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大叶黄杨和白丁香提取物对7种植物病原菌的抑制作用研究



全 文 :森林保护 Forest Protection
38  PRACTICAL FORES TRY TECHNOLOGY
二★一一年第七期 林业实用技术
大叶黄杨和白丁香提取物对 7种植物
病原菌的抑制作用研究
杨航宇1  刘艳梅2
(1.甘肃林业职业技术学院林业工程系 甘肃 天水 741020;
2.天水师范学院生命科学与化学学院 甘肃 天水 741001)
[ 摘要]  以串珠镰刀菌 、瓜果腐霉等 7 种病原菌为供试真菌 ,
用生长速率法和菌丝干重法对白丁香和大叶黄杨提取物的离
体活性进行测定。结果表明:在供试质量浓度为 0.1 g/ m L时 ,
白丁香乙醇提取液对 7 种供试病原菌菌落和菌丝生长量的抑
制作用强 , 抑菌率分别在 60%和 79%以上。大叶黄杨乙醇提
取液对 7 种病原菌菌落和菌丝生长量的的抑制作用较强 ,抑制
率分别在 55%和 58%以上。
[ 关键词]  白丁香 大叶黄杨 提取物 抑菌作用 真菌
在植物中寻找生物活性物质或直接开发植物性农药 ,是当
今农药研究领域的热点之一 , 张国珍等从药用植物中筛选出一
批对植物病原真菌有较强抑制作用的挥发油[ 1] 。孟昭礼等对
银杏的研究较为深入 , 成功地开发出了农用杀菌剂“银泰” 和
“绿帝”系列[ 2-5] 。吴恭谦等研究表明 , 白头翁素对禾谷镰刀菌
的抑制作用强烈[ 6] 。冯俊涛对来自西北地区的 187 种植物样
品的抑制活性作了较为系统的初步筛选[ 7] 。据统计 , 我国约有
高等植物 3 000 余种 ,其中有很多具有杀虫或者抑菌活性。 主
要集中在菊科 、豆科 、伞形科 、虎耳草科 、瑞香科 、大戟科 、禾本
科 、石榴科 、蓼科 、马钱科 、桑科等十几个科。近年来西北农林
科技大学和华南农业大学对孜然 、大花金挖耳 、小花假泽兰 、无
名精 、猪毛蒿 、苦豆子 、狼毒 、大戟 、苦参 、苦皮藤 、臭蒿等十几种
植物的抑菌活性进行了研究 ,获得了较好的效果[ 8] , 但前人的
研究主要集中在杂草中寻找生物活性物质 ,本研究对两种常见
木本植物提取物的抑菌活性进行研究。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试菌种 串珠镰刀菌(Fusari um moni li forme)、瓜
果腐霉(Py thium aphanidermatum)、禾谷镰刀菌(Fusarium
graminearum)、细交链格孢(A lternaria alternata)、致病疫霉
(Phy tophthora in f estans)、尖孢镰刀菌(F usarium oxy spo-
rum)、仁果丛梗孢(Monilia f ructigena), 以上菌种均由天水师
范学院生物工程实验室提供。
1.1.2 供试植物 将在天水师范学院校园内采回的白丁香(Sy-
ringa oblata var.affinis)和大叶黄杨(Euonymus japonzcus Thunb)
作者简介:杨航宇(1978-),讲师 ,硕士 ,主要从事生物防治的教学
和研究。
通讯作者:刘艳梅
在阴凉处晾干 ,粉碎后过 40目筛(d=0.37 mm)后密封 ,置于 4 ℃
冰箱中保存备用。
1.2 方法
1.2.1 样品的制备 取粉碎后的 2 种植物样品各 20 g ,室温
下分别用乙醇和丙酮提取 , 用冷浸振荡提取 3 次 , 提取时间分
别为 3、2、1 d , 合并滤液 ,浓缩至1 g/ mL ,移装于 20 mL 具塞刻
度试管中 ,加塞封口 , 在 4 ℃冰箱中保存备用。
1.2.2 生物活性测定 采用生长速率法和菌丝干重法[ 9] 分别
测定 2 种植物对供试菌菌落和菌丝生长的抑制作用 , 重复 3
次 ,取平均值 , 计算出抑菌率。
2 结果与分析
2.1 乙醇提取物对病原菌菌落生长的抑制作用
采用生长速率法测定白丁香和大叶黄杨乙醇提取物对 7
种植物病原菌菌落生长的抑制作用。结果表明:2 种植物乙醇
提取物对 7 种植物病原菌菌落生长均有较强的抑制作用 , 其中
白丁香的提取物抑菌效果优于大叶黄杨提取物。 可见 ,不同植
物样品对同一菌种的抑制活性差异较大 ,同一植物样品对不同
菌种的活性也存在显著差异(见表 1)。
表 1 乙醇提取物对 7种植物病原菌菌落生长影响
供试菌种 大叶黄杨 白丁香菌落直径/mm 抑制率/% 菌落直径/mm 抑制率/ %
串珠镰刀菌 10.5 65.18a 11.2 61.61b
瓜果腐霉 9.3 73.33a 10.8 65.83b
禾谷镰刀菌 13.5 64.15a 13.7 63.52b
细交链格孢 10.7 76.61a 14.5 63.16b
致病疫霉 12.2 55.45b 9.8 68.18a
尖孢镰刀菌 18.8 64.54a 17.8 66.93a
仁果丛梗孢 19.2 63.31b 15.7 71.77a
由表 1可见 , 在供试质量浓度为 0.1 g/m L时 , 白丁香乙醇
提取物对7 种病原菌菌落生长的抑制作用强 ,抑制率均在 61%
以上。其中对仁果丛梗孢 、致病疫霉和尖孢镰刀菌菌落生长的
抑制率较高 ,分别为 71.77%、68.18%和 66.93%, 与其他供试
菌种差异显著;对瓜果腐霉、禾谷镰刀菌 、细交链格孢菌落生长
的抑制率次之, 分别为 65.83%、63.52%和 63.16%, 对串珠镰刀
菌最低为 61.61%。大叶黄杨乙醇提取物对 7 种病原菌的抑制
率稍低于白丁香乙醇提取物 ,其中对细交链格孢菌落生长的抑
制率最高 ,为 76.61%;对瓜果腐霉 、串珠镰刀菌 、尖孢镰刀菌 、禾
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二★一一年第七期 林业实用技术
谷镰刀菌菌落生长的抑制率次之 , 分别为 73.33%、65.18%、
64.54%和 64.15%,对仁果丛梗孢和致病疫霉菌落生长抑制率
最低 ,分别为 63.31%和 55.45%, 与其他供试菌种差异显著。
2.2 丙酮提取物对病原菌菌落生长的抑制作用
采用生长速率法测定两种植物丙酮提取物对 7 种植物病
原菌菌落生长的抑制作用。结果表明:白丁香和大叶黄杨丙酮
提取物对 7 种植物病原菌菌落生长的抑制作用较差 , 而且 , 不
同植物样品对同一菌种的抑制活性差异较大 ,同一植物样品对
不同菌种的活性也存在显著差异(见表 2)。
表 2 丙酮提取物对 7种植物病原菌菌落生长影响
供试菌种 大叶黄杨 白丁香菌落直径/mm 抑制率/ % 菌落直径/mm 抑制率/ %
串珠镰刀菌 18.7 18.52b 19.7 12.96b
瓜果腐霉 22.0 51.57a 31.7 25.56a
禾谷镰刀菌 37.3 2.44b 28.0 29.76a
细交链格孢 38.0 20.31b 35.5 26.17a
致病疫霉 39.3 12.76b 34.2 25.51a
尖孢镰刀菌 42.8 14.02b 38.5 23.62a
仁果丛梗孢 50.7 8.50b 41.0 27.45a
从表 2 可以看出:在供试质量浓度为 0.1 g/m L 时 , 2 种提
取液对 7 种植物病原菌菌落生长的抑制作用较差。除大叶黄
杨对瓜果腐霉的抑制率为 51.57%之外 , 其它均较差。 显然 ,
在抑菌方面 , 乙醇提取效果优于丙酮 , 故选用乙醇作为提取剂
效果更好。
2.3 大叶黄杨和白丁香乙醇提取物对病原菌菌丝生长量抑制
作用
采用菌丝干重法测定白丁香和大叶黄杨乙醇提取物对 7 种
植物病原菌菌丝生长量的抑制作用。结果表明:白丁香和大叶
黄杨乙醇提取物对 7 种植物病原菌菌丝生长量均有较强的抑制
作用 ,其中白丁香乙醇提取物抑菌效果优于大叶黄杨乙醇提取
物抑菌效果。可见 ,不同植物样品对同一菌种的抑制活性差异
较大,同一植物样品对不同菌种的活性也存在显著差异(见表 3)。
表 3 两种植物乙醇提取物对 7种植物病原菌菌丝生长量影响
供试菌种 大叶黄杨 白丁香菌丝质量/m g 抑制率/ % 菌丝质量/mg 抑制率/ %
仁果从梗孢
致病疫霉
瓜果腐霉
禾谷镰刀菌
尖孢镰刀菌
细交链格孢
串珠镰刀菌
0.030 7
0.006 9
0.071 5
0.018 4
0.048 3
0.021 8
0.054 3
74.43 a
58.47 b
61.45 b
79.61 a
76.65 a
82.80 a
78.91 a
0.017 9
0.010 2
0.023 4
0.067 5
0.030 1
0.072 0
0.053 7
95.79 a
95.03 a
87.39 b
86.37 b
82.30 b
81.6 b
79.16 b
由表 3 可知 , 在供试质量浓度为 0.1 g/ mL 时 ,两种植物乙
醇提取物对 7种病原菌菌丝生长量有明显的抑制作用。白丁
香乙醇提取物抑制效果好 ,对 7 种病原菌的抑制率均达到 80%
以上 , 其中对仁果丛梗孢和致病疫霉菌丝生长量的抑制率高达
95.79%和 95.03%,与其他供试菌种差异显著。对瓜果腐霉 、
禾谷镰刀菌 、尖孢镰刀菌 、细交链格孢菌丝生长量的抑制率次
之 ,分别为 87.39%、86.37%、82.3%和 81.6%,对串珠镰刀菌
菌丝生长量的抑制率最低 , 为 79.16%。大叶黄杨乙醇提取物
对菌丝生长量的抑制率也较高 , 其中对细交链格孢 、禾谷镰刀
菌 、串珠镰刀菌 、尖孢镰刀菌 、仁果从梗孢菌丝生长量的抑制率
高 ,分别为 82.80%、79.61%、78.91%、76.65%和 74.43%, 与
其他供试菌种差异显著 , 对致病疫霉菌丝生长量的抑制率最
低。显然 ,菌丝干重法与生长速率法测定的结果基本一致 , 因
而在测定植物提取物对于病原菌的抑制作用时 , 这两种方法都
是可以选用的。
3 小结与讨论
(1)试验结果表明 , 大叶黄杨和白丁香进行抑菌活性 , 乙
醇作为提取剂的抑菌效果(60%以上)优于丙酮(30%以下)。
因此 ,对这 2 种植物进行抑菌活性测定时 , 应采用乙醇作为提
取剂。
(2)大叶黄杨和白丁香的乙醇和丙酮提取物对 7 种供试病
原菌生物活性的测试结果表明 ,白丁香乙醇提取物对供试菌菌
落和菌丝生长量抑制作用强 ,抑菌率分别在 60%和 79%以上。
大叶黄杨乙醇提取液对 7 种供试病原菌菌落和菌丝生长量的的
抑制作用较强 ,抑菌率分别在 55%和 58%以上。说明这 2 种
植物所含活性物质的抑制活性较强或含量较高 , 有必要对其有
效成分进行深入研究与分析 ,为开发植物源农药奠定基础。
(3)本试验中用粗提取物进行测试 , 若进一步纯化精提 ,其
杀菌活性可能会进一步提高;试验仅通过生长速率法和菌丝干
重法进行了粗提物的离体活性测定 , 其在活体植物上对病原菌
的活性及对寄主本身的影响还需要进一步研究。
参考文献:
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