全 文 ：·100· Chinese Journal of Information on TCM Oct.2016 Vol.23 No.10
对照品法和对照提取物法测定岗松油中α-蒎烯、β-蒎烯、
桉油精和芳樟醇含量比较分析
罗轶，白桂昌，陆敏仪
广西壮族自治区食品药品检验所，广西 南宁 530021
摘要：目的 分别用对照品法和对照提取物法测定岗松油中 α-蒎烯、β-蒎烯、桉油精和芳樟醇的含量，探
讨选择对照提取物替代单体对照品测定岗松油含量的可行性。方法 采用 DB-5 气相毛细管色谱柱（60 m×
0.25 mm×0.25 µm）；程序升温：起始温度 80 ℃，保持 15 min，1 ℃/min 升至 90 ℃，保持 2 min，10 ℃/min
升至 110 ℃，25 ℃/min 升至 240 ℃，保持 8 min；进样口温度 250 ℃；检测器温度 250 ℃。结果 α-蒎烯、
β-蒎烯、桉油精和芳樟醇在各自的浓度范围内均有良好的线性关系（r≥0.999），平均回收率为 96.5%～102.2%；
t 检验表明 2 种测定方法得出的含量结果无明显差异。结论 对照提取物法可用于岗松油的质量评价。
关键词：对照品法；对照提取物法；气相色谱法；岗松油；α-蒎烯；β-蒎烯；桉油精；芳樟醇；含量测定
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.10.023
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2016)10-0100-04
Comparative Analysis on Simultaneous Determination of α-pinene, β-pinene, Eucalyptol and
Linalool in Baeckea Frutescens Preparations by Reference Substances Method and
Reference Extract Method LUO Yi, BAI Gui-chang, LU Min-yi (Guangxi Institute for Food and Drug
Control, Nanning 530021, China)
Abstract: Objective To determinate the contents of α-pinene, β-pinene, eucalyptol and linalool in Baeckea
frutescens by reference substances method and reference extract method respectively; To explore the feasibility of
replacing single component reference by control extracts in assay. Methods The GC system consisted of a quartz
column DB-5 (60 m×0.25 mm×0.25 µm); The temperature programming rose from 80 ℃ (15 min) to 90 ℃ by
1 ℃/min, lasting 2 min, then 10 ℃/min to 110 ℃, then 25 ℃/min to 240 ℃, lasting 8 min in the end; The
temperature of the entrance of capillary vessel column was 250 ℃, and the temperature of the detector was 250 ℃.
Results α-pinene, β-pinene, eucalyptol and linalool were in a good linear relationship within each concentration scope
(r≥0.999). The average recovery rates were in the range of 96.5%–102.2%. The results of t-test demonstrated that
there is no significant difference between the two methods. Conclusion The reference extract method can be used as a
quality evaluation pattern for Baeckea frutescens.
Key words: reference substances method; reference extract method; gas phase chromatography; Baeckea
frutescens; α-pinene; β-pinene; eucalyptol; linalool; content determination

多成分含量测定法逐渐成为中药质量控制的趋
势。由于中药成分复杂，从药材中提取、分离、制备
对照品对分离及制备技术要求很高，从而导致对照品
供应困难，也不利于检验成本控制，且部分对照品的
稳定性差，难以解决储存和运输等问题。为减少单体
中药化学对照品的使用，“一测多评”的含量测定方
法在一定程度上解决了中药对照品短缺的问题，现已
在多种中药的多成分定量分析和多指标质量控制中
得到应用[1-3]，但此方法的实用性和耐用性存在一些
问题[4]。开发标定多个单体成分含量的对照提取物是
解决中药化学对照品短缺问题的一个好方法[5-6]。
岗松油为桃金娘科植物岗松 Baeckea frotescens L.
的枝叶经水蒸气蒸馏提取的挥发油，其质量标准收载
于广西壮族自治区《壮药质量标准》第一卷，在医药
及香精香料等领域具有较广泛的应用。目前该品种的
地方标准含量测定项只有桉油精和芳樟醇 2个检测指
标[7]，难以控制本品的内在质量。本研究建立对照提
取物法测定岗松油中 α-蒎烯、β-蒎烯、桉油精和芳樟
醇的含量测定方法，并与传统的外标对照品法进行比
较，以进一步完善岗松油的质量标准。
2016 年 10
1 仪器与试
美国安
氢火焰离子
TOLEDO X
药品检定研
β-蒎烯对照
99.5%），桉
含量测定用
国食品药品
批号 11503
蒎烯 9.17%
8.13%）；岗
黄清泉药师
frotescens L
西源安堂药
2 方法与结
2.1 色谱条
色谱柱
内径 0.25 m
柱温为程序
1 ℃ /min 速
10 ℃/min
240 ℃，保
度 250 ℃；
色谱图见图
注：A.混
图 1 岗
2.2 对照提
取净选
气蒸馏 2 h
得岗松油对
2.3 对照溶
2.3.1 对照
烯、桉油精
定，加无水乙
β-蒎烯对照
5 10
月第 23 卷
药
捷伦公司 A
化检测器
S205电子天
究院，含量测
品（Chem
油精对照品
，批号 11078
检定研究院
-201302）；
，β-蒎烯 9.
松药材经广西
鉴定，为
.带有花果的
业有限公司
果
件
：DB-5气相
m，膜厚 0.
升温：初始
率升温至
速率升温至
持 8 min；进
分流进样，
1。
合对照品；B.岗
1. α-蒎烯；2. β-蒎
松油中 α-蒎烯、
取物的制备
后的岗松枝
，静置，分取
照提取物。
液制备
品溶液制备
和芳樟醇对
醇制成每 1
品 0.3 mg、桉
15
1 2
第 10 期
gilent 6890N
（ FID）；
平。α-蒎烯对
定用，批号
Service，批
（中国食品
8-201105），
，含量测定用
岗松油对照提
38%，桉油精
壮族自治区
桃金娘科植
枝叶；28 批
提供；无水
毛细管色谱
25 µm）；流
温度 80 ℃，
90 ℃，保
110 ℃，2
样口温度 2
分流比 10∶
松油对照提取物；
烯；3.桉油精；
β-蒎烯、桉油精

叶药材，加水
油层，封装

分别精密
照品适量，精
mL含 α-蒎
油精对照品
20 25
3

型气相色谱
瑞士 MET
照品（中国
110897-200
号 207500，
药品检定研究
芳樟醇对照
，含量 98
取物（自标
8.13%，芳
食品药品检
物岗松 Ba
岗松油样品
乙醇为分析纯
柱（柱长 6
速：1.0 mL/
保持 15 mi
持 2 min，
5 ℃/min 升
50 ℃；检测
1；进样量
C.岗松油样品；
4.芳樟醇
、芳樟醇 GC图
10 倍量，
于安瓿瓶中
取 α-蒎烯、
密称定，精
烯对照品 0.
0.4 mg、芳
30 3
4 A
B
C
中国中医药
仪，
TLER
食品
502），
含量
院，
品（中
.5%，
，α-
樟醇
验所
eckea
由广
。
0 m，
min；
n，以
再以
温至
器温
1 µL。


水蒸
，即
β-蒎
密称
3 mg、
樟醇
对
2.
提
释
2.

乙
2.
2.
烯
使
27
稀
置
摇
量
精
液
置
作
2.0
稀
精
50
混
品
横
归
β-蒎
桉
醇
2.
油
20
度
上
横
回
r＝
r＝
r＝
r＝
2.

t/min5
信息杂志
照品 0.4 mg
3.2 对照提
取物 0.2 g，
至刻度，摇
4 供试品溶
精密称取
醇溶解稀释
5 线性关系
5.1 单一对
对照品 261.
溶解并稀释
0.15 mg，置
释至刻度，摇
10 mL量瓶
匀；精密称
瓶中，加无水
密吸取上述
、桉油精对照
同一 10 mL
为混合对照
mL，分别
释至刻度，摇
密吸取混合
mL量瓶中，
合对照品溶
溶液①～⑦
坐标，峰面积
方程：α-蒎烯
烯 Y＝1.82
油精 Y＝1.5
Y＝1.532 8×
5.2 对照提
对照提取物
16.10 mg，分
，摇匀，作为
述对照提取
坐标，峰面积
归方程：α-蒎
0.999 8；β-
0.999 8；桉
0.999 6；芳
0.999 8。
6 精密度试
取同一份

的混合溶液
取物溶液制
置 50 mL量
匀，即得。
液制备
本品 0.2 g，
至刻度，摇匀
考察
照品标准曲
12 mg，置 1
至刻度，摇匀
10 mL量瓶
匀；精密称取
中，加无水
取芳樟醇对照
乙醇使溶解
α-蒎烯对照
品溶液及芳
量瓶中，加无
品溶液①。精
置 5、10、2
匀，作为混
对照品溶液④
加无水乙醇
液⑤、⑥、⑦
，进样 1 μL
积分值为纵
Y＝1.725 6
7 2×103X＋
56 9×103X＋
103X＋13.4
取物标准曲
10.40、55.35
别置 50 mL
对照提取物
物溶液，进样
积分值为纵
烯 Y＝1.69
蒎烯 Y＝1.7
油精 Y＝1.5
樟醇 Y＝1.5
验
供试品溶液

，即得。
备 精密称
瓶中，加无
置 50 mL量
，即得。
线的制备
0 mL量瓶中
：精密称取
中，加无水
桉油精对照
乙醇使溶解并
品 267.08
并稀释至刻
品溶液、β
樟醇对照品
水乙醇稀释
密吸取混合
0 mL量瓶中
合对照品溶
2.0 mL，分
稀释至刻度
。分别精密
，测定。以对
坐标，绘制标
×103X＋11.1
12.326×10
81.778，r＝
01，r＝0.99
线的制备
、196.28、50
量瓶中，加
系列溶液。
1 μL，测定
坐标，绘制
0 1×106X－
95 1×106X－
93 8×106X－
97 0×106X－
（批号 2013
·10
取岗松油对
水乙醇溶解
瓶中，加无
精密称取 α
，加无水乙
β-蒎烯对照
乙醇使溶解
品 230.21 m
稀释至刻度
mg，置 10
度，摇匀；
-蒎烯对照品
溶液各 2 m
至刻度，摇匀
对照品溶液
，加无水乙
液②、③、④
别置 5、20
，摇匀，作
吸取混合对
照品进样量
准曲线，得
51，r＝1.000
，r＝1.000 0
1.000 0；芳
9 9。
精密称取岗
7.28、1009.
无水乙醇至
分别精密吸
。以进样量
标准曲线，
6.967 0×10
7.223 7×1
6.458 7×1
4.646 6×1
1129），连续
1·
照
稀
水
-蒎
醇
品
并
g，
，
mL
再
溶
L，
，
①
醇
；
、
为
照
为
回
0；
；
樟
松
16、
刻
取
为
得
4，
04，
04，
04，
测
·102· Chinese Journal of Information on TCM Oct.2016 Vol.23 No.10
定 6次，记录 α-蒎烯、β-蒎烯、桉油精和芳樟醇的峰
面积，结果 RSD分别为 0.57%、0.60%、0.67%、0.69%，
表明仪器的精密度良好。
2.7 稳定性试验
取同一份供试品溶液（批号 20131129），分别于
0、5、10、16、24、36 h进样，测定 α-蒎烯、β-蒎烯、
桉油精和芳樟醇的峰面积，结果 RSD分别为 0.97%、
0.77%、0.79%、0.72%，表明供试品溶液在 36 h内稳定。
2.8 重复性试验
取同一批样品（20131129）9份（0.1、0.2、0.4 g
各 3份），按“2.4”项下方法制成供试品溶液，按“2.1”
项下色谱条件测定。结果 α-蒎烯含量为 8.243 2%，
RSD＝2.51%；β-蒎烯含量为 7.585 0%，RSD＝2.96%；
桉油精含量为 10.252 6%，RSD＝1.30%；芳樟醇含量
为 7.438 4%，RSD＝1.66%。
2.9 加样回收率试验
2.9.1 对照品加样回收率试验 取已知含量的样品
（批号 20130711，α-蒎烯、β-蒎烯、桉油精和芳樟醇
含量分别为 9.299 8%、9.345 9%、8.322 6%、8.252 4%）
0.1 g，共 9份，分别精密加入 α-蒎烯、β-蒎烯、桉油
精和芳樟醇对照品溶液适量，按“2.4”项下方法操作，
并按“2.1”项下色谱条件测定，计算回收率。结果 α-
蒎烯平均加样回收率为 102.22%，RSD＝1.98%（n＝
9）；β-蒎烯平均加样回收率为 101.07%，RSD＝1.25%
（n＝9）；桉油精平均加样回收率为 101.34%，RSD＝
2.15%（n＝9）；芳樟醇平均加样回收率为 101.10%，
RSD＝2.18%（n＝9）。
2.9.2 对照提取物加样回收率试验 取已知含量的
样品（批号 20131129，α-蒎烯、β-蒎烯、桉油精和芳
樟醇的含量分别为 8.243 2%、7.585 0%、10.252 6%、
7.438 4%）0.1 g，共 9份，分别精密加入岗松油对照
提取物（批号 20130711）50、100、200 mg（各 3份），
按“2.4”项下方法操作，并按“2.1”项下色谱条件
测定，计算回收率。结果 α-蒎烯平均加样回收率为
97.65%，RSD＝2.19%（n＝9）；β-蒎烯平均加样回收
率为 97.20%，RSD＝1.66%（n＝9）；桉油精平均加
样回收率为 96.54%，RSD＝1.26%（n＝9）；芳樟醇
平均加样回收率为 98.09%，RSD＝1.11%（n＝9）。
2.10 对照品法和对照提取物法测定结果比较
取样品（批号 20131129），按 3个梯度 0.1、0.2、
0.4 g取样，每梯度取样 5份，采用对照品法及对照提
取物法同时进行测定，经 t 检验，除芳樟醇外，α-蒎
烯和 β-蒎烯总量（α-蒎烯和 β-蒎烯为同分异构体，可
合并计算）、桉油精测定的结果均存在明显差异，但 2
种方法测定结果 RSD值均小于 1.0%，表明差异较小，
认为采用对照提取物法代替对照品法测定是可行的。
2.11 样品测定
取不同批号样品，按“2.4”项下方法制成供试品
溶液，并按“2.1”项下色谱条件测定 α-蒎烯、β-蒎烯、
桉油精和芳樟醇的含量含量，结果见表 2。对测得的
数据进行 t检验，结果 α-蒎烯和 β-蒎烯总量、桉油精、
芳樟醇测定结果未见明显差异，且 2种方法测定结果
RSD 值均小于 4.0%，差异较小，可以采用对照提取
物替代对照品进行岗松油的质量控制。
表 1 对照品法和对照提取物法测定结果（%，n＝2）
编号 取样量/g
α-蒎烯和 β-蒎烯总量 桉油精含量 芳樟醇含量
对照品法 对照提取物法 RSD 对照品法 对照提取物法 RSD 对照品法 对照提取物法 RSD
1 0.125 1 18.12 17.83 0.81 7.95 7.85 0.66 7.76 7.81 0.34
2 0.109 3 18.45 18.15 0.82 8.07 7.97 0.66 7.88 7.93 0.34
3 0.105 2 18.57 18.27 0.81 8.11 8.00 0.66 7.91 7.96 0.34
4 0.111 8 18.42 18.12 0.82 8.06 7.95 0.66 7.93 7.99 0.34
5 0.107 7 18.48 18.18 0.82 8.11 8.01 0.66 7.93 7.99 0.34
6 0.200 7 18.46 18.16 0.82 8.14 8.03 0.66 7.98 8.03 0.34
7 0.199 2 18.51 18.21 0.82 8.11 8.01 0.66 7.94 7.99 0.34
8 0.216 6 18.45 18.15 0.82 8.11 8.01 0.66 7.96 8.01 0.34
9 0.217 0 18.59 18.29 0.81 8.18 8.07 0.66 8.03 8.08 0.34
10 0.234 7 18.81 18.50 0.83 8.22 8.12 0.66 8.07 8.13 0.34
11 0.416 8 18.37 18.07 0.82 8.17 8.06 0.66 8.06 8.12 0.34
12 0.412 6 18.55 18.25 0.82 8.10 7.99 0.66 7.95 8.00 0.34
13 0.422 2 18.57 18.27 0.81 8.14 8.03 0.66 8.00 8.06 0.34
14 0.416 0 18.52 18.22 0.82 8.12 8.01 0.66 7.98 8.03 0.34
15 0.399 8 18.61 18.31 0.81 8.18 8.07 0.66 8.03 8.08 0.34
平均值 18.50 18.20 8.12 8.01 7.96 8.01
标准差 0.15 0.14 0.06 0.06 0.08 0.08
2016 年 10 月第 23 卷第 10 期 中国中医药信息杂志 ·103·
表 2 样品含量测定结果（%，n＝2）
编号 批号
α-蒎烯和 β-蒎烯总量 桉油精含量 芳樟醇含量
对照品法 对照提取物法 RSD 对照品法 对照提取物法 RSD 对照品法 对照提取物法 RSD
1 20130427 28.69 28.58 0.19 17.90 17.71 0.53 8.82 8.75 0.39
2 20130711 18.50 18.56 0.16 8.12 8.14 0.12 7.96 8.14 1.12
3 20120702 7.90 7.69 1.35 12.08 11.72 1.51 9.31 8.79 2.87
4 20110308 23.65 23.59 0.13 10.50 10.82 1.50 10.09 9.96 0.65
5 20120403 16.13 16.98 2.57 8.91 9.35 2.43 8.19 8.62 2.56
6 20120814 7.58 7.50 0.53 10.38 10.69 1.47 8.01 7.91 0.63
7 20130715 11.87 11.80 0.30 8.05 8.30 1.53 8.31 8.20 0.67
8 20130923 21.10 22.25 2.65 8.43 8.93 2.88 9.10 9.58 2.57
9 20130924 19.39 19.33 0.15 9.11 9.49 2.04 9.91 9.78 0.66
10 20130925A 23.58 23.43 0.32 6.91 6.55 2.65 8.29 8.13 0.97
11 20131101 6.88 6.82 0.44 12.45 14.04 6.00 10.90 10.76 0.65
12 20131129 16.06 15.97 0.28 10.42 10.83 1.93 7.85 7.75 0.65
13 20131114 18.87 18.78 0.24 9.10 9.42 1.73 6.99 6.90 0.64
14 20131124 19.70 20.68 2.43 13.55 13.10 1.68 9.91 10.43 2.56
15 20131126 14.77 15.46 2.28 11.69 12.44 3.11 8.26 8.69 2.53
16 20131108 19.27 19.16 0.29 13.56 13.68 0.43 9.73 9.55 0.93
17 20130712 18.66 19.66 2.61 7.02 7.46 3.04 7.38 7.76 2.51
18 20130925B 24.69 24.59 0.20 7.99 8.25 1.60 9.10 8.98 0.66
19 20121201 9.62 10.12 2.53 30.00 31.79 2.90 5.11 5.38 2.57
20 20120104 11.26 11.83 2.47 10.91 11.57 2.94 6.67 7.02 2.55
21 20121102 6.21 6.51 2.36 7.54 7.85 2.02 8.26 8.69 2.55
22 20100111 9.99 10.44 2.20 10.48 11.11 2.92 7.71 8.11 2.55
23 20110218 14.32 15.05 2.49 10.87 11.52 2.90 8.60 9.05 2.55
24 20080922 10.53 10.51 0.10 7.10 7.50 2.74 3.01 2.98 0.50
25 20090213 14.11 14.04 0.25 11.62 11.97 1.48 9.72 9.59 0.67
26 20100414 22.22 23.31 2.39 11.83 12.55 2.95 8.45 8.90 2.59
27 20110614 20.31 21.39 2.59 8.46 8.97 2.93 6.54 6.88 2.53
28 20110615 21.35 21.21 0.33 9.74 9.35 2.07 8.76 8.60 0.92
平均值 16.33 16.62 10.88 11.25 8.25 8.35
标准差 6.05 6.10 4.47 4.71 1.60 1.56
3 讨论
本试验曾用 DB-5、WonderCap-5、SPB-5色谱柱
进行分离，结果不同品牌色谱柱的耐用性都很好；曾
用 Agilent6890A、岛津 2010-plus 气相色谱仪进行分
离，结果不同品牌的气相色谱仪耐用性都很好。供试
品曾分别用无水乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯
甲烷溶解后进样测定，结果得到的色谱图基本一致，
使用低毒的无水乙醇直接稀释样品，方法简单可行。
采用已标定各成分含量的对照提取物代替多个
化学对照品进行定量，具有简便、运行成本低的优点，
应用前景广阔。
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（收稿日期：2016-04-01）
（修回日期：2016-05-16；编辑：陈静）