全 文 ：羊踯躅果实水煎液联合美托洛尔降压调脂作用研究
黄帧桧， 崔卫东， 张年宝， 丁伯平
(皖南医学院药理学教研室及中药药理国家三级实验室，安徽 芜湖 241002)
收稿日期:2011-07-08
基金项目:安徽高校省级自然科学研究重点项目资助(KJ2008A168)
作者简介:黄帧桧(1965—) ，男，副教授，硕士生导师，研究方向:中药药理与临床药理。Tel :13866397539，E-mail :huangzhenggui2006@
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摘要:目的 探讨羊踯躅果实水煎液联合美托洛尔对自发性高血压大鼠(SHR)的降压调脂作用，并分析其可能机制。
方法 雄性 SHR大鼠 32 只，随机分为美托洛尔组、羊踯躅果实水煎液组、羊踯躅果实水煎液联合美托洛尔组、模型组，
另设 Wistar-kyoto大鼠空白组。连续用药 4 周后，腹主动脉取血，测血浆 MDA、NO与 ET-1 水平，同时检测 TC、TG、HDL-C
及 LDL-C。采用 HE和 Masson染色观察肾脏组织结构并对纤维化程度进行半定量分析。取另外一侧肾脏，测肾脏局部
血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平。结果 给药前，各 SHR组与空白组相比，平均动脉压明显升高(P ＜ 0. 01) ，SHR 组间血压
无明显差异。给药 4 周后，各给药组与模型组相比，均有明显的降压效果(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，用药各组间降压差异
无统计学意义(P ＞ 0. 05)。各用药组肾脏局部 AngⅡ含有量同模型组相比都有明显下降(P ＜ 0. 01) ，联合用药组与单用
各药组相比，肾脏局部 AngⅡ降低效果更为明显(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01)。美托洛尔组在表现较好降压效果的同时，可引
起血浆中 LDL-C、TG、TC升高(P ＜ 0. 01) ，HDL-C降低(P ＜ 0. 01)。羊踯躅果实水煎液组与模型组比较血脂变化无明显
差异(P ＞ 0. 05)。联合用药组与模型组比较 TC、TG、LDL-C 水平无明显变化，差异无统计学意义(P ＞ 0. 05) ;但 HDL-C
水平明显升高(P ＜ 0. 01)。各给药组 ET-1 和 MDA与模型组相比明显降低(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，而 NO水平明显升高
(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01)。联合用药组与美托洛尔组相比表现出更加明显的降低肾脏纤维化作用。结论 联合用药组较
单用其中一种药物可以在达到良好降压的同时并不影响血中 LDL-C、TG、TC的水平，但可使 HDL-C升高，且具有更加明
显的降低肾脏纤维化作用。其降压机制可能与升高舒张血管因子 NO水平同时降低肾脏局部 AngⅡ水平、降低血浆 ET-
1 水平有关，也可能与降低 MDA生成有关。
关键词:羊踯躅果实;美托洛尔;自发性高血压大鼠;降压;血脂变化
中图分类号:R285. 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2012)02-0351-04
杜鹃花科植物羊踯躅广泛分布于长江流域，其花、叶、根
均可入药，有镇痛、免疫、解热和降压的功效［1-2］，在发挥以上
积极治疗作用的同时也具有一定的毒性，可出现行走困难、
下肢瘫痪、呼吸急促甚至死亡［3］。β受体阻断剂是抗高血压
常用药，美托洛尔由于缺乏内在拟交感活性，长期应用会引
起血脂升高。但羊踯躅果实水煎液与美托洛尔联合应用的
效果未见报道，本研究旨在探讨羊踯躅果实水煎液联用美托
洛尔是否可以在减少各用药剂量、减轻不良反应的同时，能
够达到与单用各药相似的降压作用，并且有效地调节血脂，
并分析其可能的作用机制。
1 实验材料和方法
1. 1 实验动物 雄性 SHR大鼠 32 只(12 周，体质量 230 ～
250 g) ，饲养条件:温度(23 ± 2)℃，相对湿度 60% ～ 65%，
自然光照，自由饮食进水。动物购自北京维通利华实验动物
技术有限公司，许可证号:SCXK(京)2006-0009。饲料购于
南京青龙山实验动物中心。
1. 2 药物与试剂 羊踯躅果实 1 kg 购自亳州华申药业有
限公司(中药材经营资格证号:Z34200300258) ，为道地药材，
经水熬煮浓缩［4］(含生药 1 g /1 mL) ，制成羊踯躅果实水煎
液;美托洛尔(批号 H32025391)由阿斯得康制药有限公司生
产;考马斯亮兰蛋白测定试剂盒、NO、MDA、ET-1、ANGⅡ试
剂盒均购自南京建成生物有限公司。
1. 3 仪器 日立 7600 型全自动生化分析仪;TGL-16G-A 冷
冻离心机;UV-9100 分光光度计;ALC-NIBP无创尾动脉血压
测定分析系统等。
1. 4 方法 32 只 SHR 大鼠适应性喂养一周后随机分为 4
组:美托洛尔组(给药剂量为 5. 8 mg /kg)、羊踯躅果实水煎
液组(水煎液组，给药剂量为 1. 5 g /kg)［5］、羊踯躅果实水煎
液联合美托洛尔组(联用组，给药剂量为羊踯躅果实水煎液
0. 75 g /kg、美托洛尔 2. 9 mg /kg)、模型组和 Wistar-kyoto 大
鼠空白组(模型组和空白组给予同容积生理盐水) ，每组 8
只。每天上午 10 点灌胃给药(1. 0 mL /100 g) ，每天一次，连
续 4 周。尾袖法测大鼠尾动脉血压，给药前测一次，以后每
周测一次(每次测量 3 次，取平均动脉压)。给药 4 周后，用
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25%乌拉坦(3 mL /kg)腹腔注射麻醉，腹主动脉取血后，迅
速取出肾脏。血液注入含 10%EDTA-Na2 30 μL和抑肽酶 40
μL 的试管中，4 ℃，3 000 r /min 离心 10 min，分离血浆，
－ 20 ℃保存，待测血脂、MDA、ET-1 及 NO。取出一侧肾脏
留作 HE 及 Masson 染色，观察肾脏组织形态学变化及半定
量评分。评分方法为:光学显微镜下统一放大 10 × 20 倍，观
察肾脏组织形态。每张切片随机选取 10 个视野，观察肾脏
纤维化程度，将其分成 0 ～ 3 级并予评分:0 为正常肾脏组
织，胶原占视野面积小于 5%，评为 0 分;1 为轻度纤维化，胶
原蛋白占视野面积小于 10%，评为 1 分;2 为中度纤维化，胶
原蛋白占视野面积 11% ～ 20%，有少量炎性细胞浸润，评为
2 分;3 为重度纤维化，胶原蛋白占视野面积大于 20%，且有
明显炎性细胞浸润，评为 3 分。将 10 个视野评分叠加求算
总分。取另外一侧肾脏，留测肾脏局部 AngⅡ水平。
1. 5 数据处理 采用 spss16. 0 软件进行数据处理，数值以
珋x ± s表示，组间比较采用方差分析，显著性水平 P ＜ 0. 05。
2 结果
2. 1 不同用药组对 SHR 大鼠的降压作用 用药前，各组
SHR大鼠血压无差别(P ＞ 0. 05)。用药后，各给药组与模型
组比较均有不同程度的降压作用，随着给药时间的延长，降
压作用越明显(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01)。各给药组间在 1 ～ 4
周内降压作用无明显差别(P ＞ 0. 05)。见表 1。
表 1 不同用药组对 SHR的降压作用 (1 mmHg =0. 133 322 kPa)(珔x ± s，n =8)
组别 用药前
剂量 /
(mg·kg －1)
用药后
1 周后 2 周后 3 周后 4 周后
空白组 130. 18 ± 11. 67 － 132. 78 ± 15. 43 128. 96 ± 9. 89 140. 87 ± 12. 22 133. 77 ± 18. 88
模型组 163. 56 ± 8. 79▼▼ － 179. 00 ± 7. 88 182. 48 ± 6. 91 185. 18 ± 4. 56 193. 77 ± 10. 79
美托洛尔组 168. 96 ± 9. 14▼▼ 5. 8 167. 76 ± 7. 17* 157. 22 ± 13. 12＊＊ 148. 50 ± 8. 36＊＊ 136. 14 ± 8. 76＊＊
水煎液组 171. 63 ± 7. 83▼▼ 1 500 164. 84 ± 9. 56＊＊ 160. 12 ± 9. 09＊＊ 150. 23 ± 9. 91＊＊ 134. 13 ± 9. 89＊＊
联用组 170. 67 ± 8. 44▼▼ 2. 9 + 750 161. 18 ± 7. 03＊＊ 154. 64 ± 14. 11＊＊ 146. 91 ± 7. 39＊＊ 139. 88 ± 10. 00＊＊
注:与空白组相比，▼ P ＜ 0. 05，▼▼P ＜ 0. 01;与模型组相比，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 01;与美托洛尔组相比△P ＜ 0. 05，△△P ＜ 0. 01，下同。
2. 2 不同用药组对肾脏局部 AngⅡ水平的影响 SHR组与
空白组比较，肾脏局部 AngⅡ水平显著升高(P ＜ 0. 01)。各用
药组同模型组相比，AngⅡ水平表现为不同程度的下降(P ＜
0. 01)。联合用药组与各单用组相比，AngⅡ水平下降更为明
显，差异具有统计学意义(P ＜0. 05或 P ＜0. 01)。见表 2。
表 2 不同用药组对肾脏局部 AngⅡ水平的影响
组别 剂量 /(mg·kg －1) AngⅡ /(pg·g － 1)
空白组 － 584. 66 ± 111． 17
模型组 － 1053. 32 ± 150． 75▼
美托洛尔组 5. 8 865. 87 ± 135． 79＊＊
水煎液组 1 500 895. 68 ± 100． 62＊＊
联用组 2. 9 + 750 734. 28 ± 100． 62＊＊△△▲
注:与羊踯躅果实水煎液组相比，▲P ＜ 0. 05 ▲▲P ＜ 0. 01，下同。
2. 3 不同用药组对血浆 MDA、ET-1 和 NO水平的影响 各
给药组与模型组比较，均表现为 MDA下降(P ＜ 0. 05 或 P ＜
0. 01) ，联用组与美托洛尔、水煎液两组比较，差异具有显著
性(P ＜ 0. 05)。同模型组相比，各用药组均使 ET-1 明显降
低(P ＜ 0. 01) ;而联用组较单用美托洛尔组与水煎液组对
ET-1 的生成抑制作用更显著(P ＜ 0. 01)。而 NO 的结果与
前两个指标的情况恰好相反，即各用药组 NO水平与模型组
相比均表现为程度不同的升高(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，联合
用药组与单用各药组比较，NO的升高更为明显，差异有统计
学意义(P ＜ 0. 05)。见表 3。
2. 4 各用药组对血浆 TC、TG、LDL-C及 HDL-C水平的影响
美托洛尔组同模型组比较，TC、TG、LDL-C 升高(P ＜
0. 01) ，HDL-C降低(P ＜ 0. 01) ;水煎液组同模型组相比，血
脂变化无差异(P ＞ 0. 05)。联合用药组与模型组比较 TC、
TG、LDL-C水平无明显变化，差异无统计学意义(P ＞ 0. 05) ，
但 HDL-C同模型组相比却表现为明显升高(P ＜ 0. 01)。见
表 4。
表 3 各用药组对血浆MDA、ET和 NO水平的影响 (珔x ± s，n =8)
组别 剂量 /(mg·kg －1) MDA /(μmol·L －1) ET-1 /(ng·L －1) NO /(μmol·L －1)
空白组 － 6. 93 ± 1. 41 50. 78 ± 11． 21 50. 23 ± 10． 10
模型组 － 9. 94 ± 1. 26▼▼ 111. 79 ± 9． 98▼▼ 24. 53 ± 5． 55▼▼
美托洛尔组 5. 8 8. 67 ± 1. 10* 74. 05 ± 5． 45＊＊ 31. 93 ± 4． 97*
水煎液组 1 500 8. 65 ± 1. 05* 75. 43 ± 9． 33＊＊ 32. 31 ± 3． 83＊＊
联用组 2. 9 + 750 7. 47 ± 1. 12＊＊△▲ 58. 23 ± 6． 72＊＊△△▲▲ 39. 96 ± 9． 33＊＊▲△
表 4 各用药组对血浆 TC、TG、LDL-C及 HDL-C水平的影响 (珔x ± s，n =8)
组别 剂量 /(mg·kg －1) TG /(mmol·L －1) TC /(mmol·L －1) LDL-C /(mmol·L －1) HDL-C /(mmol·L －1)
空白组 － 0. 50 ± 0. 20 1. 65 ± 0. 18 1. 48 ± 0. 44 1. 46 ± 0. 32
模型组 － 1. 28 ± 0. 98▼ 4. 63 ± 0. 23▼▼ 2. 80 ± 0. 11▼▼ 0. 99 ± 0. 10▼▼
美托洛尔组 5. 8 2. 22 ± 0. 20＊＊ 5. 53 ± 0. 37＊＊ 3. 32 ± 0. 15＊＊ 0. 75 ± 0. 43＊＊
水煎液组 1 500 1. 27 ± 0. 42 4. 76 ± 0. 17 2. 77 ± 0. 14 1. 01 ± 0. 08
联用组 2. 9 + 750 1. 19 ± 0. 17 4. 71 ± 0. 29 2. 80 ± 0. 15 1. 50 ± 0. 28＊＊
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2. 5 不同用药组肾脏切片 HE及Masson染色纤维化程度半
定量分析 水煎液组与模型组相比，肾小球体积增大，细胞
数量增多，肾小球内有纤维素渗出。肾小球、肾间质大片红
染，细胞核减少、溶解，有中性粒细胞、单核巨噬细胞及淋巴
细胞浸润。美托洛尔组、联合用药组同水煎液组相比，肾小
球体积明显减小，纤维化不明显。肾小管并未发生萎缩，肾
间质也无充血消肿，炎性细胞很少。见图 1 ～ 2。
空白组 模型组 美托洛尔组
水煎液组 联用组
图 1 不同用药组肾脏组织 HE染色光镜下表现(×200)
空白组 模型组 美托洛尔组
水煎液组 联用组
图 2 各组大鼠典型肾脏纤维化 Masson染色切片(×200)
Masson 染色结果及半定量分析结果显示，联合用药组
和美托洛尔组与模型组比较纤维化程度明显减轻(P ＜
0. 01) ，而水煎液组与模型组相比肾脏出现了纤维化(P ＜
0. 01)。联合用药组与美托洛尔组相比表现出了更好的降低
肾脏纤维化作用，差异有显著性(P ＜ 0. 05)。见表 5。
表 5 不同用药组肾脏纤维化评分
组别 剂量 /(mg·kg －1) 评分
空白组 － 8. 3 ± 4. 2
模型组 － 15. 3 ± 1. 5
美托洛尔组 5. 8 13. 1 ± 1. 1＊＊
水煎液组 1 500 24. 9 ± 4. 2＊＊
联用组 2. 9 + 750 11. 4 ± 2. 3＊＊△
3 讨论
高血压影响重要脏器如心、肾的结构和功能，最终可导
致这些靶器官的衰竭。常用抗高血压药物可使患者产生头
痛、下肢浮肿、血管性水肿、干咳等一系列不良反应。β 受体
阻断剂美托洛尔虽然降压显著，但长期使用可引起血脂升
高。中药在治疗高血压时由于其作用温和，毒副作用较小，
在高血压的治疗中起着举足轻重的作用。羊踯躅的果实又
称八厘麻或六轴子，民间常用其驱风除湿、消肿止痛。羊踯
躅果实的水煎液在发挥快速降压作用的同时也会出现不良
反应，表现为呼吸抑制、惊厥等［6］。本实验采用羊踯躅果实
的水煎液联合美托洛尔，探讨此联用组与单用各药组相比，
是否可以在保持良好降压作用的同时，能减轻对血脂的不良
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影响。
各用药组与模型组相比均表现出了良好的降压作用，联
合用药组与单用各药组降压作用相比，差异无统计学意义。
SHR模型组血压由给药前的 163. 56 mmHg 升高到 193. 77
mmHg，这一现象符合 SHR 生长期血压变化，同时也说明了
单用美托洛尔或羊踯躅果实水煎液及两者联合应用对处于
血压上升期的 SHR血压都有良好的降压作用。
MDA是生物膜中多价不饱和脂肪酸受自由基作用生成
的脂质过氧化代谢产物，主要存在于低密度脂蛋白胆固醇
中，检测 MDA可以间接反映抗脂质过氧化作用的程度。本
研究发现各给药组血浆中 MDA 明显低于模型组，说明无论
是美托洛尔还是羊踯躅果实水煎液都可以通过减少脂质过
氧化的程度而发挥抗高血压作用。同时也看到联用组与单
用各药组比较可以更好地抵抗脂质过氧化的发生，说明联合
用药效果要比单用其中某一药物效果好。
血管内皮功能失调导致舒张因子与收缩因子分泌失衡，
是影响高血压心血管重构的重要环节［7］。车在前等［8］认为
NO可能通过抑制成纤维细胞增殖及胶原的合成，影响高血
压病的发生和发展。实验结果显示，各用药组 NO与模型组
相比有不同程度的升高，而联用组与单用各药组比较，其升
高的程度更为明显，提示联合用药可以使 NO 生成增多，其
机制可能是与鸟苷酸环化酶的活性升高有关。
目前认为 ET收缩血管活性最强，作用比血管紧张素强
10 倍，它由多种组织中血管内皮细胞分泌后，通过自分泌或
者旁分泌的形式和 ET 受体结合，引起细胞外钙内流，起到
收缩血管的作用。实验中观察到，联合用药组与单用各药组
相比差别有显著性，提示联合用药后抑制内皮细胞分泌 ET
更为明显。
在肾脏局部，活性增高的 AngⅡ直接或间接诱导转化生
长因子-β表达，刺激肾脏局部纤溶酶原激活物抑制剂-I 等
的表达，促进肾小管间质成纤维细胞的增殖、分化，导致大量
单核巨噬细胞浸润肾小球，细胞外基质成分合成增多、降解
减少，这一局部作用日益引起人们的关注［9］。从实验结果
可以看出 SHR 肾脏局部 AngⅡ水平较空白组相比明显升
高，单用各药和联合用药均可以收到明显的降低 AngⅡ水平
的效果。结果也显示，联合用药较单用各药在减少各用药剂
量的同时，可以起到更好的降低肾脏局部 AngⅡ的作用。
Xie F等［10］研究表明，高血脂这一危险因素可以协同高
血压对心脏造成更严重的损害。本次结果显示，美托洛尔组
与模型组相比，LDL-C、TG、TC物质的量浓度升高，HDL-C 降
低，这一点与赵宪平等［11］的实验结果一致。水煎液组与模
型组比较血脂变化无明显差别;联用组 LDL-C、TG、TC 与模
型相比无明显差异，而 HDL-C 却升高。说明联合用药可以
使 HDL-C升高，对机体具有保护作用。
肾脏损害表现为小管间质纤维化、肾实质丢失、肾小球
硬化，有炎症细胞浸润，肾内细胞外基质异常增多和过度沉
积，最后导致固缩肾［12-13］。从肾脏的 HE 组织切片可以看
到，水煎液组可引起肾脏纤维化，美托洛尔组和联用组纤维
化不明显。联合用药组与美托洛尔组相比具有更加明显的
降低肾脏纤维化作用。
综合以上实验结果，提示联合用药不但可以通过减轻脂
质过氧化的程度，调节内皮细胞的功能，使它合成的 ET-1 减
少，同时又增加 NO 的释放，内皮细胞重新处于对机体有利
的最佳状态，发挥更好的降压效果，同时还有阻止高血压的
易损靶器官肾脏的纤维化的可能。对肾脏的这一保护作用
尚需增加样本例数和延长观察时间加以证实。本研究还发
现联合用药对血脂的影响，在不影响 LDL-C、TG、TC 的情况
下却可以使 HDL-C升高。但其对血脂影响的机制还有待进
一步研究。
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