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倒根蓼对小鼠脾淋巴细胞花结形成的影响



全 文 :倒根蓼对小鼠脾淋巴细胞花结形成的影响
秦 禹
(通化师范学院生物系·通化·134002)
摘 要 通过化学方法提取鞣质和黄硐甙 , 用小鼠腹腔注射的方法 ,证明倒根蓼其抗菌 、
消炎和提高机体免疫力的作用。
关键词 倒根蓼 特异玫瑰花结 免疫力
  倒根蓼 ,多年生草本 ,高 10 ~ 40厘米 ,
分布于中国东北及苏联远东地区 ,喜生高
山带火山灰质石砾荒坡 ,一般春 、秋季采挖
后 ,洗净去须根 ,晒干即可 。
1 基本原理
淋巴细胞表面具有受体 ,可与不同种
动物的红细胞结合 ,形成玫瑰花瓣样的细
胞团 ,称为玫瑰花结(RFC),而此形成率的
高低 ,可反映机体细胞免疫机能的强弱 ,故
可作为药物影响免疫功能的指标之一。
2 实验材料
2.1 实验材料:小鼠 、绵羊
2.2 实验器材:显微镜 、扭力天平 、血球计
数器 、瓦氏管 、离心机 、刻度离心管等。
2.3 实验药品:倒根蓼水煎液 、Gey s 液 、
生理盐水 、小牛血清等。
3 实验方法
3.1 小鼠脾细胞悬液制备
取雄性小鼠 20只 ,随机分为倒根蓼组
和生理盐水组 。每鼠腹腔注射 5%绵羊红
细胞(SRBC)0.4ml(约 4 亿个 SRBC), 1 次
免疫后 ,接着按组分别以 0.4ml/20g 量给
水煎剂及生理盐水灌胃 ,每日 1次 ,连续 4
次 。末次给药后 1小时处死小鼠 ,取出脾
脏 ,按组分放 ,称重后放入平皿 ,剪成米粒
大小 ,用 Gey s液洗涤 3次 ,用吸管将脾小
粒移入瓦氏管捻转 ,使碎离成脾细胞。加
入 pH为 7.6的 Gey s液 2ml混匀 ,以细长
吸管吸取上层液 ,再将沉淀的组织块反复
研磨 ,使能分散混悬于上层液 。合并脾细
胞悬液 ,静置 5分使小块组织下沉 ,吸取上
层液 ,以 1000rpm离心 3次 ,第 1次 10分 ,
第 2 、3次为 5分 ,均在离心后充去上清液
(内含血浆成分 、细胞碎片等)。最后 1次
弃去上清液后 ,加入 Gey s液 2ml ,取部分
进行细胞计数 ,加 1%台盼蓝检查活细胞
数(一般为 80%~ 95%)。以上操作过程
应在冰水浴中和无菌条件下进行 。
3.2 实验方法
将上述脾细胞悬液稀释成 8×106 个
细胞/ml。取 0.1ml 加入 1%SRBC 及经
SRBC吸收过的灭活小牛血清各 0.1ml混
匀 ,以 1000rpm离心 10分后 ,放入 4℃冰箱
2小时 ,然后每管加入 1%甲笨蓝 20ul染
色 。用尖咀吸管轻轻分散沉积细胞 ,再将
均匀的细胞悬液滴于血球计数盘上 ,盍上
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盍玻片 ,在高倍镜下计数特异玫瑰花结形
成的百分率。
倒根蓼对特异玫瑰花结形成率的影响
特异玫瑰花结百分率 P值
生理盐水组 7.2±1.30
倒根蓼组 24.8±3.96 <0.001
4 讨论
本法用以观察药物对免疫早期阶段机
原结合细胞的影响 ,因为此阶段包括 T 、B
二种淋巴细胞 ,故不能说明是否选择作用
于 T或 B淋巴细胞 ,但通过实验证明倒根
蓼组的特异玫瑰花结形成率非常高于对照
组 ,进而可说明倒根蓼具有抗菌 、消炎 ,提
高机体免疫力的作用 。
参 考 文 献
1 谢申玲 ,解景田.生理解剖学实验指导.1987年.
2 张继有 ,严仲铠 ,李海日 ,等.长白山植物药志.吉林人民出版社 ,1982年.
3 朱愉 ,等.实验动物的疾病模型.天津科技翻译出版公司 ,1997年.
春 光 好
周经纬
人参研究院体制改革新气象有感
春怡近 ,杏花明 ,柳岸青 。科研逢甘露 ,放歌声 。践行三
个代表 ,高举理论明灯 。同舟共楫拥翘楚 ,绣前程 。
诠注:春光好 ,古词牌名 ,这里借喻 。
翘楚 ,这里指有才华能力的领导 。
二 00三年二月
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