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正交试验法优化狗脊膨化炮制工艺的研究



全 文 :泸州医学院学报 2008年 第31卷 第1期
JournalofLuzhouMedicalColege Vol.31No.1 2008
正交试验法优化狗脊膨化炮制工艺的研究
袁叶飞,欧贤红 1
(泸州医学院药学院,四川泸州 646000;1桂林医学院药学院)
摘 要 目的:优化选择膨化炮制狗脊的最佳工艺。方法:以小鼠扭体抑制率为指标,用正交试验法对膨化法炮制狗脊的工
艺进行研究。结果:膨化气压2.0kg/cm2时,保温时间5min,狗脊的镇痛作用最强。结论:筛选的膨化炮制工艺,能确保狗脊的药
效。
关键词 狗脊;膨化炮制;镇痛作用
中图分类号 R283 文献标识码 A 文章编号1000-2669(2008)1-015-03
STUDYONOPTIMIZINGTHEEXPANSION PROCESSING
OFRHIZOMACIBOTIIBYORTHOGONALTEST
YuanYefei,etal
DepartmentofPharmacy,LuzhouMedicalColege
AbstractObjective:TooptimizetheconditionoftheexpansionprocessingofRhizomaCiboti.Methods:
TheexpansionprocessingofRhizomaCibotiwasstudiedbyorthogonaltestwithinhibitionrateofbodytwisttest
inmiceasindex.Results:AnalgesticactionofRhizomaCibotiwasthestrongestundertheexpansionprocessing
pressureof2.0kg/cm2 andtimeof5min.Conclusion:Theselectedconditionofexpansionprocessingcan
guaranteethepharmacologicalefectsofRhizomaCiboi.
KeywordsRhizomaCiboti;Expansionprocessing;Analgesticaction
作者简介:袁叶飞(1973-),男,副教授,博士
狗 脊 为 蚌 壳 蕨 科 植 物 金 毛 狗 脊 Cibotium
barometz(L.)J.Sm.的干燥根茎。中药狗脊具有补肝肾、
强腰膝、祛风湿的功效,常用于腰膝酸软、下肢无力、
风湿痹痛等症[1]。目前临床上狗脊生制兼用,但以砂
烫品入药居多,生用较少。狗脊生品及其砂烫炮制品
具有镇痛作用的药理活性[2]。狗脊生品密被金黄色茸
毛,不易除尽,且质硬而坚韧,不利于煎煮或粉碎。因
此《中国药典》2005年版规定,狗脊加工炮制为砂烫
法,砂烫后质地松脆,易于除去茸毛,便于调剂和制
剂。但砂烫狗脊质量不易控制;操作时间长,费工费
力,不利于大量炒制;而且炒制时高温、烟熏、过滤及
除去茸毛时的灰尘影响环境,对操作人员的身体健
康造成不利影响。因此进行狗脊炮制的现代化改革
意义重大。为此,本文在不同压力、时间条件下,对狗
脊的膨化炮制工艺进行研究,以醋酸所致小鼠扭体
反应进行药理实验,以小鼠扭体抑制率为指标,采用
正交试验法优选其炮制工艺的最佳条件,为应用膨
化技术炮制狗脊提供科学依据。
1材料与仪器
1.1狗脊生品
购自南宁医药批发站,经广西中医学院中药鉴
定室鉴定为蚌壳蕨科植物金毛狗脊 Cibotium
barometz(L.)J.Sm.的干燥根茎。
1.2实验动物
昆明种小鼠由广西医科大学动物室提供,动物
许可证号:SCXK桂2003-0003
1.3膨化设备
自行设计委托加工,铁质容器,容积3.0L
2方法与结果
2.1狗脊的膨化方法
根据预试验结果,以加热后的压力和保温时间
论 著
15
泸州医学院学报 2008年 第31卷 第1期
JournalofLuzhouMedicalColege Vol.31No.1 2008
排出试验因素水平(见表l)。并根据因素水平条件选
用 L9(34)正交试验安排试验,平行操作2次。精密称
取经过挑选、大小均匀的生狗脊,随机分成l8等分,
按L9(34)正交表试验设计进行炮制。将狗脊装入膨化
机内,以适当火力加热,以40r/min的速度匀速转动
膨化器,待升温至所需压力,保温一定时间后,将狗
脊膨化(瞬间释压至常压)至接收器内冷却,粉碎,过
40目筛备用。
表1 试验因素及水平表
水平 压强A/kg/cm2 保温时间B/min
1 1.5 3
2 2.0 5
3 2.5 7
2.2镇痛实验
2.2.1样品溶液的制备
取上述试验正交表制备的 9份狗脊膨化品各
100g,加 70%乙醇回流提取 3次(90,60,30min),合
并滤液,减压浓缩溶剂制成浸膏,分别用 NaCl注射
液配置成浓度为1.5g·ml-1的生理盐水溶液,供实验
用。
2.2.2小鼠扭体法[3]
按 L9(34)正交表试验号表,可安排 9次试验,即
膨化药品需分成9组,另加生理盐水组,因此整个药
理试验共分成10组。取小鼠100只,随机分为 10
组,每组10只。生理盐水组腹腔注射生理盐水,药品
组腹腔注射膨化药品醇提液 1.5g·ml-1,剂量 10ml·
kg-1体重,腹腔注射给药后30min,再腹腔注射0.6%
的醋酸0.2ml/只,比较15min内小鼠发生的扭体次
数及计算各膨化品对扭体反应的抑制率。抑制率按
下式计算:
抑制率(%)=生理盐水组扭体均数一试药组扭均数
生理盐水组扭体均数
×100%
2.2.3试验结果与分析
按L9(34)正交表进行药理试验,结果见表2和表3。
表2 L9(34)正交试验设计表及结果
试验号 因 素 扭体抑制率/%
A B C D
1 1 1 1 1 38.46
2 1 2 2 2 47.69
3 1 3 3 3 40.02
4 2 1 2 3 48.46
5 2 2 3 1 59.65
6 2 3 1 2 41.54
7 3 1 3 2 39.12
8 3 2 1 3 46.15
9 3 3 2 1 36.92
K1 126.17 126.04 126.15 135.03
K2 149.65 153.49 133.07 128.35
K3 122.19 118.48 138.79 134.63
R 27.46 35.01 12.64 6.68
表3 方差分析结果
方差来源 离差平方和 自由度 方差 F P
A 146.7992 2 73.3996 8.3733 <0.05
B 227.0506 2 113.525312.9508<0.025
误差 35.0637 4 8.7659
注:F0.05(2,4)=6.94,F0.025(2,4)=10.65
分析结果表明,在本实验压力、时间范围内,比
较极差R值可直观看出,影响程度保温时间大于压
力,可知膨化法炮制狗脊时,保温时间是影响扭体抑
制率的主要因素。而方差分析表明,保温时间对扭体
抑制率有非常显著性影响,而压力对扭体抑制率也
有显著影响。极差分析与方差分析结果相一致。综合
两种分析结果,最佳膨化条件为A2B2,即膨化压力为
2.0kg/cm2,膨化保温时间为 5min时,狗脊膨化品显
著地降低小鼠因醋酸刺激引起的扭体反应次数,有
较高的扭体抑制率。
2.2.4最佳工艺验证
取狗脊生品5份,按2.2.3确定的最佳工艺膨化
炮制,即膨化压力为 2.0kg/cm2,膨化保温时间为
5min,膨化炮制后,冷却,粉碎,过 40目筛。各取
100g膨化粉末按 2.2.1制备样品溶液,按 2.2.2进行
镇痛试验,结果见表4。
表4最佳工艺验证
膨化样品 扭体抑制率(%) RSD(%)
1 58.67
2 58.23
3 59.46 2.27
4 60.79
5 57.23
由表 4可知,5次重复试验的结果表明依据该
工艺炮制的狗脊膨化品降低小鼠因醋酸刺激引起的
扭体反应次数均处于较高水平,有较高的扭体抑制
率,而且RSD=2.27%,说明该工艺是稳定可行的。
3讨 论
根据气体热力学的查理定律P=CT(C为恒值),
可知在质量和体积一定的情况下压力P与温度T成
正比,当在某一压力时气体的温度会维持在相应水
平不变。本试验中膨化机机舱密闭,气体质量和体积
不能改变,故机舱内温度实际是由压强所决定的,所
以正交设计为简便实用起见,未将温度列入试验因
素水平条件,仅考虑容易控制的压力与保温时间。
药典 2005年版规定,狗脊的炮制方法为砂炒
法,目的是使药材经高温处理后质地疏松,利于煎出
有效成分。但是,砂炒至药材疏松状不易把握火候,
试验号 扭体抑制率(%)
16
往往因为以砂为媒介导致受热不均,出现一部分药
材已发生炭化而另一部分药材却炮制不彻底的缺
陷。膨化炮制法是将食品膨化应用于中药炮制,使硬
质药材在一定的温度和压力下均匀受热,在突然减
压的情况下,药材分子间的引力受到破坏,达到质
地疏松的目的。
本实验证明,采用膨化技术炮制狗脊,有利于去
毛,膨化炮制后质地疏松,与砂烫法相比较,更有利
于有效成分的溶出,从而提高药效(另文发表)。与砂
烫法相比较,膨化法操作简便,只需掌握压力和时间
即可,既缩短了加工周期,又避免了砂烫法烟熏、灰
尘及挥发气体对操作人员身体的影响。本实验为应
用膨化技术炮制狗脊提供了科学依据,值得推广。
参 考 文 献
1. 国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:化学工业出
版社,2005;156
2. 鞠成国,曹翠香,史 琳,等.狗脊及其炮制品和狗脊毛的
镇痛、止血作用研究[J].中成药,2005;27(11):1279
3. 徐叔云,卞如濂,陈 修,主编.药理实验方法学[M].北
京:人民卫生出版社,2005;882
(2007-06-15收稿)
颞三针治疗三叉神经痛1例
张丰正,张 颖1
(泸州医学院:附属中医院针灸科;1附属医院神经外科,四川泸州 646000)
“颞三针”为岭南针灸新学派靳瑞教授所创,一穴多经,
选穴精当,主要用于脑血管意外后遗症。笔者采用此针刺法
尝试性治疗 1例原发性三叉神经痛患者,疗效满意,报告如
下。
1 治疗方法
“颞三针”定位方法:头颞侧部、耳尖直上,入发际 2寸为
颞Ⅰ针,在颞Ⅰ针水平向前旁开1寸为颞Ⅱ针,向后旁开1寸
为颞Ⅲ针。
操作方法:取坐位或仰卧位,选用 1.5寸毫针,在颞部先
取颞Ⅰ针,垂直向下沿皮平刺 0.8~1.2寸。针刺颞Ⅰ针后,于
颞Ⅰ针水平方向向前1寸处针颞Ⅱ针,后1寸处针颞Ⅲ针,三
针均垂直向下。留针20分钟,其间每隔10分钟,以平补平泻
手法分别行捻转和提插手法各1次。如针刺时针感过于强烈
(疼痛难忍),可能刺中较大血管,可稍微后退,调整方向,继
续行针,以患者局部有酸、麻、胀感为好。疼痛时间较久者可
单独再以电针刺激10分钟,选择密波,频率50~100次/秒。出
针时注意压迫防止出血。7次1疗程。间断休息2天。
2 疗效标准
参照卫生部《中药(新药)临床研究指导原则》所确定的三
叉神经痛疗效标准进行疗效评定[1,2]。
3 典型病例
患者易某,女,52岁,形体瘦弱。于1年前,因过度劳累后
乘车当风出现右侧颞部、额部剧烈头痛,呈针刺样,阵发性发
作,每次持续 2~3分钟,伴头晕,恶心欲吐,上下唇、鼻翼、口
角抽搐样疼痛。舌淡红,苔薄黄,脉濡细。在外院诊断为“三叉
神经痛”,予以卡马西平 0.1g口服,每日 2次。用药增至每日
0.8g后,患者因病情缓解不明显,且头晕恶心症状加剧,无法
忍受,遂求诊于我科。查:痛苦面容,上下唇、鼻翼、口角触碰
后产生抽搐样疼痛,同侧流泪,皮肤潮红。余无特殊。头颅CT
检查排除颅内肿瘤,鼻咽部病理活检排除鼻咽癌可能。中医
诊断:头风﹑头面痛。证属气血两虚、风邪闭阻、郁久成瘀。予
“颞三针”祛风通络、活血止痛。经治 1疗程后,患者头晕恶心
消失,可洗脸刷牙,头痛明显减轻。2疗程后头痛基本消失。院
外继服散偏汤巩固疗效,半年后随诊无复发情况。
4 讨 论
祖国医学认为,三叉神经痛属“头痛”、“偏头痛”、“面痛”
等范畴。古医书中有“首风”、“脑风”、“头风”等名称记载,如
《素问·风论》:“首风之状,头面多汗恶风,当先风一日则病甚,
头痛不可以出内。”因此,三叉神经痛新发病例多与外感风
寒、风热郁闭少阳胆经波及阳明经相关;病久缠绵反复者则多
与体质虚弱或情绪易怒,肝气不畅,气机不利有关。妇女“七
七”之后,体内阴阳气血变化较大,内有郁结,外受风邪时尤
其好发。无论内外,本病就病位和病机而言,与手少阳三焦经、
足少阳胆经、足太阳膀胱经、足厥阴肝经密切相关。“颞三针”
位于颞部,与角孙穴和率谷穴比邻。颞部为少阳经分部区域。
角孙为手足少阳之会,率谷为足太阳、少阳之会。针刺“颞Ⅰ
针”可疏通肝、胆、三焦、膀胱经络之气,起到行气活血、疏风通
络作用。“颞Ⅱ针”、“颞Ⅲ针”扩大和加强了其治疗作用。从解
剖学上看,颞骨较其他头骨薄,骨缝最密集,颞骨部血管非常
丰富。因此局部选穴针感强烈,疗效明显,可能是利用了骨缝
和血管对针感的双重传导,对颅内三叉神经元异常放电和外
周三叉神经过度兴奋有调整作用[3]。
针灸治疗主要针对原发性三叉神经痛,如效果不明显且
病情进行性加重者注意结合西医检查排除小脑脑桥角肿瘤、
三叉神经半月神经节肿瘤、鼻咽癌、多发性硬化等疾病。
参 考 文 献
1. 于生元,三叉神经痛的新认识[J].中国疼痛医学杂志,
2004;10(2)∶66
2. 孙树岩,邱林莉.三叉神经痛病因病理机制研究进展[J].
国外医学.耳鼻喉科学分册,1993;17(2)∶85
3. 袁 青.中风后遗症靳三针特效治疗[M].北京:人民军医
出版社,2005;74
(2007-09-02收稿)
泸州医学院学报 2008年 第31卷 第1期
JournalofLuzhouMedicalColege Vol.31No.1 2008 17