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鹿茸草种子的休眠与萌发



全 文 :收稿日期:2008-10-28
作者简介:杨业正(1937-),男 ,教授 ,研究方向:植物生理学 ,植物组织
培养学;E-mail:yzwuyang@yahoo.com。
鹿茸草种子的休眠与萌发
杨业正
(贵州大学生命科学学院 ,  贵阳 550025)
CharacteristiconDormancyand
GerminationofMonochasmasavatieriFranch.exMaximSeeds
YANGYe-zheng
摘要:将新收获的鹿茸草种子在 25℃和 30℃恒温条件下或 20
~ 30℃室内变温条件下做发芽试验均未能发芽 , 但 TTC染色
试验结果表明其具有生活力 , 由此证明该种子具有休眠特性。
打破休眠试验结果表明:2 ~ 5℃低温湿藏处理 80 d可使其发
芽率达 67.5%,用 200mg/LGA3浸泡 48h可使其发芽率达 86.
9%。干种子在 -18 ℃的密封条件下贮存 2年后 , 仍保持有
52%的发芽能力。
关键词: 鹿茸草;休眠;萌发
中图分类号: S567   文献标志码: A
文章编号: 1001-4705(2009)03-0082-03
鹿茸草 (MonochasmasavatieriFranch.exMaxim)
又名绵毛鹿茸草 、沙氏鹿茸草 、白花鹿茸草 、千年艾 、千
重塔 、千层楼 、六月霜等 ,为玄参科鹿茸草属 2年生野
生植物 ,在我国浙江 、江西 、福建 、湖南等省民间作为药
用 ,具清热解毒 、凉血止血等功效 ,用于治疗感冒 、烦
热 、咳嗽 、吐血 、赤痢 、便血 、月经不调 、风湿骨痛 、牙痛 、
乳痈等疾病 [ 2 ~ 4] 。近年来国内正在研发以鹿茸草为原
料的中成药制剂 ,单靠挖掘野生资源已难以满足市场
对鹿茸草原料药材的需求 ,探讨野生鹿茸草的人工驯
化栽培便具有实用意义。用有性方法繁殖鹿茸草的前
提条件是弄清种子的休眠与萌发特性 ,目前尚未见国
内外对此有研究报道 ,本试验研究了鹿茸草种子的休
眠与萌发特性。
1 材料与方法
供试材料为 2006年 6月采自浙江省磐安县新渥
镇东侧山坡上的野生鹿茸草成熟蒴果(由贵州宏奇药
业有限公司钟稚书提供)。蒴果经晒干后搓揉出种
子 ,贮于阴凉干燥处备用 。种子生活力用红四氮唑
(TTC)染色法[ 5]测定 ,经预备试验确定针对鹿茸草的
具体测定方法为:取干种子 20粒用纯净水先浸泡 16h
(或取已在培养皿上作发芽试验但未能发芽的种子),
再浸入 0.5%TTC溶液中在 25℃及遮光条件下放置
24h,然后用镊子将种子取出用滤纸吸干表面多余的染
液 ,在放大镜下观察种胚(种子中央部分)染色情况。发
芽试验使用 Υ60mm玻璃培养皿 ,于皿底垫 4层湿滤纸
(纯净水浸湿),于滤纸表面摆放 40 ~ 100粒种子(因该
植物在野外分布分散 ,结实率低 ,采种困难 ,所获供试种
子数量少 ,故未能设置重复),加盖后置于不同温度及光
照条件下培养 , 14天后统计发芽的种子粒数。低温湿
藏是取浸水 2天后的种子 ,置于垫有湿滤纸的培养皿
中 ,用 parafilm密封皿缝后摆放在普通冰箱冷藏室中 80
d。浸种用赤霉素溶液的配制是用少量 95%酒精助溶 ,
控制浸种液中酒精的最终浓度≤1%。长期贮存试验是
将干种子用塑封机密封于聚乙烯薄膜袋中 ,置于 -18℃
的冰箱冷冻室中保存。
2 结 果
2.1 鹿茸草种子的外形 、重量及吸水率
成熟的鹿茸草种子呈橙黄色卵圆形 ,细小(图 1),
经测定百粒重为 6.7mg。取 100粒种子用纯净水浸泡
48h后取出 ,用滤纸吸干表面水分后再称重 ,重量增至
9.8mg,吸水率为 46.27%,说明不存在种皮不透水的
问题。
图 1 成熟的鹿茸草种子
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第 28卷 第 3期 2009年 3月             种 子 (Seed)             Vol.28 No.3 Mar. 2009
表 1 新收获鹿茸草种子的发芽率
批号 试验日期(月 /日)
培育条件
温度 光照
试验
粒数
发芽
粒数
发芽率
(%)
01 06/29~ 07 /16 20 ~ 30℃变温 黑暗 80 0 0
02 07/23~ 08 /08 20 ~ 30℃变温 黑暗 67 0 0
03 09/07~ 09 /30 25℃恒温 12h/d光照 100 0 0
04 10/05~ 10 /19 30℃恒温 12h/d光照 52 0 0
2.2 新收获鹿茸草种子的发芽试验
2006年 6 ~ 10月进行的试验表明 ,当年收
获的新种子 ,若不做特殊预处理 ,无论是在 25
℃恒温 、30 ℃恒温还是夏季室内变温(20 ~ 30
℃)条件下做发芽试验 ,均未能发芽(表 1)。
2.3 新收获鹿茸草种子的生活力测定
   TTC染色试验结果表明 ,无论是新收获的
鹿茸草干种子还是在发芽试验中未能发芽的湿种子
(表 1里的 03批次),大部分都是有生活力的(表 2)。
表 2 新收获鹿茸草种子的生活力
供试种子状况 供试粒数 种胚染红粒数
种子生活力
(%)
干种子先用水浸泡 16h 20 13 65
干种子先用水浸泡 16h,
再在沸水中煮 5min,冷却后 20 0 0
表 1批号 03已培育 16天后
仍未发芽的种子 20 17 85
2.4 低温湿藏或赤霉素浸种对破除鹿茸草种子休眠
的效应
  试验结果表明 ,新收获的种子经过 80d的低温湿
藏处理或未经低温湿藏直接用 200mg/LGA浸种 2天
后做发芽试验 ,休眠均可完全被打破 ,在变温条件下的
发芽率分别达 67.5%或 86.9%,与 TTC染色法测得的
生活力相近 。低温湿藏处理后在 25 ℃恒温条件下的
发芽情况比较在变温条件下的差(表 3)。
表 3 低温湿藏及赤霉素浸种对鹿茸草种子发芽率的影响
处理 试验日期(月 /日) 发芽条件
供试
粒数
发芽
粒数
发芽率
(%)
低温湿藏 09/30~ 10 /10 13 ~ 20℃白天弱光 40 27 67.5
GA浸种 10/03~ 10 /17 13 ~ 20℃白天弱光 46 40 86.9
低温湿藏 09/30~ 10 /16 25℃恒温 ,白天弱光 40 14 35.0
表 4 低温密封贮存 2年后鹿茸草种子的发芽能力
处理 试验日期(月 /日) 发芽条件 供试粒数 发芽粒数 发芽率(%)
赤霉素浸种 06/13~ 06 /27 18 ~ 26℃,白天弱光 50 26 52
对照 06/13~ 06 /27 18 ~ 26℃,白天弱光 50 2 4
2.5 经长期贮存后鹿茸草种子发芽能力的变化
2006年 6月将一部分新收获的干种子密封到聚
乙烯薄膜袋中 ,然后存放在 -18℃的普通冰箱冷冻室
中 , 2008年 6月(2年后)取出做发芽试验。结果表
明 ,只要发芽前先用赤霉素处理(方法同前),发芽率
仍达 52%(表 4,图 2)。
图 2 赤霉素浸种对密封冷藏 2年的种子发芽的影响
3 讨 论
鹿茸草为我国南方诸省民间常用的野生药用植物
草药 ,至今尚未见有人工栽培成功报道。大量的市场
需求导致过度采挖造成野生资源的严重破坏。对其开
展包括种子繁殖在内的各种繁殖途径的研究 ,是进行
野生鹿茸草驯化栽培以建立人工栽培基地的前期准备
工作。鹿茸草种子的休眠和萌发特性以往未见报道 ,
本研究结果表明 ,鹿茸草种子具有休眠特性 ,其休眠状
态可通过低温湿藏处理或赤霉素处理打破 ,其中以赤
霉素处理最简便和速效。本试验结果印证并补充了前
人 [ 1, 6, 7]对种子休眠生理的认识 。
关于鹿茸草种子萌发对环境条件的要求 ,本试验
发现 ,与变温条件相比 ,在恒温条件下已经过破除休眠
处理的种子发芽较慢且最终发芽率较低 (表 3);陈
瑛 [ 1]曾指出:“许多中药种子在恒温条件下发芽很差 ,
但一旦放在昼夜变温条件下 ,发芽率即大大提高 ,例如
山茛菪 、酸浆 、曼陀罗 、毛茛 、黄花唐松草 、黄足鸡 、倒地
铃 、白花菜 、旱莲草 、射干 、喜树 、樟 、薯蓣 、土人参 、马利
筋等”。关于恒温对某些植物种子萌发存在不利影响
的机理 ,是个值得进一步研究的植物生理学问题。
参考文献:
[ 1]陈瑛.实用中药种子技术手册 [ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1999:40-55.
[ 2]江苏新医学院中药大辞典(下册)[ K] .上海:上海科学技术
出版社 , 1977:22-42.
(转下页)
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问题探讨  杨业正:鹿茸草种子的休眠与萌发
(接上页)
[ 3]钱崇澍 , 陈焕镛.中国植物志(第六十八卷)[ M] .北京:科
学出版社 , 1963:387-390.
[ 4]谢宗万 , 余友芩.全国中草药名鉴(上册)[ K] .北京:人民卫
生出版社 , 1996:865.
[ 5]颜启传 , 黄亚军.种子四唑测定手册 [ M] .上海:上海科学技
术出版社 , 1992.
[ 6]赵同芳.种子休眠生理概述 [ J] .植物生理学通讯 , 1960
(3):23-30.
[ 7]郑光华.种子生理的研究 [ J] .植物生理学通讯 , 1979(2):
7-132.
收稿日期:2008-10-28
作者简介:唐 容(1980-),女 ,贵州赤水人;硕士 ,主要从事油菜遗传
育种研究;E-mail:trtwo@126.com。
甘蓝型黄籽油菜粒色及相关因素研究
唐 容 1 ,  王通强 2 ,  黄泽素1 ,  代文东 1
(1.贵州省油料研究所 ,  贵阳 550006; 2.贵州大学 ,  贵阳 550025)
StudyonGrainColourandIt sRelatedFactorsofYelowSeeded
RapeseedLines(B.napesL.)
TANGRong1 , WANGTong-qiang2 , HUANGZe-su, DAIWen-dong1
摘要:以不同来源的 51份甘蓝型黄籽油菜种质为材料 , 对粒
重 、色泽 、种皮主要色素含量等主要性状进行研究。结果表明:
种质间千粒重差异大 , 变幅在 1.54 ~ 4.76 g之间 ,平均为 3.65
g, 多数集中在 3.4 ~ 3.8g之间;影响种皮色泽的主要是黑色素
和花色素 , 根据其含量的不同 , 可分为高黑色素类 、高花色素类
和低色素 3个类群;颜色等级与千粒重种子呈显著正相关 , 与
黑色素成极显著的负相关 ,与花色素的含量呈显著的正相关。
关键词: 甘蓝型油菜;黄籽;粒色;色素
中图分类号: S565.4   文献标志码: A
文章编号: 1001-4705(2009)03-0084-04
甘蓝型黄籽油菜与黑(褐)籽油菜相比 ,种子的含
油量普遍较高 ,而且具有种皮薄 、色素少 、纤维素和多
酚类物质含量低 、油质清澈透明 、蛋白质含量高等一系
列突出优点 ,从而成为甘蓝型油菜品质育种的主要目
标之一 [ 1] 。在我国 ,刘后利等 [ 2] 于 1975年首次从甘
白种间杂种后代中发现了甘蓝型黄籽油菜 ,并由此开
展了我国甘蓝型黄籽油菜遗传育种研究工作 ,有关其
生理生化 、粒色遗传 、育种 、分子生物学等研究相继在
各地展开 ,并取得了一些成果。但甘蓝型黄籽油菜有
土黄色 、姜黄色 、或者黄色背景下有黑色斑块等 ,存在
粒色差异大 , 籽粒颜色十分不稳定的问题。陈玉
萍 [ 7] 、叶小利 [ 8] 在研究黄籽与黑籽的差异时发现 ,种
子颜色主要与种皮中黑色素和花色素等色素有关。因
此本试验针对不同来源的甘蓝型黄籽油菜种质材料 ,
研究其籽粒大小 、种皮颜色 、种皮主要色素含量及各性
状之间的相关性 ,以期为甘蓝型黄籽油菜种质资源的
利用及材料选育提供理论依据 。
1 材料与方法
1.1 试验材料
由贵州大学油料所提供 51份甘蓝型黄籽油菜自
交亲本种质材料(见表 1), 2005年秋播于贵州大学教
学试验农场 , 每个亲本材料种 3行 ,行长 5 m,行距
0.30m,株距 0.15m;田间管理同大田生产 。
1.2 试验方法
1.2.1 千粒重测定及粒色观察
菜籽千粒重测定采取数 3重复 1 000粒称量计算
平均值;黄籽度观测按照李加纳等[ 3] 6级标准进行;黄
籽率取 3重复 100粒统计黄籽百分比率。
1.2.2 色素提取及含量的测定
(1)叶绿素含量测定:将供试种子于 35℃烘干 24
h后称取 2g用蒸馏水浸泡 12h,用小镊子和解剖刀挤
压 ,分离成胚和种皮 ,分别于烘干机内 35℃下烘干 40
h。称取 0.1g烘干种皮 ,加入 3ml90%的丙酮研磨 ,
移入具塞试管中在 30℃水浴下提取 1h,然后以10 000
r/min离心 15 min,再用 90%丙酮定容至 3.5ml,混匀
后于 470nm, 662nm和 645nm处测定其吸光度 ,测定
叶绿素的方法分别计算叶绿素 A、叶绿素 B和叶黄素
的含量(Lichtenthaler)[ 4] 。
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第 28卷 第 3期 2009年 3月             种 子 (Seed)             Vol.28 No.3 Mar. 2009