全 文 ：作者简介：唐政恒（１９８９－），硕士，主要从事神经外科研究工作。　△　通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｇｙｕａｎ０２３＠ａｌｉｙｕｎ．ｃｏｍ。
论著·基础研究　　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－８３４８．２０１５．２５．００８
草麻黄水提物对大鼠蛛网膜下腔出血后继发性脑损伤的影响
唐政恒，高诗豪，陈图南，李　飞，陈冬艺，单佑安，冯　华，程　远△
（重庆医科大学附属第二医院神经外科　４０００３８）
　　［摘要］　目的　观察草麻黄水提物对大鼠蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后继发性脑损伤的治疗作用并探讨其部分机制。方法　
ＳＤ大鼠５０只，分为模型组、对照组和３个不同浓度（４、１２、３６ｍｇ／ｋｇ草麻黄水提物）治疗组，术后３ｄ，各组动物脑含水量及脑组
织匀浆检测丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）与羟自由基等的变化；ＨＥ染色观测各组动物ＳＡＨ与水肿情况；免疫
组织化学及 Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ法检测各组动物脑组织补体Ｃ３的表达变化。结果　术后３ｄ，同模型组相比，１２、３６ｍｇ／ｋｇ治疗组脑组
织 ＭＤＡ水平、ＧＳＨ－Ｐｘ酶活力、羟自由基能力显著降低（Ｐ＜０．０１），４ｍｇ／ｋｇ治疗组的 ＭＤＡ水平变化不明显（Ｐ＞０．０５），但
ＧＳＨ－Ｐｘ酶活力与抑制羟自由基能力显著降低（Ｐ＜０．０１），同时，１２、３６ｍｇ／ｋｇ治疗组脑组织含水量较模型组明显降低；Ｗｅｓｔｅｒｎ
ｂｌｏｔ与免疫组织化学显示３６ｍｇ／ｋｇ治疗组补体Ｃ３的表达较模型组明显降低。结论　草麻黄水提物能降低脑水肿的严重程度，
从而减轻炎性反应，对ＳＡＨ动物具有较好的治疗效。
［关键词］　蛛网膜下腔出血；补体Ｃ３；草麻黄水提物；大鼠
［中图分类号］　Ｒ７４３．３５ ［文献标识码］　Ａ ［文章编号］　１６７１－８３４８（２０１５）２５－３４８１－０４
Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｅｐｈｅｄｒａ　ｓｉｎｉｃａ　ｔｒｅａｔｉｎｇ　ｉｎ　ｂｒａｉｎ　ｄａｍａｇｅ　ａｆｔｅｒ　ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ　ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ　ｉｎ　ｒａｔｓ
Ｔａｎｇ　Ｚｈｅｎｇｈｅｎｇ，Ｇａｏ　Ｓｈｉｈａｏ，Ｃｈｅｎ　Ｔｕｎａｎ，Ｌｉ　Ｆｅｉ，Ｃｈｅｎ　Ｄｏｎｇｙｉ，Ｓｈａｎ　Ｙｏｕａｎ，Ｆｅｎｇ　Ｈｕａ，Ｃｈｅｎｇ　Ｙｕａｎ△
（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００３８，Ｃｈｉｎａ）
　　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｅｐｈｅｄｒａ　ｓｉｎｉｃａ　ｏｎ　ｂｒａｉｎ
ｄａｍａｇｅ　ａｆｔｅｒ　ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ　ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ（ＳＡＨ）ｉｎ　ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｏｔａｌｙ　５０ｒａｔｓ　ｏｆ　Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ
ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｈｒｅｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ（４，１２，３６ｍｇ／ｋｇ）．Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｅｒｅｂｒａｌ
ｗａｔｅｒ　ｃｏｎｔｅｎｔ，ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ），ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＧＳＨ－Ｐｘ）ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｘｙ　ｒａｄｉｃａｌ　ｏｆ　ｂｒａｉｎ　ｔｉｓｓｕｅ　ｗｅｒｅ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ，ａｎｄ　ｈｅ－
ｍａｔｏｘｙｌｉｎ－ｅｏｓｉｎ（ＨＥ）ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｔｅｓｔ　ｔｈｅ　ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ　ｈａｅｍｏｒｒｈａｇｉａ　ａｎｄ　ｏｅｄｅｍａ，ａｎｄ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　ｗｅｓｔｅｒｎ
ｂｌｏｔ　ｗｅｒｅ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｔｏ　ａｓｓａｙ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ　Ｃ３ｉｎ　ｂｒａｉｎｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ａｎｉｍａｌ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　３ｄａｆｔｅｒ　ｏｐｅｒａｔｉｏｎ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ　３ｄａｙｓ，ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ＭＤＡ、ＧＳＨ－Ｐｘ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ
ｏｆ　１２、３６ｍｇ／ｋｇ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ（Ｐ＜０．０１），ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ＭＤＡ　ｏｆ　４ｍｇ／ｋｇ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ｎｏｔ　ｃｈａｎｇｅ
（Ｐ＞０．０５），ｂｕｔ　ＧＳＨ－Ｐｘ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ（Ｐ＜０．０１），ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｗａｔｅｒ　ｃｏｎｔｅｎｔ
ｏｆ　１２，３６ｍｇ／ｋｇ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ　Ｃ３ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ
ｏｎ　３６ｍｇ／ｋｇ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｅｄｅｍａ　ｒｅｄｕｃｅｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｅｐｈｅｄｒａ　ｃｏｕｌｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
ｏｆ　ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ　Ｃ３，ｐｒｅｖｅｎｔ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＭＤＡ、ＧＳＨ－Ｐｘ　ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ，ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｓｅｖｅｒｉｔｙ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｅｄｅｍａ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎ－
ｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ，ｗｈｉｃｈ　ｈａｓ　ａ　ｂｅｔｔｅｒ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｆｆｅｃｔ　ＳＡＨ　ａｎｉｍａｌｓ．
［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］　ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ　ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ；ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ　Ｃ３；ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｅｐｈｅｄｒａ　ｓｉｎｉｃａ；ｒａｔ
　　蛛网膜下腔出血（ｓｕｂａｒａｃｈｎｏｉｄ　ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ，ＳＡＨ）是多病
因致脑底或脑及脊髓表面血管破裂的急性出血性脑血管病，约
占急性脑卒中的１０．０％，占出血性脑卒中的２０．０％。ＳＡＨ常
采取控制血压、减轻水肿及止血予以治疗，目前多选用以尼莫
地平为代表的钙拮抗剂进行治疗，尼莫地平脂溶性强，能透过
血－脑屏障，有效改善血肿周围脑血流量并减轻脑水肿，进而减
轻对周围脑组织的压迫，减少神经细胞的损害［１－２］。近年研究
显示，补体系统过度活化在ＳＡＨ发病过程中也发挥了重要作
用，但目前临床上尚缺乏有效的补体抑制性药物。
草麻黄在我国分布广，是中药方剂的常用药［３］，对急性肾
炎、支气管哮喘、免疫炎性反应相关疾病等有较显著的疗效，有
研究认为，抑制补体活化介导的炎性及免疫反应是草麻黄发挥
治疗作用的根本机制［４］。补体激活成分Ｃ３ａ是一种重要的炎
性介质，在感染、创伤、缺血再灌注损伤、自身免疫疾病等多种
原因引起的急、慢性炎性反应中，介导了对自身组织细胞的病
理性损伤。而炎性及免疫反应，尤其补体活化介导的炎性及免
疫反应在中枢神经系统损伤中的预后起重要的作用［５］。因此，
用补体抑制剂阻断补体活化可成为治疗炎症的一种有效手段，
杨康等［６］证实草麻黄水提物中碱沉淀物在体外具有良好的补
体抑制活性。故本研究采用草麻黄水提物灌胃ＳＡＨ大鼠，观
察其对ＳＡＨ的治疗效果，为ＳＡＨ治疗提供新方法。
１　材料与方法
１．１　草麻黄水提物的制备　草麻黄水提物制备主要参考
Ｌｉｎｇ等［７］的方法进行。具体方法：１ｋｇ草麻黄加入１０Ｌ蒸馏
水（ｐＨ　４．０），６０℃过夜后煮沸１ｈ，过滤除渣，ＮａＯＨ调其ｐＨ
值至９．０并出现大量沉淀，离心弃上清液，无水乙醇洗涤沉淀
３次，６０℃烘干得棕褐色粗品１８．５００ｇ。将粗品溶于３００ｍＬ
蒸馏水（ｐＨ　４．０），磁力搅拌１ｈ，离心弃沉淀，再用ＮａＯＨ调其
ｐＨ值至９．０，离心弃上清液。上述酸溶碱沉过程重复３次，最
后得水提物２．３７５ｇ，得率为１２．８％（粗品计算），使用前将碱
沉淀物溶于蒸馏水中，调ｐＨ值至４．０。
１．２　动物分组与ＳＡＨ模型制备　ＳＰＦ级ＳＤ大鼠５０只，体
１８４３重庆医学２０１５年９月第４４卷第２５期
质量２００．００～２５０．００ｇ，２～３个月龄，第三军医大学大坪医院
野战外科研究所实验动物中心提供，雌雄各半，随机数字表法
随机分为模型组、对照组和３个不同浓度（４、１２、３６ｍｇ／ｋｇ的
草麻黄水提物）治疗组，每组１０只。以一尼龙线（Φ０．２３５ｍｍ）
自颈外动脉导入，经颈总动脉达颈内动脉颅内段穿刺其分叉
处，以此建立ＳＡＨ模型。手术显微镜下，将一尼龙线（Φ０．２３５
ｍｍ）自颈外动脉导入，经颈总动脉达颈内动脉颅内段穿刺其
分叉处，以此建立大鼠ＳＡＨ 模型［８］，并可通过局部脑血流量
监测判断模型是否成功［９］。建模１２ｈ后，治疗组以４、１２、３６
ｍｇ／ｋｇ的草麻黄水提物分别灌胃，对照组仅剥离各动脉管作
假手术对照，对照组及模型组仅以等量生理盐水灌胃治疗。随
时观察各组动物的活动、进食、大小便等状况。
１．３　检测指标　３ｄ后断头处死各组实验大鼠，解剖大鼠脑
组织，大体观察其损伤、出血等情况。采用干湿法检测脑组织
含水量，并制作１０．０％组织匀浆，离心取上清液进行谷胱甘肽
过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、丙二醛（ＭＤＡ）、羟自由基等检测，严格
按试剂盒操作说明书进行。ＨＥ染色：取海马组织，制成常规
病理石蜡切片，ＨＥ染色，光学显微镜下观察各组病变情况。
免疫组织化学观察：用抗补体 Ｃ３鼠抗人单克隆抗体（Ｓａｎｔａ
Ｃｒｕｚｅ，ｓｃ－２８２９４，１∶２００）配合即用型检测试剂盒（北京中杉金
桥生物技术有限公司，ＳＰ－９００２）对补体Ｃ３抗原染色，ＤＡＢ显
色并拍照。提取总蛋白：取大鼠海马组织，剪碎后加ＲＩＰＡ裂
解液（碧云天，Ｐ００１３Ｂ）。冰浴中匀浆，离心取上清液，测蛋白
浓度后分装，置－８０℃保存备用。蛋白水平测定按ＢＳＡ法，
以牛血清清蛋白为标准蛋白。Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测：５０μｇ／孔蛋
白样品经６．０％十二烷基硫酸钠－聚丙烯酸胺凝胶电泳（ＳＤＳ－
ＰＡＧＥ）分离后，１３Ｖ（恒压）过夜，将凝胶中的蛋白质转移至
ＰＶＤＦ膜上。ＰＶＤＦ膜以含５．０％脱脂奶粉的 ＴＢＳＴ（１００
ｍｍｏｌ　Ｔｒｉｓ，０．９％ ＮａＣｌ，ｐＨ　７．５）室温封闭２ｈ，抗补体Ｃ３鼠抗
人单克隆抗体（Ｓａｎｔａ　Ｃｒｕｚｅ，ｓｃ－２８２９４，１∶２００）室温反应２ｈ，
辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠ＩｇＧ（１∶１　０００倍稀释）室
温反应２ｈ。化学发光法显色并拍照。
１．４　统计学处理　采用ＳＰＳＳ１１．０统计软件进行数据分析，
计量资料以ｘ±ｓ表示，采用ｔ检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计
学意义。
２　结　　果
２．１　术后大鼠一般情况和大体观察　术后正常饲养，除对照
组外，其余各组大鼠均出现进食减少，精神萎靡，活动缓慢及个
别鼠大小便失禁等。术后３ｄ内，除３６ｍｇ／ｋｇ治疗组与对照
组大鼠无死亡外，其余各组均死亡１只。除对照组外，其余各
组均见明显ＳＡＨ，大量弥散性出血及血凝块，主要分布于前、
后颅窝处，包绕脑底部血管，穿刺侧出血量相对较多。
２．２　脑组织含水量　脑组织观察可见ＳＡＨ损伤脑组织较对
照组明显水肿，体积增大，模型组脑含水量显著高于对照组
（Ｐ＜０．０１）；草麻黄水提物１２ｍｇ／ｋｇ及３６ｍｇ／ｋｇ治疗组脑组
织含水量较模型组有明显降低（Ｐ＜０．０５），４ｍｇ／ｋｇ治疗组与
模型组差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），且脑含水量随着用药剂
量增加呈下降趋势。见表１。
　　Ａ：４ｍｇ／ｋｇ治疗组；Ｂ：１２ｍｇ／ｋｇ治疗组；Ｃ：３６ｍｇ／ｋｇ治疗组；Ｄ：模型组；Ｅ：对照组。
图１　　草麻黄水提物治疗ＳＡＨ的病理观察（×１００）
２．３　生化指标检测　ＳＡＨ后３ｄ，各组实验大鼠脑组织匀浆
生化指标检测结果显示，与模型组比较，对照组显著降低（Ｐ＜
０．０１），草麻黄水提物１２、３６ｍｇ／ｋｇ治疗组 ＭＤＡ水平、ＧＳＨ－
Ｐｘ酶活力与羟自由基能力显著降低（Ｐ＜０．０１）；草麻黄水提物
４ｍｇ／ｋｇ治疗组的 ＭＤＡ水平变化不明显，ＧＳＨ－Ｐｘ酶活力与
抑制羟自由基能力显著降低（Ｐ＜０．０５），见表２。
２．４　ＨＥ染色观察病理情况　术后３ｄＨＥ染色显示，模型组
脑组织海马ＣＡ１区呈现明显充血、水肿，部分细胞肿胀、皱缩，
细胞周间隙增大。对照组海马ＣＡ１区神经元排列整齐，结构
完整，核仁及尼氏体清楚。而草麻黄水提物治疗后，充血与水
肿均有不同程度的缓解（图１），且随药物剂量的增加其充血、
水肿改善越明显。
２８４３ 重庆医学２０１５年９月第４４卷第２５期
２．５　免疫组织化学检测补体Ｃ３表达情况　免疫组织化学结
果表明，各组大鼠脑组织海马ＣＡ１区均见补体Ｃ３表达，其中
对照组表达很弱，ＳＡＨ模型组的表达最强，草麻黄水提物治疗
组Ｃ３表达较模型组均有降低，提示草麻黄水提物对补体活化
具明显抑制作用。见图２。
　　Ａ：４ｍｇ／ｋｇ治疗组；Ｂ：１２ｍｇ／ｋｇ治疗组；Ｃ：３６ｍｇ／ｋｇ治疗组；Ｄ：模型组；Ｅ：对照组。
图２　　免疫组织化学检测草麻黄水提物治疗ＳＡＨ后补体Ｃ３表达情况（×１００）
表１　　各组大鼠脑组织含水量的比较（ｘ±ｓ）
组别 ｎ 脑组织含水量（％）
对照组 ５　 ７６．５８±０．７２ａ
模型组 ５　 ８３．２５±０．３４
４ｍｇ／ｋｇ治疗组 ５　 ８２．７６±１．０２
１２ｍｇ／ｋｇ治疗组 ５　 ８０．０１±１．２５ｂ
３６ｍｇ／ｋｇ治疗组 ５　 ７９．６４±２．０７ｂ
　　ａ：Ｐ＞０．０５，ｂ：Ｐ＞０．０１，与模型组比较。
表２　　各组大鼠脑组织生化指标检测（ｘ±ｓ）
组别 ｎ
ＭＤＡ
（ｍｍｏｌ／Ｌ）
ＧＳＨ－Ｐｘ
（Ｕ／ｍＬ）
羟自由基能力
（Ｕ／ｍＬ）
对照组 ５　 ５．４４±１．９５ａ １９４．５２±２．７６ａ １０．８２±４．２５ａ
模型组 ５　 ３２．３０±１．７２　 ５５９．７４±７．３９　 ８３．０２±１．０９
４ｍｇ／ｋｇ治疗组 ５　 ２８．１０±９．９４　 ４０８．４６±６．２２ｂ　 ４８．５４±２．３１ｂ
１２ｍｇ／ｋｇ治疗组 ５　 １５．７１±５．８１ａ ３９８．７８±１１．２０ａ ２１．３５±１１．４９ａ
３６ｍｇ／ｋｇ治疗组 ５　 １１．１０±３．０９ａ ２９７．０１±１．６５ａ ２０．２５±１０．８２ａ
　　ａ：Ｐ＜０．０１，ｂ：Ｐ＜０．０５，与模型组比较。
２．６　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ法检测补体Ｃ３表达情况　术后３ｄＷｅｓｔ－
ｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测结果表明，各组大鼠脑组织海马ＣＡ１区均有补体
Ｃ３表达，其中对照组表达最弱，模型组表达最强，治疗组居中，
且３６ｍｇ／ｋｇ治疗组与模型组相比明显降低，４ｍｇ／ｋｇ与１２
ｍｇ／ｋｇ治疗组与模型组相比变化不明显，进一步证实了草麻
黄水提物对补体活化具有明显抑制作用。见图３。
　　１：对照组；２：模型组；３：４ｍｇ／ｋｇ治疗组；４：１２ｍｇ／ｋｇ治疗组；５：
３６ｍｇ／ｋｇ治疗组。
图３　　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测草麻黄水提物治疗ＳＡＨ后
补体Ｃ３表达情况
３　讨　　论
Ｌｉｎｇ等［７］从草麻黄中纯化出一种单体成分（ＣＩＣ），并初步
鉴定为高分子碳水化合物，不溶于碱溶于酸，证实该成分在体
外具有良好的补体抑制活性。Ｌｉｎｇ等［７］在体外实验中提出，
ＣＩＣ通过结合补体蛋白Ｃ２的活性部位，从而抑制补体激活的
经典途径，且该结合是不可逆的；其次，ＣＩＣ抑制补体蛋白Ｃ９
的活化，并抑制终末途径激活补体；但对替代途径激活补体的
抑制机制尚不清楚，很有可能是通过抑制Ｂ因子的活性发挥
作用。
中枢神经系统损伤是存在补体系统激活的必要条件。中
枢神经系统损伤患者脑组织存在自由基代谢紊乱，细胞膜磷脂
中多聚不饱和脂肪酸的不饱和双键受自由基的攻击，导致脂质
过氧化反应，形成一系列的脂质自由基及其降解产物如 ＭＤＡ
等。因此，大量氧自由基的产生及其诱导的脂质过氧化在中枢
神经系统损伤的发病机制中起着重要作用［８－１０］。ＧＳＨ作为一
种体内自由基清除剂与ＧＳＨ－Ｐｘ结合，参与自由基和脂质过氧
化物损伤的防护，在脑损伤抗氧化防御中发挥作用［１１－１２］。本
研究生化指标检测结果说明，经草麻黄水提物治疗后，与模型
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组相比，治疗组脑组织中 ＭＤＡ、ＧＳＨ－Ｐｘ与羟自由基水平均显
著降低。提示草麻黄水提物在ＳＡＨ 的抗脂质过氧化损伤中
可能起重要作用。
补体系统的重要固有成分Ｃ３，是补体活化后的主要片段，
处于３个途径的汇合点，在补体系统激活过程中起着枢纽作
用［１３］。本研究将草麻黄水提物用于治疗大鼠ＳＡＨ，免疫组织
化学与 Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ结果显示，在对照组、草麻黄水提物治疗
组及模型组的脑组织中均有重要补体固有成分Ｃ３的表达，但
对照组中表达很弱，且草麻黄水提物治疗组的Ｃ３表达明显低
于模型组，提示草麻黄水提物可能抑制补体系统的激活。常规
病理观察及脑组织含水量显示，草麻黄水提物治疗后，ＳＡＨ与
水肿均得到不同程度的缓解，且从切片上可以观察到出血与水
肿随剂量的增加改善越明显。
综上所述，草麻黄水提物能显著抑制补体Ｃ３活性，阻止
脑组织 ＭＤＡ、ＧＳＨ－Ｐｘ、羟自由基的产生，降低脑水肿的严重
程度，从而减轻炎性反应，对ＳＡＨ动物具有较好的治疗效应。
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［１１］Ｂａｉｎｓ　ＪＳ，Ｓｈａｗ　ＣＡ．Ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ　ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ　ｉｎ　ｈｕ－
ｍａｎｓ：ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ　ｉｎ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ－ｍｅｄｉａｔｅｄ
ｎｅｕｒｏｎａｌ　ｄｅａｔｈ［Ｊ］．Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ　Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ　Ｒｅｖ，１９９７，２５
（３）：３３５－３５８．
［１２］邓暑芳，李素云，贺性鹏．甲基叔丁基醚对胎鼠脑组织
ＭＤＡ、ＳＯＤ及ＧＳＨ的影响［Ｊ］．南华大学学报：医学版，
２００７，３５（１）：７－９．
［１３］Ｓｗａｒｕｐ　Ｖ，Ｇｈｏｓｈ　Ｊ，Ｄａｓ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｄｅａｔｈ　ｄｏｍａｉｎ　ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｎｅｕｒｏｎａｌ
ｄｅａｔｈ　ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｇｌｉａｌ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ
ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏ－
ｃｈｅｍ　Ｉｎｔ，２００８，５２（７）：１３１０－１３２１．
（收稿日期：２０１５－０３－０８　修回日期：２０１５－０６－０１
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《重庆医学》杂志对运用统计学方法的有关要求
１．统计学符号：按ＧＢ　３３５８－１９８２《统计学名词及符号》的有关规定，统计学符号一律采用斜体。
２．研究设计：应告知研究设计的名称和主要方法。如调查设计（分为前瞻性、回顾性或是横断面调查研究），实验设计
（应告知具体的设计类型，如自身配对设计、成组设计、交叉设计、析因设计、正交设计等），临床试验设计（应告知属于第几期
临床试验，采用了何种盲法措施等）；主要做法应围绕４个基本原则（重复、随机、对照、均衡）概要说明，尤其要告知如何控制
重要非试验因素的干扰和影响。
３．资料的表达与描述：用ｘ±ｓ表达近似服从正态分布的定量资料，用 Ｍ（ＱＲ）表达呈偏态分布的定量资料；用统计表
时，要合理安排纵横标目，并将数据的含义表达清楚；用统计图时，所用统计图的类型应与资料性质相匹配，并使数轴上刻度
值的标法符合数学原则；用相对数时，分母不宜小于２０，要清楚区分百分率和百分比。
４．统计学分析方法的选择：对于定量资料，应根据所采用的设｀计类型、资料所具备的条件和分析目的，选用合适的统计
学分析方法，不应盲目套用ｔ检验和单因素方差分析；对于定性资料，应根据所采用的设计类型、定性变量的性质和频数所
具备的条件及分析目的，选用合适的统计学分析方法，不应盲目套用χ
２ 检验。对于回归分析，应结合专业知识和散点图，选
用合适的回归类型，不应盲目套用简单直线回归分析；对于具有重复实验数据检验回归分析资料，不应简单化处理；对于多
因素、多指标资料，要在一元分析的基础上，尽可能运用多元统计分析方法，以便对因素之间的交互作用和多指标之间的内
在联系做出全面、合理的解释和评价。
５．统计结果的解释和表达：应写明采用统计学方法的具体名称（如：成组设计资料的ｔ检验、两因素析因设计资料的方
差分析、多个均数之间两两比较的ｑ检验等），统计量的具体质（如：ｔ＝３．４５，χ
２＝４．６８，Ｆ＝６．７９等）；在用不等式表示Ｐ值的
情况下，一般情况下选用Ｐ＞０．０５、Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１　３种表达方式，无须再细分为Ｐ＜０．００１或Ｐ＜０．０００　１。当涉及总
体参数（如总体均数、总体率）时，再给出显著性检验结果的同时，应再给出９５％可信区间（ＣＩ）。
４８４３ 重庆医学２０１５年９月第４４卷第２５期