全 文 ：第 35卷第 3期
2008年 5月
浙　江　大　学　学　报(理学版)
Journal of Zhej iang University(Science Edition)
http:// www.journals.zju.edu.cn/ sci Vol.35 No.3M ay 2008
收稿日期:2007-03-20.
作者简介:德　吉(1981-),女 ,藏族 ,浙江大学化学系硕士研究生 ,主要从事藏药提取及分析研究.
＊通讯作者.
藏药“西藏猫乳”的色谱指纹谱研究
德　吉1 , 确　生2 , 郭　沁3 , 黄映凤1 , 郭伟强1＊
(1.浙江大学 化学系 , 浙江 杭州 310028;2.青海师范大学 化学系 , 青海 西宁 810008;
3.浙江大学 药学院 , 浙江 杭州 310058)
摘　要:用 75%乙醇回流法提取出藏药“西藏猫乳(生等)”的有效成分并浓缩精制后 ,采用 HPLC 梯度洗脱法 , 在
选定的色谱条件{DuPont ZORBAX ODS C18色谱柱(4.6 mm×25 cm), 用甲醇(A)-甲酸铵水溶液(pH =3.5 ,
1.0 mL ·min -1 , B)进行梯度洗脱(甲醇浓度:0 ～ 10 min , 20%～ 25%;10 ～ 20 min , 25%～ 40%;20～ 55 min , 40%
～ 55%;55～ 75 min , 55%～ 75%;75～ 85 min , 75%～ 90%),检测波长为 290 nm}下 ,对藏药“生等”的提取液进行了
有效的分离与检测 ,并建立了“生等”药材的数字化色谱指纹谱(DFPS).所建立的方法能对藏药的产地归属进行有
效的分辨.
关　键　词:数字化指纹谱;西藏猫乳(生等);高效液相色谱
中图分类号:O657.63　　　　文献标识码:A　　　文章编号:1008-9497(2008)03-290-06
DE Ji1 , QUE Sheng2 , GUO Qin3 , HUANG Ying-feng 1 , GUO Wei-qiang 1(1.Department of Chemistry , Zhej iang
University , H angzhou 310028 , China;2.Department o f Chemistry , Qinghai Normal University , X ining
810008 , China;3.Department of Pharmacy , Zhe jiang University , Hangz hou 310058 , China)
Study of tibetan medicine Rhamnella gilgitica Mansfe ld .etMelch by digitized chromatographic fingerprint spectrum.
Journal of Zhejiang Unive rsity(Science Edition), 2008 , 35(3):290 ～ 295
Abstract:A new separating and determining method was developed fo r the tibetan medicine Rham nella g ilgitica
Mansfeld.e t Melch.At first , the refluxing (75% ethanol for 4 h)and concentrating methods were used to ex tract
the effectiv e components o f the tibetan medicine.Then , the optimal HPLC conditions we re as follow s:DuPont
ZORBAX ODS C18 Co lumn(4.6 mm ×25 cm), methanol(A)-ammonium fo rmate(pH =3.5 , 1 mL · min-1 , B)as
mobile phase , the gr adient elution(solution A:0 ～ 10 min , 20%～ 25%, 10 ～ 20 min , 25%～ 40%, 20 ～ 55 min ,
40%～ 55%, 55 ～ 75 min , 55%～ 75%, 75～ 85 min , 75%～ 90%), detection-w aveleng th 290 nm.The accurate and
fea sible dig itized chroma to g raphic fing erprint spectrum(DFPS)o f the tibe tan medicine was established , which can
reflect the real constitution of sam ple s.This new method can be used to distinguish the g row ing area of the medicine
and to contr ol the quality of Rhamnella gilgitica Mansfeld.et Melch samples.
Key words:dig itized fingerprint spectrum;Rhamnel la gi lgitica Mansf .et Melch;HPLC
　　藏药 “生等”为鼠李科猫乳属植物西藏猫乳
(Rhamnella gi lgi tica Mansf eld .et Melch.)茎的干
燥木质部(俗称心材).原植物生长在海拔 2 600 ～
2 900 m的山地灌丛或疏林中 ,在我国主要分布于西
藏东南部 ,云南西北部 ,四川西南部 ,是一种传统的
藏药 ,曾为《中国药典》一部和《藏药标准》所收载 ,具
有凉血 ,祛风湿 ,敛干黄水 ,消肿止痛功能 ,可治血热
病 、高山多血症 、黄水病 、麻风病等[ 1] .潘勤 、杨培全
等研究了藏药“生等”的主要化学成分 ,认为生等药
材中含有墨沙酮 、柚皮素 、山萘酚 、槲皮素 、花旗松素
等黄酮类及大黄酚 、没食子酸 、β-甾醇 、混合脂肪酸 、
混合脂肪酸酯等化合物[ 2 , 3] .鉴于“生等”药材生长
于普通的灌木材间 ,各生等药材间形态非常相似 ,同
时 ,随着西藏经济的快速发展 ,加之藏药以神奇得
名 ,许多药材已面临供不应求的状况 ,藏药市场出现
了混乱 ,混淆品种 、伪劣药材以及人为掺杂现象时有
出现 ,制定统一的质量标准十分必要 ,因此笔者采用
HPLC法 ,利用相对保留值与归一化面积值两个参
数初步研究了藏药“生等”的液相色谱指纹图谱 ,以
其为药材鉴别 、质量评价 、质控标准制定 、新药研制
等提供依据.
1　中药数字化指纹图谱的概念及原理
中药数字化指纹技术是针对中药材及中成药的
鉴定和质量控制的方法 、新技术.它针对中药成份的
复杂性以及鉴定成分所需的化学对照品缺乏 ,运用
新技术得到色谱图和一系列实验数据 ,再通过相对
保留值α和面积量化值分别将色谱峰的定位和色谱
峰的面积数字化 ,从参照峰的选择出发 ,统一量化值
(如归一化面积值),提出重叠率和差异率等概念 ,并
由此衍生出一系列色谱峰的比较参数和计算公式 ,
将复杂的色谱图转换成直观的数字 ,将药品内在特
征翻译为药品的特征指纹 ,从而进行中药的质控和
质检.这一技术为鉴定假冒伪劣产品 ,寻找和选择优
质品种提供了很好的保证.
相对保留值是指待鉴物与标准物或参照物保留
值间的比值 ,它消除了色谱实验中因流动相流速及
组成的波动 、进样量 、固定相流失等系统误差 ,大大
降低保留值漂移对定性判断的影响 ,保证色谱峰的
正确定位.归一化面积值是选择某个色谱峰的峰面
积作为基准 ,其他各色谱峰的峰面积与它作比较 ,得
到一系列的面积比值 ,作为量化描述的基本参数.
标准样品与待鉴样品之间的重叠率从共有峰在
总出峰数中所占的比率反映了两样本的相似程度.
重叠率= 共有峰×2标准药材峰数+待鉴药材峰数×100%.
特征指纹差异率是以每个特征指纹峰与其相应
的标准特征指纹峰的面积归一化值间的差与标准特
征指纹峰面积归一化值的比值来表示两者间的差异
程度.特征指纹差异率= A I标 -A I鉴 /A I标.特征指
纹检出率=待鉴药材中的特征指纹峰数/特征指纹
峰总数.综合特征指纹的差异率 、特征指纹检出率等
指标 ,可以说明相关样品有无特征指纹组分的存在 ,
为药材产地的鉴定提供了很好的佐证依据.
2　实验部分
2.1　材料 、试剂及仪器
2.1.1　藏药“生等”样品
样品药材采自西藏不同地区 ,相应编号与产地
见表 1.其中以 1号为标准品 ,其余作为待鉴样品.
表 1　样品编号及产地
Table 1　Different r egions o f six batches o f samples
样品号 Sample No. 1 2 3 4 5 6
产地
r egions
西藏林芝
China T ibet
Ny ingchi
西藏林芝
China T ibet
Ny ingchi
西藏林芝
China T ibet
Nyingchi
西藏林芝
China T ibet
Nyingchi
西藏昌都
China Tibe t
Chamdo
西藏林芝
China T ibet
Nyingchi
2.1.2　试　剂
甲醇(HPLC级),甲酸(AR),氨水(AR).自制
甲酸铵水溶液:分别取 0.1 mol· L-1甲酸 100 mL ,
350 mL 水 ,用 0.5 mol ·L-1氨水调配成 pH =3.5
的流动相.
2.1.3　仪　器
Agilent1100 serie s ,配 DAD 检测器 、四元梯度
泵 、在线脱气机和 Agilent1100化学工作站.
2.2　实验方法
2.2.1　色谱分析条件
色谱柱:DuPont ZO RBAX ODS C18(4.6 mm
×25 cm);检测器:DAD;检测波长:290 nm ;流速:
1.0 mL ·min-1 ;柱温:25 ℃.流动相:甲醇(A)-
1%甲酸铵(pH =3.5)水溶液(B)作梯度洗脱.梯度
条件:(A)0 ～ 10 min , 20%～ 25%;10 ～ 20 min ,
25%～ 40%;20 ～ 55 min , 40% ～ 55%;55 ～ 75
min , 55%～ 75%;75 ～ 85 min ,75%～ 90%.
2.2.2　供试品溶液的制备
将生等药材粉碎成粗粉(过 40目筛),准确称取
5 g ,用滤纸包好后置于 100 mL 烧瓶中 ,加入 75%
乙醇 80 mL ,水浴加热回流 3次 , 每次回流 2 h ,合
并提取液 ,过滤 ,浓缩成浸膏 ,用甲醇溶解定容至 25
mL.每个样品平行制备 2 份.各取 1.5 mL 用甲醇
定容至 25 mL ,经 0.45 μm 微孔滤膜滤过作为供试
品溶液.
2.2.3　样品分析
将各生等供试品溶液按“2.2.1”项色谱条件下
进行分析 ,得到的 HPLC 图谱见图 1.
3　结果与讨论
3.1　标准药材的选择
由于藏药生等没有指定的标准药材 ,在对 6个
生等药材分别选择色谱条件并经调整后选定最佳的
291　第 3 期 德　吉 , 等:藏药“西藏猫乳”的色谱指纹谱研究
图 1　6 个生等药材的 HPLC 图谱
F ig.1　HPLC spectrum of six sam ples
色谱条件.在最佳的色谱条件下 , 1号样品的峰相对
多且各峰的相对峰面积差别小 ,故而选其作为相对
的基准药材.
3.2　实验条件的优化(以 1号样品为对象)
3.2.1　样品提取效率的比较
选择 5个相对较强的峰(如图 2所示)作为考察
对象.
图 2　不同溶剂提取效率比较
F ig.2　Compa rison of effects by different solvents
提取液为甲醇在 29.805 min处多一个峰 , 提取液为丙酮在 35.576
min处多一峰
3.2.1.1　提取方法的比较
准确称取样品各 5 g ,加入 80 mL 75%乙醇后
分别用抽提 、回流 、超声萃取方法各提取 3 次 ,每次
2 h ,分别合并提取液 ,过滤 ,浓缩 ,制备供试液 ,每个
样品平行制备 2份 ,考察色谱出峰情况 ,结果发现回
流法的提取效率最高.
3.2.1.2　提取溶剂的比较
准确称取样品各 5 g ,分别加入 80 mL 的甲醇 、
丙酮和 75%乙醇 ,分别回流 3 次 ,每次 2 h ,分别合
并提取液 ,过滤 ,浓缩 ,制备供试液 ,每个样品平行制
备 2份 ,考察色谱出峰情况(见图 2),结果丙酮和甲
醇各多了一个峰 ,但是其余峰面积都比 75%乙醇体
取的低 ,因没有明显的出峰数增加 ,考虑操作人员安
全 ,最后选择 75%乙醇作为提取溶剂.
3.2.1.3　提取时间的比较
准确称取样品各 5 g ,以 2 h 为一次 ,每次加入
80 mL 的 75%乙醇新溶剂 ,分别回流 1 ～ 4次 ,合并
各自的提取液 ,过滤 ,浓缩 ,制备供试液 ,每个样品平
行制备 2 份 ,考察色谱出峰情况.结果表明 ,回流 3
次的提取率略高于回流 2 次的 ,即回流 4 h虽然还
不能达到完全提取 ,但已能满足色谱指纹谱鉴定的
需求了.
3.2.2　精密度试验
取 1号生等样品按供试液制备方法制成供试溶
液 ,连续进样 6次(每次 20 μL),测定峰面积值.结
果表明 , 占峰面积百分比 5%以上峰的 RSD =
1.63 %～ 3.5%.
3.2.3　重现性试验
取 1号生等样品等质量的 5份药材 ,分别按照
供试品制备方法制成供试液 ,并进行测定其峰面积.
结果表明 ,占峰面积百分比 5%以上峰的 RSD =
1.5%～ 5.3%.
3.2.4　HPLC条件的选择
3.2.4.1　检测波长的选择
本研究在梯度洗脱条件下采用 DAD 检测器 ,
在 190 ～ 800 nm 波长范围内选择所需波长.根据从
三维谱图中各峰在不同波长下吸收强度的比较 ,在
290 nm 处大多数峰的吸收强度最大 ,故选用 290
nm 为检测波长.
3.2.4.2　流动相(B)pH 的选择
按表 2中梯度(A)的条件分别考察流动相 B的
pH值分别为 2.5 、3.0 、3.5 、4.0 、4.5 、5.0时的分离情
况 ,平行进样两次的结果表明 pH =3.5下效果最好.
3.2.4.3　梯度的优化
得到 3个相对较好的流动相梯度 ,见表 2.经考
察 ,梯度(A)下先出峰的大多数分离效果好 ,但出峰
不完全 ,有部分组分成为后续的“鬼峰” .梯度(B)的
分离效果较好 ,也无滞留组分 ,但从 60 min后基线
变化大.梯度(C)下得到的色谱图先出峰的大多数
分离较好 ,同时 60 min之后的峰也分离很好.故后
续实验取(C)梯度.
表 2　三个相对较好的流动相梯度
Table 2　The optimum g radient conditions of the mobile phase
(A) 时间 Time(min) 0～ 20 20 ～ 30 30 ～ 75 75 ～ 85 to 110甲醇量 M ethanol/ % 20 ～ 25 25 ～ 40 40～ 60 60 ～ 70
(B) 时间 Time(min) 0～ 20 20 ～ 30 30～ 65 65 ～ 85 85～ 95 to 110甲醇量 M ethanol/ % 20 ～ 25 25 ～ 40 40～ 55 55 ～ 75 75～ 90
(C) 时间 T ime(min) 0～ 10 10 ～ 20 20 ～ 55 55 ～ 75 85 ～ 110 to 110甲醇量 M ethanol/ % 20 ～ 25 25 ～ 40 40～ 55 55 ～ 75 75～ 90
292 浙 江 大 学 学 报(理学版)　 第 35 卷　
3.3　生等药材色谱指纹谱及参数
3.3.1　内参照峰的选择和定位
标准药材和各待鉴药材中内参照峰的定位和确
立是建立色谱指纹谱的关键.由于生等没有标准药
材 ,只能进行相互之间定位相对保留值的比较 ,以确
定内参照峰.根据所得色谱图(见图 1)分析 ,各样本
在 19.8 min左右均有一个比较明显的峰 ,选此峰作
为内参照峰.同时 ,测得该色谱峰在 196 、230 、285
nm 都有紫外吸收 ,可确定该峰不同样品中可指代
同一成分.由此确定生等药材色谱指纹谱的内参照
峰为保留值在 19.8 min左右的色谱峰.
3.3.2　生等色谱指纹谱的建立
在优化提取条件下制备得到的供试液每种两份
在最佳色谱条件下分别进样 20 μL 两次 ,由此得到
了 6个生等样品共 24张色谱图 ,取平均值后以数字
化指纹谱建立原则[ 4] 转化为色谱指纹谱.按 1%窗
口范围对各样品的 α值并结合紫外光谱信息进行比
照归纳 ,凡是 α值相同或相近(误差≤±1%),最大
吸收值相等的峰 ,即可认为同一化合物峰.由此建立
的各生等样品的色谱指纹谱见表 3.
表 3　6个生等样品 HPLC指纹谱
Table 3　HPLC-FPS of six samples
α 药材 Sample
1 2 3 4 5 6
α 药材 Sample
1 2 3 4 5 6
0.147 0.020 0.030 2.308 0.078 0.020 0.010
0.389 0.010 0.010 2.536 0.098 0.053 0.030 0.010
0.437 0.010 0.010 0.010 2.636 0.043 0.083 0.070 0.010
0.759 0.030 0.050 0.040 2.694 0.078 0.053 0.030 0.010
0.836 0.030 0.030 0.020 0.060 3.733 0.010 0.010
1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 3.854 0.010 0.013 0.010
1.078 0.060 0.090 0.060 0.020 0.020 3.896 0.033 0.010 0.040 0.048
1.192 2.520 0.030 4.820 4.910 0.115 3.923 0.018 0.040 0.028
1.300 0.208 0.010 0.028 3.971 0.010 0.027 0.040 0.030 0.020
1.346 0.303 0.010 0.053 0.020 0.013 4.045 0.010 0.010 0.010 0.020 0.030
1.514 4.913 4.247 4.350 0.658 4.109 0.010 0.015 0.200 0.010 0.010
1.575 0.028 0.038 0.013 0.020 0.118 0.010 4.196 0.015 0.010 0.220 0.010 0.053
1.640 0.068 0.103 0.100 0.060 4.240 0.010 0.170
1.687 0.125 0.077 0.080 4.392 0.063 0.010 0.010 0.120 0.010 0.030
1.725 0.220 4.443 0.193 0.010 0.027 0.190 0.027 0.038
1.752 0.168 0.015 4.489 0.138 0.063 0.220 0.025
1.840 0.188 0.010 4.713 0.010 0.933
2.031 0.065 0.013
　　由表 3所列的 6个生等样品的色谱指纹谱可以
得到各项样品的相应的各项参数.
3.3.2.1　共有峰
在 6个样品中可检测到共有色谱峰的α值分别
为 1.000 、1.575 、4.392 、4.443 等 4 个 , 5 个样品中
的共有峰α值分别为 1.192 、1.346 、3.971 、4.196 、
4.489 等 5 个 , 4 个样品中的共有峰 α值分别为
0.836 、1.078 、1.514 、1.640 、2.536 、2.636 、2.694 、
3.896 、4.045 、4.109等 10个.以上各α值的色谱峰
在多数样品中具有较高的出现频次 ,为生等药材特
征指纹的选择和确定提供了很好的依据.
3.3.2.2　重叠率
以 1 号样品生等为基准 ,得到各样品的重叠率
见表 4.其中 ,3号样品重叠率超过 70%,4号和 6号
样品的重叠率也接近 70%,可视为产地相同.不同
产地的 5号样品重叠率就明显偏低.
表 4　6个生等样品的色谱峰重叠率
Table 4　Chroma to g raphic peaks over lapping ra te o f six samples
样品号 Sample No. 1 2 3 4 5 6
总峰数 To ta l peaks 35 15 35 40 21 34
共有峰 Common peaks 35 10 25 24 11 23
重叠率 Ove rlapping rate/ % 100 40.0 71.4 64.0 39.3 66.7
3.3.2.3　n强峰
各样品的出峰数在 15 ～ 40个 ,但少量大峰有很
大的峰面积 ,根据出峰数和峰面积两项参数 ,选定 n
=7 ,从表 3选出各样品中峰面积较高的前 7个色谱
峰 ,其相对保留值和相对峰面积见表 5 ,为特征指纹
峰的选择提供了重要依据.
293　第 3 期 德　吉 , 等:藏药“西藏猫乳”的色谱指纹谱研究
表 5　6个样品的 7强峰表
Table 5　7 st reng th peaks of 6 sample s
药材
Samples
7 强峰的大小顺序 Sequence of the 7 streng th peaks
1
α/ A
2
α/ A
3
α/A
4
α/ A
5
α/ A
6
α/A
7
α/ A
1 1.514/4.75 1.192/ 2.40 1.000/ 1.00 1.346/0.34 1.725/ 0.21 1.840/ 0.21 4.443/ 0.16
2 1.000/1.00 0.724/ 0.04 1.192/ 0.04 1.575/0.04 0.147/ 0.03 2.308/ 0.02 2.902/ 0.02
3 1.192/4.74 1.514/ 4.10 1.000/ 1.00 1.428/0.39 1.640/ 0.09 1.608/ 0.08 1.275/ 0.08
4 4.592/15.02 1.192/ 4.91 1.514/ 4.35 1.000/1.00 4.818/ 0.92 4.268/ 0.53 3.971/ 0.04
5 4.713/1.17 1.000/ 1.00 1.575/ 0.11 4.443/0.04 3.971/ 0.04 4.358/ 0.03 4.592/ 0.03
6 4.489/1.03 1.000/ 1.00 1.514/ 0.66 1.192/0.12 1.640/ 0.07 0.836/ 0.06 1.158/ 0.05
3.3.2.4　特征指纹和特征指纹检出率
通过共有峰 、重叠率和 n强峰等参数 ,对复杂的
指纹谱进行简化后可以用“特征指纹”对药材的内在
质量作具体化和数据化的描述.
在排除了与标准药材无共有的峰及与标准药材
共有一个峰后 ,根据本实验样品批号相对较少的特
点 ,从中挑选与标准药材共有两个以上的峰 ,得到生
等样品指纹峰共 64 个 ,选其中 27 个(1/3 ～ 1/2)为
特征指纹峰 ,见表 6.
表 6　6个生等样品的指纹鉴定表
Table 6　The fingerprint identifica tion of the 6 samples
＊α
＊A 标准
药材
Standard
sample
待鉴药
材 1 Test
sample I
差异率
differ ence
rate
待鉴药
材 2 Test
sample 2
差异率
dif fe rence
rate
待鉴药
材 3 Test
sample 3
差异率
difference
ra te
待鉴药
材 4 Test
sample 4
差异率
difference
r ate
待鉴药
材 5 Test
sample 5
差异率
difference
r ate
0.437 0.013 0 1.000 0.013 0.000 0.010 0.231 0 1.000 0 1.000
0.759 0.025 0 1.000 0.050 1.000 0.040 0.600 0 1.000 0 1.000
0.836 0.025 0 1.000 0.027 0.080 0.020 0.200 0 1.000 0.063 1.520
1.000 1.000 1.000 0.000 1.000 0.000 1.000 0.000 1.000 0.000 1.000 0.000
1.078 0.060 0 1.000 0.087 0.450 0.060 0.000 0.018 0.700 0.015 0.750
1.192 2.520 0.030 0.988 4.820 0.913 4.910 0.948 0.010 0.996 0.115 0.954
1.300 0.208 0 1.000 0 1.000 0.010 0.952 0 1.000 0.028 0.865
1.346 0.303 0.010 0.967 0.053 0.825 0.020 0.934 0.013 0.957 0 1.000
1.514 4.913 0 1.000 4.247 0.136 4.350 0.115 0 1.000 0.658 0.866
1.575 0.028 0.038 0.357 0.013 0.536 0.020 0.286 0.118 3.214 0.010 0.643
1.640 0.068 0 1.000 0.103 0.515 0.100 0.471 0 1.000 0.060 0.118
1.687 0.125 0 1.000 0.077 0.384 0.080 0.360 0 1.000 0 1.000
1.725 0.220 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000
1.840 0.188 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0.010 0.947
2.308 0.078 0.020 0.744 0 1.000 0 1.000 0.010 0.872 0 1.000
2.536 0.098 0 1.000 0.053 0.459 0.030 0.694 0 1.000 0.010 0.898
2.636 0.043 0 1.000 0.083 0.930 0.070 0.628 0 1.000 0.010 0.767
2.694 0.078 0 1.000 0.053 0.321 0.030 0.615 0 1.000 0.010 0.872
3.733 0.010 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0.010 0
3.854 0.010 0 1.000 0.013 0.300 0 1.000 0 1.000 0.010 0
3.896 0.033 0 1.000 0.010 0.697 0.040 0.212 0 1.000 0.048 0.455
3.923 0.018 0 1.000 0.040 1.222 0 1.000 0 1.000 0.028 0.556
3.971 0.010 0 1.000 0.027 1.700 0.040 3.000 0.030 2.000 0.020 1.000
4.045 0.010 0.010 0 0.010 0 0.020 1.000 0 1.000 0.030 2.000
4.109 0.010 0 1.000 0.015 0.500 0.200 19.000 0.010 0 0.010 0
4.196 0.015 0 1.000 0.010 0.333 0.220 13.667 0.010 0.333 0.053 2.533
4.392 0.063 0.010 0.841 0.010 0.841 0.120 0.905 0.010 0.841 0.030 0.524
4.443 0.193 0.010 0.948 0.027 0.860 0.190 0.016 0.027 0.860 0.038 0.803
4.489 0.138 0 1.000 0.063 0.543 0.220 0.594 0.025 0.819 1.320 8.565
4.713 0.010 0 1.000 0 1.000 0 1.000 0.933 92.300 0 1.000
294 浙 江 大 学 学 报(理学版)　 第 35 卷　
3.3.2.5　特征指纹谱的总差异率及检出率
6个生等药材的特征指纹总差异率和检出率见
表 7.差异率是反映了每个特征指纹与均值间的差
异 ,总差异率则将每个特征指纹的差异进行了综合 ,
因此它们既能反映药材的内在质量 ,又能给出量化
数据.从表 7可知 3号 、4 号和 6 号的检出率均在
70%以上 , 而 2 号 、4 号 、5 号 、6 号的差异率大于
0.700.4号样品在α值为 4.109和4.196处的归一
化面积均值分别为 0.20 和 0.22 ,与标准药材的归
一化面积均值 0.010和 0.015相差很大;6号样品
也同样在α值为 4.196和 4.489的归一化面积值为
0.053 和 1.320 , 与标准药材的归一化面积均值
0.015和 0.138相差大;这也反映了 4号和 6号样品
在成分的含量上存在较大差异.来自其他产地的 5
号样品的总差异率特别大 ,说明了它的特异性.虽然
2号样品的重叠率较低 ,但它的总差异率并不大 ,其
产地还是可以归入林芝地区 ,只是从其较低特征指
纹检出率可以断定 ,该样品的组成与其它样品有一
定的差异.
表 7　6个生等样品的总差异率和检出率
Table 7　Characte ristic g ene ral difference rate and detection r ate of six sam ples
样品号 Sample No. 1 2 3 4 5 6
特征指纹峰数 Numbe r of
cha racteristic fing erprint peaks
30 8 24 23 13 23
总差异率 gener al difference rate/ % 0 0.894 0.652 1.748 4.03 1.09
特征指纹检出率 detection rate of
characteristic fingerprint peaks/ % 100 27 80 77 43 77
4　结　论
本研究对所收集的 6 个藏药生等药材进行
HPLC分析 ,得到不同的色谱图 ,对保留值和色谱峰
面积进行数据处理得到藏药生等的色谱指纹谱.以
上数字化色谱指纹谱产生的一系列参数包括重叠
率 、n 强峰 ,特征指纹检出率等 ,为藏药生等样品鉴
定提供了依据.
感谢达瓦仁增 、拥宗卓玛 、次仁措姆为本工作提
供药材.
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(责任编辑　涂　红)
295　第 3 期 德　吉 , 等:藏药“西藏猫乳”的色谱指纹谱研究