全 文 ：第 31卷第 11期 西 南 大 学 学 报(自然科学版) 2009年11月
Vol.31 No.11 Journal of Southw est Unive rsity (N atural Science Edi tion) N ov. 2009
文章编号:1673-9868(2009)11-0154-04
RP-HPLC法测定薏苡中薏苡素的含量①
李厚聪1 , 刘 圆2 , 袁 玮2 , 戴先芝2
1.湖北民族学院 医学院 , 湖北 恩施 445000;2.西南民族大学 少数民族药物研究所 , 成都 610041
摘要:采用 H PLC 法 , 以 Diamonsil(R)C18为色谱柱 , 乙睛-水(50∶50)为流动相 , 流速 1 m L/min , 柱温 25 ℃, 检
测波长 232 nm , 建立了薏苡非种仁部位中薏苡素的高效液相含量测定方法.结果表明:薏苡素在 0.096 ～ 1.92 μg
范围内呈良好的线性关系 , 该方法的平均回收率为 99.12%(n=5), 相对标准偏差(RSD)为 0.89%, 用此条件测得
成都华西植物园中薏苡全草中薏苡素的含量为 8.3078 mg/ g.从成分薏苡素和资源综合利用的角度考虑 , 建议薏苡
根 、茎和叶可以入药.
关 键 词:薏苡;根茎叶;薏苡素
中图分类号:TQ460.7+2 文献标识码:A
薏苡为禾本科薏苡属植物薏苡 C lacryma-jobi L var mayuen(Roman.)S tapf和川谷 C lacrymal jobi
L 和的干燥全草 、果实和种仁.其功效为健脾渗湿 、除痹止泻 、清热排脓;用于水肿 、脚气 、小便不利 、湿
痹拘挛 、脾虚泄泻 、肺痈 、肠痈;扁平疣的治疗[ 1] .薏苡根收载于上海市中药材标准 1994年版中 , 有清热 、
利尿和驱虫作用[ 2] .《中国药典》从 1963年版开始收载禾本科植物薏苡 C lacryma-jobi L var mayuen (Ro-
man.)Stapf的干燥成熟种仁;2005年版记载薏苡仁粉末的鉴别 、油脂类成分的薄层鉴别和甘油三油酸酯
的含量测定项.
日本人小山鹰二与大和正利于 1955年首次从薏苡根中分离得到薏苡素(Coixo l)[ 3-4] 并发现其具有镇痛
与消炎的功效 , 此后一些学者还发现薏苡素具有镇静 、抑制多突触反应 、降温解热 、降低血糖浓度 、肌肉松
弛以及抗惊厥等多种药理作用[ 5] .
薏苡的根 、茎 、叶 、果实 、种仁等药用部位在中国的蒙古族 、藏族 、苗族 、彝族 、侗族 、佤族 、傈僳族 、
傣族 、壮族 、毛难族 、瑶族 、哈尼族 、景颇族 、水族 、基诺族等民族中均有大量使用[ 6] , 而现有文献中关于
薏苡根 、茎 、叶的研究涉及较少.
本课题拟以薏苡素为指标 , 首次对薏苡中的薏苡素进行含量研究 , 并进行品质评价 , 以期能寻找到薏
苡新的药用部位.
1 仪器与试药
Agilent 1200型高效液相色谱仪 , DAD 型检测器(美国 Agilent 公司).薏苡素(Coixol)对照品(德国
Sigma公司 , 批号 065K1241).乙腈为色谱纯 , 水为重蒸水.其他试剂为分析纯.薏苡药材采自于四川华西
药用植物园 , 经刘圆副教授鉴定.
①收稿日期:2008-10-09
基金项目:国家科技支撑计划重点资助项目(2007BAI25B05);四川省青年基金资助项目(07ZQ026-011);国家中医药管理局资助项目(06-
07ZP43).
作者简介:李厚聪(1984-), 男 , 土家族 , 湖北巴东人 , 硕士研究生 , 主要从事少数民族药物的研究.
通讯作者:刘 圆 , 女 , 副教授.
2 方法与结果
2.1 测定波长的选择
将配制成的薏苡素对照品溶液用 DAD检测器在 190 ～ 400 nm 波长内扫描 , 从峰的对称性 , 峰面积的
大小等方面考察 , 结果薏苡素在 232 nm 处峰形对称 , 峰面积较大 , 故选择 232 nm 作为检测波长.对照品
及样品的紫外光谱图见图 1 , 纯度图见图 2.
图 1 对照品及样品光谱图
图 2 对照品和样品纯度图
2.2 流动相
分别考察了不同比例的流动相对样品和对照品溶液中目标峰的分离效果 , 结果流动相比例高于 50∶50
时 , 目标峰出现肩峰 , 在 50∶50时 , 目标峰峰形对称尖锐 , 分离度良好 , 最后选用乙睛-水(50∶50)为流动相.
2.3 色谱条件
Diamonsil(R)C18色谱柱(Dikma公司 , 4.6 mm×250 mm , 5μm);以乙睛-水(50∶50)为流动相 , 检测
波长 232 nm , 流速为 1 mL/min , 柱温 25 ℃, 进样量 10 μL.对照品及样品色谱见图 3.
图 3 对照品及样品色谱图
2.4 线性范围
精密称取薏苡素对照品适量 , 加甲醇配制成每 1 mL含 0.096 mg 的对照品溶液作为储备液.精密量
155第 11期 李厚聪 , 等:RP-HPLC 法测定薏苡中薏苡素的含量
取薏苡素对照品溶液 1 ,4 ,8 ,12 , 16 , 20 μL 注入液相色谱仪 , 测定峰面积 , 以进样量(X , μg)为横坐标 ,
峰面积(Y)为纵坐标 , 最小二乘法计算得回归方程为:Y =324.81 X-5.180 7 , r=0.999 7 , 其线性范围
为 0.096 ～ 1.92 μg.
2.5 精密度试验
精密量取“2.4”项下对照品溶液(0.096 mg/mL), 连续重复进样 6次 , 测得薏苡素峰面积的相对标准
偏差(RSD)为 0.98%, 结果表明本方法重复性良好.
2.6 稳定性试验
另取“2.4”项下对照品溶液 , 分别在 1 ,2 , 3 ,4 , 8 ,16 ,24 , 48 ,64 h按上述色谱条件进样分析 , 测定其峰面
积 , 结果本品在室温下放置 64 h 内基本稳定 , 其 RSD为 1.28%.结果表明 , 溶液稳定.
2.7 重复性试验
取同一批样品溶液 , 精密称取 6份 , 按“2.8”项下方法制备样品溶液 , 按“2.3”项下色谱条件测定薏苡
素峰面积 , RSD为 0.9%(n=6), 表明重复性良好.
2.8 回收率试验
精密称取已知薏苡素含量的薏苡药材粉末 1 g , 9 份 , 分为 3 组 , 分别加入薏苡素对照品溶液
(0.096 mg/mL)3 ,3.5 ,4.0 mL , 制备供试品溶液 , 测定峰面积 , 计算 RSD值.结果见表 1.
表 1 薏苡素的加样回收率
原有量
/mg
加入量
/ mg
检测量
/ mg
回收率
/ %
平均回收率 X
/ %
RSD
/ %
0.339 5 0.288 0.614 9 98.01
0.338 5 0.288 0.614 8 98.15
0.338 7 0.288 0.615 7 98.24
0.340 2 0.336 0.670 3 99.12
0.337 6 0.336 0.669 2 99.34 99.42 1.16
0.341 2 0.336 0.684 0 101.01
0.338 7 0.384 0.729 8 100.98
0.338 4 0.384 0.722 6 99.98
0.341 5 0.384 0.725 1 99.95
注:n=9.
2.9 样品处理方法
2.9.1 提取溶媒的选择
根据薏苡素的溶解性能 , 分别考察了料液比为 1∶15 时 , 乙醇 、丙酮 、氯仿作为提取溶媒对样品中薏
苡素提取率及峰形 、峰面积的影响 , 结果乙醇 、丙酮 、氯仿的提取率分别为 0.83 ,0.88 ,0.51 mg/mL , 最终
确定选用丙酮为提取溶媒.
2.9.2 提取方法
分别考察了料液比为 1∶15时 , 超声 、回流及索氏提取对样品中薏苡素提取率的影响 , 结果超声最低
为 0.88 mg/mL , 索氏最高为 1.84 mg/mL , 最终确定选用索氏提取.
2.9.3 料液比的考察
分别考察了料液比为 1∶10 ,1∶15 , 1∶20 ,1∶25 , 1∶30时样品中薏苡素的提取率 , 结果当料液比为
1∶25时 , 提取率较高 , 1∶30与 1∶25无明显变化 , 因此选用料液比为 1∶25.
2.10 含量测定
称取薏苡药材粉末 5份 , 每份 4 g(过 40目筛), 精密称定 , 精密加入丙酮 100 mL , 索氏提取 , 直到提
取液近无色 , 提取液减压浓缩 , 用 100 mL 甲醇溶解并定容 , 并用微孔滤膜(0.45 μm)滤过 , 取续滤液 , 即
得供试品溶液.按照“2.1色谱条件”中所述条件测定 , 每次进样 10μL , 测得薏苡全草中薏苡素的平均含量
为 8.307 8 mg/g .
3 讨 论
1)本文采用 HPLC 的方法 , 首次对薏苡中的薏苡素进行含量测定 , 为薏苡全草的品质评价提供参考.
156 西南大学学报(自然科学版) 投稿网址 http://xbg jx t.sw u.cn 第 31卷
2)薏苡素为白色针状结晶 , 易溶于乙醇 、氯仿 、丙酮中 , 因此在考察样品的制备方法时 , 主要考察了
乙醇 、丙酮 、氯仿为提取溶媒提取时对薏苡素峰形 、分离度 , 以及样品提取率的影响 , 结果选用丙酮 , 用丙
酮索氏提取后 , 提取液减压浓缩后 , 加入 100 mL 甲醇溶解并定容 , 微孔滤膜过滤后进样分析.
3)薏苡素属于苯并恶唑啉酮类化合物 , 国内外学者曾经采用 GC[ 7] , HPLC[ 8] 等方法对其进行含量测
定.但 GC 法操作烦琐 , 对设备要求高;而建立的 HPLC 法采用梯度洗脱.本方法采用等度洗脱的 HPLC
方法 , 采用不同流动相体系对薏苡素进行色谱条件与系统适应性实验 , 薏苡素峰形尖锐对称 , 快速 、简便 ,
方法可靠 、准确 、专属性强 、适用于薏苡中薏苡素的分析.
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Determination of Coixol in Coix lacryma-jobi L.
var.mayuen(Roman.)Stapf by RP-HPLC
LI Hou-cong1 , LIU Yuan2 , YUAN Wei2 , DAI Xian-zhi2
1.Medical School , Hubei Insti tate for Nationalities , Enshi Hubei 445000 , China;
2.Insti tute of Ethnic Pharmaceutical , Southwest University of Nationalities , Chengdu 610041 , China
Abstract:Objective To establish an RP-HPLC procedure for determining the content of coixo l in the roo t ,
stem and leaf of Coi x lacryma-jobi L.var.mayuen(Roman.)Stapf.Methods The Diamonsil(R)C18 co l-
umn w as used wi th the mobile phase of acetoni t rile-water (50:50), a f low rate of 1 mL/min , a tempera-
ture of 25 ℃and a w aveleng th of 232 nm.Results The linear range of coixo l w as 0.096-1.92μg.The av-
erage recovery w as 99.12%(n=5 , RSD is 0.89 %).Coix ol in the herbal of C.lacryma-jobi L.var.mayue in
the Botanical Garden of West China w as 8.3078 mg/g.Conclusion This method proved to be simple , accurate ,
well replicable , and suitable for the determination of C.lacryma-jobi L.var.mayuen(Roman.)Stapf.
Key words:Coix lacryma-jobi L.var.mayuen(Roman.)S tapf;roo t , stem , leaf;coixol
责任编辑 潘春燕
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