免费文献传递   相关文献

二歧鹿角蕨组织培养的研究



全 文 :   收稿日期:2004-02-03
作者简介:黄执缨(1969-),女 ,讲师 ,从事植物生理学 、植物组织培养的教学与研究。
二 歧 鹿 角 蕨 组 织 培 养 的 研 究
黄执缨
(汕头职业技术学院 ,广东汕头 515041)
摘 要:在二歧鹿角蕨孢子体的组织培养中 , 通过适宜的培养基诱导形成绿色球状体(GGB), 再采用添加植物生长调节
物质以及恰当的选材 ,可促进 GGB 的生长和芽分化 , 经生根培养 、炼苗和移栽可获得大量种苗。
关键词:二歧鹿角蕨;绿色球状体;分化;影响因素
中图分类号:Q943·1 文献标识码:A 文章编号:1008-9632(2004)05-0022-03
  二歧鹿角蕨(Platycerium bifurcatum C·Chr)为鹿角
蕨科鹿角蕨属植物 ,是一种热带大型附生蕨类。根状
茎短粗肥厚 ,叶二型 ,不育叶呈肾圆形鸟巢状 ,可育叶
下垂 ,分裂成多回掌状两歧深裂 ,似鹿角状分叉 ,因其
株形奇特 ,垂吊于厅堂别具热带情趣 ,是室内装饰的
珍贵种类 。
通过二歧鹿角蕨孢子体的组织培养形成绿色球
状体(GGB)的快速繁殖途径 ,可大大提高增殖速度 ,
但采用不同的诱导培养基 ,GGB的生长和分化情况差
异较大 ,所以研究影响与调控 GGB生长与分化的因
素以提高诱导率 ,对鹿角蕨这一观赏蕨类的生产应用
具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 材料
供试材料为二歧鹿角蕨孢子体 ,来源于广东省汕
头市农业科学研究所生物技术开发中心 。无菌材料
的获得:取长约 20cm 的幼嫩真叶作为外植体 。将嫩
叶用流水冲洗 5min ,除去叶表面的毛 ,再放入 70%酒
精中快速浸蘸 ,后置 5%次氯酸钠溶液中消毒 5min ,
然后用无菌水洗涤 2 ~ 3次 ,切成约 1.0cm2的小块备
用。
1.2 方法
培养基为 White 或 MS 培养基 , 附加活性炭
0.2%、蔗糖 2.0%、琼脂 0.7%, pH 值 5.5 ~ 5.8;添加
不同种类和浓度的植物生长调节物质 。培养过程中
温度 25±3℃,光照 500 ~ 1000Lx ,照光时间 8h/d 或
12h/d。
2 结果与分析
2.1 不同培养基对GGB诱导的影响
将上述无菌材料接种在添加不同的浓度的 6-
BA和 IBA的诱导培养基上(表 1),各接种 20个材料 ,
在相同的培养条件下 ,经 3周后 ,产生类似兰花原球
茎的绿色球状体(GGB),GGB可不断增殖 ,到第 4周
结束时测出GGB的块数 ,统计GGB的诱导率。
表 1 不同培养基对 GGB的诱导情况
培养基 激素(mgL-1)
6-BA IBA
接种数
(块)
GGB数
(块)
诱导率
(%)
White 0 0 20 0 0
White 0.05 0.05 20 0 0
White 0.05 0.1 20 1 5
White 0.1 0.1 20 4 20
MS 0 0 20 0 0
MS 0.05 0.05 20 10 50
MS 0.1 0.05 20 19 95
MS 0.1 0.1 20 15 75
  实验表明:MS 培养基化White 培养基更适宜GGB
的诱导 ,不添加生长调节剂 ,不产生GGB ,生长调节剂
不含 6-BA ,则 GGB 极少 ,且GGB较小 ,可见 6-BA
对GGB的诱导作用明显 。用MS培养基同时添加 6-
BAO ,1mgL-1和 IBA 0.05mgL-1时 ,诱导率高达 95%。
2.2 植物生长调节物质对芽分化的作用
将GGB分别转移至 7 种诱导芽分化的培养基
(表 2),从表 2可见 ,在添加 KT 和 IAA 的 MS 培养基
上均可分化出从生芽 ,其分化率为 50%~ 100%,但在
不同的培养基上 GGB 的分化能力有较大差别 ,芽的
分化浓度以 KT0.5mgL-1和 IAA0.5mgL-1配合使用的
22
第 21卷第5期
2004年 10月  
生 物 学 杂 志
JOURNAL OF BIOLOGY
  Vol.21 No.5
Oct ,2004
效果最好 ,可见其基部的根状茎明显 ,丛生芽叶片狭
长 ,有的已显出微分叉状 ,叶面长有绒毛 ,分化倍数达
5.1倍 。
表 2 添加不同浓度的 KT和 IAA 对从生芽形成的影响
基本
培养基
激素(mgL-1)
KT IAA
接种GGB
数(块)
分化丛
生芽数
分化率
(%)
分化芽
数(个)
分化
倍数
MS 0 0 10 0 0 0 0
MS 0.25 0.25 10 5 50 21 2.1
MS 0.25 0.5 10 7 70 33 3.3
MS 0.5 0.25 10 8 80 35 3.5
MS 0.5 0.5 10 10 100 51 5.1
MS 0.75 0.5 10 9 90 46 4.6
MS 0.75 0.75 10 7 70 39 3.9
2.3 GGB的大小与分化的关系
GGB的大小以其长度表示 ,取材时选择不同长度
的GGB ,其分化能力不同 ,形成芽的数量不同(表 3),
GGB越大 ,则分化率越高。实验表明 ,诱导 GGB 分化
时 ,应选择增殖旺盛 ,生长粗状 ,长度达 0.8cm以上的
GGB 。
表 3 不同长度的GGB在同一诱导培养基的分化情况
GGB长度
(cm)
接种 GGB
数(块/瓶)
分化丛生
芽数(块)
分化率
(%)
分化芽
数(个)
分化
倍数
<0.4 20 1 5 4 0.2
0.4~ 0.6 20 10 50 42 2.1
0.6~ 0.8 20 14 70 66 3.3
0.8~ 1 20 18 90 89 4.5
2.4 植物生长调节物质对生根培养的作用
切取单个芽分别接种入 5种生根培养基(表 3),
培养前 7天无光照 ,后其培养与诱导培养条件相同 ,
于4周后 ,测生根结果 ,结果表明:添加 NAA 在 0 ~
0.1mgL-1范围内 ,随 NAA 浓度的升高 ,生根率增加 ,
0.1mgL-1时生根率最高 ,浓度高于 0.1mgL-1 ,生根率
随NAA浓度的升高而下降 ,添加 NAA 0.1mgL-1为最
适浓度。
表 4 添加不同浓度的NAA对生根结果的影响
培养基 接种芽数(个)
生根芽
数(个)
生根率
(%)
单芽生根数
(X±SD)
1/ 2MS 50 11 22 2.1±0.6
1/ 2MS+NAA0.05 50 28 56 5.2±1.4
1/ 2MS+NAA0.1 50 47 94 9.0±2.1
1/ 2MS+NAA0.5 50 42 84 8.2±2.5
1/ 2MS+NAA1.0 50 32 64 6.1±1.7
  当试管苗长至约 4 ~ 6cm ,打开瓶盖炼苗 3天 ,后
取出小苗 ,洗去根上粘附的培养基 ,移入已消毒的由
水苔 、泥炭藓等量混合的基质中 ,在荫棚内加盖塑料
薄膜罩子 ,每天喷雾 ,保持相对湿度 85%以上 ,温度
25 ~ 30℃。两周后喷施 0.1%的尿素和磷酸二氢钾作
根外追肥 ,一个月后揭开覆盖物 ,成活率约 80%,试管
苗越大 ,成活率越高 ,在荫棚中生长两个月后 ,可将小
苗定植。
二歧鹿角蕨的栽培方法多种多样 ,可盆栽 、吊篮
栽培或板式栽培。由于二歧鹿角蕨为附生蕨类 ,其根
可裸露在空气中 ,故更适于板式栽培 ,板材可用树蕨
的茎干 、风化的硬木或树皮 ,栽培时 , 先将板材浸透
水 ,用少量苔藓 、腐殖土加少量基肥作培养基质 ,将培
养基质与二歧鹿角蕨苗捆绑在板上 ,然后将木板浸在
水中 ,待蕨苗生长后就可悬挂起来 ,注意需定期喷水 ,
保持较高的湿度 ,木板则需定期浸泡于含基肥的水
中。
3 讨论
通过孢子体的组织培养诱导形成绿色球状体
(GGB)的方法是二歧鹿角蕨快速繁殖有效途径。本
实验研究表明 ,诱导GGB应选择MS 培养基并添加 6
-BA 0.1mgL-1和 IBA 0.05mgL-1 ,诱导丛生芽应选择
增殖旺盛 ,生长粗壮 ,长度达 0.8cm以上的GGB ,培养
基为MS 添加 KT 0.5mgL-1IAA 0.5mgL-1 ,生根培养
则选择 1/2MS添加NAA 0 ,1mg-1 。
鹿角蕨的快繁技术 ,近年来在我国沿海地区实验
报道的文章有限 ,本实验通过选择不同激素组合的培
养基结合粤东地区的气候环境对二歧鹿角蕨的组培
和移栽进行试验 ,对这一观赏蕨类的推广具有一定意
义。
参考文献:
[ 1] 石 雷 , 主编.观赏蕨类[ M] .北京:中国林业出版社 , 2002 ,
49~ 52、161~ 162.
[ 2] 李浚明 , 编译.植物组织培养教程[ M] .北京:中国农业大学
出版社 , 1996 , 30~ 44.
[ 3] 黄韶玲 , 张洁莲.鹿角蕨的组织培养[ J] .植物生理学通讯 ,
1993 , 29(1), 46 ~ 47.
[ 4] 潘瑞炽 , 李 玲.植物生长发育的化学控制[ M] .广州:广东
高等教育出版社 , 1995 , 4~ 12.
[ 5] 潘瑞炽 ,董愚得.植物生理学[ M] .北京:高等教育出版社 ,
2000 , 190.
23
第 21卷第5期
2004年 10月  
生 物 学 杂 志
JOURNAL OF BIOLOGY
  Vol.21 No.5
Oct ,2004
Seudy on sissue culture of Platycerium bifurcatum
HUANG Zhi_ying
(Shantou College of Profession and Technology ,Shnntou ,Guangdong 515041 ,China)
Abstract:In tissue culture of the sporophyte of Platycerium bifurcatum ,Green globoid bodys(GGB)were abducted by
fitting culture medium.With the growth regulative substance of plant and select material seemly ,GGB would grow bud and
root.By the way of taking exercise and transplanting seeding ,we can attaina great deal of young plants.
Key words:Platycerium bifurcatum ;green globoid body(GGB);differention;influencing factor
(上接 7页)
Inhibitor of apoptosis and its regulation
LIU Xiao-ying ,FAN Li-bin
(Department of biology ,Anhui Medical University ,Hefei ,230032 ,China)
  Abstract:The members of caspase family are the key molecules in apoptosis process and each of them is strictly
regulated during the process.Inhibitor of apoptosis regulate the apoptosis by inhibitoring the activation of caspases.So it is
important to know the structure features and the regulatory mechanism of IAP.
Key words:apoptosis , caspase , IAP , regulation
《中国生物工程杂志》(月刊)
欢迎订阅 欢迎投稿 欢迎刊登广告
《中国生物工程杂志》1976年创刊 ,为中国科学院主管期刊 、中国生物工程学会会刊。本刊现为全国生物科学核心期刊(2004版)、中国科技核
心期刊 、中国科学引文索引核心期刊 、美国化学文摘收录期刊等 ,具有较大的学术影响 ,是生命科学与生物产业的主流传播媒介。
《中国生物工程杂志》由中国生物工程学会 、中国生物技术发展中心 、中国科学院文献情报中心联合主办 ,主要报道我国生物技术研究开发重
要成果和国内外最新进展 ,反映本学科的学术水平与发展动向 ,传播生物技术新理论与新技术 ,促进产业化。本刊内容涉及生物工程及相关领域 ,
包括人类健康与生物技术 、农业发展与生物技术 、生化工程与生物加工 、生态环境与生物技术 、海洋生物技术 、生物技术产业化等。
本刊发行覆盖全国各省 、自治区 、直辖市以及香港 、台湾地区 ,海外的有关大学、研究机构 、图书馆有大量的订户 , 和国外建立有广泛的刊物交
换联系。
《中国生物工程杂志》为月刊 ,全年 12期订费共 300元 ,邮发代号 82-673 ,可在编辑部直接订阅。
通信地址:北京市中关村北四环西路 33号 ,邮政编码:100080 ,电话:010-82624544(传真), 82626611-6631,电子信箱:biotech@mai l.las.ac.cn
24
第 21卷第5期
2004年 10月  
生 物 学 杂 志
JOURNAL OF BIOLOGY
  Vol.21 No.5
Oct ,2004