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微毛诃子树皮提取液对大鼠离体子宫影响的研究



全 文 :诃子属于乔木类使君子科植物,国外主产于马
来西亚、印度、缅甸等国,我国云南有分布,主要分
布于临沧市和德宏傣族景颇族自治州〔1〕。文献报道
诃子具有抗菌、强心、抗氧化、抗肿瘤、抗过敏〔2-5〕和
抗病毒〔5〕等作用。我国民间诃子主要用于润肺、涩
肠、久咳、久泻、便血及尿频等〔6〕。在印度民间诃子
树皮粉用于治疗心力衰竭、冠心病、高血脂等疾病
取得较好效果〔7〕。临沧现已有企业将其开发成饮
料,但迄今为止对其缺少系统药理学研究,现有文
献也过多的局限于诃子原种的研究,尚未见对其变
种药理研究。本实验观察的是诃子的原种变种微毛
诃子(T.chebula Retz.var.tomentella(Kurz.)clarke.1.
c.)的醇提物和水提物对大鼠离体子宫自发性和非
自发性收缩活动的影响,并对其机制进行了初步探
讨,为其开发打下理论基础。
1 材料
1.1 药品及试剂 微毛诃子树皮(产地:云南省临
沧市孟定镇,由大理学院生药教研室张德全副教授
鉴定);NaCl、KCl、NaHCO3、CaCl2、95%乙醇、葡萄糖
均为市售分析纯;蒸馏水(自制);催产素(上海第一
生化药业有限公司生产,批号:06405);组胺(上海
丽珠东风生物制药,批号:1703)。
1.2 动物 SPF级SD雌性未孕大鼠,体重250~300 g,
由大理学院动物实验中心提供,合格证号:SCAXK
微毛诃子树皮提取液对大鼠离体子宫影响的研究
赖 泳,张 梅,李代航,尹品通,刘 勇,莽朝永
(大理学院药学与化学学院,云南大理 671000)
[摘要]目的:研究微毛诃子树皮醇提物和水提物对大鼠离体子宫平滑肌活动的影响。方法:观察微毛诃子树皮醇提液和水提液
对大鼠离体子宫平滑肌自发性收缩活动和催产素或组胺作用后子宫的影响。结果:微毛诃子树皮醇提液和水提液均可使大鼠自
发及催产素作用后子宫平滑肌收缩频率减慢,张力减小,活动力下降;水提液还显著减弱子宫收缩幅度并使组胺作用后的子宫
平滑肌张力增大,收缩频率加快,收缩幅度升高,活动力增强。结论:微毛诃子树皮的醇提物和水提物均能抑制大鼠子宫的自发
性以及催产素作用后的子宫的收缩活动,其水提液可以拮抗组胺对大鼠子宫收缩活动的抑制作用。
[关键词]微毛诃子树皮;催产素;组胺;大鼠离体子宫
[中图分类号]R285.5 [文献标志码]A [文章编号]1672-2345(2013)12-0001-04
Study of the Effect of Myrobalan Bark Extracts on Isolated Rat Uterus
LAI Yong, ZHANG Mei, LI Daihang, YIN Pintong, LIU Yong, MANG Chaoyong
(College of Pharmacy and Chemistry, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China)
〔Abstract〕Objective: To research the effect of extracts (water extract and alcohol extract form myrobalan)on isolated rat uterus.
Methods: Observe the influence of water extract and alcohol extract from myrobalan on the spontaneous contraction of isolated rat
uterus, and the isolated rat uterus after treated with oxytocin or histamine. Results: The contraction frequency, tension and motoricity
of isolated rat uterus decreased with water extract and alcohol extract form myrobalan; the contraction frequency of isolated rat uterus
significantly reduced with water extract of myrobalan; the water extract of myrobalan could increase the tension, the contraction
frequency and the contraction amplitude of isolated rat uterus after the rat was treated with histamine. Conclusion: The extracts
(water extract and alcohol extract form myrobalan) can inhibit the spontaneous contraction of isolated rat uterus, and it has the same
function after the rat was treated with oxytocin. Water extract of myrobalan can antagonize the contraction of isolated rat uterus after
the rat was treated with histamine.
〔Key words〕myrobalan bark; oxytocin; histamine; excised uterus of rats
[DOI]10. 3969 / j. issn. 1672-2345. 2013.12. 001
大理学院学报
JOURNALOFDALIUNIVERSITY
第12卷 第12期 2013年12月
Vol.12 No.12 Dec. 2013
1
(滇)2009-0006。
1.3 仪器 BL-420E+生物机能实验系统(成都泰
盟电子有限公司);HW-400恒温平滑肌浴槽(成都
泰盟电子有限公司)。
2 方法
2.1 提取液的制备 ①微毛诃子树皮水提取液:称
取微毛诃子树皮粗粉50 g,加蒸馏水500 mL浸泡过
夜,过滤。在滤渣中加入250 mL蒸馏水,置于60 ℃水
浴中加热10 min,趁热过滤,残渣再加250 mL蒸馏
水于60 ℃水浴中加热10 min,趁热过滤,合并两次滤
液,减压浓缩至每1 mL相当于生药量1.700 g。②诃
子树皮酸性乙醇醇提取液:称取诃子树皮粗粉40 g,
加0.5%的盐酸乙醇溶液140 mL,置于水浴中回流1 h,
趁热过滤,残渣再加0.5%的盐酸乙醇溶液140 mL,
置于水浴中回流1 h,趁热过滤,合并两次滤液,减
压浓缩至每1 mL相当于生药量0.63 g。③按参考文
献〔7-9〕方法配制戴雅隆氏液。
2.2 标本制备 实验用大鼠于实验前3天每日皮下
注射己烯雌酚0.1 mg/kg,人工促情以提高子宫对药
物的敏感性。实验时击头处死大鼠,开腹,迅速剪取
子宫置于4 ℃通有混合气(95%O2+5%CO2)饱和的戴
雅隆氏液中,并剔除子宫外膜脂肪和结缔组织,剪
成1.5~2 cm左右,待用〔10〕。
2.3 对大鼠正常离体子宫平滑肌运动的影响 调
整BL-420E+生物机能实验系统各项参数,恒温平滑
肌浴槽内温度保持为(37±0.5)℃。将标本放在盛有
20 mL戴雅隆氏液的恒温浴管中,上端连接拉力换
能器,下端系于L型钩上固定,同时通入混合气60~
80个气泡/min,标本负荷l g,平衡30 min,待标本稳
定后,开始实验〔11〕。
①先记录10 min正常子宫平滑肌收缩曲线,等
收缩波形呈稳定的正余弦曲线或稳定波形后向浴
槽中加入微毛诃子树皮醇提液0.05 mL或水提液
0.1 mL,记录给药后5 min子宫平滑肌收缩曲线,然
后停止实验,立即用新鲜戴雅隆氏液冲洗3次,重复
实验。观察并分别记录正常、加醇提液或水提液后
子宫张力、收缩的幅度和频率,并用统计学方法进
行给药前后自身对比分析〔12〕。
②先记录10 min正常子宫平滑肌收缩曲线,等
收缩波形呈稳定的正余弦曲线或稳定波形后向水
浴槽中加入催产素0.1 mL(1 mL∶0.5个单位),3 min
后加入诃子树皮醇提液0.05 mL或水提液0.1 mL,记
录给药后5 min子宫平滑肌收缩曲线,然后停止实
验,立即用新鲜戴雅隆氏液冲洗3次,重复实验。观
察并分别记录正常、加催产素和加醇提液或水提液
后子宫张力、收缩的幅度和频率,并用统计学方法
进行给药前后自身对比分析和组间对比分析。
③先描记10 min正常子宫平滑肌收缩曲线,等
收缩波形呈稳定的正余弦曲线或稳定波形后向水
浴槽中加入组胺(0.1%)0.2 mL,3 min后加入微毛诃
子树皮水提液0.1 mL,记录给药后5 min子宫平滑肌
收缩曲线,然后停止实验,立即用新鲜戴雅隆氏液
冲洗3次,重复实验。观察并分别记录正常、加组胺
和加水提液后子宫张力、收缩的幅度和频率,并用
统计学方法进行给药前后自身对比分析和组间对
比分析。
④实验数据均以x±s表示,样本均数比较用t检验,
P<0.05,P<0.01为差异具有统计学意义。
3 实验结果
3.1 微毛诃子树皮提取液对大鼠离体子宫平滑肌
的影响 与正常组相比,微毛诃子树皮醇提液可使
大鼠离体子宫平滑肌收缩频率减慢(P<0.05),张力
减小(P<0.05),活动力下降(P<0.05),对收缩幅度影
响较小,差异具有统计学意义;与正常组比,微毛诃
子树皮水提物可使大鼠离体子宫平滑肌收缩频率
减慢(P<0.05),张力显著减小(P<0.01),活动力显著
下降(P<0.01),收缩幅度显著减弱(P<0.01),差异具
有统计学意义。见表1。
3.2 微毛诃子树皮醇提物对催产素作用后的大鼠
离体子宫平滑肌收缩活动的影响 大鼠离体子宫
加入催产素后,子宫平滑肌张力显著增加(P<0.01),
收缩频率加快(P<0.05),活动力显著上升(P<0.01),
收缩幅度没有显著变化;微毛诃子树皮醇提液可使
催产素作用后的子宫平滑肌张力减小(P<0.05),收
缩频率显著减慢(P<0.01),收缩幅度显著降低(P<
0.01),活动力显著下降(P<0.01),差异具有统计学
意义。见表2。
3.3 微毛诃子树皮水提物对催产素作用后的大鼠
大理学院学报总第 120期 医学
2
注:与正常组比较※P<0.05;▲P<0.01。
表1 微毛诃子树皮对大鼠离体子宫平滑肌的自发收缩活动的影响(x±s,n=8)
组别 最大张力/g 频率/(次/10 min) 收缩幅度/g 活动力/(g·次/10 min)
正常组 7.71±3.87 6.5±2.34 6.76±1.78 54.00±35.21
加醇提液组 5.39±4.78※ 2.67±2.50※ 1.75±1.68 19.43±15.54※
加水提液组 4.62±0.98▲ 5.17±1.57※ 3.93±1.06▲ 25.38±3.81▲
4 讨论
微毛诃子树皮提取物对大鼠离体子宫平滑肌
的自发性收缩和催产素引起的非自发性收缩活动
均有显著性抑制作用,微毛诃子树皮水提液还对组
胺引起的大鼠离体子宫平滑肌舒张活动有抑制作
用。邬国栋等报道诃子提取液能明显抑制兔离体肠
入组胺后,子宫平滑肌张力减小(P<0.05),收缩频率
减慢(P<0.05),活动力下降(P<0.05),收缩幅度降低
(P<0.05);微毛诃子树皮水提液可使组胺作用后的
子宫平滑肌张力增大(P<0.05),收缩频率显著加快
(P<0.01),收缩幅度显著升高(P<0.05),活动力显著
增强(P<0.01),差异具有统计学意义。见表4。
离体子宫平滑肌收缩活动的影响 大鼠离体子宫
加入催产素后,子宫平滑肌张力显著增加(P<0.01),
收缩频率显著加快(P<0.01),活动力显著上升(P<
0.01),收缩幅度显著升高(P<0.01);微毛诃子树皮
水提液可使催产素作用后的子宫平滑肌张力显著
减小(P<0.01),收缩频率显著减慢(P<0.01),收缩幅
度降低(P<0.05),活动力显著下降(P<0.01),差异具
有统计学意义。见表3。
3.4 微毛诃子树皮水提液对组胺作用后的大鼠离
体子宫平滑肌收缩活动的影响 大鼠离体子宫加
组别 最大张力/g 频率/(次/10 min) 收缩幅度/g 活动力/(g·次/10 min)
正常组 3.59±1.75 8.18±1.47 2.69±1.96 28.70±14.98
加催产素组 5.71±2.24▲ 19.17±1.47▲ 4.26±2.32▲ 59.15±47.05▲
加水提液组 2.73±2.21◆ 6.33±1.63◆ 1.75±1.23■ 18.15±18.01◆
注:与正常组比较▲P<0.01;与催产素组比较■P<0.05;◆P<0.01。
注:与正常组比较※P<0.05;▲P<0.01;与加催产素组比较■P<0.05;◆P<0.01。
表2 微毛诃子树皮醇提物对催产素作用后的大鼠离体子宫平滑肌收缩活动的影响(x±s,n=10)
组别 最大张力/g 频率/(次/10 min) 收缩幅度/g 活动力/(g·次/10 min)
正常组 3.59±1.85 8.33±1.03 2.39±1.76 31.08±19.80
加催产素组 4.70±2.23▲ 18±1.41※ 2.56±1.52 86.21±46.34▲
加醇提液组 2.63±1.43■ 6.5±1.05◆ 0.74±0.51◆ 17.93±11.60◆
表3 微毛诃子树皮水提物对催产素作用后的大鼠离体子宫平滑肌收缩活动的影响(x±s,n=10)
注:与正常组比较※P<0.05;与加组胺组比较■P<0.05;◆P<0.01。
表4 微毛诃子树皮水提物对组胺作用后大鼠离体子宫平滑肌收缩活动的影响(x±s,n=10)
组别 最大张力/g 频率/(次/10 min) 收缩幅度/g 活动力(g·次/10 min)
正常组 6.68±2.05 8.83±1.07 6.60±1.92 59.13±19.46
加组胺组 2.74±1.62※ 7.00±1.0※ 2.88±1.43※ 18.55±11.00※
加水提液组 5.81±1.07■ 10.5±0.96◆ 5.79±0.97◆ 61.40±14.79◆
赖 泳,张 梅,李代航,等 微毛诃子树皮提取液对大鼠离体子宫影响的研究 第 12卷总第 120期
3
平滑肌的自发性收缩活动,但不知是哪种或哪几种
成分在发挥作用,还需要进一步分离纯化;同时诃
子提取液抑制肠平滑肌收缩活动是阻断M受体,还
是抑制钙离子内流或通过其他作用机制发挥作用,
还有待进一步进行深入研究〔11〕。本实验结果显示,
微毛诃子树皮醇提液可使大鼠离体子宫平滑肌收
缩频率显著减慢,张力减小,活动力下降,但对收缩
幅度影响较小;微毛诃子树皮水提液可使大鼠离体
子宫平滑肌收缩频率减慢,张力显著减小,活动力
显著下降,收缩幅度显著减弱;催产素可使大鼠离
体子宫平滑肌张力显著增大,收缩频率加快,活动
力显著上升,收缩幅度显著增强;微毛诃子树皮醇
提液可使催产素作用后的子宫平滑肌张力减小,收
缩频率显著减慢,活动力显著下降,差异具有统计
学意义,对收缩幅度影响较小,微毛诃子树皮水提
液可使催产素作用后的子宫平滑肌张力显著减小,
收缩频率显著减慢,收缩幅度降低,活动力显著下
降,差异具有统计学意义;组胺使大鼠离体子宫平
滑肌张力减小,收缩频率减慢,活动力下降,收缩幅
度降低;微毛诃子树皮水提液可使组胺作用后的子
宫平滑肌张力增大,收缩频率显著加快,收缩幅度
显著升高,活动力显著增强,差异具有统计学意义。
文献报道干燥诃子具有收敛、止泻、抗菌、强
心、抗氧化以及抗癌抗肿瘤等功效,在我国民间中
草药中有极广泛的应用,在蒙药、藏药中占有非常
重要的地位〔13〕。但是诃子树皮和诃子之间的化学
成分差异仍不明确,同时提取液成分复杂,不知是
哪种或哪几种成分在发挥作用,仍需要进一步分离
提取;本次实验发现微毛诃子树皮水提液对组胺引
起的大鼠离体子宫平滑肌舒张活动有抑制作用,所
以诃子树皮提取液对子宫平滑肌收缩活动的抑制
可能与H受体有关,也可能通过其他作用机制发挥
作用,具体还有待进一步进行深入研究,进而为中
药微毛诃子树皮的临床应用提供理论指导。
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[收稿日期]2013-08-28 [修回日期]2013-09-17
[作者简介]赖泳,教授,主要从事中药药理学、临床药理学
研究.
(责任编辑 李 杨)
大理学院学报总第 120期 医学
4