全 文 ：·基础研究 ·
微孔草子油对大鼠胚胎毒性和致畸作用研究
郭红云1 ,梁涛1 ,张永东1 ,胡清荣1 ,李雪萍1 ,李德杏1 ,俞发荣2
[ 摘要] 目的 探讨微孔草子油对大鼠胚胎毒性和致畸作用。方法 性成熟 Wista r大鼠 ,雌性 100 只 ,雄性 50 只 ,按雌性∶雄
性=2∶1 合笼配对 ,每日清晨检查阴拴和精子 , 发现者定为受孕零天。孕鼠随机分为 5 组(每组 20 只):给药组(设 3 个剂量组:给
予微孔草子油 2.5 g/kg 、5.0 g/kg 、10.0 g/ kg , ig)、环磷酰胺组(7 mg/ kg , sc)和菜子油组(给予等容积菜子油 , ig)。受孕第 7 天开
始 ,给药组 、菜子油组每天给予受试物 1 次 ,连续 10 d。环磷酰胺组于受孕第 11天给予环磷酰胺 ,每日 1 次 ,连续 3 d。受孕第20 天
处死孕鼠 ,观察受试物对孕鼠和胚胎的毒性及致畸作用。结果 微孔草子油各剂量组孕鼠体重 、活胎率明显高于环磷酰胺组(P <
0.01),死胎率 、吸收胎率显著低于环磷酰胺组(P<0.01), 与菜子油组间无显著性差异(P>0.05);微孔草子油各剂量组胎鼠体重 、
身长 、尾长与菜子油组无显著性差异(P>0.05),外观 、内脏 、骨骼未发现畸形;环磷酰胺组 140 只胎鼠中有 112 只出现畸形。结论
微孔草子油在 2.5 g/kg 、5.0 g/ kg 、10.0 g/kg 剂量时对孕鼠和胚胎无明显的毒性和致畸作用。
[ 关键词] 微孔草子油;胚胎;毒性;致畸作用
Embryo Toxicity and Teratogenic Effects of Microula Seed Oil on Rat GUO Hong-yun , LIA NG Tao , ZH ANG Yong-dong , et al.
E xperimental Center of P harmacology and Tox icology , Gansu Academy o f Medical Sciences , Lanzhou 730050 , Gansu , China
Abstract:Objective To investig ate to xicity and ter atogenic effect o f M icroula seed o il on embryo of ra t.Methods 150 mature
Wista r rats(100 fema les , 50 male s)w ere selected with female∶ male =2∶1 cage ma tch.During the daily mo rning examination the
sperm w as discovered in the vagina a s the ze ro day fo r conception.100 pregnant rats we re randomly divided into 5 g roups(n=20 in
each g roup):treatment g roup(included 3 g roups:to g ive M icroula seed oil 2.5 g /kg , 5.0 g / kg , 10.0 g / kg body weight , ig , re-
spectively), cyclopho sphamide g roup(7 mg/ kg body w eight , sc)and the edible oil g r oup(to giv e do se , such as volume as M icroula
seed oil , ig).F rom the 7th day of pr egnancy , the treatment g roup , the edible oil g roup we re g iven inte rvention once a day fo r 10
day s.F rom the 11th day of pregnancy cyclophosphamide g roup w as given cyclophosphamide as intervention once a day , fo r 3 day s.
On the 20th day the pregnant rats wer e killed.Results The body w eight o f pregnant rats and the r ate o f liv e births w ere significantly
higher in the M icroula seed oil do se g roup than in the cyclophosphamide gr oup(P<0.01), stillbirth rate and bir th r ate o f absorption
was significantly lower in the M icroula seed oil do se g roup than in the cyclophosphamide gr oup(P<0.01), and no significant differ-
ence from the edible o il g roup(P> 0.05);the fetal ra t , body w eight , body leng th , tail leng th in all g roups of M icr oula seed o il w as
no significant diffe rence from the edible oil g roup(P> 0.05).There w as no ma lfo rmation in appea rance , visce ra , bone s in the treat-
ment g roup and the edible o il gr oup w hile there w ere 112 fe tal ra ts with defo rmity in 140 in the cyclophosphamide g roup.Conclusion
Microula seed oil at doses of 2.5 g / kg , 5.0 g / kg , 10.0 g / kg body weight had no significant r ole in the tox icity and terato genicity
on embryo s o f pregnant rats.
Key words:Microula seed oil;embryo;to xicity;teratog enic effec t
[ 中图分类号] R994.4 [文献标识码] A [ 文章编号] 1006-9771(2009)12-1135-03
[ 本文著录格式] 　郭红云 ,梁涛 , 张永东 ,等.微孔草子油对大鼠胚胎毒性和致畸作用研究[ J] .中国康复理论与实践 , 2009 , 15
(12):1135—1137.
微孔草系紫草科微孔草属(M icroula sikkimensis
(Clarke)Hemsl.)一年生草本植物。主要分布在青藏
高原及邻近的川 、陕 、甘 、云 、贵等 8 省区海拔 2500 ～
4000 m 的高寒草甸 ,也混生在该区域农田之中。全属
30余种 ,26种为我国所独有 ,是我国特有的耐高寒的
基金项目:甘肃政法学院“ 135人才工程”基金项目(GZF04-75)。
作者单位:1.甘肃省医学科学研究院药理毒理实验中心 ,甘肃兰州
市 730050;2.甘肃政法学院公安分院实验中心 , 甘肃兰州市 730070。
作者简介:郭红云(1965-),女 ,青海西宁市人 ,副研究员 ,硕士生导师 ,主
要研究方向:药理毒理学研究。通讯作者:俞发荣。
优质高效野生油料作物 ,是获取纯天然 、高营养不饱和
脂肪酸特别是γ-亚麻酸的一条新途径[ 1-2] 。微孔草子
油及其副产品具有药用 、保健 、化妆 、食用和饲料用等
多种用途。微孔草种子含油率高达 40%～ 45%,油中
含γ-亚麻酸达 8.33%,共有 13 种脂肪酸成分 ,其中不
饱和脂肪酸达 86.58%,必需脂肪酸占 44%,并且含有
月见草油中所有的十八碳四烯酸 ,其含量为 1.21%～
7%,该物质为从 γ-亚麻酸生物转化为廿碳五烯酸
(EPA)和廿二碳六烯酸(DHA)的中间体[ 3] 。有关微
孔草子油毒性及致畸作用研究尚未见相关报道 。本文
以孕鼠为实验对象 ,对微孔草子油致畸作用以及对胎
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鼠生长发育的影响进行实验研究 ,为微孔草子油的进
一步开发利用提供科学依据。
1 材料和方法
1.1 实验动物　Wistar 大鼠 ,雌性体重 210 ～ 250 g ,
雄性体重 250 ～ 300 g ,由甘肃省医学科学研究院实验
动物中心提供。动物合格证号:SYKK(甘)2006-0010 ,
环境设施合格证号:SCKK(甘)2006-0010 。
1.2 药品和试剂　微孔草子油:由甘肃省医学科学研
究院药物研究所采用超临界 CO2 萃取提供 。微孔草
子油的超临界 CO 2萃取工艺:先将微孔草种子阴干或
晒干 ,使其水分含量小于 10%,并粉碎至粒度为 0.5 ～
2.5 mm ,作为微孔草子油提取原料;然后原料投入到
一萃二分循环式超临界 CO 2 萃取装置萃取子油 ,萃取
温度为 25 ℃～ 50 ℃,一级分离压力为 6 ～ 120 MPa ,
分离温度为 45 ℃～ 65 ℃, 二级分离压力为 5 ～ 15
MPa ,分离温度为 30 ℃～ 50 ℃,CO 2 流量为 45 ～ 250
L/h ,萃取时间为 1 ～ 8 h 。菜子油:兰州昌盛植物油有
限责任公司生产;注射用环磷酰胺 ,批号 20060903 ,山
西普德药业有限公司 。
1.3 方法　动物购进后 ,喂基础饲料适应 7 d 。将性
成熟Wistar 大鼠(雌性 100 只 ,雄性 50 只)按雌性 ∶
雄性=2∶1合笼配对 ,每日清晨检查阴拴和精子 ,查
出者定为受孕零天。随机将孕鼠分为 5 组 ,每组 20
只。给药组(设 3个剂量组:给予微孔草子油 2.5 g/
kg 、5.0 g/kg 、10.0 g/kg 体重 , ig),环磷酰胺组(7 mg/
kg 体重 , sc.)和菜子油组(给予等容积的菜子油 , ig)。
1.4 微孔草子油毒性和致畸作用实验　受孕第 7 天
开始 ,给药组 、菜子油组每天给予受试物 1次 ,连续 10
d。环磷酰胺阳性对照组于受孕第 11天给予环磷酰
胺 ,每日 1次 ,连续 3 d。受孕第 20 天处死孕鼠 ,观察
孕鼠主要脏器变化 ,切开子宫检查并计数吸收胎数 、活
胎数 、死胎数 ,取出胎鼠分别称活胎体重 、胎盘重 、量胎
鼠身长 、尾长 ,检查胎仔外观形态 ,然后将其中 1/2 活
胎经 Bouin氏液固定 2 周 ,采用徒手切片法对胎仔内
脏进行检查。另 1/2 经固定 、透明和茜素红染色后在
解剖镜下检查骨骼形态。
1.5 统计学处理 　采用 SPSS 10.0 统计软件进行
Dunnet t单因素方差分析 。
2 结果
2.1 微孔草子油对孕鼠体重的影响　各组孕鼠均无
死亡 ,各剂量组孕鼠在不同时点体重及增重与菜子油
组间无显著性差异(P >0.05);环磷酰胺组孕鼠增重
明显低于对照组(P <0.01)。见表 1。结束时各受试
物组孕鼠重要脏器肉眼观察均未见病理组织学改变。
2.2 微孔草子油对胚胎形成的影响　微孔草子油各
剂量组活胎率 、死胎率 、吸收胎率与菜子油组间无显著
性差异(P>0.05)。环磷酰胺组孕鼠的活胎率降低 ,
死胎率增加 , 与菜子油组比较有显著性差异(P <
0.01)。见表 2 。
表 1　微孔草子油对孕鼠体重的影响(g)
组别 n 0 d 7 d 16 d 20 d 增重
2.5g/ kg组 20 232.4±15.8 257.2±20.7 293.9±24.4 338.0±33.2a 105.6±22.4a
5.0 g/ kg组 20 236.5±15.4 258.4±18.9 302.8±20.9 338.9±29.8a 102.4±24.6a
10.0 g/kg 组 20 234.2±14.2 255.8±12.8 304.7±20.6 342.8±30.2a 108.6±25.6a
菜子油组 20 236.8±17.0 262.5±23.0 281.4±28.0 337.9±32.6a 101±23.4a
环磷酰胺组 20 233.5±16.3 256.8±16.2 290.7±20.6 311.7±26.3 78.2±20.8
　　注:与环磷酰胺组比较 , a:P<0.01。
表 2　微孔草子油对胚胎形成的影响
组别 n 活胎总数(率) 吸收胎数(率) 死胎数(率)
2.5g/kg组 20 181(98.9%)a 8(4.1%)a 2(1.1%)a
5.0 g/kg组 20 178(98.9%)a 1(0.5%)a 2(1.1%)a
10.0 g/kg组 20 176(100%)a 2(1.1%)a 0(0.0%)a
菜子油组 20 186(99.5%)a 6(3.1%)a 1(0.5%)a
环磷酰胺组 20 140(65.7%) 16(7.0%) 73(34.3%)
　　注:与环磷酰胺组比较 , a:P<0.01。
2.3 微孔草子油对胎鼠发育的影响　微孔草子油各
剂量组 、菜子油组胎鼠体重 、身长 、尾长与环磷酰胺组
比 ,有显著性差异(P <0.01)。见表 3 。
表 3　微孔草子油对胎鼠发育的影响
组别 胎鼠体重(g) 胎盘重(g) 胎鼠身长(cm) 胎鼠尾长(cm)
2.5g/kg组 3.65±0.56a 0.51±0.06a 4.34±0.32a 1.24±0.08a
5.0 g/kg组 3.86±0.34a 0.50±0.03a 4.40±0.15a 1.26±0.06a
10.0 g/kg组 3.78±0.50a 0.52±0.05a 4.35±0.26a 1.26±0.05a
菜子油组 3.58±0.60a 0.51±0.04a 4.32±0.10a 1.25±0.06a
环磷酰胺组 2.47±0.52 0.30±0.03 3.18±0.36 1.05±0.38
　　注:与环磷酰胺组比较 , a:P<0.01。
2.4 微孔草子油对胎鼠外观 、骨骼 、内脏的影响　微
孔草子油各剂量组和菜子油组均未见有外观 、内脏畸
形 。环磷酰胺组 140只胎鼠中有 112只出现外观异常
(表现为脑膨出 、开眼 、突舌 、颈短粗 、全身水肿 、足外
翻 、多趾等),占活胎总数的 80%;26只出现内脏畸形
(表现为侧脑室或第三脑室扩张)。对 446只胎鼠进行
骨骼检查 ,上枕骨检查结果显示 ,微孔草子油各剂量组
0级+Ⅰ级组的骨化组别数所占比例均在 99%以上 ,
与菜子油组比较无显著性差异。环磷酰胺组胎鼠上枕
骨 Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ的骨化级别数所占比例明显升高 。各组
胸骨均有不同程度的变异 ,其他骨骼未见异常。环磷
酰胺组 74只胎鼠中有 68只出现第 2至第 6胸骨均有
不同程度的缺失 ,肋骨表现为波状肋及融合肋 ,部分胎
鼠颈椎裂 ,骨化中心发育不全 ,与微孔草子油组和菜子
油组比较有显著性差异(P<0.01)。见表 4 。
表 4　微孔草子油对胎鼠外观 、骨骼 、内脏的影响
组别 外观畸形数(率) 骨骼畸形数(率) 内脏畸形数(率)
2.5 g/kg组 0(0%)a 14(13.7%)a 0(0%)a
5.0 g/kg组 0(0%)a 10(10.9%)a 0(0%)a
10.0 g/ kg 组 0(0%)a 11(12.5%)a 0(0%)a
菜子油组 0(0%)a 15(15.5%)a 0(0%)a
环磷酰胺组 112(80.0%) 68(91.9%) 26(36.4%)
　　注:与环磷酰胺组比较 , a:P<0.01 。
3 讨论
·1136· 中国康复理论与实践 2009年 12月第 15卷第 12期 Chin J Reh abi l Theory Pract , Dec.2009 , Vol.15 , No.12
微孔草子油富含自由脂肪酸 ,特别是含有 ω-6 系
列的 γ-亚麻酸和 ω- 3系列的α-亚麻酸。近年来的研
究证实 ,γ-亚麻酸直接参与人体代谢和生物合成过程 ,
在前列腺素衍生物的生成中 ,占有特殊地位 。当人体
摄取过量饱和脂肪酸或出现代谢紊乱时 ,体内Δ6-脱氢
酶受到抑制 ,从而影响亚油酸向γ-亚麻酸的转化 ,造成
前列腺素缺乏 ,导致疾病的产生。此时如能及时补充
γ-亚麻酸 ,便可保证体内前列腺素的正常代谢 ,从而消
除疾病。因此 , γ-亚麻酸是治疗体内酶系统存在严重
缺陷的重要药物 。
初生婴儿体内各种酶系统尚未发育完全 ,老年人
由于体内各种酶系统衰弱 ,补充一定的 γ-亚麻酸是十
分必要的。陈志等利用微孔草种子油对小白鼠血脂水
平进行干预 ,结果显示 ,微孔草种子油对动物体内脂代
谢有明显的作用 ,对小白鼠血清总胆固醇 、甘油三脂有
显著降低作用[ 4] 。因此 ,微孔草种子油在治疗高脂血
症和防治心血管疾病方面可能成为一个有前景的药
物。
陈建国等对微孔草子油的急性毒性和脊髓微核进
行实验 ,结果未见毒副作用[ 5] 。本文按大鼠标准致畸
试验方法[ 6] ,应用不同剂量的微孔草子油在大鼠胚胎
器官形成敏感时期给药 ,观察微孔草子油对怀孕大鼠
及胚胎毒性和致畸作用 。实验结果显示:微孔草子油
组 、菜子油组未见母体毒性 、胎鼠畸形及毒性;环磷酰
胺组胎鼠身长 、尾长缩短 ,体重 、胎盘重量减轻 ,外观 、
内脏及骨骼畸形率增高 ,表现出胚胎毒性和致畸作用 ,
表明实验选用的动物种属对致畸物敏感 ,结果可靠 。
在大鼠胚胎致畸敏感期分别给予孕鼠 2.5 g/kg 、5.0
g/kg 、10.0 g/kg 体重的微孔草子油后 , 未见母体毒
性 ,胎鼠生长发育正常 ,未见明显外观及内脏畸形。提
示 ,微孔草子油在 2.5 g/kg 、5.0 g/kg 、10.0 g/kg 体重
剂量下无明显的母体毒性 、胚胎毒性和致畸性。
微孔草籽中含有 18 种氨基酸 ,其中含 10种必需
氨基酸 6.08%,占氨基酸总量的 39.74%;含鲜味氨基
酸 4.28%,占氨基酸总量的 27.97%;含甜味氨基酸
2.97%,占氨基酸总量的 19.4%,含大量营养元素和
微量元素[ 7] ,是一种尚待开发的优质高效植物油料来
源 ,是获取纯天然 、高营养 、多不饱和脂肪酸的又一条
新途径 ,研究和开发微孔草子油 ,将为我国优质高效油
料资源的发展 ,为系列高营养保健食品 、保健乳制品 、
保健菜子油以及特种医药品 、新型化妆品等新产品的
生产提供充足的原料。
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(收稿日期:2009-08-07　　修回日期:2009-10-28)
本获准刊加入“世界卫生组织西太平洋地区医学索引(WPRIM)”
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