全 文 ：第 27卷第 1期
2 0 0 8 年 3月
大 连 工 业 大 学 学 报
Journal of Dalian Polytechnic University
Vol.27 No.1
Mar.2 0 0 8
文章编号:1674-1404(2008)01-0015-04
虎眼万年青各组织部位中皂苷的分布
冯 芳侠 , 　商 秀 梅 , 　付绍 平 , 　金凤 燮 , 　鱼 红闪
(大连工业大学 生物与食品工程学院 , 辽宁 大连　116034)
摘要:将虎眼万年青茎 、须 、叶三部位的皂苷提取液脱糖和脱色后 , 检测其皂苷的组成和含量差异。 结
果表明 ,各组织部位皂苷得率分别为:茎中 0.98 %, 叶中 0.71 %,须中 0.43 %。 TLC 检测结果茎中斑
点数约为 10 ,叶中约为 9 ,须中约为 7。HPLC 检测结果为:茎中皂苷总数约为 32种 , 叶中约为 29 种 , 须
中约为 25 种。且就所选的 4 种组分开看 , 其在不同部位中的含量也不同:组分 1 在须中含量最高 ,组分
2和组分 4在茎中含量最高 ,组分 3 在叶中含量最高。
关键词:虎眼万年青;虎眼万年青皂苷;组成
中图分类号:Q946.49 文献标志码:A
Distribution of caudaside in different tissues
of Ornithogalum caudatum Ait
FENG　Fang-xia , 　SHANG　Xiu-mei , 　FU　Shao-ping , 　JIN　Feng-xie , 　YU　Hong-shan
(School of Biological &Food Eng ineering, Dal ian Polytechnic University , Dal ian 116034 , China)
Abstract:The dist ribution of caudaside in Orni thogalum caudatum Ait w as assessed.The ex t ract
y ield in roo t ball is 0.98 %, in the stem 0.71 %, in the ro ot 0.43 %.The spots on TLC of roo t ball
are 10 , stem 9 , roo t 7.There are 32 HPLC peaks in the roo t ball , 29 peaks in the stem and 25 peaks
in the ro ot .Moreove r , the same caudaside s content in dif ferent part is different .Caudaside 1 is high
in the ro ot , caudaside 2 and caudaside 4 are high in the roo t ball , caudaside 3 is high in the stem.
Key words:Orni thogalum caudatum Ait;caudaside;composi tion
收稿日期:2007-11-13.
基金项目:国家自然科学基金资助项目(20476017);辽宁省科学技术基金资助项目(20042132);辽宁省高等学校优秀人才支持计划
资助项目(RC-04-05).
作者简介:冯芳侠(1982-),女 ,硕士研究生;通信作者:鱼红闪(1968-),男 ,教授.
0　引　言
虎眼万年青(Ornithogalum caudatum Ait)
俗名珍珠草 ,又名鸟乳花 、胡连万年青 、海葱 、葫芦
兰 ,为百合科多年生常绿草本植物。虎眼万年青
有极高的药用价值 ,如民间使用虎眼万年青于抗
炎消毒 ,治疗肝病 、肝癌 、胆囊炎症等 。药理学研
究表明 ,虎眼万年青中的虎眼万年青皂苷 OSW-1
对肺癌 、乳腺癌有明显的抗癌活性 ,体外抗 p338
淋巴细胞白血病活性结果表明 ,OSW-1是常见抗
癌药物喜树碱 、阿霉索 、紫杉醇抗癌活性的 10 ～
100倍 ,而且对正常细胞没有毒性[ 1-2 ] 。虎眼万年
青球茎中含有大量的生物碱及化学成分 ,已测出
的化学成分有 27种之多[ 3] ,因此 ,是一种极具开
发潜力的中草药 。迄今为止 ,国内对虎眼万年青
的研究 ,主要集中在多糖的提取[ 4] 及药理活性[ 5]
和组织培养[ 6] 方向 ,对于虎眼万年青皂苷的分离
提取报道的很少。本论文主要对虎眼万年青各部
位(茎 、须 、叶)中皂苷的组成和含量进行了对比研
究 ,得到虎眼万年青各部位总皂苷的 HPLC 图
谱 ,为进一步研究开发虎眼万年青皂苷提供了理
论依据。
1　材料与方法
1.1　材　料
虎眼万年青 ,采自吉林省长白山地区;薄层层
析板(T LC)Kiesel-gel 60-F254 ,德国 Merck公司
生产;AB-8和 D-280大孔吸附树脂 ,南开大学化
工厂生产;Waters2996 高效液相色谱仪 ,美国沃
特斯公司生产;所用试剂均为分析纯。
1.2　方　法
1.2.1　虎眼万年青皂苷的提取
将干燥的虎眼万年青植物粉碎 ,将粉碎物用
95 %乙醇浸泡 24 h ,分别用纱布 、滤纸过滤 ,收集
滤液 。重复上述过程 3次 ,合并滤液 。滤液减压
浓缩为原体积的 1/5 ,除去乙醇。再用滤液体积
1/3的石油醚萃取脱脂 ,保留水相。再次减压蒸
馏后 ,加水稀释 , AB-8 柱反复吸附 3次 ,用 6 ～ 8
倍柱体积的水脱糖 ,用 5 倍柱体积 95 %乙醇洗
脱。所得洗脱液即为含皂苷的溶液 。此溶液再经
D-280柱脱色后 ,将所得洗脱液减压浓缩后蒸干 ,
得到粉末状物质 ,即为虎眼万年青皂苷 。
1.2.2　薄层层析(TLC)检测虎眼万年青各部位
皂苷组成
将薄层层析板在 110 ℃烘箱活化 30 min。
然后用微量点样器吸取适量样品 ,点于薄层层析
板上 ,每次点样量依照样品浓度确定点样次数 ,每
次点样后均需用电吹风吹干。将点好样的薄层层
析板放入层析缸的展开剂中 ,浸入展开剂的深度
为距薄层层析板底边 0.5 ～ 1.0 cm(且勿将样点
侵入展开剂中),密封盖 ,待展开至规定距离(一般
为5.5 cm)后 ,取出 ,吹干;喷10%硫酸 ,于 105 ℃
下加热 5 min显色 ,然后取出 ,吹干。展开剂为:
V(氯仿)∶V (甲醇)∶V (水)=7∶3∶0.5;点
样量 5 μL 。
1.2.3　HPLC 检测虎眼万年青各部位皂苷组成
(1)供试品溶液的制备 。取待测样品 1 mg ,
精密称量 ,置 1 mL 定量瓶中 ,加 1 mL 甲醇至刻
度 ,摇匀 ,用微孔滤膜过滤 ,取滤液 , 即得浓度为
1 mg/mL的供试品。
(2)色谱条件 。色谱仪型号:Waters-2695 ,
2996 DAD;色谱柱:Sunf ire C18 (150 mm ×
4.6 mm ,5μm)不锈钢填充柱;柱温:35 ℃;体积
流量:1.0 mL/min;检测波长:268 nm;进样量:
10 μL;流动相:乙腈(A)+1%的乙酸水溶液(B)
(A+B=100%),均为色谱纯 ,用前以0.45μm微
孔滤膜过滤 ,并经超声处理。
2　结果与讨论
2.1　虎眼万年青不同部位皂苷的提取
将室温干燥的虎眼万年青茎 、须 、叶分别粉
碎 ,各称取 200 g ,按照“1.2.2”的提取方法进行提
取 ,所得数据如表 1。
表 1　不同部位虎眼万年青总皂苷提取情况
Tab.1　Ex tract yield of caudasides f rom different par ts o f Ornithogalum caudatum Ait
m(初始物)/ g m(95%乙醇浸提后产物)/ g m(脱糖脱色后产物)/g 总得率/ %
茎 200 64.76 1.97 0.98
叶 200 48.51 1.41 0.71
须 200 39.07 0.85 0.43
从表 1可知 ,虎眼万年青各个部位总皂苷的
总得率分别为:茎处提取的总得率最高 , 为
0.98%;叶处提取总得率次之 ,为 0.71%;须根处
的总得率最低 ,为 0.43%。因此 ,虎眼万年青各
部位总皂苷的提取总得率顺序为:茎>叶>须 。
2.2　TLC法检测虎眼万年青不同部位皂苷的组
成
分别称取各部分提取出的虎眼万年青皂苷
1 mg ,溶解于 1 mL 甲醇中 。用微量取样器取一
定量点于薄层层析板上 ,经展开 、显色后得 T LC
图谱 。所用展开剂为:V(氯仿)∶V(甲醇)∶V
(水)=7∶3∶0.5;点样量为 5 μL 。结果如图 1
所示 。由图 1 可以看出 ,虎眼万年青皂苷在茎 、
叶 、须中的组成和含量均有差别 ,具体分析如表 2
所示 。
图 1　虎眼万年青不同部位皂苷含量的
TLC图谱
Fig.1　T LC o f composition and content about cauda-
sides in various par ts of Ornithogalum cau-
datum Ait
16 大　连　工　业　大　学　学　报 第 27卷
表 2　虎眼万年青不同部位中总皂苷的
T LC 图谱分析
Tab.2 　Analy ze T LC o f caudasides in various
par ts o f Ornithogalum caudatum Ait
斑点总个数/个 颜色深的斑点个数/个
茎 10 7
叶 9 4
须 7 3
由表 2可以看出 ,虎眼万年青不同部位提取
出来的总皂苷在 T LC上的斑点组成为:茎中斑点
数约为 10个;叶中约为 9 个;须中约为 7个。在
这些斑点中颜色最深的斑点数:茎中约为 7个;叶
中约为 4个;须中约为 3 个。由以上所得数据可
以看出 ,虎眼万年青皂苷的组成以茎中皂苷的种
类最多 ,其次为叶 ,须中最少。由于采用了定量点
样 ,因此可以从虎眼万年青皂苷在 TLC 上的斑点
大小和浓淡程度初步判断出各部位皂苷含量的高
低。根据这个理论可以得出虎眼万年青茎 、叶 、须
三部位皂苷的含量情况 ,其结果为:茎中含量最
高 ,其次为叶 ,须中最少。
通过以上两方面的比较可以得出虎眼万年青
茎 、叶 、须三部位皂苷的组成和含量的顺序如下:
茎>叶>须。此结果与上面提取总得率部分的结
果相符。
2.3　HPLC检测虎眼万年青各部位皂苷的组成
取按“1.2.2”方法提取出来的虎眼万年青茎 、
须 、叶部位的皂苷各 1 mg ,精密称量 ,置 1 mL 定
量瓶中 ,加 1 mL 甲醇至刻度 ,摇匀 ,用微孔滤膜
过滤 , 取滤液 , 即得 1 mg/mL 的供试品 。其
HPLC图谱如图 2所示。由图 2 可以看出 ,虎眼
万年青皂苷在不同部位中的组成及相同组分在不
同部位中的含量均有差别 ,具体差别如表 3所示。
图 2　虎眼万年青各部位皂苷的组成和含量的 HPLC图谱
Fig.2　HPLC of composition and content about caudasides in va rious parts of Ornithogalum caudatum Ait
表 3　虎眼万年青不同部位皂苷组成和含量的 HPLC 图谱分析
Tab.3　Analy ze HPLC of caudasides in various par ts of Ornithogalum caudatum Ait
峰数/个 保留时间相同峰的峰面积/ cm
2
峰 1(10 min) 峰 2(13 min) 峰 3(28 min) 峰 4(37 min)
茎 32 0.2982 0.852 0.0852 1.2780
须 25 1.0970 0.4580 0.0213 0.1598
叶 29 0.3461 0.4793 0.1278 0.8467
17第 1期 冯芳侠等:虎眼万年青各组织部位中皂苷的分布
由表 3的数据可以得出:
(1)虎眼万年青的部位不同皂苷的组成也不
同 ,表中粗略地列出了茎 、须 、叶中皂苷的数目 ,其
中茎中皂苷的数目约为 32种;须中约为 25种;叶
中约为 29种 。依照这些数据 ,再结合 HPLC 图
谱可以得出如下结果:在虎眼万年青茎 、须 、叶三
个部位中 ,皂苷组成最全的为茎 ,叶次之 ,须最少 ,
即就皂苷组成来说 ,存在如下关系:茎>叶>须。
这与上面总得率的计算结果和 T LC 图谱的结果
相符 。
(2)比较相同组分在不同部位中的含量情况。
为了估算相同组分在不同部位的含量 ,选取
了提取部位不同但保留时间相同的 4个峰(4种
组分)计算峰面积 ,根据计算出的峰面积可以看
出:组分 1(保留时间为 10 min)在须中的峰面积
为 1.097 0 cm 2 ,在茎中为0.298 2 cm2 ,在叶中为
0.346 1 cm2 ,可见对于组分 1来说 ,其在三个部
位中的含量顺序依次为:须>叶>茎。同样可以
得出组分 2(保留时间为 13 min)的含量顺序为:
茎>叶>须。组分 3(保留时间为28 min)为:叶
>茎>须 。组分 4(保留时间为 37 min)为:叶>
茎>须。
3　结　论
(1)就皂苷组成而言 ,茎中的组成最全 ,其皂
苷提取总得率为 0.98%, T LC 图谱斑点数约为
10个 , HPLC色谱峰数目约为 32个 。
(2)在 HPLC 过程中发现 ,对于相同的组分 ,
在不同的部位含量有很大差别 ,为此选取了 4个
组分进行不同部位含量的对比研究 。结果为:组
分1(保留时间为10 min)在须中含量最高;组分2
(保留时间为 13 min)和组分 4(保留时间为
37 min)在茎中含量最高;组分 3(保留时间为
28 min)在叶中含量最高。
鉴于目前对于虎眼万年青的研究主要集中在
多糖的提取和药理活性方面 ,所以本实验所得结
果在虎眼万年青的进一步研究方面具有重要的理
论意义。为虎眼万年青皂苷的提取及进一步的药
理学研究提供了理论依据和实验参考。实验得到
的虎眼万年青皂苷的 HPLC 图谱可作为中药虎
眼万年青皂苷的指纹图谱 ,用以鉴别真伪 ,评价原
料药材 、半成品和成品质量均一性和稳定性 。
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18 大　连　工　业　大　学　学　报 第 27卷