 ,
一致认为这是促进香菇高速度发展的新路径 , 宜迅
速推广 。 现将香菇速生高产栽培新技术介绍如下 。
一 、 原料选择
适合袋栽的杂木屑 , 应以壳斗科 、 桦木科 、 械
树科和金缕梅科的树种。 其中以拷 、 储 、 懈 、 栋 、 {
枫 、 杜英 、 械树等为适。 含有松脂酸 、 精油 、 醇类 、
醚类及其他杀菌的树种 , 如杉 、 松 、 樟 、 柏等不宜
采用 。 此外 , 棉籽壳 、 玉米芯 、 葵花籽壳 、花生壳 、
甘蔗渣 、 棉花秆 、 稻草等均可用作培养料。
二 、 培养基配方
1
. 杂术屑 1 00公斤 , 鼓皮2 5公斤 , 蔗糖 1 . 5 公
斤 , 石膏粉 2 . 5公斤 , 水1 15、 1 25 公斤。
2
. 棉籽壳 1 0 公斤 , 鼓皮20 公斤 , 石膏粉 3 公
斤 , 蔗糖 i公斤 , 水1 20~ 13 0公斤 。
3
. 甘蔗渣 10 0公斤 , 米糠 2 5公斤 ,石膏粉 3公斤 ,
磷酸二氢钾 0 . 3公斤 , 尿素0 . 3公斤 , 水 14 0~ 15 0公
斤。
4
. 玉米芯80 公斤 ,杂木屑 2 0公斤 , 鼓皮 20 公
斤 , 蔗糖 2公斤 , 蛋白陈 0 . 3公斤 , 尿素0 . 2公斤 ,水
1 20、 135公斤。
5
. 稻草60 公斤 ,鼓皮30 公斤 , 花生壳或葵花籽
壳20 公斤 , 蔗糖 2公斤 , 石膏粉 3公斤 , 尿素0 . 3 公
斤 , 过磷酸钙 0 . 6公斤 , 水 1场~ 13 n公斤。
配制培养基时 , 玉米芯和葵花籽壳 、 花生壳要
粉碎成木屑 , 棉籽壳不必粉碎 , 稻草切成 2~ 3厘米
长的小段或粉碎成粉状 。 为防止杂菌污染 , 每 10 。
公斤原料 , 加5 0多的多菌灵农药 0 . 1 公斤 , 拌均后
含水量为5 5万 , 料握在手中能成团 , 掷人料堆能分
成4、 5块 , 或碰地即散。
三 、 装袋灭菌
栽培香菇的袋子 , 应选择低压聚乙烯塑料薄膜
筒 , 薄膜厚度为 4丝米 , 薄膜筒径扁宽 15 厘米。 裁戊
肠厘米长 , 一端用棉纱线扎束筒口 , 用烛火熔结 。
每 10 公斤代料 , 装栽培袋 12 0只左右 。 装料可用装
能显著地促进苗的形成 , 这与 kS o g 和 崔 徽的高
生长素 / 细胞分裂素比例促进生根 、 低比例有利苗
的形成的著名结论是一致的 。 B A与 N A A 和 G A :
结合使用时降低出苗率 , 同样 , N A A 和G A 。 对发
根的效应也能被 B A 所降低。 有趣的是 , N A A 和
G A 。 都能促进根的形成 , 但它们的组合 效 应却 比
N A A 单独作用时为低 , 即两者的组合具有负效应 。
产生这种负效应有二方面的原因 , 一是这两种激素
在共同使用时产生某种拮抗作用 ; 二是这两种激素
虽无拮抗 , 但在共同使用时造成生根类激素浓度过
高而抑制生根 。
对各处理的苗长及根长均进行了统计 , 见表 2 。
表 2 不 同处理 组培养物 的根长与苗长
处理组 苗长 ( e m )
、
0
.
0 + 0
.
0
0
.
0 + 0
.
0
1
.
2 + 0
.
3
0
.
0土 0 0
1
.
9+ 0
.
2
0
.
0+ 0
`
0
4
.
5土0 . 3
3
.
1 + 0
.
?
根长 ( e m )
0
.
0士0 . 0
2
.
3士0 . 5
0
.
0士 0 . 0
0
.
3
0
。
4
0
.
3
+一月往ùO口04心自ōl
5几匕
4 0士0 . 3
3
.
0士0 . 7
当G A 。 和 BA 结合使用时有最长的苗 , 而当 G戈
单独作用时有最长的根 .
一 3 2 一