免费文献传递   相关文献

狗脊生、制品正丁醇提取物药效学实验研究



全 文 :35
第 1 4卷 第 1 0 期
2012 年 10 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 14 No. 10
Oct .,2012
狗脊为蚌壳蕨科植中药物金毛狗脊的干燥根
茎。始载于《神农本草经》,为草部中品。历版《中
华人民共和国药典》均有收载,具有补肝肾、强腰膝、
祛风湿、止痛、利尿之功效。
中医理论认为,骨骼生长、发育、修复、衰老等
都与肾的精气盛衰密切相关,从“肾主骨”角度来
看,绝大多数的骨与关节疾患在其病程的一定阶段
都与肾有着直接或间接的联系。骨质疏松症以肾虚
为本,补肾药物往往具有一定的抗骨质疏松作用,
我们认为这也正是狗脊“补肝肾、强腰膝”功效的体
现。
1 实验材料
1.1 实验动物
SD种大白鼠,雌性,体重250~300g,清洁级,大
连医科大学实验动物中心提供。许可证号 :SYXK
(辽)2007-0010。
饲养环境 :室内洁净,安静,自然采光,通风良
好,湿度45%~55%,温度20~22℃。
饲料 :鼠颗粒饲料,沈阳东陵实验动物饲料厂
生产。
1.2 实验仪器
常规手术器械 ;游标卡尺 :上海恒胜工具有
限公司产品 ;7500A ICP-MS(电感耦合等离子体
质谱仪):美国Agilent公司 ;马弗炉SRZX-2-9 :沈
阳市电炉厂 ;7230分光光度计 :上海分析仪器厂 ;
Challenger双能X线骨密度分析仪(DEXA):法国
DMS公司 ;电子万能试验机CMT4000系列 :深圳市
新三思材料检测有限公司 ;T-500型电子天平 :美
国双杰兄弟(集团)有限公司常熟双杰测试仪器厂 ;
碱性磷酸酶检测试剂盒 :南京建成生物试剂有限
公司 ;旋涡振荡器 :上海医科大学仪器厂生产 ;xw-
80A,编号08 ;微量移液器 :上海求精生化试剂仪器
有限公司生产。
1.3 药品与试剂
尼尔雌醇 :上海医药(集团)有限公司新华联制
药厂生产,国药准字H31021647,规格 :2mg/片,使用
时以蒸馏水配至所需浓度,4℃冰箱保存。
狗脊生品正丁醇提取物、狗脊制品正丁醇提取
物 :此两种药物均由辽宁中医药大学药学院中药化
学教研室提供,使用时以蒸馏水配至所需浓度,4℃
冰箱保存。
2 试验方法
2.1 分组
选择无异常行为体征,外观活泼健康,清洁级,
体重250~300g 雌性SD大鼠70只,称重后随机分为
5组,每组10只,正常对照组,模型对照组,阳性药尼
狗脊生、制品正丁醇提取物药效学实验研究
索天娇,韩蕾,贾天柱
(辽宁中医药大学药学院,辽宁 大连 116600)
摘 要:目的:研究狗脊生、制品的正丁醇提取物的抗骨质疏松作用。方法:将SD雌性大鼠切除卵巢造成骨质
疏松动物模型,用狗脊生、制品的正丁醇提取物溶液灌胃给药研究其对卵巢去势大鼠的抗骨质疏松作用。结果:狗
脊制品正丁醇提取物对卵巢去势大鼠具有显著的抗骨质疏松作用,狗脊生品正丁醇提取物对卵巢去势大鼠具有一
定的抗骨质疏松作用。结论:狗脊生、制品的正丁醇提取物具有一定的抗骨质疏松的作用。
关键词:狗脊;骨质疏松症;疗效;实验研究
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1673-842X (2012) 10- 0035- 04
收稿日期:2012-04-10
基金项目:国家自然基金课题(30973938)
作者简介:索天娇(1972-),女,辽宁铁岭人,主治医师,硕士,研究方向 :中药药理学。
Pharmacodynamics Pilot Study of N-butyl Alcohol Extract of
Rhizoma Cibotiis Crude Drugs and Products
SUO Tian-jiao,HAN Lei,JIA Tian-zhu
(Pharmacy College,Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Dalian 116600,Liaoning,China)
Abstract :Objective :To investigate the anti-osteoporosis effects of n-butyl alcohol extract of rhizoma
cibotiis crude drugs and products. Methods :Resection ovarians of SD female rats were made animal models
of osteoporosis. We investigated the anti-osteoporosis effects of n-butyl alcohol extract of rhizoma cibotiis
crude drugs and products by filling the stomachs of the ovarian castrated rats. Results :N-butyl alcohol
extract of rhizome cibotiis products have the significant role of anti-osteoporosis. N-butyl alcohol extract of
rhizoma cibotiis crude drugs have the certain role of anti-osteoporosis. Conclusion :N-butyl alcohol extract
of rhizoma cibotiis crude drugs and products have some certain effect of anti-osteoporosis.
Key words :rhizoma cibotii ;osteoporosis ;curative effect ;experimental study
DOI:10.13194/j.jlunivtcm.2012.10.37.suotj.057
36
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报 1 4 卷
尔雌醇组(1.5mg/kg),狗脊生品的正丁醇提取物组
(0.4g/kg),狗脊制品的正丁醇提取物组(0.4g/kg)。
正常组常规饲养。
2.2 造模方法及指标的检测
正常对照组大鼠又称为假手术组(仅取出卵
巢周围一小块脂肪,不切除卵巢),其它组大鼠均在
10%水合氯醛麻醉下行双侧卵巢切除手术。
狗脊各种炮制品组分别灌胃给药,尼尔雌醇组
灌胃给予尼尔雌醇水溶液(1.5mg/kg),模型对照组
及正常对照组大鼠灌胃给予等体积的生理盐水,各
组给药体积均为20mL/kg,每天灌胃1次,每周称体
重1次,用以调整灌胃剂量。
灌胃进行3个月,第90天大鼠禁食不禁水过
夜,第91天上午称重,摘眼球取血,之后脱颈椎处死
大鼠,摘取子宫,剪去周围结缔组织并称重,测定子
宫指数(子宫重量/体重)。
大鼠血清碱性磷酸酶含量检测 :使用离心机分
离出大鼠血清,用Akp试剂盒及分光光度计检测血
清碱性磷酸酶的活性。
取大鼠胫骨1根,剔除周围肌肉和结缔组织,
浸泡于浓度为10%的福尔马林溶液中,进行病理检
测。
取大鼠股骨和胫骨各1根,剔除周围肌肉和结
缔组织,放入马弗炉内进行灰化,取出骨灰进行研磨
后硝解,用ICP-MS测定骨灰中钙离子的含量。
取大鼠股骨1根,剔除周围肌肉和结缔组织,用X
线骨密度扫描仪测定骨密度,用万能机测定骨应力。
3 实验结果
3.1 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松大鼠体
重的影响
由表1可见,模型组动物体重有增加的趋势,
各给药组体重增加相对较少,但均不具有统计学意
义。
表1 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质
疏松大鼠体重的影响(g,n=10)
组别 剂量 实验初体重 实验末体重
假手术组 - 252.32±17.58 269.59±17.19
模型组 - 254.27±24.74 285.21±28.88
阳性药组 1.5mg/kg 254.88±17.79 257.36±25.86
生品正丁醇组 0.4g/kg 253.22±31.09 270.41±36.63
制品正丁醇组 0.4g/kg 254.73±20.82 270.24±25.00
3.2 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松大鼠子
宫指数的影响
由表2可见,模型组动物子宫指数明显降低,阳
性药组和制品正丁醇组可使子宫指数明显增加。
表2 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质
疏松大鼠子宫指数的影响(n=10)
组别 剂量 子宫指数(mg/g)
假手术组 - 1.73±0.53
模型组 - 1.27±0.30*
阳性药组 1.5mg/kg 1.64±0.32#
生品正丁醇组 0.4g/kg 1.40±0.49
制品正丁醇组 0.4g/kg 1.71±0.29#
注 :与空白对照组相比,*P<0.05 ;与模型组相比,
#P<0.05。
3.3 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松大鼠血
清碱性磷酸酶的影响
由表3可见,模型组动物血清碱性磷酸酶水平
明显升高,制品正丁醇组可使碱性磷酸酶水平明显
降低。
表3 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松
大鼠血清碱性磷酸酶的影响(n=10)
组别 剂量 碱性磷酸酶(金氏单位/100mL)
假手术组 - 15.46±7.40
模型组 - 23.13±7.36*
阳性药组 1.5mg/kg 17.64±10.14
生品正丁醇组 0.4g/kg 22.56±12.72
制品正丁醇组 0.4g/kg 14.63±6.31#
注 :与空白对照组相比,*P<0.05 ;与模型组相比,
#P<0.05。
3.4 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松大鼠骨
密度的影响
由表4可见,模型组动物骨皮质及骨松质密度
均明显降低,阳性药组、制品正丁醇组可逆转这一趋
势,其它各组变化不明显。
表4 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松
大鼠骨密度的影响(g/cm2,n=10)
组别 剂量 骨皮质密度 骨松质密度
假手术组 - 0.28±0.02 0.19±0.03
模型组 - 0.23±0.04* 0.14±0.05*
阳性药组 1.5mg/kg 0.30±0.03# 0.20±0.03#
生品正丁醇组 0.4g/kg 0.27±0.05 0.20±0.02
制品正丁醇组 0.4g/kg 0.28±0.03# 0.21±0.05#
注 :与空白对照组相比,*P<0.05 ;与模型组相比,
#P<0.05。
3.5 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松大鼠股
骨生物力学的影响
结果表明,模型组动物生物力学指针最大载荷
和弹性模量明显降低,阳性药组、制品正丁醇组可对
抗这一作用,其它各组变化不明显。见表5。
表5 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松
大鼠股骨生物力学的影响(n=10)
组别 剂量 最大载荷Fb(N)弹性模量E(MPa)
空白对照 - 102.59±14.64 5236.68±2499.01
模型组 - 94.99±16.65* 3422.68±1581.07
阳性药组 1.5mg/kg 103.06±14.65# 3229.59±1771.23
生品正丁醇组 0.4g/kg 114.63±14.77 3235.83±1452.44
制品正丁醇组 0.4g/kg 125.57±17.70# 4474.30±1772.87
注 :与空白对照组相比,*P<0.05 ;与模型组相比,
#P<0.05。
3.6 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松大鼠股
骨钙离子水平的影响
结果表明,模型组动物股骨中钙离子含量明显
降低,阳性药组可使骨钙含量明显升高,制品正丁醇
组亦有增加骨钙的趋势,但无统计学意义。其它各
组变化不明显。见表6。
表6 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松
大鼠股骨钙离子水平的影响(n=10)
组别 剂量 Ca2+(g/kg)
空白对照组 - 0.7319±0.0615
模型组 - 0.4818±0.1780*
阳性药组 1.5mg/kg 0.7122±0.3443#
生品正丁醇组 0.4g/kg 0.5324±0.0831
制品正丁醇组 0.4g/kg 0.3371±0.1555
注 :与空白对照组相比,*P<0.05 ;与模型组相比,
#P<0.05。
37
1 4 卷 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
3.7 狗脊生、制品正丁醇提取物对骨质疏松大鼠病
理组织学的影响
胫骨脱钙切片显示模型组大鼠松质骨破坏明
显,骨小梁断裂,不连续,骨髓腔增大,骨质疏松大鼠
骨小梁厚度和骨小梁相对体积均减少,皮质骨平均
厚度变薄,表明存在骨丢失。阳性药对照组及制品
正丁醇组骨小梁排列相对整齐、规则,连续性相对较
好(见图1~5)。
图1 正常组(40×)正常大鼠胫骨脱钙切片
图2 模型组(40×)松质骨破坏明显,骨小梁断裂,不连
续,骨髓腔增大,骨质疏松大鼠骨小梁厚度和骨小梁相
对体积均减少,皮质骨平均厚度变薄,表明存在骨丢失
图3 阳性药组(40×)骨小梁排列相
对整齐、规则,连续性相对较好
图4 生品正丁醇组(40×)骨小梁排列
相对整齐、规则,连续性相对较好
图5 制品正丁醇组(40×)骨小梁排列
相对整齐、规则,连续性相对较好
4 讨 论
骨质疏松是一种以骨量减少,骨组织的微结构
破坏,骨骼的脆性增加和易发生骨折为特征的全身
性代谢性骨骼疾病[1]。随着科学研究的进展,大量
的资料表明骨量并不能完全解释骨质疏松性骨折的
发生。
中医古籍中没有记载骨质疏松这一病名,但
与之相应的疾病症状描述散见于历代医书中。现
今中医将该病归为“骨瘘”、“骨庳”、“肾亏”或“腰
背痛”范畴。总结历代医家所论,该病的发生与肾
的关系密切,并提出“肾主骨”之说来源于长期临
床实践,属于中医整体观念范畴,是指以“肾”为
中心,阐明肾与骨的生理病理关系,是以“肾主骨”
的理论为指导,研究有关骨骼疾病的病因病机、诊
断和辨证论治的系统,是中医骨伤科的重要内容
之一。
“肾主骨”学说指出 :骨骼生长、发育、修复、衰
老等都与肾的精气盛衰密切相关。这一观点为现代
医学所证实,说明“肾主骨”是有科学依据的客观规
律。所以从“肾主骨”角度来看,绝大多数的骨与关
节疾患在其病程的一定阶段都与肾有着直接或间接
的联系[2]。
中医指出,骨质疏松症病位在肾,与脾、肝、胃
等脏腑有关。肾主生殖、主骨、生骨髓,肾精充足则
骨髓生化有源,骨得髓的充分滋养而坚固有力,反
38
第 1 4卷 第 1 0 期
2012 年 10 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 14 No. 10
Oct .,2012
之,肾虚则骨质生成不足,因此骨的生长和重建与肾
密切相关,肾虚是该病的主要病机。
根据上述骨质疏松的病因病机,目前中医治疗
骨质疏松有三大原则,即肝肾或脾肾同治,经血同
补,气血并重。根据患者的症状和体征,中医把骨质
疏松辨证分为肝肾阴虚、肾阳虚弱、气血两虚、气血
瘀滞等,治疗上以滋补肝肾、填精补髓、温补肾阳、强
筋健骨为主,辅以益气养血,祛风散寒除湿,通络止
痛[3-4]。因此,中医防治骨质疏松症多从补肾入手。
补肾中药具有促进成骨细胞、抑制破骨细胞功能的
双向调节作用,促进骨折愈合[5]。
骨质疏松的临床分为肾虚肝弱、禀赋不足、脾
虚血少、气滞血瘀等类型,治疗时除注重补益肝脾
肾三脏外,还应加强活血通络止痛。中医临床治疗
OP多为辨证论治、分型论治或以补肾为基础加减
论治。
研究结果表明,狗脊生、制品正丁醇提取物能
够提高卵巢去势大鼠的子宫指数、降低其血清碱性
磷酸酶的水平、提高其骨皮质和骨松质的密度、提高
其骨生物力学指标、使骨小梁排列更整齐以及连续
性更好。体现了狗脊生、制品的正丁醇提取物对骨
质疏松症具有治疗作用。◆
参考文献
[ 1 ] 刘忠厚.骨质疏松学[ M ] .北京 :科学技术出版社,1998 :142.
[ 2 ] 郭建安,赵清巨,袁纯峰.“肾主骨”学说的基本内容[ M ] . 北
京 :科学技术文献出版社,2001 :276-280.
[ 3 ] 赵伟业,董碧蓉.骨质疏松症的预防和治疗进展[ J ] .中国骨
质疏松杂志,2003,9 ( 1 ) :80-83.
[ 4 ] Lekgabe ED,Royce SE,Hewitson TD,et al The Effects of Relaxin
and Estrogen Deficiency on Collagen Deposition and Hypertrophy
of Non-reproductive Organs [ J ] .Endocrinology(SOO13-7227),
2006,147 ( 12 ) :5575-5583.
[ 5 ] 汤耿民,沈霖,方肇年,等.中药促进骨折愈合疗效机理研究新
进展[ J ] .中国中医骨伤科杂志,2000,8 ( 4 ) :56-58.
子宫内膜异位症与中医体质类型相关性研究
周英1,曹佳佳2
(1.广州中医药大学第一附属医院,广东 广州 510405 ;2.广州市花都区第二人民医院,广东 广州 510805)
摘 要:目的:研究子宫内膜异位症患者的体质偏颇,总结其特殊体质类型,从而为子宫内膜异位症的预防和
个体化诊疗提供依据。方法:运用中医体质调查量表对子宫内膜异位症患者及正常健康女性进行调查,按中医体质
分类与判定标准进行体质判定,应用SPSS17.0统计软件统计分析。结果:子宫内膜异位症患者与正常健康女性体质
类型分布相比较发现,两组人群在体质分布构成比上有统计学差异。病例组两种偏颇体质的血瘀质、湿热质、血瘀-
湿热质3组间无统计学差异。结论:子宫内膜异位症的发病为生育期女性。临床上各种表现之内异症,其体质虽略
不同,但总体分布基本一致。内异症患者存在体质偏颇,与血瘀质、湿热质具有相关性。
关键词:子宫内膜异位症;中医体质;中医体质调查量表;血瘀质;湿热质
中图分类号:R711.71 文献标识码:A 文章编号:1673-842X (2012) 10- 0038- 03
收稿日期:2012-04-21
基金项目:广东省科技计划项目(2010B030700040)
作者简介:周英(1972-),女,重庆人,副教授、副主任医师,博士,研究方向 :中西医结合治疗妇科疾病。
Research on the Relationship Between Endometriosis and the Chinese Medicine Constitutions
ZHOU Ying1,CAO Jia-jia2
(1.The First Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine,
Guangzhou 510405,Guangdong,China ;2.The Second Peoples Hospital of Huadu
District in Guangzhou,Guangzhou 510805,Guangdong,China)
Abstract :Objectives :To investigate the constitutional type of the women suffering from endometriosis
(EM)and normal women and conclude its special physical types,so as to prevent endometriosis and
provide the basis for individualized treatment. Methods :The physical scale was used to investigate the
endometriosis patients and normal healthy females,the system decision criteria was according to the
determined constitutional type,then statistical software SPSS17.0 was used to analyze the data. Results :It
has significant differences in structures between the two groups :EM patients and normal women.There was
no statistical differences among the three groups :blood-stasis type,dampness-heat type,blood-stasis and
dampness-heat. Conclusions :The stage of EM patients is the reproductive period. The incidence of EM is
related to blood-stasis type and dampness-heat type.
Key words :endometriosis(EM);Chinese medicine constitutional type ;questionnaire scales of
Chinese constitution ;blood-stasis type ;dampness-heat type