全 文 ：!
!#$%&法测定草麻黄中四种生物碱
林 枫， 杨文远， 刘利军&
#宁夏大学 化学化工学院，宁夏 银川 !$$%& ’
摘 要：目的——— 用反相高效液相色谱法同时分离测定不同生长年限和不同采收期的草麻黄中四种生物碱 ( 方
法——— 反相高效液相色谱法，即采用 )*+,-./01.反相分离柱（2( 3 44 5 %!$ 44），以 ! #甲醇 ’ 6 ! # %$ 4478 9 :
磷酸二氢钾 ’ 6 ! #三乙胺 ’ ; <6 =6 $( %! 为流动相，紫外检测波长为 %&$ >4( 结果——— 草麻黄中四种生物碱得到
很好分离；同时试验表明，采摘期对麻黄总碱的含量影响显著，&$ 月份采收的麻黄总碱含量明显高于 ! 月份采
摘的麻黄 ( 结论——— 建立的麻黄碱测定方法具有操作简便、稳定和可重复等特点，可用于麻黄药材及含麻黄复
方制剂的质量控制，为麻黄的质量评价提供科学依据 (
关键词：麻黄；麻黄碱；反相高效液相色谱法（-?/@?:A）
中图分类号：03!( % 文献标志码：*
宁 夏 工 程 技 术
BC>DECF ,>DC>GGHC>D +GIJ>787DK
L78( ! B7( &
MFH( %$$3
第!卷 第&期
%$$3 年 < 月
文章编号：&3& N %22 #%$$3 ’$& N $$! N $<
收稿日期：%$$! N &$ N %(
基金项目：宁夏自然科学基金资助项目 # O&$&% ’ (
作者简介：林 枫 # &==— ’，女，硕士研究生，主要从事分析化学研究 (
&通讯联系人：刘利军 # &=!P— ’，女，博士，教授 ( ,/4FC8：8Q8CRS &3<( I74；电话：$=!& N %$3%<33 (
麻黄具有解表、散寒、平喘、止咳、利水等功能和
松弛平滑肌、收缩血管及中枢兴奋神经等作用，是治
疗风寒感冒、气喘、水肿及支气管哮喘等病的一种传
统药材 T & U ( 药材质量的差异给中成药生产及临床疗
效控制带来的不确定性不容忽视 ( 麻黄主要有效成
分为麻黄生物碱，它们是麻黄内在质量评价的主要
依据 ( 但目前文献报道的检测方法多为对麻黄碱和
伪麻黄碱的检测，如李吉来 T % U用 VA/M.法测定麻黄
汤中的麻黄碱和伪麻黄碱，刘永 T < U 用 @?:A法测定
麻黄中盐酸麻黄碱的含量，鲁传华等 T 2 U 用乳液电导
法分步测定麻黄中麻黄碱和伪麻黄碱的含量限度(
由于方法的局限性，灵敏度较低，且麻黄生物成分十
分复杂，非待测成分不易分离或干扰主成分测定 (
麻黄生物碱又多为旋光异构体 T ! U，较难分离，同时测
定多种生物碱有一定困难，故报道较少 (
该实验用反相高效液相色谱法，对宁夏麻黄种
植基地的不同生长年限和不同采收期的麻黄样品，
同时测定其麻黄碱、伪麻黄碱、甲基麻黄碱和去甲基
麻黄碱的含量，从而为麻黄草的种植和质量评价提
供了可靠的科学数据 ( 该方法简捷、灵敏、准确，具
有较好的通用性 (
& 实验部分
’( ’ 仪器与试剂、样品
&( &( & 仪器 :A N 3*高效液相色谱系统，.?1 N
3*L紫外检测器，.:A N 3*系统控制器，A N -<*数
据处理系统，以上均为日本 .@WM*1XY公司生产；
A.Z N W*超声波发生器（上海超声波仪器厂）；MC88C/
[7HG溶剂过滤系统（美国 MC88C[7HG公司）(
&( &( % 试剂与样品 甲醇（优级纯，北京化工厂）；
磷酸二氢钾、磷酸、三乙胺均为分析纯；去甲基麻黄
碱对照品 #批号\ ? N P3，:0+ !Z0
%$$<$< ’、伪麻黄碱对照品 #批号\ &&%< N %$$<$2 ’、
甲基麻黄碱对照品 #批号\ &&%2 N %$$<$& ’ 均由
中国药品生物制品检定所提供 ( 草麻黄 #$%&’(
)*+*,( -.(#/ 样品由银广夏 V*? 麻黄种植基地提
供；试验所用水均为二次蒸馏水 (
’( ) 实验方法
&( %( & 色谱条件 )*+,-./01. 色谱柱 # %!$
44 5 2( 3 44 ’ ( 流动相为 ! #甲醇 ’ 6 ! # %$ 4478 9 :
磷酸二氢钾 ’ 6 ! #三乙胺 ’ ; <6 =6 $( %!，水相用磷
酸调 [@ ; <( $，临用前流动相用微孔滤膜过滤] 并
经超声脱气处理，紫外检测波长为 %&$ >4，灵敏度
为 $( $P *YZ.，流速为 $( P 4: 9 4C>，柱温为 %$ ^ (
&( %( % 标准溶液的制备 精密称取麻黄碱、伪麻
黄碱和甲基麻黄碱标准品各 %! 4D，用甲醇溶解并定
容至 %!( $ 4:，然后将麻黄碱、伪麻黄碱稀释成
$( 2&3 3 4D 9 4:、$( %$P < 4D 9 4:、$( &$2 % 4D 9 4:、
$( $!% & 4D 9 4:、$( $%3 4D 9 4:( 甲基麻黄碱相应稀释
!
为 #$ %&& & ’( ) ’*、#$ #+ + ’( ) ’*、#$ #,% & ’( ) ’*、
#$ #-# ’( ) ’*、#$ #%# , ’( ) ’*的系列标准溶液 $
精密称取去甲基麻黄碱标准品 -$ ,+ ’(，溶于 -$ # ’*
甲醇中，稀释成 #$ #%# - ’( ) ’*、#$ #%! # ’( ) ’*、
#$ #%. . ’( ) ’*、#$ #-. & ’( ) ’*、#$ #!/ ’( ) ’*的
系列标准溶液 $
%$ -$ + 分析方法的精密度、重现性和回收率实验
取对照品溶液，在测定条件下进样 !$ # !*，重复进样
!次，进行重现性测定；平行测定样品 &份，每间隔
- 0进样一次，以 ,种麻黄碱的峰面积计算，测定方
法的精密度；精密称取已测知含量的 !份平行样品，
其中 -份作为对照，其余 +份加入一定量的混合标
准品，按样品溶液的制备方法制备，测定分析方法的
加样回收率 $
%$ -$ , 样品溶液的制备 取草麻黄样品的干燥草
质茎粉碎，过 %-#目筛子，称取 #$ %## # (，精密加入
!#!甲醇溶液 !$ # ’*，密闭超声提取 +# ’123提取液
经过 415516789溶剂过滤系统后供进样用 $ 依照标准
曲线进行定量，如果浓度超出或低于标准曲线的线
性范围，则相应地稀释或浓缩至一定体积后再进
样$ 每种药材平行测定 +个样，取平均值 $
- 结果与讨论
! # 提取溶剂优选
比较了用水、甲醇、乙醇、丙酮作溶剂的提取效
率，实验结果表明，甲醇和水的提取效果较好 $ 笔者
又用不同比例的水和甲醇进一步对其进行优化，最
终确定当二者比例为 %: %时提取率最高 $
! ! 流动相选择
精密吸取样品溶液 !$ # !*进样，分别以不同比
例的甲醇 ;水、甲醇 ;醋酸水溶液、甲醇 ;磷酸二氢
钾水溶液为流动相进行试验 $ 结果表明，甲醇 ;磷
酸二氢钾水体系分离效果最佳；后又加入少量三乙
胺可改善峰形，并用磷酸调节 6< = +$ #，其主成分生
物碱都能达到基线分离 $ 该流动相体系在实际分析
中，分离效果很好，且配制此流动相的试剂价廉易
得，非常实用 $
! $ 方法的精密度、重现性和回收率
按上述色谱条件每次进样 !$ # !*，通过峰面积
的相对标准偏差测定检测方法的重现性，以峰面积
>对浓度 ?进行线性回归，得回归方程（表 %）$
! % 样品测定
在与标准品相同的色谱分析条件下，按 %$ -$ ,
节制备的样品溶液进样，每次 !$ # !*，由色谱处理
工作站处理，绘出标准对照品图谱（图 %（@））和样品
谱图（图 %（A）B $
! & 样品分析结果
按 %$ -$ ,制备样品溶液，进行样品分析，以标准
曲线为依据，用外标法定量，待测样品平行测定 +次
（表 -）$
+ 结 论
研究分析表明：麻黄栽培时间的长短和采收
季节的不同，其主要成分麻黄碱的含量都不相同，其
中栽培时间对麻黄总碱含量影响较小，而采摘期对
其总碱含量影响显著，%#月份采收的麻黄总碱含量
明显高于 !月份 $
# 实验采用 CD;
图 # % 种麻黄碱对照品和麻黄样品
（#’’(年 #)月）的色谱图
*+, # -./01230,/214 05 506/ 278270+94 1+:;9
432<92/94 （2）2<9 421=7;4 05 ;=.;9/+<; /29+:（>）
表 # %种麻黄碱的标准曲线及相关数据
?2> # -27+>/23+0< -6/@; 2<9 /;723+@; 9232 05 506/ !#!$%&’! ()*()+&$,
&+ 次测定回收率的平均值 $
生物碱标准品
F @5G@571HI B
麻黄碱F F J B !#!$%&’!B
伪麻黄碱F F K B (!)$*!#!$%&’!B
甲基麻黄碱F F J B +!,#-.!#!$%&’!B
去甲基麻黄碱F F J B ’*%!#!$%&’!B
%（相关
系数）
#$ ... !
#$ ... ,
#$ ... &
#$ ... %
线性范围& F 5129@8
8@2(9 B ) F’(·’* J % B
#$ #-& # L #$ ,%& &
#$ #-& # L #$ ,%& &
#$ #%# , L #$ %&& &
#$ #%# - L #$ #!/ .
第 !卷宁 夏 工 程 技 术
注：%—去甲基麻黄碱 F F J B ’*%!#!$%&’! B；-—麻黄碱
F F J B !#!$%&’! B；+—伪麻黄碱 F F K B (!)$*!#!$%&’! B；
,—甲基麻黄碱 F F J B +!,#-.!#!$%&’! B
CMN
F ’ = ! B )!
-$
%$ #
%$ %
,$ -
加入量& F @HH9H B )
F’(·’* J % B
#$ #!# #
#$ #!# #
#$ #!# #
)
回收率&
F 89?7O988P B )!
.!$ #
.%$ +
.-$
)
回归方程
F 89(89II172 9QR@S172I B
/ = J +%+$ !, ,- K +!/ .,+$ !+# /% 0
/ = J ,&+$ !+ K +!/ &#%$ ,#/ /& 0
/ = J -&+$ -// ! K -& -&$ .,- . 0
/ = J %-+$ -. %. K %&. +&/$ +,, !& 0
!
表 ! 麻黄样品中生物碱的质量分数 ! # $ %
&’() ! *+,-.,-/ +0 #$%&’! ()*()+’%, 1, #$%&’! /’234./ !
5.-.621,’-1+, +0 0+76 #$!&’! ()*()+’%, +0 #$%&( ,’!’-(
,.(#/ (8 7/1,9 :19: 3.60+62’,*. 41;71< *:6+2’-+96’3:1* 2.-:+<
!# $%&’， ()#* +%&,-./&0 !1 !2,3.&
# $%&&’(’ %) $*’+,-./0 123 $*’+,41& 52(,2’’/,2(6 7,2(8,1 92,:’/-,.06 ;,24*<12 =!>>?@6 $*,21 A
=(/-6’*-：>(?.*-1@.— )%)%/+124’ &,G<,3 4*/%+1.%(/1D*0E $*/%+1.%(/1D*,4 4%23,.,%2-H IJK5LM 4%&<+2（NE O ++ P ?!> ++）6 +’.*12%&F?> ++%& Q R D%.1--,<+
3,*03/%(’2 D*%-D*1.’F./,’.*0&1+,2’ #ST =T >E ?!，U Q U A 1- +%V,&’ D*1-’6 123 9U 3’.’4.,%2 1. ?@> 2+E B./74-/—)%5/4627 C’/’ -’D1/1.’3 :’/0 C’&& ,2 .*’ %9:%7;/ 82&2 123 .*’ /’-’1/4* 1&-% -*%C’3 .*1. .*’ %9:%7;2&% *1/:’-.,2( .,+’ *13
(/’1. ,2)&<’24’ %2 .*’ .%.1& %9:%7;2&% /45/46278E K*’ 4%2.’2.- %) .%.1& %9:%7;2&% /45/46278 D,4B’3 ,2 W4.%V’/ C’/’ +<4* *,(*’/
.*12 .*1. ,2 X10E C+,*47/1+,—.*’ ’-.1V&,-*’3 +’.*%3 *13 V’’2 D/%:’3 .% V’ -,+D&’6 -.1V&’ 123 /’D’1.1V&’6 123 4%<&3 V’ 1DF
D&,’3 )%/ G<1&,.0 4%2./%& %) .*’ 4/<3’ ?%;@/4 A9:%7;/ 123 4%+D%<23 D/’-4/,D.,%2- 4%2.1,2,2( 4/<3’ :%;@/4 %9:%7;/B
D.8 E+6#责任编辑、校对 高继红 A
第 @期 林 枫等：LYFZYR$法测定草麻黄中四种生物碱
样品编号
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甲基麻黄碱
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伪麻黄碱
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去甲基麻黄碱
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采收年份
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麻黄碱
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>E =[! O
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>E [O> =
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>E ON= ?
@E >=! !
含量，灵敏度高，准确可靠，回收率高 E 采用常温超
声提取的方法，有较高的样品回收率和处理效率，适
用于大批量麻黄药材的质量分析 E
! 该分析方法提高了麻黄的质控标准，较全面
地反映了麻黄生药的质量，为人工栽培麻黄的质量
评价提供了参考 E
参考文献：
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